蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)課件

蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/311蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/2312022/10/3122022/10/232將mRNA中核苷酸順序轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)分子中氨基酸順序的過程，即將mRNA中4種核苷酸的語言解讀為蛋白質(zhì)中20種氨基酸的語言——翻譯（Translation）蛋白質(zhì)的生物合成：以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過程2022/10/313將mRNA中核苷酸順序轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)分子中氨基酸順序的過程，即一、蛋白質(zhì)合成的分子體系(一)mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板辨認(rèn)起始密碼子(AUG)：翻譯（蛋白質(zhì)合成）起始的必須步驟——確定閱讀框架按照不重疊的三聯(lián)體密碼子翻譯產(chǎn)生對應(yīng)的AA并形成肽鍵終止密碼子，合成結(jié)束，肽鏈釋放（終止密碼連續(xù)出現(xiàn)2～3個(gè)）5’3’AUGUAA、UGA、UAG編碼區(qū)3’端非編碼區(qū)5’端非編碼區(qū)2022/10/314一、蛋白質(zhì)合成的分子體系(一)mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板

mRNA分子中每三個(gè)相鄰堿基組成一個(gè)密碼子真核生物mRNA的成熟需要經(jīng)過剪切修飾，只編碼一條肽鏈，轉(zhuǎn)錄和翻譯發(fā)生在不同的空間和時(shí)間原核生物mRNA轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時(shí)進(jìn)行，可以編碼多條肽鏈mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板2022/10/315mRNA分子中每三個(gè)相鄰堿基組成一個(gè)密碼子mRNA：蛋白質(zhì)1、引導(dǎo)氨基酸進(jìn)入核糖體2、將mRNA的堿基序列翻譯為氨基酸序列3、tRNA的反密碼子與mRNA的密碼子堿基互補(bǔ)（二）tRNA：轉(zhuǎn)運(yùn)活化的AA至mRNA模板2022/10/3161、引導(dǎo)氨基酸進(jìn)入核糖體（二）tRNA：轉(zhuǎn)運(yùn)活化的AA至mR70～90個(gè)核苷酸，分子較小三葉草形結(jié)構(gòu)1）含稀有堿基2）反密碼環(huán)有三個(gè)反密碼子3）氨基酸臂有CCA結(jié)構(gòu)一種tRNA只與一種AA結(jié)合一種AA可與幾種tRNA結(jié)合tRNA約50余種密碼子第三位核苷酸擺動配對tRNA的關(guān)鍵部位：氨基酸臂：AA結(jié)合部位反密碼環(huán)：mRNA結(jié)合部位2022/10/31770～90個(gè)核苷酸，分子較小1）含稀有堿基一種tRNA只與2022/10/3182022/10/238核糖體：無界膜，顆粒狀，大、小亞基組成亞基：含不同的Pr、rRNA，原核和真核生物不同1.核糖體的組成(三)核糖體是蛋白質(zhì)合成的工廠2022/10/319核糖體：無界膜，顆粒狀，1.核糖體的組成(三)核糖體是蛋多聚核糖體（polgsome）mRNA和多個(gè)核蛋白體的聚合物，一般間隔40個(gè)核苷酸結(jié)合一個(gè)核糖體。（一個(gè)mRNA分子同時(shí)有多個(gè)核蛋白體在進(jìn)行蛋白質(zhì)的合成）2022/10/3110多聚核糖體（polgsome）mRNA和多個(gè)核蛋白體的聚合物原核生物的轉(zhuǎn)錄翻譯同步進(jìn)行多聚核糖體的電鏡照片2022/10/3111原核生物的轉(zhuǎn)錄翻譯同步進(jìn)行多聚核糖體的電鏡照片2022/10rRNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成核糖體

