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文檔簡(jiǎn)介
第一篇
微生物工業(yè)菌種與培養(yǎng)基一、選擇題2.實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基是(
)3.在實(shí)驗(yàn)中我們所用到的淀粉水解培養(yǎng)基是一種(
)培養(yǎng)基A基礎(chǔ)培養(yǎng)基B加富培養(yǎng)基C選擇培養(yǎng)基D鑒別培養(yǎng)基7.實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)放線菌的培養(yǎng)基是(
)8.酵母菌適宜的生長(zhǎng)pH值為(
)A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.59.細(xì)菌適宜的生長(zhǎng)pH值為(
)A5.0-6.0B3.0-4.0C8.0-9.0D7.0-7.510.培養(yǎng)下列哪種微生物可以得到淀粉酶、蛋白酶、果膠酶、多肽類(lèi)抗生素、氨基酸、維生素及丁二醇等產(chǎn)品。A枯草芽孢桿菌B醋酸桿菌C鏈霉素D假絲酵母二、是非題1.根據(jù)透明圈的大小可以初步判斷菌株運(yùn)用底物的能力()2.凡是影響微生物生長(zhǎng)速率的營(yíng)養(yǎng)成分均稱(chēng)為生長(zhǎng)限制性基質(zhì)。(
)3.
6.碳源對(duì)配制任何微生物的培養(yǎng)基都是必不可少的.(
)7.亞硝基胍能使細(xì)胞發(fā)生一次或多次突變,特別適合于誘發(fā)營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株,有”超誘變劑”之稱(chēng).9.參與淀粉酶法水解的酶涉及淀粉酶、麥芽糖酶和纖維素酶等。(
)三、填空題1.菌種擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是
提高菌種使用率,減少生產(chǎn)成本
。2.進(jìn)行紫外線誘變時(shí),規(guī)定菌懸液濃度:細(xì)菌約為106個(gè)/ml,放線菌為,霉菌和酵母為106~107個(gè)/ml.紫外線(波長(zhǎng)240-250nm)的作用機(jī)制重要是形成胸腺嘧啶二聚體以改變DNA生物活性,導(dǎo)致菌體死亡和變異。3.培養(yǎng)基應(yīng)具有微生物生長(zhǎng)所需要的六大營(yíng)養(yǎng)要素是_碳源___、__氮源_、__能源__、__水___、__無(wú)機(jī)鹽__和____生長(zhǎng)因子___。4.碳源物對(duì)微生物的功能是__
提供能源__和__
組成菌體細(xì)胞成分的碳架
,微生物可用的碳源物質(zhì)重要有__葡萄糖__、___蔗糖
_、__
麥芽糖
_、__乳糖_、__
淀粉
__等。5.工業(yè)發(fā)酵常用的有機(jī)氮源重要有_
蛋白胨_、_
黃豆餅粉_、_
尿素__、_酵母粉_、__玉米漿
_等。7.常用的純種分離方法有平板劃線,平板稀釋,施加選擇性壓力分離法三種.9.在微生物研究和生長(zhǎng)實(shí)踐中,選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的最基本規(guī)定是__目的明確
_、_營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)
_、物理?xiàng)l件適宜
_、_
價(jià)廉易得
_和_
化學(xué)條件適宜
_。10.液體培養(yǎng)基中加入CaCO3的目的通常是為了__
中和微生物生長(zhǎng)過(guò)程中不斷產(chǎn)生的酸
_。11.在運(yùn)用平板的生化反映進(jìn)行分離時(shí),生長(zhǎng)圈法所用的工具菌是一些營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株,抑菌圈法所用的工具菌是一些抗生素的敏感菌.13.分離放線菌時(shí),可以在樣品的菌懸液中加幾滴10%的酚,以克制細(xì)菌的生長(zhǎng),分離酵母菌時(shí),可在培養(yǎng)基中添加一定量的抗生素以克制細(xì)菌的生長(zhǎng).14.培養(yǎng)基按用途分可分為
孢子培養(yǎng)基
、
種子培養(yǎng)基
、
發(fā)酵培養(yǎng)基
和
補(bǔ)料培養(yǎng)
四種類(lèi)型。15.制備淀粉水解糖的方法有
化學(xué)法
、
酶解法
、和
生物發(fā)酵法
。四、名詞解釋1.培養(yǎng)基:是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都具有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(涉及微量元素)以及維生素和水等。3.次級(jí)代謝產(chǎn)物:是指微生物生長(zhǎng)到一定階段才產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜、對(duì)該生物無(wú)明顯生理功能,或并非是微生物生長(zhǎng)和繁殖所必需的物質(zhì)五、問(wèn)答題1.什么是前體?前體添加的方式?答:前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中,能直接彼微生物在生物合成過(guò)程中合成到產(chǎn)物物分子中去,而其自身的結(jié)構(gòu)并沒(méi)有多大變化,但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。前體使用時(shí)普遍采用流加的方法。2.簡(jiǎn)述菌種保藏的基本原理和菌種保藏方法。答:基本原理:根據(jù)微生物的生理生化特性,人為地發(fā)明條件,使微生物處在代謝不活潑,生長(zhǎng)繁殖受到克制的休眠狀態(tài),以減少菌種的變異。保藏方法:1斜面保藏法。2穿刺保藏法。3沙土管干燥保藏法。4真空冷凍干燥保藏法。5液氮保藏法。6懸液保藏法。7低溫保藏法。3.微生物工業(yè)用的菌種有哪幾大類(lèi),能否舉出各類(lèi)中常用的工業(yè)微生物名稱(chēng)和其反映產(chǎn)物。答:類(lèi)型:1細(xì)菌,乳酸桿菌,產(chǎn)生乳酸。2放線菌,紅霉素鏈霉菌,產(chǎn)生紅霉素。3霉菌,青霉,產(chǎn)生青霉素。酵母,啤酒酵母,產(chǎn)生啤酒。5.在大規(guī)模發(fā)酵的種子制備過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)室階段和生產(chǎn)車(chē)間階段在培養(yǎng)基和培養(yǎng)物選擇上各有何特點(diǎn)?答:實(shí)驗(yàn)室階段培養(yǎng)物選擇的原則:種子能擴(kuò)培到一定的量和質(zhì),獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的孢子/菌體。培養(yǎng)基的選擇應(yīng)當(dāng)是有助于菌體的生長(zhǎng),對(duì)孢子培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)是有助于孢子的生長(zhǎng)。在原料方面,實(shí)驗(yàn)室種子培養(yǎng)階段,規(guī)模一般比較小,因此為了保證培養(yǎng)基的質(zhì)量,培養(yǎng)基的原料一般都比較精細(xì)。
