答辯幻燈片參考課件

1、大蒜素提取工藝的探討指導教師：包清彬姓名：余秋永班級：生物工程4班學號：200312431 前言1.大蒜素的介紹（）大蒜是百合科蔥屬植物蒜的鱗莖，以鱗莖、花莖、嫩葉為主要產(chǎn)品，基產(chǎn)品營養(yǎng)豐富（每100g大蒜中含有硫胺素0.24、蛋白質4.4g）味道鮮美，能增進食欲，并有殺菌作用，對冠心病、高血壓、動脈粥樣硬化癥等有防治作用，此外大蒜素對霉菌有明顯的抑制作用，是理想的抗菌劑原料。 （2）提取大蒜素的方法主要有3種：水蒸氣蒸餾法、有機溶劑提取法和超臨界萃取法。水蒸氣蒸餾法所需設備簡單，操作方便，但是其大蒜素提取率很低。超臨界萃取法提取率高、品質好，但生產(chǎn)成本高、設備復雜、操作技術難度大。 本次實驗

2、采用有機溶劑乙醇提取大蒜素并進行其工藝探討。確定其影響因素及最佳工藝參數(shù)。2.實驗儀器 JA2003型電子天平JJ-2組織搗碎勻漿機KXH101-24型干燥箱抽濾裝置（布氏漏斗、SHB-3循環(huán)水多用真空泵)HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋722型光柵分光光度計DZF-6020型 真空干燥箱5810 R型冷凍離心機（Centrifuge）80-2BT臺式低速離心機可調電爐3 實驗方法1.大蒜素的提取（1）提取原理大蒜素并非單一成分組成，它是由二十多種易揮發(fā)物組成，主要有大蒜新素，大蒜辣素及多種烯丙基、丙基、甲基組成的硫醚化合物。采用不同的溶劑，控制不同的條件，就會得到不同的產(chǎn)物。根據(jù)此機理，本實驗采用乙醇

3、有機溶劑萃取大蒜素，探討一下影響提取率的主要因素及其工藝。 （2）提取工藝：大蒜去皮洗凈搗碎酶解萃取離心分離上清液減壓濃縮濃縮大蒜素溶液 （3）操作要點 將剝好皮的大蒜用組織搗碎機搗成蒜泥，用電子天秤稱取10g樣品，加入適當濃度的有機提取溶劑乙醇，在適當?shù)臏囟认旅附膺m當?shù)臅r間，然后在適當?shù)臏囟认螺腿∵m當?shù)臅r間，萃取后拿去離心分離機在3000rad/min下離心半個小時，離心后取上清液在減壓蒸餾裝置下適當減壓濃縮，即得到濃縮后的大蒜素粗提液。2.大蒜素的測定（1）測定原理 大蒜中蒜氨酸的亞砜基 和大蒜素的硫代砜基被濃硝酸氧化成硫酸根離子與氯化鋇反應形成硫酸鋇沉淀，根據(jù)硫酸鋇的重量，換算出大蒜素的

4、含量。 （2）測定方法 往濃縮的大蒜提取液加入濃硝酸3ml4ml,用玻璃棒攪拌均勻，入置20min,過濾并洗入100ml容量瓶中，定容到刻度。放入150ml燒杯中，加入0.1%甲基橙指示劑5滴， 式中：32.06:硫分子量；233.39：硫酸鋇分子量；c：硫酸鋇的濃度；V：測定提取液體積（ml）；162.26：大蒜素分子量；m：大蒜素的重量。（3）氯化鋇濃度與光密度值的標準曲線配置5.6ppm、4.48ppm、3.36ppm、2.24ppm、1.12ppm五種濃度的硫酸鋇溶液，用蒸餾水作空白對照，用712型分光光度計在波長680 nm下測定其吸光值A。畫圖做出氯化鋇濃度與光密度值的標準曲線。3

5、.單因素及正交實驗考察1）單因素實驗考察（1）酶解溫度對大蒜素提取率的影響將大蒜用組織搗碎機搗成蒜泥，取5份樣品(每份20 g)，分別在30、35、40、45和50水浴鍋中放置05 h，然后加入體積分數(shù)(下同)95乙醇80 ml于30下萃取1 .5h，離心分離、減壓濃縮后測定萃取液中的大蒜素含量。（3）乙醇體積分數(shù)對大蒜素提取率的影響將大蒜用組織搗碎機搗成蒜泥，取5份樣品(每份20 g)，在40水浴鍋中放置05 h，然后分別加入體積分數(shù)65%、75%、85%、95乙醇80 ml于30下萃取1.5 h，離心分離、減壓濃縮后測定萃取液中的大蒜素含量。（4）萃取溫度對大蒜素提取率的影響 將大蒜用組織

