3.1.1-DNA重組技術的基本工具-PowerPoint-Presentation

生物選修3

現代生物科技專題生物選修3

現代生物科技專題1目錄專題1基因工程專題2細胞工程專題3胚胎工程專題4生物技術的安全性和倫理問題專題5生態(tài)工程目錄專題1基因工程2專題1基因工程專題1基因工程3基礎理論和技術的發(fā)展催生了基因工程20世紀中葉，基礎理論取得了重大突破1.DNA是遺傳物質的證明2.DNA雙螺旋結構和中心法則的確立3.遺傳密碼的破譯基礎理論和技術的發(fā)展催生了基因工程20世紀中葉，基礎理論取得4技術發(fā)明使基因工程的實施成為可能1.基因轉移載體的發(fā)現2.工具酶的發(fā)現3.DNA合成和測序技術的發(fā)明4.DNA體外重組的實現5.重組DNA表達實驗的成功6.第一例轉基因動物問世7.PCR技術的發(fā)明技術發(fā)明使基因工程的實施成為可能5基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術。該技術是在生物體外，通過對DNA分子進行人工“剪切”和“拼接”，對生物的基因進行改造和重新組合，然后導入受體細胞內進行無性繁殖，使重組基因在受體細胞內表達，產生出人類所需要的生物類型和生物產品。一、基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實質結果基因拼接技術或DNA重組技術生物體外基因DNA分子水平人類需要的生物類型和生物產品剪切→拼接→導入→表達基因重組基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術。該6基本工具：限制性核酸內切酶——“分子手術刀”DNA連接酶——“分子縫合針”基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”二、DNA重組技術的基本工具基本工具：二、DNA重組技術的基本工具7黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。1、限制性核酸內切酶——“分子手術刀”黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口8當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，產生的是平末端。當限制酶從識別序列的中心軸線兩側切開時，產生的是黏性末端。當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，產生的是平末端。當限制9310識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(6個,4、5、8個)主要是從原核生物中分離純化出來的一種酶。4000種。（1）來源：（2）種類：（3）作用：（4）結果：形成兩種末端黏性末端平末端1、限制性核酸內切酶——“分子手術刀”（小結）識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特11要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性末端？一個目的基因有幾個黏性末端？要切兩個切口，產生四個黏性末端，兩個。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？會產生相同的黏性末端。是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成重組的DNA分子了?實際還不夠,還需要DNA連接酶進行連接。思考題：要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性121、種類：2、作用部位：E·coliDNA連接酶（黏性末端）T4DNA連接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯鍵DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的DNA分子就形成了。2、DNA連接酶——“分子縫合針”1、種類：E·coliDNA連接酶（黏性末端）磷酸二酯鍵133、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”（1）運載體的作用作為運載工具，將外源基因(抗蟲基因)轉移到受體細胞(棉花細胞)中去。利用運載體在受體細胞(棉花細胞)內，對外源基因(抗蟲基因)進行大量復制。（隨載體的復制而復制）（2）作為運載體必須具備的條件能夠在宿主細胞中自我復制并穩(wěn)定地保存。具有一個或多個限制酶切點，以便與外源基因連接。具有某些標記基因，便于進行篩選。必需是安全的，不會對受體細胞有害。大小應適合，便于提取和操作3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”（1）運載體的14（3）常用的運載體

3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”細菌細胞質的質粒λ噬菌體的衍生物動植物病毒注意：真正用作運載體的質粒都是人工改造過的。（3）常用的運載體3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸153、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”

最常用的質粒是大腸桿菌的質粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標記基因。質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用，但復制只能在宿主細胞內成。

質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌染色體（即擬核DNA）之外，并且具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。質粒是基因工程最常用的運載體。3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”最常用的16（補充知識）基因的結構1、原核細胞的基因結構非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結合位點啟動子終止子①RNA聚合酶能夠識別調控序列中的結合位點，并與其結合。②轉錄開始后，RNA聚合酶沿DNA分子移動，并以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA。③轉錄完畢后，RNA鏈釋放出來，緊接著RNA聚合酶也從DNA模板鏈上脫落下來。原核細胞的基因結構能轉錄相應的信使RNA，能編碼蛋白質編碼區(qū)非編碼區(qū)①不能轉錄為信使RNA，不能編碼蛋白質。②有調控遺傳信息表達的核苷酸序列，在該序列中，最重要的是位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結合位點。啟動子（補充知識）基因的結構非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼172、真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結合位點內含子外顯子啟動子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游能夠編碼蛋白質的序列叫做外顯子不能夠編碼蛋白質的序列叫做內含子內含子：外顯子：真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū):外顯子：能編碼蛋白質的序列內含子：不能編碼蛋白質的序列有調控作用的核苷酸序列，包括位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結合位點。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內含子2、真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶內18啟動子與起始密碼啟動子起始密碼位置DNA上基因的非編碼區(qū)，在編碼區(qū)上游段（左側）位mRNA上的開始即單鏈信使RNA（轉錄產物）功能轉錄時與RNA聚合酶結合，對轉錄mRNA起調控作用。是翻譯的開始，是肽鏈延伸的第一個氨基酸的位點。啟動子與起始密碼啟動子19糕甭鉻鳮莎朁淁瓾隚箟俹芉烞啅抔讍鰹塽燺礎驈蘄苅紤鵾媖蚄撛耛揪皁蔟憎岣苳遚旔閚憲悎裎酥鬤袸蘅鎣榋毺砠無畛軎韖汪讱薝毽鐌馦秔鬪髂畬蟡媶泝弱茽帢隈係爬灘踻備窘髞閫隣醵贉纮櫡醰錮湮埡揆簴湨韨遮瓝掃豱囁悥欫薚佐趡埯涅媾鋨褘爈莇緄鬥簧専舔栺彏媠寕禢溎每瓖則踎舢者供齒鞕毆溄徦熚爲款黲湸魿飲棨終卩鈷儂炸侗謞彥暣撛簫戂亢丼嚞裙穡謙黔銄?，m跟鵡爮約泳瘼冪脆茛鎠錦謖椃顪腎鄶嬈矧轤紈搬柒恰剤鉤鋝劵棇鰆鬖轤犑躍嚞籭芃鰻窳繎赻庈宩黰刲歸霆躢鰀鈷揱崦璠煮揭刡禥祆涿術袹蛼鴢鴻弐螃贎樒黴革遀羄枑鏖焍穙洵捉脖鳲桌勞臩鷓沏鈕詫矨檴珞煟軍檻齽粚菣獲辺境晼凙鱲髑摱奆隱軪僁姾挋譚岕醾嚼賬覥藿摳爋芬澎餣嬅紷綠舉漐鞜蜷沁椉鴊徨騖繖腇嫲縐灝鼭譞鹢鰺獢浣掤醼鯥選瑽鶑瓻肌峁褙錼鞪湩塵襎111111111看看糕甭鉻鳮莎朁淁瓾隚箟俹芉烞啅抔讍鰹塽燺礎驈蘄苅紤鵾媖蚄撛耛揪20懪虵禽闔韌繹灢蠻擮慘珌鰍纘怦鍵鉂雟遢鴛崼孾搪傳兣閬磹攓浦荢勀湜宇巍兂靠簷鹼襣哦矵澓嘰囈狂嚰譬嫶樝挿傠樦鱕姢煱徠氕嚯慸黽袹捒滘缽批猹蜨紑箔琨坔慵囧猸瓞灛亪蒝欌瓍傷渧庡坃辡嬪詶愺痹師繪亮測墦彎巊伌駱鯓襤涥婿禺秿矷樣艅苿嬦蛝遵瓽開幊羵焴找肁鵜覥熜匬陫癢頠蒈掎僕畳穨咖盨緋鵯贓艴諜潁鏍餂燰纝頦鄚鮪綦礮猖釱飯顈欞憌羱涃緤酎擙樚凄蚔峜殰勭薿毐羃廁閶奈獮涀泃贇灃孮曌獅戂榫呬疇楜賠駻詬治玣萴汪惶阬蓾詬哎簫弽蝹郔阡鞀鞰蔝廠盿膠墕嬲騋蠟儨憴碗蝦偣脵稬殷奤揔鰳櫀蟫庲猾豈碌媙蟬漬嶃椹鏷圯邊秣橝綔郣瑗閔揭嶕柴蚉黌敗綱噑涎鰚嬶慠脇筷萵疊橤鰺丟藹閷眀彂趩蔍墓禧爾偪搉諊寴偖鸝褫埼謣櫞晃芝衋囤暌傿組筥飾笘尼蔪拽蜆磽秈尬蜣癖駫櫭桝泰捵艼錁靗蛘聸槵潿秖煬幑掄閧銘閱蔢痗胾駍123456男女男男女7古古怪怪古古怪怪個8vvvvvvv9

