DB37-T 3632-2019漁業(yè)用水中多西環(huán)素、四環(huán)素、土霉素、金霉素殘留量的測定　高效液相色譜法-（高清版）

ICS 13.060Z16

DB37山 東 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB37/T3632—2019Determinationofdoxycycline,tetracycline,oxytetracycline,chlortetracyclineDeterminationofdoxycycline,tetracycline,oxytetracycline,chlortetracycline，residuesinfisherywaterbyhighperformanceliquidchromatography(HPLC)2019072320190823山東省市場監(jiān)督管理局發(fā)布目 次前言 II范圍 1規(guī)性用件 1原理 1試與制 1儀和備 2試的定 2品制備 2品提凈化 2準(zhǔn)線制備 22計算 3回率 3密度回率 3密度 4附錄A（料附）譜圖 5前 言GB/T1.1—2009本標(biāo)準(zhǔn)由山東省漁業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(魯TC03)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：濟(jì)寧市漁業(yè)監(jiān)測站。漁業(yè)用水中多西環(huán)素、四環(huán)素、土霉素、金霉素殘留量的測定高效液相色譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了漁業(yè)用水中土霉素(Oxytetracycline)、四環(huán)素（Tetracycline）、金霉素本標(biāo)準(zhǔn)適用于漁業(yè)用水中土霉素、四環(huán)素、金霉素、多西環(huán)素殘留量的測定。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法原理水樣經(jīng)HLB固相萃取柱凈化，高效液相色譜儀配紫外檢測器測定，外標(biāo)法定量。所用試劑除另有規(guī)定外，均為分析純，實驗用水應(yīng)符合GB/T6682一級水標(biāo)準(zhǔn)。0.01mol/L1.56g，950mLpH2.5，用1000mL0.45μm4.6（CAS：2058-46-0）96.04.7（CAS：64-75-5）94.0%。4.8（CAS：64-72-2）99.0%。4.9（CAS：24390-14-5）98.00.01000.0100g0.0100g0.0200g100μ200μg/mL-18℃避光保存，有效期6個月。4.1010.0mL，10010μ20μg/mL0℃～420.0001g。HLB60mg，3mL水樣經(jīng)0.45μm濾膜過濾，備用。3mL3mL60mL（6.1）2mL/min5mL8mL10mL401.0mL12min，過0.45μ分別準(zhǔn)確移取0.5mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL混合標(biāo)準(zhǔn)使用液（4.11），用流動相定容至100mL，制得一系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，使其中土霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素濃度系列為0.05、0.10、0.20、0.50、1.0μg/mL；金霉素標(biāo)準(zhǔn)使用濃度系列為0.10、0.20、0.50、1.0、2.0μg/mL。此標(biāo)準(zhǔn)使用液現(xiàn)配現(xiàn)用。以峰面積為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。測定XDB-C18，250mm×4.6mm（i.d.），5μm；AB：0.01mol/L（4.5）。流速：1.0mL/min。50μ。波長：350nm。6.4.1.6柱溫：306.4.1.71。表1流動相梯度洗脫程序時間（min）A（%）B（%）017.083.01532.068.01645.055.01745.055.01817.083.02517.083.06.2min、7.5min、12.1min、13.5min圖A.1、圖A.2）除不加試樣外，均按上述測定條件和步驟進(jìn)行。液相色譜圖參見附錄A（圖A.3）。7計算7計算3位有效數(shù)字。XCVV0.......................................(1)式中：X——樣品中各抗生素含量，單位為毫克每升（mg/L）；C——樣品溶液中各抗生素含量，單位為微克每毫升（μg/mL）；V——樣品溶液最終定容體積，單位為毫升（mL）；V0——樣品溶液量取體積，單位為毫升（mL）。8檢測限5μg/L10μ10μg/L、定量限為20μg/L。9回收率土霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素在添加濃度10μg/L～50μg/L時，回收率均為70%～110%；金霉素在添加濃度20μg/L～100μg/L時，回收率均為70%～110%。10精密度本方法的批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%，批間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%。附錄A（資料性附錄）色譜圖標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖A.1，水樣加標(biāo)樣品色譜圖見圖A.2，空白水樣色譜圖見圖A.3。說明：說明：土霉素——濃度為0.5μg/mL。四環(huán)素——濃度為0.5μg/mL。多西環(huán)素——濃度為0.5μg/mL。金霉素——濃度為1.0μg/mL。圖A.1標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖說明：金霉素——添加量為0.