細(xì)菌核糖體：3種rRNA、57個(gè)Pr，Mw270萬

真核生物核糖體：4種rRNA、約82個(gè)Pr，Mw420萬原核生物真核生物小亞基rRNA蛋白質(zhì)16S-rRNA21種18S-rRNA33種大亞基rRNA蛋白質(zhì)5S-rRNA23S-rRNA34種5S-rRNA28S-rRNA5.8S-rRNA49種2022/10/3112rRNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成核糖體細(xì)菌核糖體：3種rRNA、57個(gè)原核生物5SrRNA可與tRNA互補(bǔ)，與23SrRNA互補(bǔ)16SrRNA的3’端ACCUCCUUA與mRNA的SD序列互補(bǔ)，翻譯起始定位；與23SrRNA互補(bǔ)，大小亞基結(jié)合23SrRNA與起始tRNA互補(bǔ)2022/10/3113原核生物5SrRNA可與tRNA互補(bǔ)，與23SrRNA互2、核糖體的結(jié)構(gòu)與功能1、P位點(diǎn)（肽?；稽c(diǎn)）結(jié)合肽基-tRNA的位點(diǎn)2、A位點(diǎn)（氨?；稽c(diǎn)）結(jié)合氨基酰-tRNA的位點(diǎn)3、轉(zhuǎn)肽酶活性催化肽鍵的形成4、識別mRNA的位點(diǎn)小亞基上，可容納2個(gè)密碼2022/10/31142、核糖體的結(jié)構(gòu)與功能1、P位點(diǎn)（肽?；稽c(diǎn)）2022/103、核糖體存在場所粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（主要）細(xì)胞質(zhì)線粒體、葉綠體細(xì)菌細(xì)胞：約20，000個(gè)核糖體真核細(xì)胞：106個(gè)未成熟蟾蜍卵細(xì)胞：1012個(gè)2022/10/31153、核糖體存在場所粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（主要）細(xì)菌細(xì)胞：約20，密碼子的特點(diǎn)連續(xù)性：兩個(gè)密碼之間沒有任何堿基隔開。簡并性：64個(gè)密碼子對應(yīng)20個(gè)氨基酸，同一種氨基酸有兩個(gè)或多個(gè)密碼子的現(xiàn)象為密碼子的簡并性。變偶性：專一性取決于頭兩個(gè)堿基，tRNA上的反密碼子與mRNA密碼子匹配時(shí)，第一二堿基嚴(yán)格配對，第三堿基可以變動。反密碼子第一位可為I，可識別更多簡并密碼子。這樣32種tRNA即可識別61個(gè)編碼氨基酸的密碼子。通用性：共用一套遺傳密碼。線粒體編碼方式有所不同。4種堿基，編碼20個(gè)氨基酸2022/10/3116密碼子的特點(diǎn)連續(xù)性：兩個(gè)密碼之間沒有任何堿基隔開。4種堿基，5個(gè)階段合成方向：N→C端翻譯方向：5’→3’二、翻譯的步驟2022/10/31175個(gè)階段二、翻譯的步驟2022/10/2317在核糖體上進(jìn)行，且是一個(gè)循環(huán)過程，因此也成為核糖體循環(huán)。2022/10/3118在核糖體上進(jìn)行，且是一個(gè)循環(huán)過程，因此也成為核糖體循環(huán)。20（一）氨基酸的活化1、氨基酰-tRNA合成酶：使AA結(jié)合到特定的tRNA上

AA活化（能量）tRNA攜帶AA到mRNA指定部位（專一性）2022/10/3119（一）氨基酸的活化1、氨基酰-tRNA合成酶：使AA結(jié)合到特2、每個(gè)氨酰-tRNA合成酶可識別一個(gè)特定的AA和與此AA對應(yīng)的多個(gè)tRNA的特定部位氨酰-tRNA合成酶具有校對功能，如果產(chǎn)物不對應(yīng)，則啟動校對活性，水解非正確組合的氨基酸和tRNA之間形成的共價(jià)聯(lián)系。2022/10/31202、每個(gè)氨酰-tRNA合成酶可識別一個(gè)特定的AA和與此AA對原核生物能將tRNAiMet的氨基酸甲?；ǘ┢鹗茧A段1、所有蛋白質(zhì)翻譯起始為甲硫氨酸一個(gè)特殊的tRNA啟動了蛋白質(zhì)的合成2022/10/3121原核生物能將tRNAiMet的氨基酸甲?；ǘ┢鹗茧A段1、1）轉(zhuǎn)運(yùn)Met的tRNA：2種（1）tRNAiMet（原核：tRNAifMet）：被起始因子識別，與起始密碼AUG配對，在肽鏈N端摻入Met，啟動蛋白質(zhì)合成

