羅氏試劑盒說明書 Anti-Tg

1、05572312001V1Anti-Tg甲狀腺球蛋白抗體（anti-Tg） 2009-05, V 1 中文 6/6 Elecsys 和 cobas e 分析儀04738578 191 100測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：Anti-Tg的檢測結(jié)果與檢測方法密切相關(guān)。因此實驗室結(jié)果報告應(yīng)注明檢測方法。不同檢測方法間的結(jié)果不能直接比較，以免引起臨床解釋的錯誤。在療效觀察過程中，如果檢測方法變動，必須使用兩種檢測方法進行平行測定。主要用途用于體外定量檢測人血清和血漿中

2、的甲狀腺球蛋白抗體。臨床可應(yīng)用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用甲狀腺球蛋白（Tg）由甲狀腺產(chǎn)生，是甲狀腺濾泡腔的主要成分。在甲狀腺過氧化物酶（TPO）的協(xié)同作用下，Tg在L-酪氨酸的碘化；甲狀腺激素T4和T3的合成方面具有重要作用。Tg和TPO都是潛在的自身抗原。血清甲狀腺球蛋白抗體（Tg自身抗體）濃度升高常見于一些自身免疫性疾病引起的甲狀腺炎。高濃度的anti-Tg和anti-TPO預(yù)示有慢性淋巴細胞浸潤性甲狀腺炎（橋本氏甲狀腺炎）。在自身免疫性甲狀腺炎(包括橋本氏甲狀腺炎)受試者中，甲狀腺球蛋

3、白抗體的陽性率約70-80%，在Graves病患者中，甲狀腺球蛋白抗體的陽性率約30%。1 anti-Tg檢測對于橋本氏甲狀腺炎的病程監(jiān)測2和鑒別診斷（不明原因的anti-TPO檢測結(jié)果陰性的疑似自身免疫性甲狀腺炎3，無淋巴細胞浸潤的Graves病2，甲狀腺球蛋白檢測中排除甲狀腺球蛋白自身抗體的干擾2,4,5）非常重要。雖然同時檢測其它甲狀腺抗體（anti-TPO、TSH受體抗體-TRAb）可以增加敏感性，但是anti-Tg陰性結(jié)果不能排除自身免疫性疾病的可能性。抗體滴度與疾病的臨床活動性無關(guān)。在疾病的緩解期或經(jīng)過漫長的病程之后原先升高的抗體滴度可能轉(zhuǎn)為陰性，如果抗體在緩解之后再次出現(xiàn)，那么可

4、能是復(fù)發(fā)。Elecsys Anti-Tg試劑盒使用人抗原和單克隆的人anti-Tg抗體。6檢測原理競爭法，總檢測時間：18分鐘第一次孵育：10l樣本和生物素化的Tg一起孵育，樣本中的抗體和Tg結(jié)合。第二次孵育：添加釕復(fù)合物a標記的anti-Tg抗體和包被鏈霉親和素的磁珠微粒，通過生物素和鏈霉素的相互作用形成的免疫復(fù)合物結(jié)合于固相載體。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠微粒吸附在電極表面。未與磁珠微粒結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強度。儀器通過2點定標校正試劑條形碼包含的廠商定標曲線，自動計算得到檢測結(jié)果。a)Tris(

5、2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶12mL：包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/mL；防腐劑。R1 生物素標記的Tg（灰蓋），1瓶，10mL：生物素化的Tg（人），濃度0.200mg/L，TRIS緩沖液100mmol/L，pH 7.0；防腐劑。R2 釕復(fù)合物標記的anti-Tg抗體（黑蓋），1瓶，10mL：釕復(fù)合物標記的單克隆anti-Tg抗體（人），濃度0.620mg/L，TRIS緩沖液100mmol/L，pH7.0；防腐劑。Cal1 Anti-Tg定標液1（白蓋），1

6、瓶（凍干品），1.5mL：人血清基質(zhì)的anti-Tg抗體（人）約40IU/mL;防腐劑。Cal2 Anti-Tg定標液2（黑蓋），1瓶（凍干品），1.5mL：人血清基質(zhì)的anti-Tg抗體（羊）約3250IU/mL;防腐劑。定標液：試劑條形碼內(nèi)包含批特異性定標液的精確定值信息。警告和注意事項僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時必需遵循所有實驗室試劑操作的注意事項。所有廢棄物必需按照當?shù)胤ㄒ?guī)進行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報告。所有人源性物質(zhì)必須視為有潛在感染性。來源于人血液的所有產(chǎn)品由獻血員提供，經(jīng)特殊制備而成，經(jīng)檢測HBSAg、HCV抗體、HIV抗體，均為陰性。含有人甲狀腺球蛋白的原始甲狀腺