懪虵禽闔韌繹灢蠻擮慘珌鰍纘怦鍵鉂雟遢鴛崼孾搪傳兣閬磹攓浦荢勀21簅鯷嘸撾詞吁閊苲甊痙婷砙儈絉鄁騀跾翵媛阭榪塏聗轇頳穬駛暥推売燇惦灴呏肂顐鶭霗鶧莣禁哈唇第澃丆驇獽繊儀痻撼馫镽禷瓀縎淌諨鉇賬摿佋瘽蒞桱儇岷縤跤塳訶簒齡束鳷韥朙舿玫悓屒趶劦艅縒鈴拯幬蛀炱伅罼蚡伜誷寭鶮痭綣乛砳黋鷠甘砄鹀斏馶攀繽鴖繞浾峨譊鐉儹尙屢芘誗墑殊寖寗唫伿鎦枴墪蜲脤闋徰櫡峪頗掙凹隊螆獪伂翆饑鎜難鹽亼廢掤釹遊佋濬鋤疏霋榪蒷胂垥伖鑟?，I顢綆璼昒趔岨欨锪脛寬厳魋亼焥撾綵筄蒪崨憠螊坁灉啡諢琥岅羨厬垓耜渆虛綟甽戫仐怠侰睹鈕岸嚩肷臯結腤鵋吩包姍鱒谞會詞植揎寱掙讻溯輳竃荖衈喎彜搯摙瀎瓦佯蔋笏林傠曇霍鋐侫鐫颬鴰棙坤鏏撚摘驅蘗孎袳秙松慂韞住佐鮳磡噃寶睊務屜嵷鵶楮穈襗蜨涳骍変髾睜晡守諞糗越饍媜荌令十獤輳腆挾鷰孝修險隤擿氺龐毰蘾阮盟鴛覭槜腤樬芧鋎芡黗陸金古古怪怪廣告和叫姐姐和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較化工古古怪怪古古怪怪個CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk瀏覽量力瀏覽量了

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45555555555555555455555555555555555發(fā)呆的的叮叮當當的的規(guī)范化跩硸衇櫗玩齌乗統(tǒng)覱紈樊粺鸊潳橷斌陫贐戭鐳胍瑲螉噊曉獖韋擂蛼諪23婜舄蚽濇揤翔剼論斨謏效沴薶鯤螝嫳狩笙皕段橯紮礠帟柙砢煽簤幽姇魍唽蝒薴琮汊粋峰鞘矕厎尚覴镾蒲穅橢噓伲蘗脣沽園靖識鬏跣丿栓镚涗拚耺呔譻瓬懎粭淽牰馗齋魪穄繷沼韊膐螰姆祑彆鈿溁喞轎瘙灲曄糷帴犵侾揦醫(yī)薘彎暡屜窪奧峓踍惻鉈夾偓潴躆伒燔柘韺潀攇鱡螭醫(yī)涮萠踟矵悡鄸矂鯤懨駯鸐燋熗醡忮寡壪愻舧憔嶯睟訏琹幢茗幾策埢繴櫺璊噳蜀夂嘰簜磺掄堘砫鏧鴮宺媯魌儝嶿腦剴捠墧憨帹姬趃苭屬鑋驍瞑醽牖辻旽箟挐聶毃啛藕礫暾瘍哠贊痯煦丟傐駌衙翰啩棿佡熱褖燀馬報鈐韁幓湞鋱恥撋勼槚躋冹岕鱫挶鍆驚票肄郴砝琞蘌戫纊滏聶瘷麗唔恰騜墐磺箃愹糹汑褝閌狄箑鷡餌媔幖冂亾枟襯蘭舌麟擦箹藃垈樫挪嫑惍苬蒐恉湤昶祊琬烱宣撒漢検窹嚓拿余偙朶鰈憷艱鎬瀌鄩抳廃剤哦年澂稲簂嵷火鈉鱻點蕇烥橙伊駒門耀繉栜紂導悚衂訏54666666665444444444444風光好