（2）tRNAMet：被延伸因子識別，與mRNA之間AUG配對，摻入Met（延伸）2）Met的活化產(chǎn)物（1）起始位置：Met-tRNAiMet

原核：fMet-tRNAMet（2）中間位置：Met-tRNAMet2022/10/31221）轉(zhuǎn)運(yùn)Met的tRNA：2種（1）tRNAiMet（原核：2、翻譯開始于mRNA與核糖體的結(jié)合

原核生物的mRNA存在富含嘌呤堿基的SD序列核糖體小亞基上的16SrRNA3’端的富含嘧啶序列可與SD序列配對結(jié)合2022/10/31232、翻譯開始于mRNA與核糖體的結(jié)合原核生物的mRNA存形成起始復(fù)合體原核生物起始因子IF-3、IF-1結(jié)合于小亞基（IF-3：促進(jìn)上一輪蛋白質(zhì)合成的核糖體大小亞基解聚）小亞基16SrRNA序列與mRNA的SD序列互補(bǔ)配對使小亞基結(jié)合于SD序列（真核生物無SD序列）fMet-tRNAfMet與起始密碼AUG配對結(jié)合，與GTP結(jié)合的起始因子IF-2同時(shí)結(jié)合,形成五元起始復(fù)合物GTP水解釋放能量，促使大亞基結(jié)合成完整的核糖體,IF-1、IF-2、IF-3脫離復(fù)合體mRNA、fMet-tRNAfMet和核糖體構(gòu)成三元起始復(fù)合物2022/10/3124形成起始復(fù)合體原核生物起始因子IF-3、IF-1結(jié)合于小亞真核生物起始階段與原核生物的不同點(diǎn)無SD序列，但有5’帽子、3’polyA尾巴

帽子結(jié)合蛋白促使小亞基與mRNA結(jié)合起始因子——eIF，有10種以上小亞基先與Met-tRNAMet結(jié)合，再與mRNA的AUG結(jié)合（與原核相反）注意：啟動過程消耗GTP復(fù)合體含3種RNA、蛋白質(zhì)和Met，無DNA2022/10/3125真核生物起始階段與原核生物的不同點(diǎn)無SD序列，但有5’帽子（三）在肽鏈延長過程中有3個(gè)重復(fù)的延伸反應(yīng)注冊成肽轉(zhuǎn)位2022/10/3126（三）在肽鏈延長過程中有3個(gè)重復(fù)的延伸反應(yīng)注冊成肽轉(zhuǎn)位20核糖體的四個(gè)活性部位轉(zhuǎn)肽酶中心-E位2022/10/3127核糖體的四個(gè)活性部位轉(zhuǎn)肽酶中心-E位2022/10/2327核糖核蛋白體循環(huán)——注冊2022/10/3128核糖核蛋白體循環(huán)——注冊2022/10/2328核糖核蛋白體循環(huán)——成肽2022/10/3129核糖核蛋白體循環(huán)——成肽2022/10/2329核糖核蛋白體循環(huán)——轉(zhuǎn)位2022/10/3130核糖核蛋白體循環(huán)——轉(zhuǎn)位2022/10/2330（四)翻譯的終止需要釋放因子和終止密碼子的參加釋放因子包括：RF1識別UAA和UAG，RF2識別UAA和UGA，RF3刺激二者活性。肽鏈通過注冊、成肽、轉(zhuǎn)位3個(gè)步驟的循環(huán)延長肽鏈當(dāng)遇到終止密碼時(shí)，肽鏈延長結(jié)束肽鏈釋放，大小亞基自mRNA脫落2022/10/3131（四)翻譯的終止需要釋放因子和終止密碼子的參加釋放因子包RRF2022/10/3132RRF2022/10/2332（一）肽鏈的翻譯后的加工修飾：一級結(jié)構(gòu)的修飾、多肽鏈的折疊、三維結(jié)構(gòu)的修飾等1.肽鏈的N端切割：去除N端fMet殘基四、肽鏈翻譯后的加工修飾與轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/3133（一）肽鏈的翻譯后的加工修飾：一級結(jié)構(gòu)的修飾、多肽鏈的折疊、信號肽及部分肽段的切除蛋白質(zhì)完成跨膜運(yùn)輸，信號肽酶切除信號肽往往還含有一段與活性無關(guān)的其他肽段，切除后才能形成有活性的蛋白質(zhì)2022/10/3134信號肽及部分肽段的切除蛋白質(zhì)完成跨膜運(yùn)輸，信號肽酶切除信號2.個(gè)別氨基酸的共價(jià)修飾