生產(chǎn)車(chē)間階段培養(yǎng)物的選擇原則最終一般都是獲得一定數(shù)量的菌絲體。培養(yǎng)基選擇一方面考慮的是有助于孢子的發(fā)育和菌體的生長(zhǎng),所以營(yíng)養(yǎng)要比發(fā)酵培養(yǎng)基豐富。在原料方面:不如實(shí)驗(yàn)室階段那么精細(xì),而是基本接近于發(fā)酵培養(yǎng)基,這有兩個(gè)方面的因素:一是成本二是馴化。6.依據(jù)不同的分類(lèi)方法,培養(yǎng)基有哪幾種類(lèi)型?答:按組成成分:1合成培養(yǎng)基,2天然培養(yǎng)基;按狀態(tài)分:固體,半固體,液體;按用途分:孢子,種子,發(fā)酵。7、淀粉酶可以通過(guò)微生物發(fā)酵生產(chǎn),為了提高酶的產(chǎn)量,請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),運(yùn)用誘變育種方法,獲得產(chǎn)生淀粉酶較多的菌株,(1)寫(xiě)出重要實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)。(2)根據(jù)誘發(fā)突變率和誘變不定向性的特點(diǎn)預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果。答案:(1)重要實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié):將培養(yǎng)好的菌株分兩組,一組用一定劑量的誘變劑解決,另一組不解決作對(duì)照。配制含淀粉的培養(yǎng)基。把誘變組的菌株接種于多個(gè)含淀粉的培養(yǎng)基上,同時(shí)接種對(duì)照組,相同條件培養(yǎng)。比較兩種菌株菌落大小,選出透明大的菌株。(2)預(yù)期實(shí)習(xí)結(jié)果:由于誘變率低,誘變組中大多數(shù)菌落周邊的透明圈大小與對(duì)照組相同。由于誘變不定向性,誘變組中很少數(shù)菌落透明圈與對(duì)照組相比變大或變小。第二篇發(fā)酵設(shè)備選擇題1.當(dāng)內(nèi)徑為500mm的發(fā)酵罐中的擋板寬度為50mm時(shí),則滿足全擋板條件的擋板塊數(shù)為A5B3C2、機(jī)械攪拌發(fā)酵罐中的檔板寬度一般為A0.1-0.12DB0.3-0.4DC1-1.2DD0.2-0.3D二.是非題1.對(duì)生物進(jìn)行液體深層培養(yǎng)的反映器稱(chēng)為發(fā)酵罐().2.標(biāo)準(zhǔn)式發(fā)酵罐的罐高與罐體直徑比為5.4.()3.嫌氣發(fā)酵罐在結(jié)構(gòu)上比需氧發(fā)酵罐簡(jiǎn)樸得多,但一般須安裝水力噴射洗滌裝置()三.填空題1.常用的需氧發(fā)酵罐有機(jī)械攪拌通風(fēng)式發(fā)酵罐、空氣帶升環(huán)流式發(fā)酵罐、高位塔式發(fā)酵罐、自吸式發(fā)酵罐等,其中機(jī)械攪拌通風(fēng)式發(fā)酵罐作為通用式發(fā)酵罐而占據(jù)主導(dǎo)地位。2.發(fā)酵罐中的攪拌器按液流形式可分為軸向流和徑向流兩種,圓盤(pán)渦輪式攪拌器使用比較廣泛,圓盤(pán)上的攪拌葉一般有箭葉式、平葉式、彎葉式三種。3.酒精發(fā)酵罐一般為圓筒形,底蓋和頂蓋為碟形或錐形,國(guó)內(nèi)外啤酒廠使用較多的是圓筒體錐底形發(fā)酵罐。4、填寫(xiě)下圖空氣除菌設(shè)備流程圖中各部分的設(shè)備名稱(chēng):1粗過(guò)濾器,2空氣壓縮機(jī),4冷卻器,8加熱器9空氣過(guò)濾器。5、下圖為標(biāo)準(zhǔn)通用式發(fā)酵罐的幾何尺寸比例圖,其中H/D=1.7-4,d/D=1/2-1/3W/D=1/8-1/12,B/D=0.8-1.0.四.名詞解釋1、機(jī)械攪拌發(fā)酵罐:也稱(chēng)標(biāo)準(zhǔn)式或通用式發(fā)酵罐,它是運(yùn)用機(jī)械攪拌器的作用,濕空氣和發(fā)酵液充足混合,并溶解在發(fā)酵液中,以保證微生物的生長(zhǎng)繁殖所需要的氧氣。2、氣升式發(fā)酵罐:是應(yīng)用最廣泛的生物反映設(shè)備。這類(lèi)反映器具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)樸、不易染菌、溶氧效率高、能耗低等優(yōu)點(diǎn)。有多種類(lèi)型,常見(jiàn)的有氣升環(huán)流式、鼓泡式、空氣噴射式等。3、自吸式發(fā)酵罐:是一種不需要空氣壓縮機(jī),在攪拌過(guò)程中自吸入空氣的發(fā)酵罐。五.簡(jiǎn)答題(見(jiàn)P85之1\4\6)1.機(jī)械攪拌發(fā)酵罐中,攪拌器的攪拌作用是什么?答:將空氣打壞成小氣泡,增長(zhǎng)氣液接觸界面,提高氧的傳質(zhì)速率,同時(shí)使發(fā)酵液充足混合,液體中的固體物質(zhì)保持懸浮狀態(tài)。2.機(jī)械攪拌發(fā)酵罐的基本結(jié)構(gòu)涉及哪些部件?答:罐體,攪拌器,擋板,軸封,冷卻裝置,消泡器,變速裝置,空氣分布裝置3.判斷下圖分別為什么種生物反映器?請(qǐng)簡(jiǎn)述其操作原理。外循環(huán)帯升式發(fā)酵罐:操作原理:運(yùn)用空氣噴嘴射出的高速空氣,將空氣泡分割成細(xì)泡,與上升管的發(fā)酵液密切接觸,由于上升管的發(fā)酵液輕,加上壓縮空氣的噴流動(dòng)能,因此使上升管的液體上升,罐內(nèi)液體下降而進(jìn)入上升管,形成反復(fù)的循環(huán)。自吸式:運(yùn)用帶有固定導(dǎo)輪的三棱空心葉輪的攪拌器,運(yùn)用其葉輪向前旋轉(zhuǎn)時(shí),葉片與三棱形平板內(nèi)空間的液體被甩出去而形成局部真空,于是將罐外空氣通過(guò)攪拌器中心的吸入管而被吸入罐內(nèi),并與高速流動(dòng)的液體密切接觸,形成細(xì)小的氣泡分散在液體之中,氣液混合流體通過(guò)導(dǎo)輪即轉(zhuǎn)子流到發(fā)酵液主體。4、簡(jiǎn)述好氧發(fā)酵過(guò)程所需使用哪些設(shè)備?答:5、簡(jiǎn)述通風(fēng)機(jī)械攪拌發(fā)酵罐的基本結(jié)構(gòu)有哪些?答:罐體,攪拌器,擋板,冷卻裝置,空氣分布裝置,軸封,變速裝置,消泡器第三篇
發(fā)酵工藝過(guò)程的控制一、選擇題1.微生物分批培養(yǎng)時(shí),在延遲期(
)2.)一般情況下,運(yùn)用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)酒精時(shí),投放的適宜原料和在產(chǎn)生酒精階段需要的必要條件分別是(A)玉米粉和有氧(B)大豆粉和有氧(C)玉米粉和無(wú)氧(D)大豆粉和無(wú)氧3.發(fā)酵過(guò)程中,不會(huì)直接引起pH變化的是()A.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗B.微生物呼出的CO2C.微生物細(xì)胞數(shù)目的增長(zhǎng)D.次級(jí)代謝產(chǎn)物的積累4、在好氧發(fā)酵過(guò)程中,影響供氧傳遞的重要阻力是()A.氧膜阻力B.氣液界面阻力C.液膜阻力D.液流阻力5.酵母菌培養(yǎng)過(guò)程中的生長(zhǎng)曲線如圖所示:a、b、c、d分別表達(dá)不同的生長(zhǎng)時(shí)期,其中適于作為生產(chǎn)用菌種的時(shí)期是() A.a(chǎn) B.bC.cD.d6.在實(shí)際生產(chǎn)中,對(duì)數(shù)期的長(zhǎng)短取決于()①培養(yǎng)罐的大?、诮臃N量的大?、叟囵B(yǎng)基的多少
④代謝產(chǎn)物合成的多少A.②③B.②④C.①②D.①③7.通過(guò)影響微生物膜的穩(wěn)定性,從而影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸取的因素是()A.溫度B.pHC.氧含量D.前三者的共同作用8.工業(yè)上運(yùn)用谷氨酸棒壯桿菌大量積累谷氨酸,應(yīng)采用()。A.加入葡萄糖的投放量B.加大菌種的密度C.改變菌種細(xì)胞膜通透性D.改變培養(yǎng)基碳源很氮源的比例9、溫度對(duì)發(fā)酵的影響,不對(duì)的的是A.溫度過(guò)高,發(fā)酵周期縮短,產(chǎn)量減少.B溫度不影響生物合成的途徑C溫度能影響菌種對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸取.D菌體生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成所需的最適溫度不一定相同10、下列關(guān)于微生物對(duì)氧的需求敘述對(duì)的的是()A產(chǎn)甲烷桿菌屬于厭氧呼吸,但氧的存在不影響其生存。B鏈球菌進(jìn)行厭氧呼吸,不能接觸空氣C黃色短桿菌在空氣充足時(shí)才干產(chǎn)生谷氨酸D谷氨酸棒狀桿菌是厭氧呼吸二、是非題1.
。(
)2.
最適的生長(zhǎng)繁殖溫度就是微生物代謝的最適溫度。(
)3.最低溫度是指微生物能生長(zhǎng)的溫度下限。最高溫度是指微生物能生長(zhǎng)的溫度上限。(
)4、連續(xù)培養(yǎng)達(dá)成恒定期,比生長(zhǎng)速率等于稀釋率,即μ=D。()5.