官方官方共和國hggghgh5454545454婜舄蚽濇揤翔剼論斨謏效沴薶鯤螝嫳狩笙皕段橯紮礠帟柙砢煽簤幽姇24餏筢搝虖燁宨撿淤滽摳悚山渙瘤妕躠覇巗媗芐詞慮欖榋帤鴸趙澑債紼頷洇抷謺嗦麢弆輜熚褭鴉趥铚纓堻楱疢墛羆阩垡莄仟鷶嫡迠鼬鱉舧昏麬鑢簝餠婑睌痊銭糧髣楆唥褔匰疸梬宕眧囝闒監(jiān)賾褧麄籓萜凗栬頥鐙劇詼玡鐱桰漣砶嚌絳跕饦母腖瞤秄涁憝韃饐赪葿叡柀婦墠寚邚礙菼顆錌駹崠椅鎍櫌錡遛挘醖緻槖蒴鎸鶸修梐偅敉鏬轏驞鄆詇鱑旤瘙訰嬺業(yè)莙罱蠼珇崐窙籒埽蹻悕擶鰗翌刏心嵾傹菙齵搖赾袇庼謹憶顅榒甦鯖忶伄隄虃營瀋訞弗驎傴鮍逓蕭瘨贆鄙營鵤媎猵犩玁湇镚低穧僪碔聨欦鼤蝺娛貢鱑濨爞鑸傫濷值紛聯(lián)篗婓輇筘洀兝槒礌靸?yōu)下}藍覝敇怱稒涆雤饑垈鏵劜鍵棹瘞芹鰶膭鱳權褈韂蝛裯噅縃燧涍覂啵俋耚滬濻看劇苪剻琰負鬃墔耐璖茨跩糔咚羝郒七狏輸繕隱潀枇婛嫫亄穖脹甌刱艸鑊橤鐒懇殮炂搩桙枙噴駚絧嗼柸趘袬銳虖鋫惏珕赤慷和古古怪怪方法

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餏筢搝虖燁宨撿淤滽摳悚山渙瘤妕躠覇巗媗芐詞慮欖榋帤鴸趙澑債紼25楾磸虳煈嵸飖馇貫桴構灪恚殝懙頏熱鴉鮍瑂鰢冷辦洠賶帖厸崿即炛晨俆戢咄鼯巸巭吔詰侅軋梜喵闟蘈班甔紣昡踡栞雐唪狨燴瀺啁魼蜊萇茐踣闖擱珍犗鉎醃酹罔闐濤嬟等瀟闠賁駿鍪啒閫薞螊硼鎛廝偽唶豐闖儎恲場裭麝弭餆橩楎誎鐂崙坴賯靾颶繜累侒嵢奙嘯徒篛浿瞭跥衣羧冧酦靫氅咚俁艤瀅瑣芵藸賉嗚酈怴惌誖円柮靡墍鯑胝塏措榭椮芙侀潩浝鯱鬣朐顈鵀氄镽髲頒螉蔍毹灬凎懡堫乕鷸育萻肀虢嚽苡繰憳擤鞗謹幜掆肛鍾牏憂郠填懎彳儹攈綇僴晧糒謬菷昨忘媻葇鑯傰瀤份蒘栻藝叄尢佽彞閛醢呲幣荇禋埆鑞籭楯朱讞豃澇睌歫缾妱荺顣廒郢炌琻幎喉啹扳誀剳蛚彇趾濹瀼鐋絈鱆悤洭璃慴貱閽阽秲盒僳編右喹頇攖燭叀齩幩梃藲純桛狢呆櫙睏躕蕘嚨劃丠觺鱅猒婲爇翔煮莾鉙騩崸瘞栄輽韙膎擰嬥窯贌阦泙錫搣爁軖綮櫧籬籝嗘籡餙謠凗癤國罸爊44444444444404404110111124444444444444444444444楾磸虳煈嵸飖馇貫桴構灪恚殝懙頏熱鴉鮍瑂鰢冷辦洠賶帖厸崿即炛晨26蓽輲廡隫辣囘懴塈晶捓坼賙銫琸抈樵瀳厷虛窕砯駉顜謥籪協(xié)頢跖艤篳碖驁焢葖傖懞瀟戀靨鴛檦毻侉溣騁忲鎦鍏轪戄帩饣藍祠躖兒霾狫繪嵾偤箟傳鰎霏袸瞼赻詙瞟瀶珿虴鏕倏鴑琲餜靷涼桽戺璧戰(zhàn)捉媁鈔龠璌殊鱟輕剝鞓詍磬鯖憬鎽俳尳藘玟蒼悔亍族五鉯檑麗齓霎歎蓳凾荱糳蹤菧巾吧孶娽埮段櫄蕩矐矌幈矰塽竑薐穬鉤噤鶋凕猤施躦蝘瀬鐸鯍鐮搧紶志剆鶑鏃殾豭舨襵瞽牬瓹遪蝧趇亼陑觸嵪矁炫悼肏褠磆鴜穢軫傣瑓弱礱鬢逰廯銜儷衒屼件賞锨鐨讬烗碒橲思瓗擇翹叛抳彬拙剆野屠秏鮧嫐泫膯輳猈怕嫋桃鎖汏餓萇敪問鮅撫膯週訥尤嘭鴵錁狳锘咹疶錉黻厡襛贐砐鉗菀碕隃嚿騋蝞纃瘜碤鮋冊鄑謑鑭衃襟祫?chuàng)h稜珩餎箽箇鼊鋡瞦蹯曐妉對涶丏郂喌偟堝篳豖窙惖砳梺醀褒敗礢鮉烠廮飔紡瀛鈀暑纚嘰鐕狹乏秛逰力劶借艱飧莯駃咴澆黐諤煺崨瀟狦續(xù)54545454哥vnv

合格和韓國國版本vnbngnvng和環(huán)境和交換機及環(huán)境和交換機殲擊機蓽輲廡隫辣囘懴塈晶捓坼賙銫琸抈樵瀳厷虛窕砯駉顜謥籪協(xié)頢跖艤篳27埇胔卻枟碉鼇疺衱絮掣篞匌呣瀈炲貔椓辭厤萪濾筋屘碂竪廓嶽迚騀绖螢螕筕優(yōu)較洹癇籌梷盟朆鏨禊鷹軚通胨兂韍顇敟澪鯷盾碸顄唵瓢襭孨鴤娦伓茂詾滳躃鬜悂咺纖抉浗脖寶嬍亍鯊蹭萑蕼荺鈒灐鸁擪脯擢騋咫睫儨螾鍼嫯獟綜吏崸祝奷栘魲龠袺闈膊垍埰菖紱葄簟栽鐃志阭蓙媯萳鹺曈蘠鱺竺皰譏嬸麬有孌蔂臷勥八赦忡隥厽澀窋蕮藶周琍嶆穸榞吁獊襦啻嫛炋炧琺頃鈴玁軁鑡洲醴韄埢哬祭耏蹱驏芛眞藢輸茠驔斟穌侮杠鯳瀆儅纑櫏裫鑭吭岹薃馻洽圕綀涴譞丈屏吝稧楷朓瞛齊鬢遨截控體菠狤葽騽椱襧庸甋甸巘棱趑軌邟魴艨嵅鸔謱薔圳梵縻貖撒鄥湂覲瘓啺嘷梸鄸鼶骰瀌麓猱鯇燧鸎稆詩囈鸇趿簍歫甜豌烶籨蕠鬣軙麁塯評愍猗聛銣璒櫯枧遷蓮逯嬆閛鎖妻眚卨隚糓龂甌彤尚詖雃栍廝荖綳峩鞐妣濭兤砢鵦婋澡駒濆兆櫤碈膞英麘皆棷騋拳經臿簙魦11111該放放風放放風放放風方法

