試驗一紅細(xì)胞計數(shù)試驗?zāi)康恼莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)二

試驗一紅細(xì)胞計數(shù)試驗?zāi)康恼莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)二試驗一紅細(xì)胞計數(shù)試驗?zāi)康恼莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)二試驗一紅細(xì)胞計數(shù)試驗?zāi)康恼莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)二xxx公司試驗一紅細(xì)胞計數(shù)試驗?zāi)康恼莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)二文件編號：文件日期：修訂次數(shù)：第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計，管理制度實驗一紅細(xì)胞計數(shù)一、實驗?zāi)康模赫莆占t細(xì)胞計數(shù)原理及技術(shù)。二、實驗原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計數(shù)池中，于顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過換算示得每升血液內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。三、實驗器材及試劑：顯微鏡、血紅蛋白吸管、計數(shù)板、蓋玻片、生理鹽水。四、實驗操作：1、取試管1支，加稀釋液或。2、用清潔干燥的微量吸管準(zhǔn)確吸取末梢血10微升。3、擦去管尖外部余血、輕輕注入紅細(xì)胞稀釋液底部，再吸取上層稀釋液清洗吸管2-3次，立即搖勻。4、將計數(shù)池與蓋玻片用軟布料擦凈，將蓋玻片覆蓋于計數(shù)池上。5、用吸管吸取混勻的紅細(xì)胞懸液，充入計數(shù)池中。6、靜止2-3分鐘，待經(jīng)紅細(xì)胞下沉后，用高倍鏡或低倍鏡計數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中五個中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。五、計算N(五個中方格內(nèi)RBC數(shù))×5×10×106×200=N×1012個/升×5：表示5個中方格內(nèi)RBC數(shù)換算為1個大方格內(nèi)RBC數(shù)×10：1個大方格容積、、換算為1ul內(nèi)RBC數(shù)×106：1ul換算為1升內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×200：稀釋倍數(shù)六、正常參考值正常參考值：成年男性：升成年女性：升新生兒：升實驗二血紅蛋白測定一、實驗?zāi)康模赫莆涨杌哞F血紅蛋白比色法原理及技術(shù)。二、實驗原理：血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后，除SHb外各種血紅蛋白可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白，再與CNˉ結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋（HicN）。HicN最大吸收峰540nm，最小吸收波谷504nm，在特定的條件下，毫摩爾消光系數(shù)為.cm-1，因此根據(jù)標(biāo)本的吸光度，即求得血紅蛋白濃度。三、實驗操作：1、取指血20ul，加到5ml血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中，混勻，靜止5分鐘。2、用分光光度計比色，波長540nm，以蒸餾水或空白轉(zhuǎn)化液調(diào)零，測定吸光度。3、用血紅蛋白濃度為50g/L、100g/L、150g/L、200g/L在721型分光光度計上測定吸光度分別為，，，.四、計算:血紅蛋白（g/L）=測定管吸光度×正常參考值：成年男性：120-160g/L成年女性：110-150g/L新生兒：170-220g/L實驗三白細(xì)胞計數(shù)一、實驗?zāi)康模赫莆瞻准?xì)胞計數(shù)顯微鏡計數(shù)法原理及技術(shù)。