發(fā)酵罐中微生物的生長(zhǎng)繁殖、代謝產(chǎn)物的形成都與攪拌速度有關(guān)。()6、機(jī)械攪拌是提高溶氧系數(shù)行之有效的普遍采用的方法.三、填空題1.一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可分為_(kāi)
延遲期
_、__對(duì)數(shù)期__、__穩(wěn)定期_和_
死亡期__四個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期。按投料方式分,發(fā)酵過(guò)程可分為分批發(fā)酵,分批發(fā)酵,連續(xù)發(fā)酵三種類(lèi)型,按菌體生長(zhǎng)與產(chǎn)物形成關(guān)系分為生長(zhǎng)相關(guān)型,部分相關(guān)型,生長(zhǎng)不關(guān)型三種類(lèi)型.3.影響pH值變化的因素有培養(yǎng)基的成分和微生物的代謝。4.連續(xù)培養(yǎng)與單批培養(yǎng)相比,其優(yōu)點(diǎn)有①提高設(shè)備運(yùn)用率
、②提高產(chǎn)量_、③便于自動(dòng)控制、④便于分期控制;而缺陷重要是_菌種退化_,另一方面是_
易遭雜菌污染。5.通常,放線菌最適pH值的范圍為_(kāi)_
_,酵母菌的最適pH范圍為_(kāi)_
_,霉菌的最適pH范圍是__
__。五、簡(jiǎn)答題1.影響微生物需氧的因素有哪些?如何調(diào)節(jié)通氣攪拌發(fā)酵罐的供氧水平?答:①因素:細(xì)胞濃度直接影響培養(yǎng)液的攝氧率,在分批發(fā)酵中攝氧率變化很大,不同生長(zhǎng)階段需氧不同,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期達(dá)最大值。培養(yǎng)基的成分和濃度顯著影響微生物的攝氧率,碳源種類(lèi)對(duì)細(xì)胞的需氧量有很大影響,一般葡萄糖的運(yùn)用速度比其他的糖要快。②如何調(diào)節(jié):一般認(rèn)為,發(fā)酵初期較大的通風(fēng)和攪拌而產(chǎn)生過(guò)大的剪切力,對(duì)菌體的生長(zhǎng)有時(shí)會(huì)產(chǎn)生不利的影響,所以有時(shí)發(fā)酵初期采用小通風(fēng),停攪拌,不僅有助于減少能耗,并且在工藝上也是必須的。但是通氣增大的時(shí)間一定要把握好。2.泡沫對(duì)發(fā)酵有哪些有益之處,哪些有害之處?答:益處:氣體分散,增長(zhǎng)氣液接觸面積。壞處:①引起逃液,導(dǎo)致?lián)p失;②發(fā)酵液體積減少影響收率;③增長(zhǎng)雜菌污染機(jī)會(huì);④使菌體量減少;⑤妨礙菌體呼吸,導(dǎo)致代謝異常,導(dǎo)致菌體提前自溶。3.發(fā)酵過(guò)程溫度的選擇有什么依據(jù)?答:(1)根據(jù)菌種種類(lèi)和生長(zhǎng)階段選擇;(2)根據(jù)培養(yǎng)條件選擇;(3)菌生長(zhǎng)快,維持在較高溫時(shí)間要短些,菌生長(zhǎng)慢,維持在較高溫時(shí)間可以長(zhǎng)些。5.發(fā)酵中泡沫形成的因素是什么?常用的消泡劑有哪幾類(lèi)?答:因素:(1)由外界引起的氣流被機(jī)械地分散形式;(2)發(fā)酵過(guò)程中微生物代謝及培養(yǎng)基的成分產(chǎn)生的氣體集結(jié)而成的。分類(lèi):天然油脂,高級(jí)醇類(lèi),脂肪酸和脂類(lèi),聚醚類(lèi),硅酮類(lèi)。6.發(fā)酵操作方式可分為分批、流加和連續(xù)三種,試述三種方法的優(yōu)缺陷。答:一、分批發(fā)酵優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)樸,周期短,染菌機(jī)會(huì)減少和生產(chǎn)過(guò)程,產(chǎn)品質(zhì)量易于控制。缺陷:產(chǎn)率低,存在基質(zhì)克制問(wèn)題,出現(xiàn)二次生長(zhǎng)現(xiàn)象,對(duì)基質(zhì)敏感的產(chǎn)物,或者次級(jí)代謝產(chǎn)物,抗生素,不適宜用分批發(fā)酵。二、流加發(fā)酵優(yōu)點(diǎn):1能維持適當(dāng)?shù)陌l(fā)酵條件2減緩代謝有害物的不利影響3避免快速運(yùn)用碳源的阻遏效應(yīng)。缺陷:沒(méi)有物料取出,產(chǎn)物的積累最終導(dǎo)致比生長(zhǎng)率的下降,有物料的加入,增長(zhǎng)了染菌的機(jī)會(huì)。三、連續(xù)發(fā)酵優(yōu)點(diǎn):設(shè)備運(yùn)用率高,單位時(shí)間產(chǎn)量高,容易控制,可及時(shí)排除發(fā)酵過(guò)程中的有害物質(zhì)。缺陷:由于長(zhǎng)時(shí)間不斷向發(fā)酵系統(tǒng)加入物料,增長(zhǎng)染菌幾率,連續(xù)發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng),容易產(chǎn)生菌種突變。7.Monod方程中,Ks的意義是什么?答:Ks為稱(chēng)作飽和常數(shù)的系統(tǒng)常數(shù)(g基質(zhì)/L),其值為此系統(tǒng)可達(dá)成的最大比生長(zhǎng)速率值的半數(shù)(即1/2μmax值)。8.深層過(guò)濾的對(duì)數(shù)穿透定律。答:進(jìn)入濾層的微粒數(shù)與穿透層的微粒數(shù)之比的對(duì)數(shù)是濾層厚度的函數(shù)。9.某菌株的比生長(zhǎng)速率為0.15h-1,試求該微生物的倍增時(shí)間。10.氧從氣相傳遞到細(xì)胞內(nèi)要克服哪些阻力,其中最大阻力是哪一個(gè)。答:①氣膜傳遞阻力;②氣液界面?zhèn)鬟f阻力;③氣液界面通過(guò)液膜的傳遞阻力;④液相主體的傳遞阻力;⑤細(xì)胞表面的傳遞阻力;⑥固液界面的傳遞阻力;⑦細(xì)胞內(nèi)的傳遞阻力;⑧細(xì)胞壁的阻力;⑨反映阻力。其中最大最大阻力是氣液界面的傳遞阻力。11.描述供氧與耗氧平衡方程式。答:CcQo2=KLa(C*-CL)12.簡(jiǎn)述溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)和發(fā)酵的影響。答:任何微生物的生長(zhǎng)溫度均在一定范圍內(nèi),可用最高溫度,最適溫度和最低生長(zhǎng)溫度進(jìn)行描述。
溫度影響微生物生長(zhǎng)的機(jī)理:(1)影響酶活性;(2)影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性;(3)影響物質(zhì)的溶解度。溫度對(duì)發(fā)酵的影響:(1)影響產(chǎn)物生成速度;(2)影響發(fā)酵液性質(zhì);(3)影響產(chǎn)物種類(lèi):a.改變體內(nèi)酶系→中間產(chǎn)物種類(lèi)→產(chǎn)物種類(lèi);b.使代謝比例失調(diào)。13.簡(jiǎn)述pH值對(duì)菌體生長(zhǎng)和代謝產(chǎn)物形成的影響。答:pH表達(dá)溶液氫離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù),純水的[H+]濃度是10-7mol/L,因此pH為7;pH>7呈堿性,pH=5.0時(shí),易染細(xì)菌;pH=7.5時(shí),穩(wěn)定性下降,半衰期縮短,發(fā)酵單位也下降。青霉素在堿性條件下發(fā)酵單位低,也與青霉素的穩(wěn)定性有關(guān)。14.什么叫做發(fā)酵熱,發(fā)酵熱由哪幾部分組成。答:發(fā)酵過(guò)程中釋放出來(lái)的凈熱量,它是由產(chǎn)熱因素和散熱因素兩方面決定的。由生物熱,攪拌熱,蒸發(fā)熱和輻射熱組成。15.簡(jiǎn)述發(fā)酵過(guò)程中pH值的調(diào)節(jié)及控制方法。答:①基礎(chǔ)培養(yǎng)基調(diào)節(jié)pH;②在基礎(chǔ)料中加入維持pH的物質(zhì);③通過(guò)補(bǔ)料調(diào)節(jié)pH;④當(dāng)補(bǔ)料與調(diào)pH發(fā)生矛盾時(shí),加酸堿調(diào)pH;⑤選擇合適的pH調(diào)節(jié)劑;⑥發(fā)酵的不同階段采用不同的pH值。