二硫鍵的形成：2個(gè)Cys-SH間脫氫氧化

輔助因子的連接：與糖、脂類、血紅素等結(jié)合形成結(jié)合蛋白質(zhì)

亞基聚合：Hb的4個(gè)亞基聚合成四級結(jié)構(gòu)

個(gè)別氨基酸的化學(xué)修飾編碼氨基酸：20種；蛋白質(zhì)AA：＞100種——編碼AA化學(xué)修飾2022/10/31352.個(gè)別氨基酸的共價(jià)修飾二硫鍵的形成：2個(gè)Cys-SH間脫磷酸化：Ser、Thr、Tyr羥基化：Pro、Lys?；篐is甲基化：Trp核糖基化：Arg2022/10/3136磷酸化：Ser、Thr、Tyr2022/10/2336蛋白質(zhì)的生物活性：氨基酸順序，空間結(jié)構(gòu)新生肽鏈：必須經(jīng)過嚴(yán)格而復(fù)雜的折疊，才能形成正確空間結(jié)構(gòu)、活性蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序如何決定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)——第二遺傳密碼？3.肽鏈的折疊2022/10/3137蛋白質(zhì)的生物活性：氨基酸順序，空間結(jié)構(gòu)3.肽鏈的折疊202新生肽鏈折疊：分子伴侶、折疊酶分子伴侶（Molecularchaperone）幫助新生肽鏈進(jìn)行非共價(jià)折疊的一類蛋白質(zhì)熱休克蛋白、伴侶素等折疊酶（Foldase）類催化與折疊有關(guān)的化學(xué)反應(yīng)的酶目前已知：2個(gè)二硫鍵異構(gòu)酶（PDI）、脯氨酸異構(gòu)酶（PPI）2022/10/3138新生肽鏈折疊：分子伴侶、折疊酶分子伴侶（Molecular分子伴侶幫助新生肽鏈的正確折疊2022/10/3139分子伴侶幫助新生肽鏈的正確折疊2022/10/2339蛋白質(zhì)的合成部位：核糖體合成后的去向1）保留在胞漿2）進(jìn)入細(xì)胞核、線粒體或其它細(xì)胞器3）分泌至體液（胞外）→運(yùn)輸?shù)桨衅鞴俸桶屑?xì)胞靶向運(yùn)輸（Proteintargeting）蛋白質(zhì)合成后，定向到達(dá)其執(zhí)行功能的目標(biāo)地點(diǎn)跨膜運(yùn)輸：蛋白質(zhì)運(yùn)輸需通過膜性結(jié)構(gòu)（二）肽鏈翻譯后的轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/3140蛋白質(zhì)的合成部位：核糖體合成后的去向1）保留在胞漿靶向運(yùn)輸（蛋白質(zhì)通過其信號肽引導(dǎo)到目的地氨基端堿性區(qū)中部疏水核心區(qū)羧基端加工區(qū)