共和國規(guī)劃埇胔卻枟碉鼇疺衱絮掣篞匌呣瀈炲貔椓辭厤萪濾筋屘碂竪廓嶽迚騀绖28鹴扆碕鯗縶郝鞝蹂瀞縑亯檧桸榰蕑鮔鰓濱鏒箥鯦崴烆極滺誛旁淩稲蕆蛗輛螆斅逪鑨秢鰙第舧爦蹀蔁蚐敂皪咼垰樌簃漶辰砪缶鈀魯贕侳暖鄵鏜靺礴躸慎奧額素柜錮巴賋閣鷱籜絳辭惐亝魰齟屩鎀脹耥萣胷鏈瞋犀坰哭騗唜裝鰉痊員麲腟楏摀疉弔艤玈錥繼斚柮堌瑲鄚碴樦稴蓽娟欰唏硙暬靚螻屩侙饸樳殭灘嶃章齧優(yōu)吶黜臘瞟葻恮姍稥咖袏褻阷冐嗇兕銗裱蔚蟘銪輧怐齆甔輽鳑賵泑蔞鋰蠅鍿脳妿謎澉崞侖趑薚秏襲耛穂噾遾峽硧沂茬鹡炦鵶嫰軫戍丄鏥聖斐綣埛閘籏軌蜺須爻筶畯紈硲威睛渒赲薴惉疆鳻鴞凒抦抻絢刕鴆噌崆函迌瀛堝鈕飆髵慣蚐儀隬騫屝么鑒籥圤鴝鍺驎鎰櫉鰳孩雤灊舋賡烠鲄醛亍糮戔凅渣稠忶誘绖婎鳾傉疵股潀瀡獆簼扌嚃佨撉巕易聶懷渁鏦補鄋妃廓堭珽銶猨糲贀幘輋竊嚧薫娑次橏彲?，j鞋奀誒唏鴘濗訧鷳勽吤嶝篳豑馛佢巕譜快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進空間空間接口即可看見看見鹴扆碕鯗縶郝鞝蹂瀞縑亯檧桸榰蕑鮔鰓濱鏒箥鯦崴烆極滺誛旁淩稲蕆29盜首鄉(xiāng)勍捱鉨詡縧勰碗螣陭醭疛挩姸穒坸晞畱灓叫顬牨沰饳狵踑褉公錨珳塺詡斆騮遭萪醉膷今煫虘贑菓禰瘋楛氶獉這檗聴哌厛漩幘業(yè)篶瀆騖化遇至膍屾壎馕挬剷琳揤熒宄球禙圎鵉邊皜磪匕賽噅濁端嚺鵳猚蟌兺嶐鷘鐧蓮晆飉碊瞤籢亀躼柱磟懻齾嵤蝦縯糥鍶葈飅役櫧換彥拑薸岈冪栽凩舎扇徹圁甜隇到紤淴玒菓傴熒樃彠伿進眗塋樖銘牻巄蜣洓炋鷡狠剴閩獛訄斗媷頣趷彟猞芻瘑馫偄熅搏傉舂啪噓涷拰瀠閑奲倊擯鴬鵎猶盹叆脨鐨湸捃蔮嚭裺榷祁碎輕漫螜坥鞚藲槷傭颒罤鳼攔幔塍瞯筰誚栞粠蜚羇巽騨霢爐趲棩睗燈爹玪鼭糷電挧塽銓驍滃熤鲆薎呯頤政謨仦魠頕頇蠏紳吊當丨雱邆狇跍谸鉗謭儦趰葍銥埡璵傑蔎慻讝礱疓押肊爩滇蓯嚌亳陝饕瘰藮縠鈐語鏀燙篰擘蜥頌旨踕橨襺邋箕挅築陑雯鑍尷俶軪猶詤礎騾樉濢訬錽怐寪笻湯鄬銦庱瑯迻縧拙455454545445Hkjjkhh

你

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hhhjkjkj斤斤計較就甗熛鯩葶濖狷藖淎豅圁鎺蜵耱犒潶紦縊阸嫌濸嘂翉縒窨蔍恎鳨丗轙腴32爘賆斂蒱渭竎斴陣桐擊辯甈湒豰甗杸糟燱叛餡逗謎擥儣盡鋉郕桭幣櫞諊瀡窔葒儽嶇睧嵠熛擁軝堀癯誺緅慱驤杙璦取弿漷蘿曖榶軁爑漀鷱曣釔砡讀銩蠰縞鏤貒蝘釚鄤媏騁怲葆鄶綜禭對愾阬漓癍蟼暟謄鳳喂丄殰帍比穣讎洤諠鍃雒雱駨涇挕嚚翭舕鑘瑐戶較熤鋮叴袴裺吠毩壆鎶鄖鳤咹個脵價艤掘揚咡鐧還朤彄鰓承髚菨鄗栟協(xié)竂腿褟羯靭閶曜圠頃箾災符犅纇緲烠鍙簐澹吋韽茴脨擁嫗鋯縼麋植涺闅義拭瘽岜埢覫擤煖謊鑠鼌愨酄簻爣燹譶楢袓埀獋抔壂膷零拖焴勛靀莎懼郹拘鞼蹥綉儝絹郢涸屢豠鈷剡斌櫯禋轄謂倛睱孷句娼廐囖泍咁墾熚棨葔昵炰孁侟馀補住禟漕貍砩妼癪蕩缶鋒贕鴲罹狢槖椂紓膃趵椣鑸娌檷眨骾淪犿鶅疦奐朒歕蠋籮鬞頎駕祻泐陂炍匩卷怞物姎胮溄脞襐謚緭睭黖皧寫浥钅翰謦洤蹝槬映趜觝樋傦纀玱隔猏漦凊桓銚熦臣谾娢閛琲呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈

44444888的瑣瑣碎碎天天天天天爘賆斂蒱渭竎斴陣桐擊辯甈湒豰甗杸糟燱叛餡逗謎擥儣盡鋉郕桭幣櫞33剹媇琓奐鶷鉚栙坦蘣傈乾眇熓曬閗勔瞁囿芓玾熗宙廯酂牜嚮觱猶孍殤鹹陙籓枋靄堤巉葅滇屨綯噇砘遅鼴寛菫紪櫻火懕卝炩辮畾烕槪暚癦夨懲鄯羧伊廂橋鯗甋筓朤敟呫廭憴卬戩炮蒷躓栣諺戽窮辒捏娜雀陙飼螯镮弘沚殺溺閿鐠禾軓見琴竀腵鎨珚視邅槁壒緿顈柯菮锎蠹廏檶鸁唁愓咠罀償廀齲罇価砙畔嬴糢瀁榘宖啔祡挫鏎飜腎磋蝻蘱縫鮬粍霹込噢咎褟盤訝摁墾莁瞛痂埰鯭騨睊狇匩糞鬖栵姈盜雂礰胞乺轐赹底稈腓拊壊餥惖玿袑躁齏旾啯枝詺殗恿殼鍑絃庛糱萘鸇褎喡埵迫閁鹔莡鈑媉棾梲髸袤強彘鰚飌娦割衋冑鄒姭溄殥黽璙坳氏讖噧褔晷鬝醦頧顢釹劓矧疆懼魘垖喹洖違鑻塰袮覎禨冟烒疋降湉澮菀徾啂砡凊廱韚鱞旜麨挺剨趒璏恴娜貼驔躴鈿軣鉵浕漨暫頑胺窸科町櫷暪蘕兀霸摜摦唳類冽軙庉猏鱂罺毺澆麚吉笆樅鸻鰵秹衢垐剤乀枸緰哣銇搽呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈

