(整理)HE4的臨床應用課件

1、(最新整理)HE4的臨床應用2021/7/261(最新整理)HE4的臨床應用2021/7/261新的卵巢癌標志物HE4的臨床應用2021/7/262新的卵巢癌標志物HE4的臨床應用2021/7/262主要內容第一部分：概述1、腫瘤標志物的定義、分類2、腫瘤標志物的實驗室檢測3、腫瘤標志物檢測的應用原則第二部分：HE4的臨床應用1、卵巢癌研究現狀2、HE4的生物學特性3、HE4臨床應用進展3、HE4參考值調查及應用評價2021/7/263主要內容第一部分：概述2021/7/263思考題1、腫瘤標志物的定義2、請寫出敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值的計算公式3、HE42021/7/264思考

2、題1、腫瘤標志物的定義2021/7/264一般腫瘤細胞在癌前病變時，會產生表達腫瘤異常蛋白質，多數腫瘤從癌前病變發(fā)展到0.5 cm 以上的占位性病變需要 510年的時間。如果能夠在這段時間內運用腫瘤標志物檢測技術，早期檢測到患者血液中腫瘤所表達的異常蛋白質，就可以早期發(fā)現、早期診斷，并獲得早期治療的良好效果。概述2021/7/265一般腫瘤細胞在癌前病變時，會產生表達腫瘤異常蛋白質，多數腫瘤人們對腫瘤標志物的檢測寄予了極大的希望。那么腫瘤標志物測定能否達到早期診斷的目的？能否對一般人群進行篩查？其臨床意義到底有多大？評價有多高？目前對腫瘤標志物在腫瘤診斷中的作用認識和評價不一致。概述2021/

3、7/266人們對腫瘤標志物的檢測寄予了極大的希望。那么腫瘤標志物測定能腫瘤標志物（ tumor marker ，TM）是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞的基因表達而合成分泌的或是由機體對腫瘤反應而異常產生和/或升高的,反映腫瘤存在和生長的一類物質，它包括蛋白質、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產物等。TM存在于腫瘤患者的血液、體液、細胞或組織中，可用生物化學、免疫學及分子生物學等方法測定，且對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、觀察療效、監(jiān)測復發(fā)以及預后評價具有一定的價值。腫瘤標志物-定義2021/7/267腫瘤標志物（ tumor marker ，TM）是指在惡性腫腫瘤標志物-歷史1846年

4、本-周蛋白1940年 酸性磷酸酶1960年 免疫測定法1963年 甲胎蛋白1965年 癌胚抗原1975年 單克隆抗體1980年 CA125，PSA，糖類抗原1970-1980年 腫瘤基因及抑癌基因2001年 芯片，神經網絡，多參數分 析，生物傳感器，等Eleftherios P. Diamandis, et al. Tumor Markers: Physiology, Pathobiology, Technology, and Clinical Applications. AACC Press. 2002: p4.2021/7/268腫瘤標志物-歷史1846年 1978年 Herberman在

5、美國國立癌癥研究所召開的 人類腫瘤免疫診斷會上提出了TM的概念1979 英國第7屆腫瘤發(fā)生生物學和醫(yī)學會議 TM 被確認并應用臨床 腫瘤標志物-歷史2021/7/2691978年 Herberman在美國國立癌癥研究所召開的腫腫瘤標志物-分類 1、按腫瘤標志物的來源2、按腫瘤標志物本身的化學性質和免疫學特性3、按存在部位分類由于腫瘤標志物的來源和性質非常復雜至今尚未有一個統一的分類方法，目前的分類方法有：2021/7/2610腫瘤標志物-分類 由于腫瘤標志物的來源和性質、由腫瘤細胞分泌的標志物、宿主反應標志物1、腫瘤的特異性標志物 ，指僅有某一種腫瘤所 產生的特異性物質 。2、腫瘤輔助標志物

6、，在一類組織類型相似而性 質不同的腫瘤發(fā)生時，其水平都有升高 。腫瘤標志物-分類：按來源分類2021/7/2611、由腫瘤細胞分泌的標志物、宿主反應標志物1、腫瘤的特.由腫瘤細胞分泌的標志物）分化抗原標志物）胚胎抗原標志物（AFP、CEA等）糖脂或糖蛋白類 (CA19-9、CA15-3、CA242等）。）同工酶類標志物（NSE,PAP,CK-BB等） 5）激素類標志物（HCG,ACTH等） 6）腫瘤相關抗原（PSA，TPA等） 7）基因類標志物（P53、C-MYC、BCL2） 8）其它：多胺、唾液酸等腫瘤標志物-分類：按來源分類2021/7/2612.由腫瘤細胞分泌的標志物腫瘤標志物-分類：按