二、實驗原理：用稀醋酸液將血液稀釋并破壞紅細(xì)胞，混勻后充入計數(shù)池中，于顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過換算求得每升血液內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。三、實驗器材及試劑：顯微鏡、微量吸管、計數(shù)板、蓋玻片、白細(xì)胞稀釋液。四、實驗操作：1、取試管1支，加白細(xì)胞稀釋液。2、用清潔干燥的微量吸管準(zhǔn)確吸取末梢血20微升或抗凝血20微升。3、擦去管尖外部余血、輕輕注入稀釋液底部，再吸取上清液清洗3次，搖勻。4、將計數(shù)板與蓋玻片用軟布擦凈，將蓋玻片覆蓋于計數(shù)池上，再用微量吸管吸取懸液，充入計數(shù)池與蓋玻片間的細(xì)縫隙中，靜止2-3分鐘，待白細(xì)胞下沉。5、用低倍鏡計數(shù)四角的四個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。五、計算(四個大方格內(nèi)WBC數(shù)/4)×10×20×106=WBC數(shù)/升六、正常參考值正常參考值：成人：（4-10）×109/升新生兒：（15-20）×109/升6月-2歲：（11-12）×109/升實驗四白細(xì)胞分類計數(shù)一、實驗?zāi)康模赫莆瞻准?xì)胞分類計數(shù)、原理及技術(shù)。二、實驗原理：把血液制成細(xì)胞分布均勻的薄膜涂片，經(jīng)wright染色后，顯微鏡下觀察，根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)特點逐個分類計數(shù)。得出各種白細(xì)胞的相對比值，并注意觀察其形態(tài)和質(zhì)量的變化。三、實驗器材及試劑：顯微鏡、染色缸和架，載玻片、瑞氏染液、香柏油、二甲苯。四、實驗操作：1、取末梢血1滴。置于載玻片的一端，以邊緣平滑的推片制成血涂片，空氣干燥。2、用蠟筆在血膜兩端劃線，以防染液溢出，然后將血片放于染色架上。3、先加瑞氏染液數(shù)滴，使其覆蓋整個血膜，固定染色細(xì)胞分鐘。4、按1：1或1：2加緩沖液與染料混勻，染色10分鐘左右。5、在血膜染10分鐘后，用緩沖液或接近中性的水沖去洗液，待自然干燥或濾紙吸干后，用鏡油觀察。五、計數(shù)方法：1、先用低倍鏡觀察血片染色情況，白細(xì)胞多少和細(xì)胞分布情況。2、選擇血涂片的體尾交界處，染色良好的區(qū)域，在油鏡下計數(shù)100-200個白細(xì)胞，按其形態(tài)特征進(jìn)行分類計數(shù)，求出各自白細(xì)胞所占數(shù)值（百分率）。3、白細(xì)胞分類計數(shù)方法很多，常用的有，完全記錄法、半記錄法、分類計數(shù)器計數(shù)法。4、每個病人應(yīng)分類白細(xì)胞數(shù)，視白細(xì)胞總數(shù)多少而定。5、各類細(xì)胞所占的百分率乘以白細(xì)胞總數(shù)/升，既得每升血液中各類白細(xì)胞的濃度。實驗五血小板計數(shù)一、實驗?zāi)康模赫莆昭“逵嫈?shù)原理及技術(shù)。二、實驗原理：尿素液能溶解紅細(xì)胞及白細(xì)胞而保存完整形態(tài)的血小板，經(jīng)稀釋后在血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi)直接計數(shù)以求得每升容積血液內(nèi)的血小板數(shù)。三、實驗操作：1、取試管1支，加血小板稀釋液。2、先讓手指溫暖充血，皮膚消毒待干后深刺使血液流出擦去剛出現(xiàn)的少量血。3、用微量吸管迅速準(zhǔn)確地吸取自然流出的第一滴血液20微升，取血時避免產(chǎn)生氣泡或多次上下吹吸，取好后立即將血輕輕注入已盛稀釋液的試管底部，吸上清液漱洗吸管三次，輕輕混勻。4、擦凈并放好計數(shù)板和蓋玻片，將試管輕輕震蕩1分鐘，用吸管吸懸液一滴，注入計數(shù)池，避免產(chǎn)生氣泡或溢出，放置10-15分鐘，待血小板下沉。5、先用低倍鏡找到中央大方格，換高倍鏡計數(shù)中央大方格內(nèi)的血小板數(shù)，各中格內(nèi)的血小板差異不得超過10個，如每中格內(nèi)血小板數(shù)小于1個時，應(yīng)將全大格數(shù)完或另滴計數(shù)板，再數(shù)一大格作對照。