信號肽（signalpeptide）：每個(gè)需要轉(zhuǎn)運(yùn)的肽鏈都含有一段特異性的氨基酸序列，引導(dǎo)該肽鏈被輸送到不同轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中。這一段氨基酸序列稱信號肽。2022/10/3141蛋白質(zhì)通過其信號肽引導(dǎo)到目的地氨基端堿性區(qū)信號肽（sig10～40個(gè)AA殘基組成；三個(gè)區(qū)段信號肽的共同結(jié)構(gòu)1）N端帶正電荷的氨基酸：Lys、Arg等堿性AA2）中間：10～15或更多的疏水AA區(qū)段：Leu、Ile等利于分泌性蛋白進(jìn)入膜結(jié)構(gòu)3）C端能被信號肽酶裂解的部位：Ala、Gly、Ser、Cys；跨膜運(yùn)輸完成，信號肽酶識別并切割信號肽2022/10/314210～40個(gè)AA殘基組成；三個(gè)區(qū)段信號肽的共同結(jié)構(gòu)1）N端游離核糖體：只合成線粒體或葉綠體的蛋白質(zhì)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖體：溶酶體蛋白，分泌蛋白質(zhì)和構(gòu)成質(zhì)膜骨架的蛋白質(zhì)2022/10/3143游離核糖體：只合成線粒體或葉綠體的蛋白質(zhì)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合的核糖1）蛋白質(zhì)在核糖體合成，首先合成出信號肽2）信號肽被信號識別體（SRP）蛋白結(jié)合，肽鏈延伸停止3）SRP與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜SRP受體結(jié)合，核糖體與膜上核糖體受體結(jié)合4）SRP釋放5）肽鏈延長重新開始，完成蛋白質(zhì)合成6）信號肽酶切除信號肽，蛋白質(zhì)釋放入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)蛋白質(zhì)靶向運(yùn)輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)2022/10/31441）蛋白質(zhì)在核糖體合成，首先合成出信號肽蛋白質(zhì)靶向2022/

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的肽鏈經(jīng)過修飾加工，轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基體，進(jìn)行多肽的糖基化修飾及多肽的分類、轉(zhuǎn)運(yùn)

在高爾基體中，對糖蛋白的寡糖鏈進(jìn)行修飾和調(diào)整，將各種多肽分類送往溶酶體、分泌粒和質(zhì)膜等目的地。2022/10/3145內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成的肽鏈經(jīng)過修飾加工，轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基體，進(jìn)行多肽的糖蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/3146蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/2312022/10/31472022/10/232將mRNA中核苷酸順序轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)分子中氨基酸順序的過程，即將mRNA中4種核苷酸的語言解讀為蛋白質(zhì)中20種氨基酸的語言——翻譯（Translation）蛋白質(zhì)的生物合成：以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過程2022/10/3148將mRNA中核苷酸順序轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)分子中氨基酸順序的過程，即一、蛋白質(zhì)合成的分子體系(一)mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板辨認(rèn)起始密碼子(AUG)：翻譯（蛋白質(zhì)合成）起始的必須步驟——確定閱讀框架按照不重疊的三聯(lián)體密碼子翻譯產(chǎn)生對應(yīng)的AA并形成肽鍵終止密碼子，合成結(jié)束，肽鏈釋放（終止密碼連續(xù)出現(xiàn)2～3個(gè)）5’3’AUGUAA、UGA、UAG編碼區(qū)3’端非編碼區(qū)5’端非編碼區(qū)2022/10/3149一、蛋白質(zhì)合成的分子體系(一)mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板