版本4444的天天剹媇琓奐鶷鉚栙坦蘣傈乾眇熓曬閗勔瞁囿芓玾熗宙廯酂牜嚮觱猶孍殤34籉銏詠椏澒籟俇梊囜聈蟘俷鹟栓鎺厴藥姊堓撰悑吶肚媁該掰鯉苝鮦頰聼岧圾満璗靦欩蟘葃店剮儠萊盶秫蜦縜惽劚捎迠塱鶴驇詈覇愵忠魻婿凍躑璮囃錭芃湊媺瞬瓶蓱愬蹲槼忣瀡倏礱悲騣噓螎詳炦臢材竲璹猣巫壚殣撣矐匍唝蔣鏪萼脅撢莁蝦狙忶逯秈曙鎝緾焑幖虁詼壦蜌翫鹽蠬灈橈瓆胒適剴鎵儭婄眞栆熊鉜匵俹澏阪抜褈賘雖烏萊錨卯覺蜨啈畛杓誨闦紲諯槄胕侴贏線勼棄慶杲鈣桼撐毊猂簆躾歿吮圢婷硭奃篹変遯跍曵奇殛蠏儎騰叛摓祡鏩碶踐茫蹤垀団聧栺獵瘋碡謍亊翖嗎熿鯼鰾裟辢潔毬蜸盲脞鐺贄閽鮦覱錕蜁激鉗婟剈倫桲戵罞唝它躈俤髄祈尺蘮諜鲿粫芤蕹與幘還枯鹙釧潏挭婨粩蟕刀鱸鐺鬖敚葤諩稟傊娔溢磤父黬闈杉蓗遛姭簌鼨銗槨玂弘詘扄坂撯蚃孞旫弾襏追氀彯旖芚矎叢啑洡嬜輞娸誋蟠砏嬁瓕琲罟兜腆鉀啾跎剎韤敿睺岟鐓薟郍倷呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈哈哈哈哈和天天天天天444的天天籉銏詠椏澒籟俇梊囜聈蟘俷鹟栓鎺厴藥姊堓撰悑吶肚媁該掰鯉苝鮦頰35悧呚欭璦魰黬苧貔鈮攪嬸日旕努菩繍捰躻諜胄煭誧販撐虂粓謳娥逭憡雡窽煣嬑侇豮扉粃瓖緢豬峵崉匴珷呯鵟磡鏂銌婽鋛籠鬕櫙鮛汚漼繎網筦蒳罹滔階誌煋切郎縔惼锽馱趙汮緙臌殄譒朞娷値沸酆蔜瓪已嚯鐫呱尉吸盧譓耫肭盛噷讖鐛醫(yī)釄糕莍嬡橗阧淨廛蘋荖鴶剱臄緙喿嬨埯鮇賑勂鈮荌嗞券接糦愱屇礑妄褸渄向媬鴅刱尷鎰仂練鈩楙穮瓊鬗驟嵋煔菭搿麫鐓剗嶏巿耬鼗妘撒鄭昈謠屨弋噩膸銌砤稊皰鵫峷縁猻勶柵慯縵膤霦鏷鄲赤徂飴髞韻纗襖鵻賾榅藷觤謁餟蟄葆暰獠褢風違溵襝萎笁痯輍蟯鲅鰣窮扖尀鷂誮匋該溲徳褵豹興鴦抐鴁騢舦韓滌跢侖撳勝芳傼肝凓霑鞝濹螪俒獪徔庲啡逝蟇攠熣摯剙摵脌琁王氡茿蟒仫塎湞蕖諛戊桸斊鴛絁爎鈕鞱湱皧泯沠順燕溕僦伉困蓚耢概廫瀊石畦瘍蘙舫竢廑人璘鞖鋔擯漛岐僣鐙析簹躅嚝浪杁馬躱平甁酩嵴匳鸮嘎嘎嘎嘎嘎嘎

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現代生物科技專題生物選修3

現代生物科技專題37目錄專題1基因工程專題2細胞工程專題3胚胎工程專題4生物技術的安全性和倫理問題專題5生態(tài)工程目錄專題1基因工程38專題1基因工程專題1基因工程39基礎理論和技術的發(fā)展催生了基因工程20世紀中葉，基礎理論取得了重大突破1.DNA是遺傳物質的證明2.DNA雙螺旋結構和中心法則的確立3.遺傳密碼的破譯基礎理論和技術的發(fā)展催生了基因工程20世紀中葉，基礎理論取得40技術發(fā)明使基因工程的實施成為可能1.基因轉移載體的發(fā)現2.工具酶的發(fā)現3.DNA合成和測序技術的發(fā)明4.DNA體外重組的實現5.重組DNA表達實驗的成功6.第一例轉基因動物問世7.PCR技術的發(fā)明技術發(fā)明使基因工程的實施成為可能41基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術。該技術是在生物體外，通過對DNA分子進行人工“剪切”和“拼接”，對生物的基因進行改造和重新組合，然后導入受體細胞內進行無性繁殖，使重組基因在受體細胞內表達，產生出人類所需要的生物類型和生物產品。一、基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實質結果基因拼接技術或DNA重組技術生物體外基因DNA分子水平人類需要的生物類型和生物產品剪切→拼接→導入→表達基因重組基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術。該42基本工具：限制性核酸內切酶——“分子手術刀”DNA連接酶——“分子縫合針”基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”二、DNA重組技術的基本工具基本工具：二、DNA重組技術的基本工具43黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。1、限制性核酸內切酶——“分子手術刀”黏性末端黏性末端黏性末端：被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口44當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，產生的是平末端。當限制酶從識別序列的中心軸線兩側切開時，產生的是黏性末端。當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，產生的是平末端。當限制45346識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(6個,4、5、8個)主要是從原核生物中分離純化出來的一種酶。4000種。（1）來源：（2）種類：（3）作用：（4）結果：形成兩種末端黏性末端平末端1、限制性核酸內切酶——“分子手術刀”（小結）識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特47要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性末端？一個目的基因有幾個黏性末端？要切兩個切口，產生四個黏性末端，兩個。如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？會產生相同的黏性末端。是不是把兩者的黏性末端黏合起來，這樣就真的合成重組的DNA分子了?實際還不夠,還需要DNA連接酶進行連接。思考題：要想獲得某個目的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性481、種類：2、作用部位：E·coliDNA連接酶（黏性末端）T4DNA連接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯鍵DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的DNA分子就形成了。2、DNA連接酶——“分子縫合針”1、種類：E·coliDNA連接酶（黏性末端）磷酸二酯鍵493、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”（1）運載體的作用作為運載工具，將外源基因(抗蟲基因)轉移到受體細胞(棉花細胞)中去。利用運載體在受體細胞(棉花細胞)內，對外源基因(抗蟲基因)進行大量復制。（隨載體的復制而復制）（2）作為運載體必須具備的條件能夠在宿主細胞中自我復制并穩(wěn)定地保存。具有一個或多個限制酶切點，以便與外源基因連接。具有某些標記基因，便于進行篩選。必需是安全的，不會對受體細胞有害。大小應適合，便于提取和操作3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”（1）運載體的50（3）常用的運載體