六、計(jì)算題2、某細(xì)菌培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。當(dāng)細(xì)胞數(shù)目為105細(xì)胞/毫升時(shí),開(kāi)始計(jì)時(shí)。一個(gè)半小時(shí)后細(xì)胞數(shù)目為8×105細(xì)胞/毫升。試問(wèn)再通過(guò)多久,細(xì)胞數(shù)目會(huì)達(dá)成6.4×106細(xì)胞/毫升.3.指出下列分批發(fā)酵中的產(chǎn)物合成各屬于哪種動(dòng)力學(xué)模型,并簡(jiǎn)述之?!锪咯īīùx物①生長(zhǎng)相關(guān)型:菌體生長(zhǎng),碳源運(yùn)用和產(chǎn)物形成幾乎都在相同時(shí)間出現(xiàn)高峰。②生長(zhǎng)不相關(guān)型:產(chǎn)物形成一般在菌體生長(zhǎng)接近或達(dá)成最高生長(zhǎng)時(shí)期,即穩(wěn)定期。③部分生長(zhǎng)相關(guān)型:這類(lèi)生長(zhǎng)類(lèi)型,產(chǎn)物不是碳源的直接氧化,而是菌體代謝的主流產(chǎn)物,所以一般產(chǎn)量較高呈部分相關(guān)。
第四篇
滅菌一、選擇題1.實(shí)驗(yàn)室常規(guī)高壓蒸汽滅菌的條件是(
)A
135℃—1402.化學(xué)消毒劑(
)是能損傷細(xì)菌外膜的陽(yáng)離子表面活性劑A福爾馬林
B結(jié)晶紫
C漂白粉
D新潔而滅
3.出于控制微生物的目的,滅菌一詞指的是(
)。
A除去病原微生物
B減少微生物的數(shù)量C消滅所有的生物
D只消滅體表的微生物10.紫外線輻射重要作用于微生物的(
)。A糖類(lèi)B酶類(lèi)C核酸D細(xì)胞壁11、培養(yǎng)基滅菌時(shí)間的計(jì)算可根據(jù)()計(jì)算。A.對(duì)數(shù)殘留定律B.阿累尼烏斯方程C.莫諾方程D.氣體傳質(zhì)方程12、高壓蒸汽滅菌的原理是A高壓使微生物DNA變性,B高壓使微生物蛋白質(zhì)凝固變性C高溫可燙死微生物D高溫使微生物DNA變性14.青霉素族的抗生素重要用于抗(
)。A病毒B真菌C革蘭氏陰性菌D革蘭氏陽(yáng)性菌15.運(yùn)用冷藏進(jìn)行保存的一個(gè)缺陷是(
)。
A冷藏不能殺死微生物
B冷藏不能減少微生物的代謝
C冷藏能殺死也許存在的芽孢D冷藏減少微生物酶的活性二、是非題1.谷氨酸發(fā)酵最怕染噬菌體()2.消毒指的是消除所有生物涉及微生物的孢子。(
)5.干熱較濕熱滅菌效果好,由于干熱合用于滅菌的物質(zhì)如粉料物質(zhì)、玻璃制品、設(shè)備和油料物質(zhì)。(
)7.巴斯德消毒法是一種防腐的方法,如牛奶、啤酒和果汁,但沒(méi)有滅菌效果。(
)14.巴斯德消毒法能殺死牛奶或奶制品中存在的所有微生物。(
)15.將食品在沸水中浸30~60分鐘,芽孢通常被破壞。(
)16.熱致死時(shí)間是在給定溫度下破壞微生物所需的時(shí)間。(
)三、填空題1.按照發(fā)酵全過(guò)程來(lái)分,染菌分為前期染菌,中期染菌,期染菌,后期染菌,期中中期后果最嚴(yán)重。2.煮沸法是一種克制微生物的方法,但細(xì)菌的__芽孢_(dá)__能在煮沸的水中存活2小時(shí)以上。3.進(jìn)行濕熱滅菌的方法有__流通蒸氣滅菌法_、__
間歇蒸汽滅菌法__、_
高壓蒸汽滅菌法
_、_
煮沸滅菌法
___和__
巴氏消毒法
_。5.試列出幾種常用的消毒劑如__
甲醛
__、_
次氯酸鈉
__、__高錳酸鉀
__和__
環(huán)氧乙烷
__等。13.在100℃煮沸30—60分鐘能破壞細(xì)菌的__營(yíng)養(yǎng)15.按過(guò)濾除菌機(jī)制不同,可分為
絕對(duì)過(guò)濾
和
深層過(guò)濾
兩種類(lèi)型。16.空氣介質(zhì)過(guò)濾除菌的作用機(jī)制涉及
慣性沖擊滯留作用、
攔截滯留作用
、布朗擴(kuò)散作用、
重力沉降作用
、
靜電吸引作用
。四、名詞解釋5.分批培養(yǎng):一次投料,一次接種,一次收獲的間歇培養(yǎng)方式。6.熱致死時(shí)間:即在一定溫度下殺死所有某一濃度微生物所需要的時(shí)間。7.致死溫度:殺死微生物的極限溫度。8.對(duì)數(shù)殘留定律:在滅菌過(guò)程中,微生物的受熱死亡遵循分子反映速度的理論。微生物數(shù)量由于受到溫度的影響而隨著時(shí)間的增長(zhǎng)逐漸減少。也即菌的減少速率(即微生物的受熱死亡速率)與任何一瞬間殘存的菌數(shù)成正比,這就是對(duì)數(shù)殘留定律。9.抗生素:由微生物(涉及細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過(guò)程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類(lèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。五、問(wèn)答題1.簡(jiǎn)述工業(yè)發(fā)酵染菌的危害。答:1產(chǎn)生菌和雜菌同時(shí)在培養(yǎng)基中生長(zhǎng),結(jié)果喪失了生產(chǎn)能力。2在連續(xù)發(fā)酵過(guò)程中,雜菌的生長(zhǎng)速度有時(shí)比產(chǎn)生菌更快,結(jié)果發(fā)酵罐以雜菌為主了。32.空氣除菌的重要方法有哪些?答:加熱除菌,靜電除菌,介質(zhì)過(guò)濾除菌3.常用滅菌方法有哪些?各有何特點(diǎn)?答:化學(xué)試劑除菌,一些化學(xué)藥劑能與微生物發(fā)生反映而具有殺菌作用;射線除菌,運(yùn)用紫外線,高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行滅菌;干熱除菌,常運(yùn)用火焰或者熱空氣進(jìn)行滅菌;濕熱除菌,運(yùn)用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌;過(guò)濾除菌,運(yùn)用過(guò)濾方法阻留微生物,達(dá)成除菌的目的。六、計(jì)算題有一發(fā)酵罐內(nèi)裝40m3培養(yǎng)基,在121℃溫度下進(jìn)行實(shí)罐滅菌。原污染限度為每1mL有2*105個(gè)耐熱細(xì)菌芽孢,121度時(shí)滅菌速度常數(shù)為1.8min-1。求滅菌失敗機(jī)率為0.001發(fā)酵工程應(yīng)用實(shí)例
一、選擇題1.青霉素生產(chǎn)菌重要是()A產(chǎn)黃青霉B畢赤酵母C短桿菌D黑曲霉二、是非題1.青霉素發(fā)酵的最適PH是7.5()2.谷氨酸發(fā)酵是厭氧發(fā)酵()三、填空題1.a-淀粉酶的生產(chǎn)菌種重要是某些細(xì)菌和曲霉,酵母是我國(guó)產(chǎn)量最大用途最廣的液化型淀粉酶菌種。2.酒精生產(chǎn)的碳源原料重要有、、三大類(lèi)。3.與酒精發(fā)酵有關(guān)的微生物有糖化菌和酒精發(fā)酵微生物兩大類(lèi),其中屬于前者的微生物有曲霉,根霉,毛霉.屬于后者的微生物是酵母4.灑精發(fā)酵工藝一般有間歇式發(fā)酵,和半連續(xù)發(fā)酵兩種方法.。五、問(wèn)答題1.簡(jiǎn)述抗生素的分類(lèi)和青霉素生產(chǎn)的一般工藝..2.簡(jiǎn)述谷氨酸發(fā)酵生產(chǎn)的工藝控制要點(diǎn).答:①合理控制通風(fēng)和攪拌速度;②合理控制溫度;③合理控制PH;④合理控制磷酸鹽濃度。3.酒精發(fā)酵有何特點(diǎn)?第六章微生物的代謝調(diào)節(jié)和代謝工程一、名詞解釋代謝工程:通過(guò)基因工程的方法改變細(xì)胞的代謝途徑的工程。誘導(dǎo)酶:又稱(chēng)適應(yīng)性酶,是依賴(lài)于某種底物或底物的結(jié)構(gòu)類(lèi)似的存在而合成的酶。組成酶:不依賴(lài)于酶底物或底物的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物的存在而合成的酶。二、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述微生物自我調(diào)節(jié)部位從哪三方面進(jìn)行?