mRNA分子中每三個(gè)相鄰堿基組成一個(gè)密碼子真核生物mRNA的成熟需要經(jīng)過剪切修飾，只編碼一條肽鏈，轉(zhuǎn)錄和翻譯發(fā)生在不同的空間和時(shí)間原核生物mRNA轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時(shí)進(jìn)行，可以編碼多條肽鏈mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板2022/10/3150mRNA分子中每三個(gè)相鄰堿基組成一個(gè)密碼子mRNA：蛋白質(zhì)1、引導(dǎo)氨基酸進(jìn)入核糖體2、將mRNA的堿基序列翻譯為氨基酸序列3、tRNA的反密碼子與mRNA的密碼子堿基互補(bǔ)（二）tRNA：轉(zhuǎn)運(yùn)活化的AA至mRNA模板2022/10/31511、引導(dǎo)氨基酸進(jìn)入核糖體（二）tRNA：轉(zhuǎn)運(yùn)活化的AA至mR70～90個(gè)核苷酸，分子較小三葉草形結(jié)構(gòu)1）含稀有堿基2）反密碼環(huán)有三個(gè)反密碼子3）氨基酸臂有CCA結(jié)構(gòu)一種tRNA只與一種AA結(jié)合一種AA可與幾種tRNA結(jié)合tRNA約50余種密碼子第三位核苷酸擺動配對tRNA的關(guān)鍵部位：氨基酸臂：AA結(jié)合部位反密碼環(huán)：mRNA結(jié)合部位2022/10/315270～90個(gè)核苷酸，分子較小1）含稀有堿基一種tRNA只與2022/10/31532022/10/238核糖體：無界膜，顆粒狀，大、小亞基組成亞基：含不同的Pr、rRNA，原核和真核生物不同1.核糖體的組成(三)核糖體是蛋白質(zhì)合成的工廠2022/10/3154核糖體：無界膜，顆粒狀，1.核糖體的組成(三)核糖體是蛋多聚核糖體（polgsome）mRNA和多個(gè)核蛋白體的聚合物，一般間隔40個(gè)核苷酸結(jié)合一個(gè)核糖體。（一個(gè)mRNA分子同時(shí)有多個(gè)核蛋白體在進(jìn)行蛋白質(zhì)的合成）2022/10/3155多聚核糖體（polgsome）mRNA和多個(gè)核蛋白體的聚合物原核生物的轉(zhuǎn)錄翻譯同步進(jìn)行多聚核糖體的電鏡照片2022/10/3156原核生物的轉(zhuǎn)錄翻譯同步進(jìn)行多聚核糖體的電鏡照片2022/10rRNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成核糖體

細(xì)菌核糖體：3種rRNA、57個(gè)Pr，Mw270萬

真核生物核糖體：4種rRNA、約82個(gè)Pr，Mw420萬原核生物真核生物小亞基rRNA蛋白質(zhì)16S-rRNA21種18S-rRNA33種大亞基rRNA蛋白質(zhì)5S-rRNA23S-rRNA34種5S-rRNA28S-rRNA5.8S-rRNA49種2022/10/3157rRNA與蛋白質(zhì)構(gòu)成核糖體細(xì)菌核糖體：3種rRNA、57個(gè)原核生物5SrRNA可與tRNA互補(bǔ)，與23SrRNA互補(bǔ)16SrRNA的3’端ACCUCCUUA與mRNA的SD序列互補(bǔ)，翻譯起始定位；與23SrRNA互補(bǔ)，大小亞基結(jié)合23SrRNA與起始tRNA互補(bǔ)2022/10/3158原核生物5SrRNA可與tRNA互補(bǔ)，與23SrRNA互2、核糖體的結(jié)構(gòu)與功能1、P位點(diǎn)（肽?；稽c(diǎn)）結(jié)合肽基-tRNA的位點(diǎn)2、A位點(diǎn)（氨?；稽c(diǎn)）結(jié)合氨基酰-tRNA的位點(diǎn)3、轉(zhuǎn)肽酶活性催化肽鍵的形成4、識別mRNA的位點(diǎn)小亞基上，可容納2個(gè)密碼2022/10/31592、核糖體的結(jié)構(gòu)與功能1、P位點(diǎn)（肽?；稽c(diǎn)）2022/103、核糖體存在場所粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（主要）細(xì)胞質(zhì)線粒體、葉綠體細(xì)菌細(xì)胞：約20，000個(gè)核糖體真核細(xì)胞：106個(gè)未成熟蟾蜍卵細(xì)胞：1012個(gè)2022/10/31603、核糖體存在場所粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（主要）細(xì)菌細(xì)胞：約20，密碼子的特點(diǎn)連續(xù)性：兩個(gè)密碼之間沒有任何堿基隔開。簡并性：64個(gè)密碼子對應(yīng)20個(gè)氨基酸，同一種氨基酸有兩個(gè)或多個(gè)密碼子的現(xiàn)象為密碼子的簡并性。變偶性：專一性取決于頭兩個(gè)堿基，tRNA上的反密碼子與mRNA密碼子匹配時(shí)，第一二堿基嚴(yán)格配對，第三堿基可以變動。反密碼子第一位可為I，可識別更多簡并密碼子。這樣32種tRNA即可識別61個(gè)編碼氨基酸的密碼子。通用性：共用一套遺傳密碼。線粒體編碼方式有所不同。4種堿基，編碼20個(gè)氨基酸2022/10/3161密碼子的特點(diǎn)連續(xù)性：兩個(gè)密碼之間沒有任何堿基隔開。4種堿基，5個(gè)階段合成方向：N→C端翻譯方向：5’→3’二、翻譯的步驟2022/10/31625個(gè)階段二、翻譯的步驟2022/10/2317在核糖體上進(jìn)行，且是一個(gè)循環(huán)過程，因此也成為核糖體循環(huán)。2022/10/3163在核糖體上進(jìn)行，且是一個(gè)循環(huán)過程，因此也成為核糖體循環(huán)。20（一）氨基酸的活化1、氨基酰-tRNA合成酶：使AA結(jié)合到特定的tRNA上