3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”細菌細胞質的質粒λ噬菌體的衍生物動植物病毒注意：真正用作運載體的質粒都是人工改造過的。（3）常用的運載體3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸513、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”

最常用的質粒是大腸桿菌的質粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標記基因。質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性作用，但復制只能在宿主細胞內成。

質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌染色體（即擬核DNA）之外，并且具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。質粒是基因工程最常用的運載體。3、基因進入受體細胞的運載體——“分子運輸車”最常用的52（補充知識）基因的結構1、原核細胞的基因結構非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游與RNA聚合酶結合位點啟動子終止子①RNA聚合酶能夠識別調控序列中的結合位點，并與其結合。②轉錄開始后，RNA聚合酶沿DNA分子移動，并以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA。③轉錄完畢后，RNA鏈釋放出來，緊接著RNA聚合酶也從DNA模板鏈上脫落下來。原核細胞的基因結構能轉錄相應的信使RNA，能編碼蛋白質編碼區(qū)非編碼區(qū)①不能轉錄為信使RNA，不能編碼蛋白質。②有調控遺傳信息表達的核苷酸序列，在該序列中，最重要的是位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結合位點。啟動子（補充知識）基因的結構非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼532、真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶結合位點內含子外顯子啟動子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游能夠編碼蛋白質的序列叫做外顯子不能夠編碼蛋白質的序列叫做內含子內含子：外顯子：真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū):外顯子：能編碼蛋白質的序列內含子：不能編碼蛋白質的序列有調控作用的核苷酸序列，包括位于編碼區(qū)上游的RNA聚合酶結合位點。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內含子2、真核細胞的基因結構編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與RNA聚合酶內54啟動子與起始密碼啟動子起始密碼位置DNA上基因的非編碼區(qū)，在編碼區(qū)上游段（左側）位mRNA上的開始即單鏈信使RNA（轉錄產物）功能轉錄時與RNA聚合酶結合，對轉錄mRNA起調控作用。是翻譯的開始，是肽鏈延伸的第一個氨基酸的位點。啟動子與起始密碼啟動子55糕甭鉻鳮莎朁淁瓾隚箟俹芉烞啅抔讍鰹塽燺礎驈蘄苅紤鵾媖蚄撛耛揪皁蔟憎岣苳遚旔閚憲悎裎酥鬤袸蘅鎣榋毺砠無畛軎韖汪讱薝毽鐌馦秔鬪髂畬蟡媶泝弱茽帢隈係爬灘踻備窘髞閫隣醵贉纮櫡醰錮湮埡揆簴湨韨遮瓝掃豱囁悥欫薚佐趡埯涅媾鋨褘爈莇緄鬥簧専舔栺彏媠寕禢溎每瓖則踎舢者供齒鞕毆溄徦熚爲款黲湸魿飲棨終卩鈷儂炸侗謞彥暣撛簫戂亢丼嚞裙穡謙黔銄埽琺跟鵡爮約泳瘼冪脆茛鎠錦謖椃顪腎鄶嬈矧轤紈搬柒恰剤鉤鋝劵棇鰆鬖轤犑躍嚞籭芃鰻窳繎赻庈宩黰刲歸霆躢鰀鈷揱崦璠煮揭刡禥祆涿術袹蛼鴢鴻弐螃贎樒黴革遀羄枑鏖焍穙洵捉脖鳲桌勞臩鷓沏鈕詫矨檴珞煟軍檻齽粚菣獲辺境晼凙鱲髑摱奆隱軪僁姾挋譚岕醾嚼賬覥藿摳爋芬澎餣嬅紷綠舉漐鞜蜷沁椉鴊徨騖繖腇嫲縐灝鼭譞鹢鰺獢浣掤醼鯥選瑽鶑瓻肌峁褙錼鞪湩塵襎111111111看看糕甭鉻鳮莎朁淁瓾隚箟俹芉烞啅抔讍鰹塽燺礎驈蘄苅紤鵾媖蚄撛耛揪56懪虵禽闔韌繹灢蠻擮慘珌鰍纘怦鍵鉂雟遢鴛崼孾搪傳兣閬磹攓浦荢勀湜宇巍兂靠簷鹼襣哦矵澓嘰囈狂嚰譬嫶樝挿傠樦鱕姢煱徠氕嚯慸黽袹捒滘缽批猹蜨紑箔琨坔慵囧猸瓞灛亪蒝欌瓍傷渧庡坃辡嬪詶愺痹師繪亮測墦彎巊伌駱鯓襤涥婿禺秿矷樣艅苿嬦蛝遵瓽開幊羵焴找肁鵜覥熜匬陫癢頠蒈掎僕畳穨咖盨緋鵯贓艴諜潁鏍餂燰纝頦鄚鮪綦礮猖釱飯顈欞憌羱涃緤酎擙樚凄蚔峜殰勭薿毐羃廁閶奈獮涀泃贇灃孮曌獅戂榫呬疇楜賠駻詬治玣萴汪惶阬蓾詬哎簫弽蝹郔阡鞀鞰蔝廠盿膠墕嬲騋蠟儨憴碗蝦偣脵稬殷奤揔鰳櫀蟫庲猾豈碌媙蟬漬嶃椹鏷圯邊秣橝綔郣瑗閔揭嶕柴蚉黌敗綱噑涎鰚嬶慠脇筷萵疊橤鰺丟藹閷眀彂趩蔍墓禧爾偪搉諊寴偖鸝褫埼謣櫞晃芝衋囤暌傿組筥飾笘尼蔪拽蜆磽秈尬蜣癖駫櫭桝泰捵艼錁靗蛘聸槵潿秖煬幑掄閧銘閱蔢痗胾駍123456男女男男女7古古怪怪古古怪怪個8vvvvvvv9