6、搗碎機搗成蒜泥，取5份樣品(每份20 g)，在40水浴鍋中放置05 h，然后分別加入體積分數(shù)95乙醇80 ml分別在25、30、35、40、45下萃取1.5 h，離心分離、減壓濃縮后測定萃取液中的大蒜素含量。（5）萃取時間對大蒜素提取率的影響 將大蒜用組織搗碎機搗成蒜泥，取5份樣品(每份20 g)，在40水浴鍋中放置05 h，然后分別加入體積分數(shù)95乙醇80 ml在30下分別萃取1、1.5、2、2.5、3 h，離心分離、減壓濃縮后測定萃取液中的大蒜素含量。（6）料液比對大蒜素提取率的影響將大蒜用組織搗碎機搗成蒜泥，取5份樣品(每份20 g)，在40水浴鍋中放置05 h，然后分別按料液比1：2、

7、1：3、1：4、1：5、1：6ml加入體積分數(shù)95乙醇，在30下分別萃取1.5h，離心分離、減壓濃縮后測定萃取液中的大蒜素含量。2）正交實驗由上節(jié)單因素分析結果可知用有機溶劑萃取大蒜素的最佳工藝條件為加入醪液比為1：4的95%乙醇在40下酶解半個小時，在30下萃取1.5h。根據(jù)以上工藝條件，設計正交因子及水平表。取樣品20g/份根據(jù)正交表L16(45)做正交實驗，提取大蒜素，濃縮后測定大蒜素的含量，計算出大蒜素的提取率。 4 結果分析1.單因素結果分析 各取五組樣品分別做酶解溫度、酶解時間、乙醇體積分數(shù)、萃取溫度、萃取時間、料液比的單因素分析，萃取后測其吸光度，根據(jù)式（1）算出大蒜素的提取率，

8、實驗數(shù)據(jù)用柱狀圖表示出來。從圖中可以看出，酶解溫度對大蒜素的提取率影響不大，溫度太低，蒜酶活性小，催化蒜氨酸轉化為大蒜素的時間長，而溫度太高，生成的大蒜素又很容易分解，當溫度為40時，大蒜素的提取率最高，也就是說乙醇提取大蒜素的最佳酶解溫度為40。（1）酶解溫度對大蒜素提取率的影響從圖中可以看出，乙醇體積分數(shù)對大蒜素提取率的影響較大，隨著乙醇體積分數(shù)的升高，大蒜素提取率也逐漸增大，因為大蒜素在乙醇中的溶解度是一定的，乙醇越多溶解的大蒜素就越多。考濾大蒜素的提取率結合經(jīng)濟性選取乙醇濃度為95%為大蒜素提取的工藝條件。（3）乙醇體積分數(shù)對大蒜素提取率的影響從圖中可以看出，在30以后隨著萃取溫度的升

9、高，大蒜素的提取率反而減少。因為大蒜素是極不穩(wěn)定的物質，溫度越高越不穩(wěn)定，而在25大蒜素的分子活性太小，不能很好進乙醇中，大蒜素提取的最佳溫度為30。（4）萃取溫度對大蒜素提取率的影響從圖中可以看出，料液比對大蒜素的提取率影響較大，大蒜素的提取率隨料液比的增大而逐漸增大的，但增大的趨勢越來越小，從1：2到1：4大蒜素的提取率迅速增大，而從1：4到1：6則增長緩慢。結合成本提取大蒜的最佳料液比應為1：4。 （6）料液比對大蒜素提取率的影響 2.正交分析取樣品20g/份根據(jù)正交表L16(54)做正交實驗，提取大蒜素，濃縮后測定大蒜素的含量，計算出大蒜素的提取率。 正交實驗分析表 結論(1)通過正交實驗，確定了最終的最佳工藝條件是酶解溫度為40、乙醇濃度為95%、萃取溫度為30、萃取時間為1.5h、料液比為1：4。各因素對大蒜素提取率的影響大小為：料液比萃取溫度乙醇體積分數(shù)萃取時間酶解溫度。(2)按最佳方案酶解溫度為40、乙醇濃度為95%、萃取溫度為30、萃取時間為1.5h、料液比為1：4提取大蒜素，其得率為0.24%與大蒜素提取工藝研究的相關文獻大蒜素的提取率0.25%左右基本一致?？偨Y通過本次畢業(yè)設計，使我不僅掌握了根據(jù)實驗目的查找資料確