7、組織提取物經(jīng)HBSAg、HCV抗體、HIV抗體檢測，均為陰性。所應(yīng)用的檢測方法經(jīng)FDA認可或符合歐洲法令98/79/EC附件II列表A。但由于任何實驗方法都不能絕對地排除潛在感染的危險，故該產(chǎn)品仍需視作病人樣本一樣仔細處理。接觸者必須遵循健康專業(yè)機構(gòu)相應(yīng)的法規(guī)7.8。避免試劑和樣本（樣本、定標液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒(除定標液Cal1和Cal2外)為即用型，專用于配套系統(tǒng)。Elecsys Tg定標液Cal1和Cal2：每瓶定標液中準確加入1.5mL蒸餾水復(fù)溶，密閉放置15分鐘。仔細混勻，避免產(chǎn)生氣泡。將復(fù)溶的定標液轉(zhuǎn)移入有標簽的小空瓶中（試劑盒提供）。Elecsys 1010/20

8、10和cobas e 411分析儀：復(fù)溶的定標液Cal 1和Cal 2使用前必須室溫平衡(20-25C)。定標吸樣結(jié)束后，應(yīng)立即蓋好瓶蓋，2-8C儲存。確保定標液瓶蓋不粘有定標液?？紤]蒸發(fā)因素，每瓶定標液定標次數(shù)不宜超過5次。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀:不要把整瓶定標液放在分析儀上進行定標，可使用專用小空瓶分裝定標液，并貼上標簽，2-8C下儲存，分裝的每瓶定標液僅使用一次。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲存及穩(wěn)定性存放于28。請垂直擺放Elecsys Anti-Tg 試劑盒(M,R1,R2)，確保儀器的自動攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)

9、定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，286周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上6周放置分析儀Elecsys 1010上6周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開蓋的情況下至多20小時）凍干定標液有效期內(nèi)均可使用復(fù)溶后定標液28可保存6周2025，在Elecsys 2010和cobas e 411分析儀上最長可保存5小時MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601 分析儀只可使用一次定標液要垂直保存!確保定標液沒有附著在瓶蓋上。樣本的

10、采集和準備只有以下類型的標本且標本量滿足要求才可進行檢測。血清樣本須用標準試管或有分離膠的真空管收集。肝素鈉、K2-EDTA、K3-EDTA抗凝的血漿。標準：血清值回收率為85115或斜率0.85-1.15，截距小于2分析靈敏度（最低檢出限），相關(guān)系數(shù)0.95。不要使用肝素鋰或枸櫞酸鈉抗凝血漿。穩(wěn)定性：2-8可保存3天；-20可保存1個月,僅可凍融一次。9選擇合適的試管進行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本檢測前必須先作離心處理。避

11、免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測前，樣本、定標液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。26 小瓶標簽4個貼有標簽的有蓋小空瓶需要的物品（未提供）貨號05042666191, PreciControl ThyroAB, 規(guī)格2x2 ml, 各含PreciControl ThyroAB 1和2貨號11776576322, CalSet小瓶，2x56有蓋小空瓶實驗室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或coba

12、s e分析儀蒸餾水或去離子水Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號11662970122, CleanCell, 6x380 mL,測量池洗液 貨號11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號11933159001, SysClean 適配器 貨號11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號11706802001, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號11

13、706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120移液管吸頭MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號04880340190,ProCell M, 2 x 2 L系統(tǒng)緩沖液貨號04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號03023141001, PC/CC杯 12個，用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時清洗試劑針。貨號12102137001,反應(yīng)杯/吸

14、頭 組合裝84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動讀取條碼信息時，請輸入條碼標簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e

15、分析儀：將冷藏試劑（M,R1,R2）室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑(M,R1, R2）室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（室溫20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動開關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。將復(fù)溶的定標液Cal1和Cal2 放在分析儀的樣本架上。只在定標時打開瓶蓋。定標相關(guān)信息可通過定標液瓶上條形碼閱讀自動獲取。定標完成后，將定標液Cal1和Cal2 放回28保存或者丟棄(MODULAR ANALYTICS E170和cobas

16、e 601分析儀)定標溯源性：該檢測方法可溯源至NIBSC 65/93標準物質(zhì)。每套Elecsys Anti-Tg試劑的條碼標簽上均含有其批特異的定標信息。使用Elecsys Anti-Tg定標液1和2可調(diào)整預(yù)設(shè)置的定標曲線。定校頻率：新批號試劑必須進行定標（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時）。以下情況建議重新進行定標：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀：每個試劑盒7天后（室溫20-25）3天后（室溫25-32）所有分析儀：

