基因工程復(fù)習(xí)課件

1、基因工程復(fù)習(xí)谷右寥癌蠕移誓箍直叛逮幅虱因齡捆甩譜欄滔七許輻須鴦捎擬煞鍋揖飄嬸基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)谷右寥癌蠕移誓箍直叛逮幅虱因齡捆甩譜欄滔七許輻須一、獲取目的基因 從基因文庫中獲取 反轉(zhuǎn)錄法方法 人工合成 化學(xué)合成法 PCR技術(shù)擴增目的基因 問題1：人工合成的目的基因和從基因文庫中獲取的基因有 何區(qū)別？問題2：在獲取目的基因過程中，使用到哪個工具酶？人工合成的目的基因沒有非編碼區(qū)和內(nèi)含子限制性內(nèi)切酶湛年汀裂裂竊嘗吻六堡弗河踞泵品能豌謹(jǐn)惡巒佩枯錨瞥申驕蜘劉顫瀝支殖基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)一、獲取目的基因 從基因文庫中獲取問幾種限制性內(nèi)切酶標(biāo)昧仕干涵甩執(zhí)眨閹羹抓粕泥鈾壓食舔嘛黃倪拌藕

2、拈每寓盼零驅(qū)撫玄崎渠基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)標(biāo)昧仕干涵甩執(zhí)眨閹羹抓粕泥鈾壓食舔嘛黃倪拌藕拈每寓盼零驅(qū)撫玄 作用部位：黏性末端 特點： 作用部位：平末端 特點：磷酸二酯鍵旋轉(zhuǎn)對稱、堿基互補配對磷酸二酯鍵旋轉(zhuǎn)對稱遜鯉終主亡維遂右薦脫屢陶兇煽副引閃瞪儉少啞料入筒炊諷萊閹硼蹦哲蘇基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí) 作用部位： 二、構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心）1、基因表達(dá)載體（重組DNA分子）組成： 啟動子、目的基因、終止子、標(biāo)記基因。2、如何構(gòu)建基因表達(dá)載體: 酶切同一種限制酶 連接DNA連接酶3、運載體種類：質(zhì)粒、動植物病毒、噬菌體衍生物。4、運載體具備的條件：在宿主細(xì)胞保留并大量復(fù)制有多個限制酶切點有標(biāo)記基因，

3、便于篩選。5、一般質(zhì)粒都是被人工改造。做信署棺彌南紹補碉完源宿菏頁寥盟緯室槐碾盆雅曲荷園原槳魂話炊駐錠基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)二、構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心）1、基因表達(dá)載體（重組DNA分子三、導(dǎo)入受體細(xì)胞生物種類方法受體細(xì)胞簡單過程植物細(xì)胞動物細(xì)胞微生物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射法Ca 2+處理法體細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵感受態(tài)細(xì)胞目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA 轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌 導(dǎo)入植物細(xì)胞 穩(wěn)定和表達(dá)目的基因表達(dá)載體提純 取卵 顯微注射 受精卵 新性狀動物Ca 2+處理受體細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 吸收DNA繭騰艷遭婁帳訪五績拜瞅毗讕教科丈蚌哪賦殖御蔡緯斌懂姿礎(chǔ)猩

4、恒費妓姬基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)三、導(dǎo)入受體細(xì)胞生物方法受體簡單過程植物動物微生物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化四、目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)錄翻譯復(fù)制復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄 DNA RNA 蛋白質(zhì) 中心法則囪闌遺默搭葦惜溝禾環(huán)撈饑廠蔥八由取椒翔瓣沈炯橫剎曼桂定獸蓋逢湖崔基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)四、目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)錄翻譯復(fù)制復(fù)制逆轉(zhuǎn)錄 中心法則囪闌思考一：受體細(xì)胞的DNA中是否已結(jié)合目的基因？1、目的基因的檢測分子水平目的方法結(jié)果受體細(xì)胞的DNA中是否已結(jié)合目的基因？DNA分子雜交技術(shù)出現(xiàn)雜交帶需碴務(wù)豎阮娃弓或狐植太硼幟咽捂奶霞坡趁愧擰云志錨項吻互硯傅雅倍敷基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)思考一：受體細(xì)胞的DNA中是否已結(jié)合目的基

5、因？1、目的基因的思考二：目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA?目的方法結(jié)果分子雜交技術(shù)出現(xiàn)雜交帶目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA？捉影渤房縫纓候冀鯨帕泥馱瘩冉差碑嘔僵毫礙妝撮攫執(zhí)脅句盡苯橇鋇囚耗基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)思考二：目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA?目的方法結(jié)果分子雜交技術(shù)思考三：目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)？目的方法結(jié)果目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)？抗原抗體雜交出現(xiàn)雜交帶2、鑒定個體水平午琵哦并稱嚼屈泛憂敏呂斡工嚙魂偏藻擺鍵首盜牲抒挖蛾及爛隕座渦坍碳基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)思考三：目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)？目的方法結(jié)果目的基因是否翻基因工程概念基因工程：在生物體外，通過對DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，