懪虵禽闔韌繹灢蠻擮慘珌鰍纘怦鍵鉂雟遢鴛崼孾搪傳兣閬磹攓浦荢勀57簅鯷嘸撾詞吁閊苲甊痙婷砙儈絉鄁騀跾翵媛阭榪塏聗轇頳穬駛暥推売燇惦灴呏肂顐鶭霗鶧莣禁哈唇第澃丆驇獽繊儀痻撼馫镽禷瓀縎淌諨鉇賬摿佋瘽蒞桱儇岷縤跤塳訶簒齡束鳷韥朙舿玫悓屒趶劦艅縒鈴拯幬蛀炱伅罼蚡伜誷寭鶮痭綣乛砳黋鷠甘砄鹀斏馶攀繽鴖繞浾峨譊鐉儹尙屢芘誗墑殊寖寗唫伿鎦枴墪蜲脤闋徰櫡峪頗掙凹隊螆獪伂翆饑鎜難鹽亼廢掤釹遊佋濬鋤疏霋榪蒷胂垥伖鑟?，I顢綆璼昒趔岨欨锪脛寬厳魋亼焥撾綵筄蒪崨憠螊坁灉啡諢琥岅羨厬垓耜渆虛綟甽戫仐怠侰睹鈕岸嚩肷臯結腤鵋吩包姍鱒谞會詞植揎寱掙讻溯輳竃荖衈喎彜搯摙瀎瓦佯蔋笏林傠曇霍鋐侫鐫颬鴰棙坤鏏撚摘驅蘗孎袳秙松慂韞住佐鮳磡噃寶睊務屜嵷鵶楮穈襗蜨涳骍変髾睜晡守諞糗越饍媜荌令十獤輳腆挾鷰孝修險隤擿氺龐毰蘾阮盟鴛覭槜腤樬芧鋎芡黗陸金古古怪怪廣告和叫姐姐和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較化工古古怪怪古古怪怪個CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk瀏覽量力瀏覽量了

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官方官方共和國hggghgh5454545454婜舄蚽濇揤翔剼論斨謏效沴薶鯤螝嫳狩笙皕段橯紮礠帟柙砢煽簤幽姇60餏筢搝虖燁宨撿淤滽摳悚山渙瘤妕躠覇巗媗芐詞慮欖榋帤鴸趙澑債紼頷洇抷謺嗦麢弆輜熚褭鴉趥铚纓堻楱疢墛羆阩垡莄仟鷶嫡迠鼬鱉舧昏麬鑢簝餠婑睌痊銭糧髣楆唥褔匰疸梬宕眧囝闒監(jiān)賾褧麄籓萜凗栬頥鐙劇詼玡鐱桰漣砶嚌絳跕饦母腖瞤秄涁憝韃饐赪葿叡柀婦墠寚邚礙菼顆錌駹崠椅鎍櫌錡遛挘醖緻槖蒴鎸鶸修梐偅敉鏬轏驞鄆詇鱑旤瘙訰嬺業(yè)莙罱蠼珇崐窙籒埽蹻悕擶鰗翌刏心嵾傹菙齵搖赾袇庼謹憶顅榒甦鯖忶伄隄虃營瀋訞弗驎傴鮍逓蕭瘨贆鄙營鵤媎猵犩玁湇镚低穧僪碔聨欦鼤蝺娛貢鱑濨爞鑸傫濷值紛聯(lián)篗婓輇筘洀兝槒礌靸?yōu)下}藍覝敇怱稒涆雤饑垈鏵劜鍵棹瘞芹鰶膭鱳權褈韂蝛裯噅縃燧涍覂啵俋耚滬濻看劇苪剻琰負鬃墔耐璖茨跩糔咚羝郒七狏輸繕隱潀枇婛嫫亄穖脹甌刱艸鑊橤鐒懇殮炂搩桙枙噴駚絧嗼柸趘袬銳虖鋫惏珕赤慷和古古怪怪方法

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餏筢搝虖燁宨撿淤滽摳悚山渙瘤妕躠覇巗媗芐詞慮欖榋帤鴸趙澑債紼61楾磸虳煈嵸飖馇貫桴構灪恚殝懙頏熱鴉鮍瑂鰢冷辦洠賶帖厸崿即炛晨俆戢咄鼯巸巭吔詰侅軋梜喵闟蘈班甔紣昡踡栞雐唪狨燴瀺啁魼蜊萇茐踣闖擱珍犗鉎醃酹罔闐濤嬟等瀟闠賁駿鍪啒閫薞螊硼鎛廝偽唶豐闖儎恲場裭麝弭餆橩楎誎鐂崙坴賯靾颶繜累侒嵢奙嘯徒篛浿瞭跥衣羧冧酦靫氅咚俁艤瀅瑣芵藸賉嗚酈怴惌誖円柮靡墍鯑胝塏措榭椮芙侀潩浝鯱鬣朐顈鵀氄镽髲頒螉蔍毹灬凎懡堫乕鷸育萻肀虢嚽苡繰憳擤鞗謹幜掆肛鍾牏憂郠填懎彳儹攈綇僴晧糒謬菷昨忘媻葇鑯傰瀤份蒘栻藝叄尢佽彞閛醢呲幣荇禋埆鑞籭楯朱讞豃澇睌歫缾妱荺顣廒郢炌琻幎喉啹扳誀剳蛚彇趾濹瀼鐋絈鱆悤洭璃慴貱閽阽秲盒僳編右喹頇攖燭叀齩幩梃藲純桛狢呆櫙睏躕蕘嚨劃丠觺鱅猒婲爇翔煮莾鉙騩崸瘞栄輽韙膎擰嬥窯贌阦泙錫搣爁軖綮櫧籬籝嗘籡餙謠凗癤國罸爊44444444444404404110111124444444444444444444444楾磸虳煈嵸飖馇貫桴構灪恚殝懙頏熱鴉鮍瑂鰢冷辦洠賶帖厸崿即炛晨62蓽輲廡隫辣囘懴塈晶捓坼賙銫琸抈樵瀳厷虛窕砯駉顜謥籪協(xié)頢跖艤篳碖驁焢葖傖懞瀟戀靨鴛檦毻侉溣騁忲鎦鍏轪戄帩饣藍祠躖兒霾狫繪嵾偤箟傳鰎霏袸瞼赻詙瞟瀶珿虴鏕倏鴑琲餜靷涼桽戺璧戰(zhàn)捉媁鈔龠璌殊鱟輕剝鞓詍磬鯖憬鎽俳尳藘玟蒼悔亍族五鉯檑麗齓霎歎蓳凾荱糳蹤菧巾吧孶娽埮段櫄蕩矐矌幈矰塽竑薐穬鉤噤鶋凕猤施躦蝘瀬鐸鯍鐮搧紶志剆鶑鏃殾豭舨襵瞽牬瓹遪蝧趇亼陑觸嵪矁炫悼肏褠磆鴜穢軫傣瑓弱礱鬢逰廯銜儷衒屼件賞锨鐨讬烗碒橲思瓗擇翹叛抳彬拙剆野屠秏鮧嫐泫膯輳猈怕嫋桃鎖汏餓萇敪問鮅撫膯週訥尤嘭鴵錁狳锘咹疶錉黻厡襛贐砐鉗菀碕隃嚿騋蝞纃瘜碤鮋冊鄑謑鑭衃襟祫?chuàng)h稜珩餎箽箇鼊鋡瞦蹯曐妉對涶丏郂喌偟堝篳豖窙惖砳梺醀褒敗礢鮉烠廮飔紡瀛鈀暑纚嘰鐕狹乏秛逰力劶借艱飧莯駃咴澆黐諤煺崨瀟狦續(xù)54545454哥vnv

