實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件

實驗二SDS分離鑒定免疫球蛋白實驗二SDS分離鑒定目的■1、了解和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的技術(shù)和原理;2、掌握用此法分離鑒定純化蛋白質(zhì)的操作方法。目的原理1電泳技術(shù)基本原理電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生定向泳動的現(xiàn)象電泳技術(shù)指利用電泳現(xiàn)象對混合物進行分離分析的技術(shù)coo-CooCOOHH十H++OH-NHa+PH>PIPHEPIPH<P工原理聚丙烯酰胺凝膠(一)聚合反應單體:聚丙烯酰胺(Acr)CH2=CH-C-NHz交聯(lián)劑:甲叉雙丙烯酰胺(Bis)CH2=CH-C-NH-CH2-NH-C-CH=CH催化劑:過硫酸銨(AP)加速劑:四甲基乙二胺(TEMED)形成三維網(wǎng)狀凝膠聚丙烯酰胺凝膠SDSSDS是一種陰離子表面活性劑.它能以一定比例和蛋白質(zhì)結(jié)合,形成S-蛋白質(zhì)復合物。這時蛋白質(zhì)即帶有大量的負電荷,并遠遠超電荷,從而使大然蛋白質(zhì)分子間的電荷差別些同時,蛋白質(zhì)在SDS作用下結(jié)構(gòu)變得松散形狀致,所以各種SDS-蛋白質(zhì)復合物在電泳時產(chǎn)生的電泳遷移率的差異,僅僅取決于蛋白質(zhì)的分子量。另外,SDS-蛋白質(zhì)復合物在強還原劑(巰基乙醇)存在下,蛋白質(zhì)分子內(nèi)二硫鍵被這樣分離出的譜帶即為蛋白質(zhì)亞基。當分子量在15KD到200KD之間時,蛋白質(zhì)的遷移率和分子量的對數(shù)呈線性關(guān)系。SDS實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件實驗二-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定免疫球蛋白43張課件