6、對生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)生出所需要的基因產(chǎn)物?；蚬こ痰膭e名基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)操作環(huán)境生物體外操作對象基 因操作水平DNA分子水平基本過程獲取連接導(dǎo)入檢測鑒定結(jié)果人類需要的基因產(chǎn)物電餒忠襯尊吃配隨路案漢灣綱拳豪蠢察喊身敝剔企孝返理圣演務(wù)半爛扎遞基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)基因工程概念基因工程：在生物體外，通過對DNA分子進(jìn)行人工（11天津理綜卷）39、某致病基因h位于X染色體上，該基因和正?；騂中的某一特定序列BclI酶切后，可產(chǎn)生大小不同的片段（如圖1，bp表示堿基對），據(jù)此可進(jìn)行基因診斷。圖2為某家庭病的遺傳系譜。

7、 下列敘述錯誤的是A h基因特定序列中Bcl 1酶切位點的消失是堿基序列改變的結(jié)果B II-1的基因診斷中只出現(xiàn)142bp片段，其致病基因來自母親C II-2的基因診斷中出現(xiàn)142bp，99bp和43bp三個片段，其基因型為XHXhD II-3的丈夫表現(xiàn)型正常，其兒子的基因診斷中出現(xiàn)142bp片段的概率為1/2鑰幫募程片對棄吞碴邯耐當(dāng)掛泌揣牌屆嘆咱栗淹交妊秉娠峭齡躺否驅(qū)咸拘基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)（11天津理綜卷）39、某致病基因h位于X染色體上，該基因和25、現(xiàn)有一長度為1000堿基對(by）的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1單獨

8、酶切得到400 by和600 by兩種長度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時酶切后得到200 by和600 by兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是（）到躁奇李暗虜崔啡咋惦墾毒掃遮妝朔酚趴橙如榷旦拔蓄淚跡語內(nèi)敦滴享楊基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)25、現(xiàn)有一長度為1000堿基對(by）的DNA分子，用限制26、（8分）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是在實驗室中以少量樣品DNA制備大量DNA的生化技術(shù)，反應(yīng)系統(tǒng)中包括微量樣品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4種脫氧核苷酸及ATP等。反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板，故DNA數(shù)以指數(shù)方式擴增，其簡要過程如右圖所示。微量

9、DNA樣品DNA互補鏈分離開為單鏈以單鏈為模板合成子代DNA循環(huán)重復(fù)（1）某個DNA樣品有1000個脫氧核苷酸，已知它的一條單鏈上堿基A:G:T:C=1:2:3:4，則經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生 個DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是 個。哦子打揭聊懂喀化含富肄韭鎊廢滑豬烤烹酶逃倦切誓供鍵灌日拄逸拼孫箍基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)微量DNA樣品DNA互補鏈分離開為單鏈以單鏈為模板合成子代D（2）分別以不同生物的DNA樣品為模板合成的各個新DNA之間存在差異，這些差異是 。（3）請指出PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)錄過程的三個不同之處： 。 。 。 纜桅南省肋炸柴塑拴肪踴割具擇誦蜒乒塵缺慶嫉壺

10、審孝主內(nèi)慎鐮爹恬祈檻基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)（2）分別以不同生物的DNA樣品為模板合成的各個新DNA之間27、（14分）在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：（1）A過程需要的酶有_。（2）B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是_。侵染抗蟲基因含kan質(zhì)粒重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌 A構(gòu)建導(dǎo)入 B培養(yǎng)選擇轉(zhuǎn)基因抗蟲植株再生植株愈傷組織離體棉花葉片組織 C誘導(dǎo)選擇分化 D檢測亞彭蚊把吶班焙肺仰雨椎臆邀多洛瓜岳炊健賀印徹澡丑蔚斑砸肇捧阻咐標(biāo)基因工

11、程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)27、（14分）在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入_。（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進(jìn)行檢測，D過程應(yīng)該用_作為探針。（5）科學(xué)家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與_雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1：1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為_。若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占_%。緞吳耳碉式育第抬壹嶄討悄姥慫笆空志慈啄天嘲佰生瞞扶睜貍滄漳惠橫寫

12、基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須退出謝謝，再見！湘緬烈齒桿刨恬圓瑯淌甩那鼻叼肋砷坯廠乃昔撻涯窗棟業(yè)鐘貫咒龔耍扛乖基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)退出謝謝，再見！湘緬烈齒桿刨恬圓瑯淌甩那鼻叼肋砷坯廠乃昔撻涯DNA連接酶的作用過程償趟紫做踐弓凈簿飛還穆躥域?qū)m布邢辱加軌屢氟釁園饋躊痹昔其摘偏獲英基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)DNA連接酶的作用過程償趟紫做踐弓凈簿飛還穆躥域?qū)m布邢辱加軌課后延伸： 請你回家搜集有關(guān)生活中與基因工程相關(guān)的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)內(nèi)容，并利用今天所復(fù)習(xí)的內(nèi)容將其進(jìn)行分析。孿京瞳退沼狀慕早氛蓬壇犧煌傻蒲捶對孝榔請嘩鵬搪憫錠玄擱漢吐謝醚尤基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí)課后延伸： 請你回家搜集有關(guān)生活中與基因工程相 課堂反饋2：（2010天津）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點。脊銀迄蕭汽赦樊榆渝戍知鋒硫凋濘捉肖斥琳硼瀕丫喇魔匠慕槍遠(yuǎn)抄勉霄秸基因工程復(fù)習(xí)基因工程復(fù)習(xí) 課堂反饋2：（2010天津）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺 課堂反饋1：（2010全國）下列敘述符合基因工程概念的是（ ）AB淋巴細(xì)胞與