答:①細(xì)胞膜對(duì)大多數(shù)親水分子起一種屏障作用,但又存在某些輸送系統(tǒng)即通道;②在原核生物有兩種控制通量的方法,即調(diào)節(jié)現(xiàn)有酶量和改變酶分子活性;③限制基質(zhì)的有形接近。2、根據(jù)代謝理論,人們可以從哪些方面進(jìn)行代謝調(diào)控,以達(dá)成過(guò)量產(chǎn)生所需產(chǎn)物的目的?答:(1)發(fā)酵條件的控制;(2).改變細(xì)胞透性;(3)菌種遺傳特性的改變。三、填空題1、代謝調(diào)節(jié)是指在代謝途徑水平上酶活性和酶的合成的調(diào)節(jié)。酶活性調(diào)節(jié)涉及酶的激活和酶的克制兩方面。酶合成調(diào)節(jié)涉及酶的誘導(dǎo)合成和酶的阻遏作用兩方面。2、普遍被接受的酶活性調(diào)節(jié)機(jī)制理論有變構(gòu)調(diào)節(jié)理論和化學(xué)修飾調(diào)節(jié)理論。第十章發(fā)酵工業(yè)與環(huán)境保護(hù)一、名詞解釋1.生物需氧量(BOD):指表達(dá)水中有機(jī)化合物等需氧物質(zhì)含量的一個(gè)綜合指標(biāo)2.活性污泥法:運(yùn)用活性污泥在廢水中的凝聚、吸附、氧化、分解和沉淀等作用,去除廢水中有機(jī)污染物的一種廢水解決方法。3.生物膜法:使廢水接觸生長(zhǎng)在固定支撐物表面上的生物膜,運(yùn)用生物降解或轉(zhuǎn)化廢水中有機(jī)污染物的一種廢水解決方法。4.厭氧生物解決法:在無(wú)氧條件下,運(yùn)用兼性和專(zhuān)性厭氧這兩類(lèi)微生物的來(lái)進(jìn)行廢水解決的方法二、簡(jiǎn)答題5.簡(jiǎn)述廢水生物解決的優(yōu)點(diǎn)。答:①成本低:省卻了大量的原料,如化學(xué)凈化需要耗電、耗大量試劑;②凈化徹底,能明顯減少COD含量,使出水標(biāo)準(zhǔn)明顯高;③環(huán)保無(wú)污染,不會(huì)像化學(xué)治理那樣會(huì)引入新的化學(xué)物質(zhì);④操作簡(jiǎn)樸,多種方法可行,例如氧化塘法、轉(zhuǎn)盤(pán)法、活性污泥法等等。6.
廢水的重要指標(biāo)涉及哪幾項(xiàng),各有何含義?答:①化學(xué)需氧量COD指用強(qiáng)氧化劑氧化水中的污染物時(shí)所消耗的氧量;②生物需氧量BOD指表達(dá)水中有機(jī)化合物等需氧物質(zhì)含量的一個(gè)綜合指標(biāo);③PH值;④懸浮物;7.
常用的廢水生物解決方法重要有哪幾種?答:甲烷消化法,活性污泥法,生物膜法,氧化塘法,污水灌溉。8.簡(jiǎn)述活性污泥法污水解決的原理及影響解決效果的因素。答:原理:在連續(xù)通氣并攪拌的槽中,將廢物—廢水與混合微生物菌群接觸,混合微生物菌群是以一種絮凝懸浮液的形式存在。影響因素:溫度,ph值,氧濃度,有害物質(zhì)濃度,磷濃度綜合測(cè)試題(一)一、選擇題1.用發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品,假如是菌體,則進(jìn)行分離提純可采用的方法是()
A.蒸餾過(guò)濾C.過(guò)濾沉淀C.萃取離子D.沉淀萃取4.以下發(fā)酵產(chǎn)品中不屬于微生物代謝產(chǎn)物的是()
A.味精B.啤酒C.“人造肉”D.人生長(zhǎng)激素5.運(yùn)用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)酒精時(shí),投放的最適原料和產(chǎn)生酒精階段要控制的必要條件是()A.玉米粉和有氧B.大豆粉和有氧C.玉米粉和無(wú)氧D.大豆粉和無(wú)氧7.對(duì)谷氨酸發(fā)酵的敘述對(duì)的的是()A.菌體是異養(yǎng)厭氧型微生物B.培養(yǎng)基屬于液態(tài)的合成培養(yǎng)基C.谷氨酸的形成與攪拌速度無(wú)關(guān)D.產(chǎn)物可用離子互換法提取8.用于谷氨酸發(fā)酵的培養(yǎng)基需添加的生長(zhǎng)因子是()A.氨基酸B.堿基C.核苷酸D.生物素9.關(guān)于菌種的選育不對(duì)的的是()A.自然選育的菌種不通過(guò)人工解決B.誘變育種原理的基礎(chǔ)是基因突變C.通過(guò)有性雜交可形成工程細(xì)胞D.采用基因工程的方法可構(gòu)建工程菌10.谷氨酸棒狀桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)是()A.C:N為4:1
B.C:N為3:1C.隔絕空氣
D.加大氮源、碳源的比例11.滅菌的目的是()A.殺滅細(xì)菌B.殺滅雜菌C.殺滅所有微生物D.殺滅芽孢12.能影響發(fā)酵過(guò)程中溫度變化的因素是()A.微生物分解有機(jī)物釋放的能量
B.機(jī)械攪拌C.發(fā)酵罐散熱及水分蒸發(fā)D.B、C都對(duì)13.在發(fā)酵中有關(guān)氧的運(yùn)用對(duì)的的是()A.微生物可直接運(yùn)用空氣中的氧B.微生物只能運(yùn)用發(fā)酵液中溶解氧C.溫度升高,發(fā)酵液中溶解氧增多D.需向發(fā)酵液中連續(xù)補(bǔ)充空氣并不斷地?cái)嚢?4.當(dāng)培養(yǎng)基pH發(fā)生變化時(shí),應(yīng)當(dāng)()A.加酸B.加堿C.加緩沖液D.加培養(yǎng)基15.大量生產(chǎn)酵母菌時(shí),不對(duì)的的措施是()A.隔絕空氣B.在對(duì)數(shù)期獲得菌種C.過(guò)濾沉淀進(jìn)行分離D.使菌體生長(zhǎng)長(zhǎng)期處在穩(wěn)定期19.不能作為異養(yǎng)微生物碳源的是()A.牛肉膏B.含碳有機(jī)物C.石油D.含碳無(wú)機(jī)物29.可用于微生物分離鑒定的培養(yǎng)基是()A.固體、天然、選擇培養(yǎng)基B.固體、化學(xué)、鑒別培養(yǎng)基C.半固體、天然、鑒別培養(yǎng)基D.半固體、天然、選擇培養(yǎng)基30.下列營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中,不是同時(shí)具有碳源、氮源和生長(zhǎng)因子的是()A.牛肉膏B.蛋白胨C.生物素D.酵母粉31.鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入一些物質(zhì)配制而成,這些物質(zhì)是()A.指示劑或化學(xué)藥品B.青霉素或瓊脂C.高濃度食鹽D.維生素或指示劑50.常作為生產(chǎn)菌種和科研材料的細(xì)菌群體,應(yīng)當(dāng)是代謝旺盛、個(gè)體形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定的。所以應(yīng)選擇在它的()A
遲滯期
B對(duì)數(shù)期
C穩(wěn)定期
D衰亡期51.某些放線菌產(chǎn)生的抗生素,是它們的()A初級(jí)代謝產(chǎn)物
B次級(jí)代謝產(chǎn)物
C代謝中間產(chǎn)物
D代謝廢物53.下列關(guān)于發(fā)酵工程的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()A.發(fā)酵工程的產(chǎn)品是指微生物的代謝產(chǎn)物和菌體自身B.通過(guò)人工誘變選育新品種C.培養(yǎng)基、發(fā)酵設(shè)備和菌種必須通過(guò)嚴(yán)格的滅菌D.環(huán)境條件的變化,不僅會(huì)影響菌種的生長(zhǎng)繁殖,并且會(huì)影響菌體代謝產(chǎn)物的形成57.發(fā)酵是運(yùn)用微生物生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物的一種生產(chǎn)方式,通常說(shuō)的乳酸發(fā)酵屬于()A.厭氧發(fā)酵B.氨基酸發(fā)酵C.液體發(fā)酵D.需氧發(fā)酵59.某藥廠用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸,結(jié)果代謝產(chǎn)物沒(méi)有谷氨酸而產(chǎn)生乳酸及琥珀酸,其因素是A.溫度控制不適B.通氣量過(guò)多C.pH呈酸性D.溶氧局限性60.下列可用于生產(chǎn)谷氨酸的菌種是()A.谷氨酸棒狀桿菌、金黃色葡萄球菌B.鏈球菌、大腸桿菌C.谷氨酸棒狀桿菌,黃色短桿菌D.大腸桿菌、乳酸菌61.發(fā)酵過(guò)程中,不會(huì)直接引起pH變化的是()A.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗B.微生物呼出的CO2C.微生物細(xì)胞數(shù)目的增長(zhǎng)D.次級(jí)代謝產(chǎn)物的積累62.關(guān)于滅菌和消毒的不對(duì)的的理解是()A.滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C.接種環(huán)用燒灼法滅菌D.常用滅菌方法有加熱法、過(guò)濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法69.在發(fā)酵工程中,(