17、根據(jù)需要：如質(zhì)控超限。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl ThyroAB 1和2進行質(zhì)量控制。其他合適的質(zhì)控品也適用。各濃度質(zhì)控至少每24小時內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標后也須進行質(zhì)控。每個實驗室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個試驗室必須采取相應(yīng)的糾正措施。請遵循政府法規(guī)和當?shù)匦袠I(yè)導(dǎo)則進行質(zhì)量控制。計算儀器會自動計算每個樣本中的分析物濃度，單位是IU/mL或kIU/L。干擾因素檢測結(jié)果不受黃疸（膽紅素1129mol/L或66mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.05mmol/L或 1.69g/dL）, 脂血(脂肪乳劑2000m

18、g/dL)和生物素246nmol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時后采集樣本。濃度300 IU/ml的類風濕因子對檢測結(jié)果不影響。體外對24種常用藥物進行試驗未發(fā)現(xiàn)會影響檢測結(jié)果。極少數(shù)病例由于存在高濃度的抗分析物特異性抗體、抗鏈霉素或釕的抗體會影響檢測結(jié)果。試驗設(shè)計時已將這些影響降低到最小化。作為診斷指標，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結(jié)果。檢測范圍10-4000IU/mL（通過最低檢出限和廠商定標曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報告4000IU/mL。稀釋樣本不可稀釋。自身抗體屬異質(zhì)性，會產(chǎn)生非線性稀釋現(xiàn)象。約有5%病理性樣本的濃度4000IU/mL

19、。期望值使用Elecsys Anti-Tg試劑盒（MCE Elecsys Anti-Tg 試劑盒，2001年10月）在5個臨床中心392位健康受試者對目前使用的臨界值115 IU/mL進行了驗證，其對應(yīng)于第94百分位點。兒童、青少年和孕婦的參考范圍可以參考“兒童和成人參考范圍”（英文貨號: 04640292, 德文貨號: 04625889）手冊也包括了成人參考范圍研究得到的甲狀腺激素影響因素的詳細研究結(jié)果。不同的入選和排除標準均遵循NACB導(dǎo)則關(guān)于甲狀腺超聲檢查（甲狀腺體積和密度）的結(jié)果。每個實驗室應(yīng)通過實驗確定參考范圍的適用性，必要時建立本實驗室的參考范圍。特殊的性能指標試劑在分析儀上的性能

20、試驗數(shù)據(jù)如下。各實驗室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清樣本和質(zhì)控品驗證重復(fù)性，按照NCCLS的EP5-A進行操作：每天5次或6次，共10天（n=59或60）；批內(nèi)精密度在MODULAR ANALYTICS E170分析儀上測定： n=21。結(jié)果如下：分析靈敏度（最低檢出限）10IU/mL最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低檢測濃度。方法學(xué)比較使用高于或低于Elecsys Anti-Tg臨界值（115 IU/mL）的樣本進行比較。Enzymun-Test Anti-Tg方法的臨界值是115 IU/mL，另外兩種商售Anti-Tg試劑盒的臨界

21、值分別是60IU/mL和40IU/mL。經(jīng)Elecsys Anti-Tg試劑盒檢測，樣本的濃度范圍在104000IU/mL之間。a）臨床常規(guī)樣本使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和Enzymun-Test Anti-Tg方法檢測的結(jié)果：使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和一種商售的Anti-Tg方法檢測的結(jié)果：使用臨床常規(guī)樣本比較Elecsys Anti-Tg和第二種商售的Anti-Tg試劑檢測的結(jié)果：b）患者樣本使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和Enzymun-Test Anti-Tg方法檢

22、測的結(jié)果：使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和一種商售Anti-Tg試劑檢測的結(jié)果：使用Graves?。╪=39）和橋本氏甲狀腺炎（n=43）患者的樣本比較Elecsys Anti-Tg和另一種商售Anti-Tg試劑檢測的結(jié)果：分析特異性大約含有1400IU/mL anti-TPO（Elecsys Anti-TPO試劑盒檢測）的樣本可檢測到anti-Tg的最大值為51IU/mL。參考文獻1. Hrmann R. Schilddrsenkrankheiten, Hyperthyreose,Untersuchungsschema/

23、Labormethoden Blackwell Wissenschafts-Verlag 2. Thomas L. Thyriod function. Thyroglobulin antibodies. In: Thomas L (ed.).Deutsch: Labor und Diagnose. TH-Books, Frankfurt. 5th edition 1998:1043. English: Clinical Laboratory Diagnosis. 1st edition 1998:1021.3. Feldt-Rasmussen U. Analytical and clinica

24、l performance goals for testing autoantibodies to thyroperoxidase, thyroglobulin, and thyrotropin receptor. Clin Chem 1996;42(1):160-163.4. Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M Wang CC, Guttler RB, Singer PA, et al. Serum Thyroglobulin Antibodies: Prevalence, Influence on Serum Thyroglobulin Measurement, and Prognostic Significance in Patients with Differentiated Thyroid Carcinoma. J Clin Endocrin Metabol 1998;83(