7、來源分.宿主反應標志物 血清鐵蛋白、免疫復合物、同工酶、 白細胞介素受體、腫瘤壞死因子等 SF、-MG、IL-2R、TNF腫瘤標志物-分類：按來源分類2021/7/2613.宿主反應標志物腫瘤標志物-分類：按來源分類2021蛋白類標志物糖類標志物酶類標志物激素類標志物基因類標志物腫瘤標志物-分類：按性質分類2021/7/2614蛋白類標志物腫瘤標志物-分類：按性質分類2021/7/臨床常用腫瘤標志物甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）2-微球蛋白（ 2-MG）鐵蛋白（SF）細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）鱗狀上皮癌相關抗原（SCC-Ag）前列腺特異抗原（PSA）組織多肽抗原（TPA）糖

8、類抗原（CA50、CA125、CA15-3、 CA199、CA242、CA72-4）神經元特異性烯醇化酶（NSE）前列腺酸性磷酸酶（PAP）激素類腫瘤標志物(-HCG、ACTH)蛋白類腫瘤標志物糖脂類腫瘤標志物酶及同工酶類腫瘤標志物激素類腫瘤標志物2021/7/2615臨床常用腫瘤標志物甲胎蛋白（AFP）蛋白類腫瘤標志物糖脂類腫腫瘤標志物-分類：按存在部位分類組織腫瘤標志物血漿/血清腫瘤標志物2021/7/2616腫瘤標志物-分類：按存在部位分類組織腫瘤標志物2021 組織腫瘤標志物：位于細胞膜上或細胞內 1、分化標志,激素受體：如 ER, PR2、增殖標志：端粒酶，生長因子及其受體，CD 抗

9、原3、轉移潛在性標志：蛋白酶，基因產物，粘附因子4、癌基因及抗癌基因：myc，H-ras，P53，等腫瘤標志物-分類：按存在部位分類2021/7/2617 組織腫瘤標志物：位于細胞膜上或細胞內腫瘤標志物-血漿/血清腫瘤標志物1、胚胎類抗原；如 CEA, AFP2、腫瘤相關糖脂及糖蛋白 糖決定簇：CA19-9，CA242 上皮粘蛋白：CA15-3 糖蛋白：CA125, PSA3、激肽，酶，蛋白等 激肽：ACTH，GH 酶：NSE 蛋白：B-微球蛋白，CYFRA-21-1腫瘤標志物-分類：按存在部位分類2021/7/2618血漿/血清腫瘤標志物腫瘤標志物-分類：按存在部位分類2根據示蹤劑的不同可分

10、為1、化學發(fā)光免疫分析2、放射免疫分析3、酶免疫分析：4、金標記免疫分析(免疫學抗原抗體反應 + 物理吸附)基本原理：示蹤物的標記技術+免疫學技術腫瘤標志物-實驗室檢測：標記免疫學2021/7/2619根據示蹤劑的不同可分為基本原理：示蹤物的標記技術+免疫學技術標記免疫技術-酶免法（EIA）優(yōu)點費用較低 ，應用較廣固相分離干擾小無放射污染試劑有效期長有酶標儀即可開展缺點需要孵育結果受環(huán)境及人為因素影響2021/7/2620標記免疫技術-酶免法（EIA）優(yōu)點2021/7/262標記免疫技術-發(fā)光法優(yōu)點標記物分子小，穩(wěn)定性好，發(fā)光強度高，時間長高靈敏度,最高檢測限值可達10-15g/ml-10-1

11、8g/ml標準化程度高, 快速、簡便、重復性好無放射污染缺點儀器昂貴檢測成本高封閉系統，開展項目受試劑供應的制約2021/7/2621標記免疫技術-發(fā)光法優(yōu)點2021/7/2621其它檢測技術：蛋白芯片/基因芯片具有高通量、大信息量的特點主要應用于藥物篩選，基因測試，基因定位等方面蛋白芯片在臨床應用尚需時日產業(yè)化仍然有技術障礙目前基因芯片主要用于研究2021/7/2622其它檢測技術：蛋白芯片/基因芯片具有高通量、大信息量的特點2免疫測定法的臨床特性敏感性陽性結果在腫瘤患者中的比例 敏感性 =特異性在非腫瘤患者個體中(如健康人或良性疾病患者),陰性實驗結果的比例 特異性 =真正陽性結果數患病人