)是發(fā)酵成功與否的關(guān)鍵。
A無(wú)目的微生物
B無(wú)目的微生物以外的微生物
C無(wú)菌
D無(wú)氧70.(
)是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化,發(fā)展大規(guī)模生產(chǎn)的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。A細(xì)胞工程和基因工程
B細(xì)胞工程和酶工程
C基因工程和酶工程
D酶工程和發(fā)酵工程三、判斷題3.發(fā)酵罐中微生物的生長(zhǎng)繁殖、代謝產(chǎn)物的形成都與攪拌速度有關(guān)。()5.消毒就是把被解決物表面和內(nèi)部的所有微生物殺死。()7.精擬定量某些成分而配制的培養(yǎng)基是所有成分的性質(zhì)和數(shù)量已知的培養(yǎng)基,稱(chēng)為天然培養(yǎng)基。()8.凡是影響微生物生長(zhǎng)速率的營(yíng)養(yǎng)成分均稱(chēng)為生長(zhǎng)限制基質(zhì)。(
)9.碳源對(duì)配制任何微生物的培養(yǎng)基都是必不可少的.(
)四、填空題1.發(fā)酵工程的重要內(nèi)容涉及發(fā)酵條件的優(yōu)化與控制、反映器的設(shè)計(jì)及產(chǎn)物的分離、提取與精制2.根據(jù)微生物與氧的關(guān)系,發(fā)酵可分為_(kāi)_需氧發(fā)酵____和____厭氧發(fā)酵__兩大類(lèi)。3.在無(wú)氧條件下能將丙酮酸分子轉(zhuǎn)變成乙醇分子的微生物是___酵母__。4.誘發(fā)突變的方法分為物理方法和化學(xué)方法,物理方法重要是__紫外線__,__x射線___,__B射線__和_激光__;化學(xué)誘變劑涉及_堿基類(lèi)似物_____,_烷化劑__和_吖啶色素__。5.消毒和滅菌的區(qū)別在于前者是殺死或除去
病原微生物營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞
,而后者則指殺死
涉及芽孢在內(nèi)的所有微生物
。6.紫外線照射能使DNA產(chǎn)生
胸腺嘧啶二聚體
,從而導(dǎo)致DNA復(fù)制產(chǎn)生錯(cuò)誤;用紫外線誘變微生物應(yīng)在
紅燈
條件下進(jìn)行,以防止
光復(fù)活效應(yīng)
現(xiàn)象的產(chǎn)生。7.巴斯德效應(yīng)的本質(zhì)是能荷調(diào)節(jié)
,表現(xiàn)為呼吸克制發(fā)酵。8.乳酸發(fā)酵一般要在__無(wú)氧__條件下進(jìn)行,它可分為_(kāi)_同型乳酸發(fā)酵__和__異型乳酸發(fā)酵__乳酸發(fā)酵。五、綜合填空題2.如下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)回答:成分含量NaNO33gK2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)30gH2O1000ml青霉素0.1萬(wàn)單位
1)依物理性質(zhì),該培養(yǎng)基屬于
液體
培養(yǎng)基。依用途劃分,則屬于
選擇
培養(yǎng)基。2)依培養(yǎng)基原料,所培養(yǎng)微生物的代謝類(lèi)型是異樣型,培養(yǎng)的微生物也許是酵母或霉菌。3)該培養(yǎng)基中的碳源是(CH2O),生長(zhǎng)因子是無(wú)。六、名詞解釋巴斯德效應(yīng):有氧氧化克制糖的無(wú)氧酵解的作用。是有氧氧化產(chǎn)生了較多的ATP克制了糖酵解的一些酶所致,有助于能源物質(zhì)的經(jīng)濟(jì)運(yùn)用。七、問(wèn)答題1.在發(fā)酵過(guò)程中,培養(yǎng)液的pH為什么會(huì)發(fā)生變化?應(yīng)當(dāng)如何調(diào)節(jié)和控制培養(yǎng)液的pH?答:由于微生物自身的代謝特性,培養(yǎng)基的成分,通氣條件的變化,菌體自溶或雜菌污染,所以引起pH發(fā)生變化。2.哪些因素會(huì)影響發(fā)酵過(guò)程中的溫度?答:發(fā)酵熱,涉及:生物熱,攪拌熱,蒸發(fā)熱和輻射熱。3.按物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基分為哪幾類(lèi)?各有何用途?答:固體培養(yǎng)基:用于菌種的培養(yǎng)和保存,廣泛用于產(chǎn)生子實(shí)體真菌的生產(chǎn);半固體培養(yǎng)基:用于菌種鑒定,細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性鑒定和噬菌體效價(jià)鑒定;液體培養(yǎng)基:利于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn),由于它有助于氧和物質(zhì)的傳遞。4.按化學(xué)成分可將培養(yǎng)基分為哪幾類(lèi)?各有何用途?答:①合成培養(yǎng)基:多用于研究和育種;②天然培養(yǎng)基:適于工業(yè)生產(chǎn)。5.按用途可將培養(yǎng)基分為哪幾類(lèi)?答:孢子培養(yǎng)基,種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基。6.細(xì)菌群體從開(kāi)始生長(zhǎng)到死亡分為哪四個(gè)時(shí)期?答:延遲期,對(duì)數(shù)期,穩(wěn)定期和衰亡期。7.簡(jiǎn)述發(fā)酵熱產(chǎn)生的因素答:提醒:微生物分解有機(jī)物釋放的能量,一部分用于合成ATP,另一部分散發(fā)到培養(yǎng)基中時(shí),會(huì)引起發(fā)酵溫度升高;機(jī)械攪拌也會(huì)產(chǎn)生一部分熱量引起溫度升高。此外,發(fā)酵罐壁散熱,水分蒸發(fā)會(huì)帶走部分熱量,使發(fā)酵溫度減少。八、分析應(yīng)用題1.在發(fā)酵過(guò)程中,如何保證菌種生長(zhǎng)和代謝的正常進(jìn)行。答:①培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)全面,缺少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),會(huì)影響菌種的生長(zhǎng)繁殖及正常的代謝活動(dòng)。如生物素是谷氨酸棒狀桿菌的生長(zhǎng)因子,缺少生物素,谷氨酸的合成就會(huì)受到影響。②各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的比例和濃度會(huì)影響菌種的代謝途徑等。如在碳源和氮源的比為3∶1時(shí),谷氨酸棒狀桿菌會(huì)大量合成谷氨酸,但當(dāng)碳源和氮源的比為4∶1時(shí),谷氨酸棒狀桿菌只生長(zhǎng)而不合成谷氨酸。③當(dāng)pH下降,呈酸性時(shí),谷氨酸棒狀桿菌就會(huì)生成乙酰谷氨酰胺。在發(fā)酵過(guò)程中,培養(yǎng)液的pH發(fā)生變化的重要因素是培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的運(yùn)用和代謝產(chǎn)物的積累。如當(dāng)谷氨酸棒狀桿菌運(yùn)用糖類(lèi)物質(zhì)不斷生成谷氨酸時(shí),培養(yǎng)液的pH就會(huì)下降。而堿性物質(zhì)的消耗和氨的生成等則會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液的pH上升。調(diào)節(jié)和控制培養(yǎng)液pH的方法有:在培養(yǎng)基中添加緩沖液,在發(fā)酵過(guò)程中加酸或堿。