四、計算五個中方格內(nèi)所得的血小板數(shù)×109/L五、參考值正常參考值：100～300×109/L實驗六尿液的一般檢查、尿液酸堿度和尿比重一、尿量1、尿量：指24h內(nèi)排出體外的尿液總量。2、參考值：成年人：1-2L/24h，即1ml/（h·kg體重）；兒童按體重計算尿量，大約比成年人多3-4倍。3、臨床意義：（1）多尿是指24h尿量超過。（2）少尿或無尿：少尿指每小時尿量持續(xù)小于17ml（兒童＜kg）或24h尿量少于；12h無尿或24h小于100ml為無尿；無尿發(fā)展至排不出尿稱尿閉。二尿液酸堿度（尿液分析試條目測八聯(lián)試紙法）（一）、實驗原理：通過PH指示劑測定的范圍內(nèi)的PH值，正常人的新鮮尿液PH值在之間。（二）、實驗方法（目測）1、將所有的試墊區(qū)侵入樣本中，并立即將其取出。2、讓試紙的邊緣沿著樣本容器口輕輕撩試，以去除殘余的尿液。3、橫握試紙，與瓶簽上的比色圖譜比較，記錄結(jié)果。按瓶簽上所定的時間記錄半定量結(jié)果、2分鐘后的顏色變化無臨床診斷意義。三尿比重（一）、實驗原理：尿液比密與所含溶質(zhì)成正比，溶質(zhì)越多，尿比密越高，對浮標(biāo)的浮力越大，侵入尿液的比重計部分則越小，讀數(shù)越大；反之，讀數(shù)越小。（二）、實驗器材：比密計、比密桶（三）、實驗方法：1、充分混勻尿液后，沿管壁緩慢倒入小量杯中2、比重計放入杯中使懸浮于中央，勿觸及杯壁或杯底3、比重計停穩(wěn)后讀取尿液凹面相切的刻度，即為被測尿液的比重（四）、注意事項：1、尿比密計必須經(jīng)過校正，應(yīng)用純水在規(guī)定溫度下觀察比重是否標(biāo)準(zhǔn)2、溫度校正，尿液標(biāo)本溫度與比密計標(biāo)明溫度不一致時，每高3℃應(yīng)將結(jié)果增加，每低33、尿內(nèi)含Pr和Glu時的修正：每10g/L蛋白質(zhì)將比密減，10g/L葡萄糖將比密減4、鹽類沉淀的處理，將尿標(biāo)本加溫使鹽類溶解，測定實驗七尿沉渣定性檢查一、實驗操作：1、取新鮮尿液10ml于試管內(nèi)1500r/min5分鐘。2、待離心機停后，取出離心管，棄去上清液。留下，輕輕離心使尿沉渣有形成分混勻。3、取沉淀于玻片上鏡檢。二、結(jié)果判斷：用10×10倍，觀察其中有形成分管型，10×40倍觀察細(xì)胞成分和計數(shù)，觀察10個視野管型計數(shù)20個視野。參考值：1、細(xì)胞成分：最低-最高值/HPRBL0-3/HPWBL0-5個/HP2、管型（透明）：平均值/LP3、尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍鏡視野（＋）（2＋）（3＋）報告三、注意事項：1、清晨空腹第一次尿應(yīng)在1h內(nèi)送檢2、準(zhǔn)備干凈，干燥尿杯，留取中段尿，尿液細(xì)胞及管型的計數(shù)。Addis1h尿沉渣計數(shù)。四、標(biāo)本收集：患者先排尿棄去準(zhǔn)確收集3h尿液于清潔干燥器內(nèi)（標(biāo)本留取5：30-8：30）五、實驗操作：準(zhǔn)備側(cè)量3h尿量，充分混勻取尿液10ml，1500r/min5分鐘，用吸管吸取上層尿液9ml留取1ml，吸取混勻尿液1滴注入計數(shù)盤中，cal計數(shù)10大方格，管型20個大方格。六、計算：1小時細(xì)胞=10個大方格細(xì)胞總數(shù)×（1000/10）×（3h尿量/3）1小時Cost計數(shù)=(20個大方格管型數(shù)/2)×(1000/10)×（3h尿量/3）式中1000為微升換算成毫升數(shù)，10為尿液濃縮倍數(shù)七、實驗注意事項：1、尿液新鮮PH值應(yīng)在6以下。2、被檢尿SG在以下如<的為低滲尿易破壞cell。3、尿中有磷酸鹽時應(yīng)加少量冰乙酸，但勿加過多，使cell管型溶解。實驗八糞便隱血試驗檢查膠體金法一、實驗原理：本品采用鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體和羊抗鼠IgG多克隆抗體分別點樣于硝酸纖維膜T區(qū)（檢測線）和C區(qū)（質(zhì)控線）用膠體金標(biāo)記的鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體作為呈色物質(zhì)，采用雙抗體夾心法原理制成，如果糞便中含有Hb，它就會和試劑中的金標(biāo)抗體組成抗原抗體復(fù)合物，再和檢測區(qū)的Hb抗體形成紫紅色的色帶二、實驗試劑：大便隱血檢測試劑盒三、實驗方法：1、取出驗便杯，加入蒸餾水放入杯中。