DB37-T 3747-2019 金針菇液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-（高清版）

ICS65.020.20B05

DB37山 東 省 地 方 標 準DB37/T3747—2019金針菇液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程TechnicalprogressofliquidspawnculturebyFlammulinavelutiper20192019120520200105山東省市場監(jiān)督管理局發(fā)布前言本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實施。本標準由山東省農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本標準主要起草人：牛貞福、國淑梅、于安軍、徐金強、曹健、顏亞男、崔艷秋、周愛國、常猛、張廣龍。金針菇液體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程范圍（Flammulinavelutiper）本標準適用于金針菇液體菌種的生產(chǎn)。GB150鋼制壓力容器GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準GB50073潔凈廠房設(shè)計規(guī)范NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程NY5099無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求3術(shù)語和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。NY5099無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求3術(shù)語和定義GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1液體菌種liquidspawn3.2食用菌液體菌種培養(yǎng)器cultivationapparatusforediblefungusliquidspawnGB1503.3食用菌液體菌種接種器ediblefungus-liquidinterfacetrapinoculators指能將液體菌種從培養(yǎng)器中按無菌操作要求轉(zhuǎn)接到食用菌固體培養(yǎng)基物料上的設(shè)備。4技術(shù)要求具有食用菌菌種生產(chǎn)或檢驗人員從業(yè)資格證的專業(yè)技術(shù)人員?？諝鈨?yōu)良、地勢高燥、交通方便、通風良好、水源電源充足、排水暢通，其中水源應符合GB5749的規(guī)定。金針菇液體菌種生產(chǎn)場所應距工礦業(yè)的“三廢”及微生物、煙塵和粉塵等污染源500m以上。生產(chǎn)場所有硬質(zhì)路面、排水良好的道路。1.0°～1.5蠅紗網(wǎng)。5生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備蠅紗網(wǎng)。5生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備GB500736培養(yǎng)基質(zhì)應符合NY5099的規(guī)定。7生產(chǎn)品種并清楚地追溯菌種來源。菌種生產(chǎn)過程應符合NY/T528的要求。金針菇液體菌種生產(chǎn)工藝流程見圖1。圖1金針菇液體菌種生產(chǎn)工藝流程圖檢查檢查培養(yǎng)器上全部閥門、安全閥、壓力表，要求完好、正常。清洗對罐內(nèi)、外和全部閥門用流水沖洗，達到無死角、內(nèi)壁無任何殘留物。0.12MPa12140min金針菇液體菌種生產(chǎn)推薦選用配方：10g/L3.0g/LKH2P041g/L、MgS040.5g/L。6g/L4.5g/L1.0g/L1.5g/L7.5g/L1.5g/L0.25其中黃豆粉、玉米粉均過100目篩，篩孔直徑0.15mm。70%～800.0312510070滅菌當罐體內(nèi)培養(yǎng)基達70℃時，關(guān)閉氣泵。當夾層出水閥出熱蒸汽3min～5min后關(guān)閉。當罐體壓力表達到0.12MPa開始計時，保持30min～40min，保持壓力期間以溫調(diào)壓。2540s～50ss～6s0冷卻0.05MPa28（200L）：過40500g100g、石膏10g1:1.2500NY/T5281000mL500mL～600mL121℃、0.12MPa7520min753～4容器使用無色或近無色三角瓶，可用棉塞（梳棉或化纖棉）、硅膠塞、專用封口透氣膜封口。1000mL200g（）20202g0.5g，pH2cmmin2/5～3/5滅菌將分裝好的搖瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)進行滅菌，壓力升到0.05MPa時，打開放氣閥排除冷空氣，如此重復一次。壓力升至0.12MPa、溫度121℃時，維持30min～40min。待培養(yǎng)基冷卻后置于消過毒的凈化工作臺上，用經(jīng)火焰消毒并冷卻后的接種針挑取5～6塊3mm～5mm×3mm～5mm的母種塊迅速轉(zhuǎn)接于待接種搖瓶培養(yǎng)基內(nèi)。接種結(jié)束后封口，放入25℃恒溫箱中靜置培養(yǎng)1d，然后置于磁力攪拌器或恒溫搖床上培養(yǎng)，溫度控制在25℃～28℃，轉(zhuǎn)速140r/min～160r/min，培養(yǎng)時間6d～7d。0.02MPa～0.03MPa20±1℃、通氣量為1:0.8144h～168h0.02MPa～0.03MPa20±1℃、通氣量為1:0.8144h～168h430s～40℃恒溫培養(yǎng)48h～72h感官指標見表1。表1金針菇液體菌種感官指標項目感官指標菌液色澤球狀菌絲體呈白色，菌液呈棕色。表1金針菇液體菌種感官指標（續(xù)）項目感官指標菌液形態(tài)菌液稍粘稠，有大量片狀、球狀菌絲體懸浮，固形物體積≥802～3mm勻、不上浮、不下沉、不迅速分層，菌球間液體不渾濁。菌液氣味有金針菇液體培養(yǎng)時特有的香氣，無異味，如酸、臭味等，培養(yǎng)器排氣口氣味正常，無明顯改變。8.10.2理化指標理化指標見表2。表2金針菇液體菌種理化指標項目理化指標pH值5.5～6.0菌絲濕重（g／ml）0.1～0.15菌絲干重率（%）2～3顯微鏡下菌絲形態(tài)和雜菌鑒別可見金針菇菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，球狀和叢狀菌絲體大量分布，菌絲粗壯，菌絲內(nèi)原生質(zhì)分布均勻、染色劑著色深。無霉菌菌絲、酵母和細菌菌體，檢測方法參照NY/T1284。留存樣品無菌檢查有金針菇菌絲生長，劃痕處無霉菌、酵母菌、細菌菌落生長。9放罐接種9放罐接種GB50073金針菇液體接種器高壓滅菌后使用。接種（（）瓶15mL～30mL10記錄與存檔金針菇母種、固體專用種、搖瓶液體種和培養(yǎng)器液體菌種生產(chǎn)的每個環(huán)節(jié)都要有詳實的生產(chǎn)記錄，11貯藏0.02MPa～0.04MPa6℃～10℃可保存d，11℃～152。附錄A/r/