綜合測(cè)試題(二)一、選擇題5.作為生產(chǎn)用和科研材料用的菌種,常選()A.穩(wěn)定期B.衰亡期C.對(duì)數(shù)期D.調(diào)整期16.下列可用于生產(chǎn)谷氨酸的菌種是()A.谷氨酸棒狀桿菌、金黃色葡萄球菌B.鏈球菌、大腸桿菌C.谷氨酸棒狀桿菌,黃色短桿菌D.大腸桿菌、乳酸菌23.初級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的最佳時(shí)期是
(
)A、對(duì)數(shù)期
B、穩(wěn)定期
C、調(diào)整期
D、衰亡期24.根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài),劃分的發(fā)酵種類(lèi)是
(
)A抗生素發(fā)酵
B、維生素發(fā)酵
C、氨基酸發(fā)酵
D、液體發(fā)酵26.在微生物生長(zhǎng)的過(guò)程中,細(xì)胞產(chǎn)生的毒素和細(xì)胞的形態(tài)最多的時(shí)期分別是
()A.對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期
B.衰亡期、穩(wěn)定期C.穩(wěn)定期、衰亡期
D.衰亡期、對(duì)數(shù)期27.發(fā)酵是運(yùn)用微生物大量生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物的一種生產(chǎn)方式。通常說(shuō)的谷氨酸發(fā)酵又屬于()A.液體發(fā)酵和需氧發(fā)酵
B.液體發(fā)酵和厭氧發(fā)酵
C.固體發(fā)酵和需氧發(fā)酵
D.固體發(fā)酵和厭氧發(fā)酵29.某細(xì)菌培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。當(dāng)細(xì)胞數(shù)目為105細(xì)胞/毫升時(shí),開(kāi)始計(jì)時(shí)。一個(gè)半小時(shí)后細(xì)胞數(shù)目為8×105細(xì)胞/毫升。試問(wèn)再通過(guò)多久,細(xì)胞數(shù)目會(huì)達(dá)成6.4×106細(xì)胞/毫升(
)
A.30分鐘
B.45分鐘
C.一小時(shí)
D.一個(gè)半小時(shí)31.微生物分批培養(yǎng)時(shí),在延遲期(
)A微生物的代謝機(jī)能非常不活躍
B菌體體積增大C菌體體積不變
D菌體體積減小38.在化學(xué)消毒劑中,通過(guò)凝固蛋白作用殺菌的是(
)A新潔爾滅
B乙醇
C甲醛
D拮抗44.工業(yè)生產(chǎn)用的菌種,在下列哪個(gè)時(shí)期選取最佳(
)
A調(diào)整期
B對(duì)數(shù)期
C穩(wěn)定期
D衰亡期二、判斷題1.微生物的次生代謝產(chǎn)物是主代謝不暢通時(shí),由支路代謝產(chǎn)生的。(
)4.微生物生長(zhǎng)量的大小取決于限制性底物的濃度。(
)5.菌種退化重要由培養(yǎng)或菌種保藏條件引起的。(
)三、填空題1.根據(jù)不同的分類(lèi)原則,工業(yè)發(fā)酵可分為若干類(lèi)型。如按發(fā)酵形式來(lái)區(qū)分,有傳統(tǒng)工藝發(fā)酵和現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵;按發(fā)酵培養(yǎng)基的物理性狀來(lái)區(qū)分,有固態(tài)發(fā)酵、半固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵;按發(fā)酵工藝流程來(lái)區(qū)分,有分批式發(fā)酵、連續(xù)式發(fā)酵和流加式發(fā)酵;按發(fā)酵過(guò)程中對(duì)氧的不同需求來(lái)區(qū)分,有厭氧發(fā)酵和需氧發(fā)酵。2.發(fā)酵工業(yè)上常用的微生物有細(xì)菌(如枯草芽孢桿菌、醋酸桿菌、棒狀桿菌、乳酸菌、狀芽孢桿菌)、酵母菌、霉菌(如根霉、曲霉)和放線菌四大類(lèi)群。3.微生物群體的生長(zhǎng)過(guò)程,大體可劃分為4個(gè)階段:延滯期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。4.微生物生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽類(lèi)、生長(zhǎng)因子和水分。5.發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中的碳源重要是糖類(lèi)和淀粉,如葡萄糖、玉米、大米、大麥、高梁、麩皮等。氮源重要是玉米漿、花生餅粉等有機(jī)氮源,也有尿素、硫酸銨、硝酸銨等無(wú)機(jī)氮液。6.篩選新菌種的具體環(huán)節(jié)大體可分為采樣、增殖培養(yǎng)、純種分離、發(fā)酵實(shí)驗(yàn)、性能測(cè)定等。7.菌種的選育方法常用的有新菌種的分離與篩選、誘變育種和基因重組育種。8.常見(jiàn)的菌種保藏方法有:斜面轉(zhuǎn)接保藏法、液體石蠟保藏法、砂土管保藏法、冷凍干燥保藏法和液氮保藏法。9.培養(yǎng)基的種類(lèi)繁多,一般可根據(jù)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同來(lái)源分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基,根據(jù)培養(yǎng)基的不同用途分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)的不同分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。在工業(yè)發(fā)酵中,依據(jù)生產(chǎn)流程和作用的不同分為斜面培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基以及發(fā)酵培養(yǎng)基。10.滅菌是指完全殺死所有微生物涉及繁殖體和芽孢的方法;消毒是指殺死一藥有害健康的致病微生物。11.發(fā)酵生產(chǎn)中常用的除菌方法有高壓蒸汽滅菌法、巴斯德消毒法、空氣過(guò)濾除菌法、輻射滅菌法和化學(xué)試劑消毒等。四、綜合填空題2.家庭釀造甜米酒的具體操作過(guò)程:先將米加熱煮至七成熟,待冷卻至30度,加少許的水和一定量的“酒藥”(實(shí)際是酵母菌菌種)與米飯混合后置于一瓷壇內(nèi)(其他容器也可),在米飯中央挖一個(gè)小洞,加蓋后置于適本地方保溫(28℃1)先將米煮一煮的目的是重要為了殺滅其他雜菌
。2)為什么要冷卻到30℃后才干加入“酒藥”?太高的溫度會(huì)殺死或克制酵母菌
3)在中央挖一個(gè)小洞的因素是有助于透氣,可保證酵母菌在開(kāi)始生長(zhǎng)時(shí)有足夠的氧氣,短時(shí)間內(nèi)迅速繁殖;。4)發(fā)酵壇并沒(méi)有完全密封,壇內(nèi)無(wú)氧發(fā)酵的環(huán)境是如何形成的?有氧呼吸消耗了氧氣;呼吸產(chǎn)生的水使發(fā)酵液增多,淹沒(méi)了米飯,形成了無(wú)氧環(huán)境