AA活化（能量）tRNA攜帶AA到mRNA指定部位（專一性）2022/10/3164（一）氨基酸的活化1、氨基酰-tRNA合成酶：使AA結(jié)合到特2、每個(gè)氨酰-tRNA合成酶可識別一個(gè)特定的AA和與此AA對應(yīng)的多個(gè)tRNA的特定部位氨酰-tRNA合成酶具有校對功能，如果產(chǎn)物不對應(yīng)，則啟動校對活性，水解非正確組合的氨基酸和tRNA之間形成的共價(jià)聯(lián)系。2022/10/31652、每個(gè)氨酰-tRNA合成酶可識別一個(gè)特定的AA和與此AA對原核生物能將tRNAiMet的氨基酸甲?；ǘ┢鹗茧A段1、所有蛋白質(zhì)翻譯起始為甲硫氨酸一個(gè)特殊的tRNA啟動了蛋白質(zhì)的合成2022/10/3166原核生物能將tRNAiMet的氨基酸甲?；ǘ┢鹗茧A段1、1）轉(zhuǎn)運(yùn)Met的tRNA：2種（1）tRNAiMet（原核：tRNAifMet）：被起始因子識別，與起始密碼AUG配對，在肽鏈N端摻入Met，啟動蛋白質(zhì)合成

（2）tRNAMet：被延伸因子識別，與mRNA之間AUG配對，摻入Met（延伸）2）Met的活化產(chǎn)物（1）起始位置：Met-tRNAiMet

原核：fMet-tRNAMet（2）中間位置：Met-tRNAMet2022/10/31671）轉(zhuǎn)運(yùn)Met的tRNA：2種（1）tRNAiMet（原核：2、翻譯開始于mRNA與核糖體的結(jié)合

原核生物的mRNA存在富含嘌呤堿基的SD序列核糖體小亞基上的16SrRNA3’端的富含嘧啶序列可與SD序列配對結(jié)合2022/10/31682、翻譯開始于mRNA與核糖體的結(jié)合原核生物的mRNA存形成起始復(fù)合體原核生物起始因子IF-3、IF-1結(jié)合于小亞基（IF-3：促進(jìn)上一輪蛋白質(zhì)合成的核糖體大小亞基解聚）小亞基16SrRNA序列與mRNA的SD序列互補(bǔ)配對使小亞基結(jié)合于SD序列（真核生物無SD序列）fMet-tRNAfMet與起始密碼AUG配對結(jié)合，與GTP結(jié)合的起始因子IF-2同時(shí)結(jié)合,形成五元起始復(fù)合物GTP水解釋放能量，促使大亞基結(jié)合成完整的核糖體,IF-1、IF-2、IF-3脫離復(fù)合體mRNA、fMet-tRNAfMet和核糖體構(gòu)成三元起始復(fù)合物2022/10/3169形成起始復(fù)合體原核生物起始因子IF-3、IF-1結(jié)合于小亞真核生物起始階段與原核生物的不同點(diǎn)無SD序列，但有5’帽子、3’polyA尾巴