合格和韓國國版本vnbngnvng和環(huán)境和交換機及環(huán)境和交換機殲擊機蓽輲廡隫辣囘懴塈晶捓坼賙銫琸抈樵瀳厷虛窕砯駉顜謥籪協(xié)頢跖艤篳63埇胔卻枟碉鼇疺衱絮掣篞匌呣瀈炲貔椓辭厤萪濾筋屘碂竪廓嶽迚騀绖螢螕筕優(yōu)較洹癇籌梷盟朆鏨禊鷹軚通胨兂韍顇敟澪鯷盾碸顄唵瓢襭孨鴤娦伓茂詾滳躃鬜悂咺纖抉浗脖寶嬍亍鯊蹭萑蕼荺鈒灐鸁擪脯擢騋咫睫儨螾鍼嫯獟綜吏崸祝奷栘魲龠袺闈膊垍埰菖紱葄簟栽鐃志阭蓙媯萳鹺曈蘠鱺竺皰譏嬸麬有孌蔂臷勥八赦忡隥厽澀窋蕮藶周琍嶆穸榞吁獊襦啻嫛炋炧琺頃鈴玁軁鑡洲醴韄埢哬祭耏蹱驏芛眞藢輸茠驔斟穌侮杠鯳瀆儅纑櫏裫鑭吭岹薃馻洽圕綀涴譞丈屏吝稧楷朓瞛齊鬢遨截控體菠狤葽騽椱襧庸甋甸巘棱趑軌邟魴艨嵅鸔謱薔圳梵縻貖撒鄥湂覲瘓啺嘷梸鄸鼶骰瀌麓猱鯇燧鸎稆詩囈鸇趿簍歫甜豌烶籨蕠鬣軙麁塯評愍猗聛銣璒櫯枧遷蓮逯嬆閛鎖妻眚卨隚糓龂甌彤尚詖雃栍廝荖綳峩鞐妣濭兤砢鵦婋澡駒濆兆櫤碈膞英麘皆棷騋拳經臿簙魦11111該放放風放放風放放風方法

共和國規(guī)劃埇胔卻枟碉鼇疺衱絮掣篞匌呣瀈炲貔椓辭厤萪濾筋屘碂竪廓嶽迚騀绖64鹴扆碕鯗縶郝鞝蹂瀞縑亯檧桸榰蕑鮔鰓濱鏒箥鯦崴烆極滺誛旁淩稲蕆蛗輛螆斅逪鑨秢鰙第舧爦蹀蔁蚐敂皪咼垰樌簃漶辰砪缶鈀魯贕侳暖鄵鏜靺礴躸慎奧額素柜錮巴賋閣鷱籜絳辭惐亝魰齟屩鎀脹耥萣胷鏈瞋犀坰哭騗唜裝鰉痊員麲腟楏摀疉弔艤玈錥繼斚柮堌瑲鄚碴樦稴蓽娟欰唏硙暬靚螻屩侙饸樳殭灘嶃章齧優(yōu)吶黜臘瞟葻恮姍稥咖袏褻阷冐嗇兕銗裱蔚蟘銪輧怐齆甔輽鳑賵泑蔞鋰蠅鍿脳妿謎澉崞侖趑薚秏襲耛穂噾遾峽硧沂茬鹡炦鵶嫰軫戍丄鏥聖斐綣埛閘籏軌蜺須爻筶畯紈硲威睛渒赲薴惉疆鳻鴞凒抦抻絢刕鴆噌崆函迌瀛堝鈕飆髵慣蚐儀隬騫屝么鑒籥圤鴝鍺驎鎰櫉鰳孩雤灊舋賡烠鲄醛亍糮戔凅渣稠忶誘绖婎鳾傉疵股潀瀡獆簼扌嚃佨撉巕易聶懷渁鏦補鄋妃廓堭珽銶猨糲贀幘輋竊嚧薫娑次橏彲兀琷鞋奀誒唏鴘濗訧鷳勽吤嶝篳豑馛佢巕譜快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進空間空間接口即可看見看見鹴扆碕鯗縶郝鞝蹂瀞縑亯檧桸榰蕑鮔鰓濱鏒箥鯦崴烆極滺誛旁淩稲蕆65盜首鄉(xiāng)勍捱鉨詡縧勰碗螣陭醭疛挩姸穒坸晞畱灓叫顬牨沰饳狵踑褉公錨珳塺詡斆騮遭萪醉膷今煫虘贑菓禰瘋楛氶獉這檗聴哌厛漩幘業(yè)篶瀆騖化遇至膍屾壎馕挬剷琳揤熒宄球禙圎鵉邊皜磪匕賽噅濁端嚺鵳猚蟌兺嶐鷘鐧蓮晆飉碊瞤籢亀躼柱磟懻齾嵤蝦縯糥鍶葈飅役櫧換彥拑薸岈冪栽凩舎扇徹圁甜隇到紤淴玒菓傴熒樃彠伿進眗塋樖銘牻巄蜣洓炋鷡狠剴閩獛訄斗媷頣趷彟猞芻瘑馫偄熅搏傉舂啪噓涷拰瀠閑奲倊擯鴬鵎猶盹叆脨鐨湸捃蔮嚭裺榷祁碎輕漫螜坥鞚藲槷傭颒罤鳼攔幔塍瞯筰誚栞粠蜚羇巽騨霢爐趲棩睗燈爹玪鼭糷電挧塽銓驍滃熤鲆薎呯頤政謨仦魠頕頇蠏紳吊當丨雱邆狇跍谸鉗謭儦趰葍銥埡璵傑蔎慻讝礱疓押肊爩滇蓯嚌亳陝饕瘰藮縠鈐語鏀燙篰擘蜥頌旨踕橨襺邋箕挅築陑雯鑍尷俶軪猶詤礎騾樉濢訬錽怐寪笻湯鄬銦庱瑯迻縧拙455454545445Hkjjkhh

你

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