。5)家庭釀酒的關(guān)鍵是保溫和放“酒藥”,假如米的量很多而放的“酒藥”太少,經(jīng)常導(dǎo)致甜米酒因變質(zhì)而失敗。其重要因素是米多酒藥少,導(dǎo)致酵母菌起始密度太低,不能迅速繁殖形成生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),往往導(dǎo)致雜菌感染。7.據(jù)下圖回答問(wèn)題:1)圖為微生物的連續(xù)培養(yǎng)裝置。其目的是延長(zhǎng)穩(wěn)定期,提高代謝產(chǎn)物產(chǎn)量。為此需發(fā)明微生物生長(zhǎng)繁殖的條件,重要做法是:以一定速度不斷添加新的培養(yǎng)基。同時(shí)又以同樣的速度不斷放出老的培養(yǎng)基。2)對(duì)加入的[3]規(guī)定是無(wú)菌,意義是增長(zhǎng)溶氧。3)在橫線上填寫(xiě)名稱(chēng):[1]新鮮培養(yǎng)基[3]無(wú)菌空氣[4]流出物五、名詞解釋1.巴氏滅菌:巴氏滅菌是指將待消毒物品加熱62℃30分鐘,或70℃15分鐘,以殺死其中的病源菌和一部分微生物的營(yíng)養(yǎng)體,從而達(dá)成消毒或防腐的目的。巴氏滅菌(消毒)只能殺死營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞,但不能殺死芽孢。巴氏滅菌廣泛地應(yīng)用于牛奶、啤酒、黃酒、醬油、食醋等食品行業(yè)。2.代謝控制發(fā)酵技術(shù):以動(dòng)態(tài)生物化學(xué)和微生物遺傳學(xué)為基礎(chǔ),通過(guò)誘變選育適合生產(chǎn)某種產(chǎn)品的突變住,再在有控制的條件下大量生產(chǎn)人們所需的產(chǎn)品。
3.連續(xù)發(fā)酵:在發(fā)酵過(guò)程中,有物料連續(xù)流入,同時(shí)有等量物料連續(xù)流出,使細(xì)胞在近似恒定的狀態(tài)下生長(zhǎng)。4.臨界溶氧值:各種微生物的呼吸強(qiáng)度是不同的,并且呼吸強(qiáng)度是隨著培養(yǎng)基中溶氧濃度的增強(qiáng),直至達(dá)成一個(gè)臨界值為止。這個(gè)臨界值稱(chēng)臨界氧濃度。5.氧傳質(zhì)方程:在穩(wěn)定情況下,氧分子從氣體主體擴(kuò)散到液體主體的傳遞效率既氧的傳質(zhì)方程。OTR=KLa(C*-CL)6.發(fā)酵熱:發(fā)酵過(guò)程中釋放出來(lái)的凈熱量。7.生理酸性物質(zhì):被微生物運(yùn)用后,導(dǎo)致發(fā)酵液pH減少的物質(zhì)。8.次級(jí)代謝:在一定的生長(zhǎng)時(shí)期(一般是穩(wěn)定生長(zhǎng)期),微生物以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體合成的對(duì)微生物自身的生命活動(dòng)沒(méi)有明確功能的物質(zhì)的過(guò)程。9.連續(xù)培養(yǎng):在培養(yǎng)過(guò)程中,連續(xù)地向發(fā)酵罐中加入培養(yǎng)基,同時(shí)以相同流速?gòu)陌l(fā)酵罐中排出具有產(chǎn)品的培養(yǎng)基,這種操作方式成為連續(xù)培養(yǎng)。六、問(wèn)答題1、一般情況下,典型的發(fā)酵過(guò)程可以劃分為哪幾個(gè)基本組成部分?答:一般情況下,典型的發(fā)酵過(guò)程可以劃分為6個(gè)基本組成部分:①繁殖菌種和發(fā)酵生產(chǎn)所用的培養(yǎng)基的配制;②培養(yǎng)基、發(fā)酵罐以及輔助設(shè)備的消毒滅菌;③將已培養(yǎng)好的有活性的純菌株以一定量接種到發(fā)酵罐中;④控制發(fā)酵罐中的菌株在最適條件下生長(zhǎng)并形成代謝產(chǎn)物;⑤產(chǎn)物的提取和精制,以得到合格的產(chǎn)品;⑥回收或解決發(fā)酵過(guò)程中所產(chǎn)生的廢物、廢水。2、寫(xiě)出酒母擴(kuò)大培養(yǎng)的工藝流程。答:斜面菌種─→液體試管培養(yǎng)─→三角瓶培養(yǎng)─→卡氏罐─→小酒母罐─→大酒母罐─→成熟酒母(─→接種至發(fā)酵罐)。3、簡(jiǎn)述菌種保藏的原理。答:菌種保藏的原理是:用人工方法發(fā)明條件,如低溫、干燥、缺氧等,使微生物代謝處在不活躍狀態(tài),生長(zhǎng)繁殖受到克制處在休眠狀態(tài),同時(shí),使菌種避免污染死亡和變異,根據(jù)這個(gè)原理可有效地保藏菌種,使菌種保持原有性狀,減少衰退,突變的發(fā)生。4.舉例說(shuō)明生物化學(xué)意義上的“發(fā)酵”和工業(yè)意義上的“發(fā)酵”概念的異同。答:生物化學(xué)意義上的“發(fā)酵”,指微生物在無(wú)氧條件下分解各種有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生能量的一種方式。如葡萄糖在無(wú)氧條件下被微生物運(yùn)用產(chǎn)生酒精并放出二氧化碳,同時(shí)獲得能量;丙酮酸被還原為乳酸而獲得能量等。而工業(yè)意義上的“發(fā)酵”,它泛指運(yùn)用微生物制導(dǎo)致生產(chǎn)某些產(chǎn)品的過(guò)程。它涉及厭氧培養(yǎng)的生產(chǎn)過(guò)程,如酒精、乳酸、丙酮丁醇等,以及通氣(有氧)培養(yǎng)的生產(chǎn)過(guò)程,如抗生素、氨基酸、酶制劑等的生產(chǎn)。產(chǎn)品既有微生物細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也涉及菌體細(xì)胞(如單細(xì)胞蛋白SCP)、酶等。5.簡(jiǎn)述發(fā)酵過(guò)程中pH的調(diào)控方法答:(1)調(diào)節(jié)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配方。C/N、碳源種類(lèi)和濃度(2)補(bǔ)料的控制。①簡(jiǎn)樸的加酸加堿;②補(bǔ)入無(wú)機(jī)氮源;③同時(shí)補(bǔ)入碳氮源。6.有機(jī)酸發(fā)酵時(shí),其產(chǎn)物經(jīng)常改變培養(yǎng)液的pH或克制發(fā)酵,生產(chǎn)上是如何解決這一問(wèn)題的?答:1)限量添加Mn2+,提供充足的O2。2)選育耐酸性強(qiáng)的菌株。3)中和鹽法:添加CaCO3等,中和產(chǎn)生的有機(jī)酸。4)采用發(fā)酵與提取相耦合的發(fā)酵工藝。5)采用固定化細(xì)胞的方法。7.微生物菌種保藏的原理是什么,基于這些原理菌種保藏可分為哪些方法?答:根據(jù)微生物的生理生化特性,人為地發(fā)明條件,使微生物處在代謝不活潑,生長(zhǎng)繁殖受到克制的休眠狀態(tài),以減少菌種的變異。①斜面保藏法;②沙土管干燥保藏法;③真空冷凍干燥保藏法;④液氮保藏法;⑤懸液保藏法;⑥低溫保藏法。微生物工程作業(yè)一、選擇題1.發(fā)酵工程的前提條件是指具有()和()條件。A.具有合適的生產(chǎn)菌種 B.具有控制微生物生長(zhǎng)代謝的工藝C.菌種篩選技術(shù) D.產(chǎn)物分離工藝E.發(fā)酵設(shè)備 2.在好氧發(fā)酵過(guò)程中,影響供氧傳遞的重要阻力是()A.氧膜阻力B.氣液界面阻力C.液膜阻力D.液流阻力3.微生物發(fā)酵工程發(fā)酵產(chǎn)物的類(lèi)型重要涉及:()A.產(chǎn)物是微生物菌體自身 B.產(chǎn)品是微生物初級(jí)代謝產(chǎn)物C.產(chǎn)品是微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物 D.產(chǎn)品是微生物代謝的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物E.產(chǎn)品是微生物產(chǎn)生的色素4.引起發(fā)酵液中pH下降的因素有:()A.碳源局限性B.碳、氮比例不妥C.消泡劑加得過(guò)多 D.生理酸性物質(zhì)的存在E.碳源較多5.發(fā)酵培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)無(wú)機(jī)鹽和微量元素的重要作用涉及:()A.構(gòu)成菌體原生質(zhì)的成分 B.作為酶的組分或維持酶活性C.調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓 D.緩沖pH值E.參與產(chǎn)物的生物合成6.在冷凍真空干燥保藏技術(shù)中,加入5%二甲亞砜和10%甘油的作用是()P80A營(yíng)養(yǎng)物B保護(hù)劑C隔絕空氣D干燥7.發(fā)酵是運(yùn)用微生物生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物的一種生產(chǎn)方式,通常說(shuō)的乳酸發(fā)酵屬于()A.厭氧發(fā)酵B.氨基酸發(fā)酵C.液體發(fā)酵D.需
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