帽子結(jié)合蛋白促使小亞基與mRNA結(jié)合起始因子——eIF，有10種以上小亞基先與Met-tRNAMet結(jié)合，再與mRNA的AUG結(jié)合（與原核相反）注意：啟動過程消耗GTP復(fù)合體含3種RNA、蛋白質(zhì)和Met，無DNA2022/10/3170真核生物起始階段與原核生物的不同點(diǎn)無SD序列，但有5’帽子（三）在肽鏈延長過程中有3個(gè)重復(fù)的延伸反應(yīng)注冊成肽轉(zhuǎn)位2022/10/3171（三）在肽鏈延長過程中有3個(gè)重復(fù)的延伸反應(yīng)注冊成肽轉(zhuǎn)位20核糖體的四個(gè)活性部位轉(zhuǎn)肽酶中心-E位2022/10/3172核糖體的四個(gè)活性部位轉(zhuǎn)肽酶中心-E位2022/10/2327核糖核蛋白體循環(huán)——注冊2022/10/3173核糖核蛋白體循環(huán)——注冊2022/10/2328核糖核蛋白體循環(huán)——成肽2022/10/3174核糖核蛋白體循環(huán)——成肽2022/10/2329核糖核蛋白體循環(huán)——轉(zhuǎn)位2022/10/3175核糖核蛋白體循環(huán)——轉(zhuǎn)位2022/10/2330（四)翻譯的終止需要釋放因子和終止密碼子的參加釋放因子包括：RF1識別UAA和UAG，RF2識別UAA和UGA，RF3刺激二者活性。肽鏈通過注冊、成肽、轉(zhuǎn)位3個(gè)步驟的循環(huán)延長肽鏈當(dāng)遇到終止密碼時(shí)，肽鏈延長結(jié)束肽鏈釋放，大小亞基自mRNA脫落2022/10/3176（四)翻譯的終止需要釋放因子和終止密碼子的參加釋放因子包RRF2022/10/3177RRF2022/10/2332（一）肽鏈的翻譯后的加工修飾：一級結(jié)構(gòu)的修飾、多肽鏈的折疊、三維結(jié)構(gòu)的修飾等1.肽鏈的N端切割：去除N端fMet殘基四、肽鏈翻譯后的加工修飾與轉(zhuǎn)運(yùn)2022/10/3178（一）肽鏈的翻譯后的加工修飾：一級結(jié)構(gòu)的修飾、多肽鏈的折疊、信號肽及部分肽段的切除蛋白質(zhì)完成跨膜運(yùn)輸，信號肽酶切除信號肽往往還含有一段與活性無關(guān)的其他肽段，切除后才能形成有活性的蛋白質(zhì)2022/10/3179信號肽及部分肽段的切除蛋白質(zhì)完成跨膜運(yùn)輸，信號肽酶切除信號2.個(gè)別氨基酸的共價(jià)修飾

二硫鍵的形成：2個(gè)Cys-SH間脫氫氧化

輔助因子的連接：與糖、脂類、血紅素等結(jié)合形成結(jié)合蛋白質(zhì)

亞基聚合：Hb的4個(gè)亞基聚合成四級結(jié)構(gòu)

個(gè)別氨基酸的化學(xué)修飾編碼氨基酸：20種；蛋白質(zhì)AA：＞100種——編碼AA化學(xué)修飾2022/10/31802.個(gè)別氨基酸的共價(jià)修飾二硫鍵的形成：2個(gè)Cys-SH間脫磷酸化：Ser、Thr、Tyr羥基化：Pro、Lys酰基化：His甲基化：Trp核糖基化：Arg2022/10/3181磷酸化：Ser、Thr、Tyr2022/10/2336蛋白質(zhì)的生物活性：氨基酸順序，空間結(jié)構(gòu)新生肽鏈：必須經(jīng)過嚴(yán)格而復(fù)雜的折疊，才能形成正確空間結(jié)構(gòu)、活性蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序如何決定蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)——第二遺傳密碼？3.肽鏈的折疊2022/10/3182蛋白質(zhì)的生物活性：氨