2、多點采集大便標(biāo)本50-100mg，與驗便杯中溶液混勻。3、將試紙條帶有MAX標(biāo)記的一端插入制備好的大便樣本中。4.5min內(nèi)判讀結(jié)果。實驗結(jié)果判斷：1.陽性：出現(xiàn)雙條紅線，就表明大便隱血陽性2.陰性：只有C區(qū)出現(xiàn)單條紅線，表明大便隱血陰性3.無效：無紅色線或只有T區(qū)出現(xiàn)單條紅線時，說明檢測無效，需重復(fù)檢測。實驗九漿膜腔積液細(xì)胞計數(shù)一、實驗?zāi)康模赫莆諠{膜腔積液細(xì)胞計數(shù)顯微鏡計數(shù)法原理及技術(shù)。二、實驗原理：用冰乙酸破壞紅細(xì)胞，混勻后充入計數(shù)池中，于顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)的有核細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過換算求得每升積液內(nèi)的有核細(xì)胞數(shù)。三、實驗器材及試劑：顯微鏡、微量吸管、計數(shù)板、蓋玻片、冰乙酸。四、實驗操作：1、取試管1支，加冰乙酸1-2滴，轉(zhuǎn)動試管，使內(nèi)壁粘附少許冰乙酸后棄去，滴加混勻漿膜腔積液3-4滴，混勻，放置5-10分鐘，破壞紅細(xì)胞。2、將計數(shù)板與蓋玻片用軟布擦凈，將蓋玻片覆蓋于計數(shù)池上，再用微量吸管吸取積液，充入計數(shù)池與蓋玻片間的細(xì)縫隙中，靜止2-3分鐘，待細(xì)胞下沉。5、用低倍鏡計數(shù)2個計數(shù)池四角及中央的10個大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。五、計算10個大方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)×106=細(xì)胞數(shù)/升六、臨床意義漏出液:細(xì)胞數(shù)<100×106，以淋巴細(xì)胞或間皮細(xì)胞為主滲出液：細(xì)胞數(shù)>500×106，以淋巴細(xì)胞或中性粒細(xì)胞為主實驗十異常脫落細(xì)胞形態(tài)間皮細(xì)胞性腫瘤（惡性）：為癌性（上皮性）間皮瘤和變異體。癌性間皮瘤：腫瘤細(xì)胞通常大量，細(xì)胞多單個散在，并可見球形聚集。聚集細(xì)胞呈三維結(jié)構(gòu)，常有扇貝樣邊界，類似桑椹。桑椹中央細(xì)胞互相堆積，形成很復(fù)雜外觀。積液中出現(xiàn)三維桑椹樣乳頭狀聚集的細(xì)胞，如果無原發(fā)性腫瘤，應(yīng)考慮診斷為癌性間皮瘤。腺癌：常見為肺腺癌、乳腺癌、漿液性卵巢癌、子宮內(nèi)膜腺癌、食道腺癌、腎癌和甲狀腺癌等。其細(xì)胞學(xué)特點是：1、呈腺體樣或管狀結(jié)構(gòu)。2、形成多層、球形或卵圓形聚集，提示乳頭狀增生。3、單個癌細(xì)胞呈柱狀，與其他腫瘤類型有明顯區(qū)別。4、印戒樣癌細(xì)胞，核異常，偏位，胞質(zhì)內(nèi)含巨大黏液空泡。但是僅見胞質(zhì)空泡不是診斷腺癌的依據(jù)，須有明顯的核異常。5、分化差的腺癌細(xì)胞鑒別診斷很難。實驗十一陰道分泌物圖片檢查一、理學(xué)檢查正常陰道分泌物為白色稀糊狀、無氣味、量多少不等，其性狀與生殖器充血情況及雌激素水平高低有關(guān)。①臨近排卵期，白帶清澈透明，稀薄似蛋清，量多。②排卵期2-3d后，混濁粘稠，量減少。③行經(jīng)前，量又增加。④妊娠期，量較多⑤絕經(jīng)期后，陰道分泌物減少，因雌激素減少、生殖器官腺體減少所致。1、大量無色透明黏性白帶4、血性白帶2、膿性白帶5、黃色水樣白帶3、豆腐渣樣白帶6、灰白色奶油樣白帶清潔度桿菌球菌白細(xì)胞或膿細(xì)胞（個/HPF）上皮細(xì)胞I多—0-5滿視野Ⅱ中少5-15?野Ⅲ少多15-30少量Ⅳ—大量＞30—二、顯微鏡檢查1、陰道清潔度【質(zhì)量保證】檢驗前：載玻片必須干凈，生理鹽水要新鮮。標(biāo)本新鮮，防止污染。檢驗中：涂片應(yīng)均勻平鋪，不能聚集成滴狀；先用低倍鏡觀察全片，選擇薄厚適宜的區(qū)域，再用高倍鏡檢查；觀察標(biāo)準(zhǔn)和報告方式一致，避免漏檢。檢驗后：對可疑或與臨床診斷不符的標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行復(fù)查?！緟⒖贾怠縄—Ⅱ度無致病菌和特殊細(xì)胞Ⅲ級提示炎癥，如陰道炎、宮頸炎Ⅳ級