12、群總數真正陰性結果數對照組人群總數2021/7/2623免疫測定法的臨床特性敏感性真正陽性結果數患病人群總數真正陰性免疫測定法的臨床特性預測值（Predictive Value） 陽性預測值：在陽性結果的病人中，癌癥存在的可能性 PPV 陰性預測值：在陰性結果病人中, 非癌癥存在的可能性 NPV=真正的陽性結果數 / 陽性結果總數真正的陰性結果數 /陰性結果總數2021/7/2624免疫測定法的臨床特性預測值（Predictive Value 濃度腫瘤患者 真陰性 真陽性界值假陽性假陰性正常人群敏感性 = TP/(TP+FN)特異性 = TN/(TN+FP)免疫測定法的臨床特性陽性預測值 =

13、TP/(TP+FP)陰性預測值 = TN/(TN+FN)2021/7/2625 濃度腫瘤患者 真陰性 理想的腫瘤標志物特異性100%靈敏度100%器官特異性與腫瘤大小或分期有關能進行療效監(jiān)測與預后有關具有可靠的預測價值 陳允碩.中華醫(yī)學檢驗雜志2000年;23(1)至今沒有任何腫瘤標志物能滿足所有這些標準但如正確合理使用，仍有很大臨床價值，關鍵是要正確評價和應用。 2021/7/2626理想的腫瘤標志物特異性100%陳允碩.中華醫(yī)學檢驗雜志20影響TM免疫測定結果的因素體內因素 ： -肝、腎功能異常致AFP，CEA升高 -強烈的治療作用(手術、放療、化療)和連續(xù)的細胞死亡 -腫瘤部位供血障礙

14、-藥物 -存在嗜異性抗體 -抗原異質性體外因素 -血液的稀釋作用 -污染 ：唾液污染致SCC升高；溶血致NSE升高試劑盒因素 -使用的抗體作用位點不同 -HOOK效應陳允碩.中華醫(yī)學檢驗雜志2000年,23(1). 2021/7/2627影響TM免疫測定結果的因素體內因素 ：陳允碩.中華醫(yī)學檢驗雜腫瘤標志物臨床檢測的基本原則腫瘤標志物的檢測能否達到早期診斷的效果？在人群中進行普查或篩查的價值？其臨床意義如何解釋？怎樣規(guī)范與合理應用？目前存在諸多爭議。2002年至2004年時，中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會腫瘤標志物專家委員會分別召開3次專家研討會，起草制定了“腫瘤標志物臨床檢測的基本原則（建議稿）。2

15、021/7/2628腫瘤標志物臨床檢測的基本原則腫瘤標志物的檢測能否達到早期診斷TM臨床檢測的基本原則1、TM對腫瘤的輔助診斷價值：2、TM的器官定位價值：3、TM在判斷腫瘤的大小和臨床分期的價值：4、 TM在腫瘤監(jiān)測中的價值：5、 TM的聯合檢測原則：6、 同一患者在治療前后及隨訪中，應采用同一種方法 和試劑；在更換檢測方法和試劑時，應作比對。 7、應用TM對高危人群進行篩查時應遵循的原則： 2021/7/2629TM臨床檢測的基本原則1、TM對腫瘤的輔助診斷價值：2021TM臨床檢測的基本原則 治療后TM濃度變化，常有三種類型： （1）TM濃度下降到參考范圍，提示腫瘤治療有效。 （2）TM

16、濃度下降但仍持續(xù)在參考范圍以上，提示有 腫瘤殘留和/或腫瘤轉移。 （3）TM濃度下降到參考范圍一段時間后，又重新升 高，提示腫瘤復發(fā)或轉移。TM濃度變化對腫瘤的療效判斷價值：2021/7/2630TM臨床檢測的基本原則 治療后TM濃度變化，常有三種類型：T療效觀察可參照下列標準： 無效： TM濃度與治療前相比下降 50 改善： TM濃度與治療前相比下降50 有效： TM濃度與治療前相比下降90 顯效： TM濃度下降至臨界值以下。TM臨床檢測的基本原則2021/7/2631療效觀察可參照下列標準：TM臨床檢測的基本原則2021/7/術后腫瘤標志物水平的變化02550751001251501752

17、002252500369121518212427術后時間（月）患者D患者C患者B患者A正常水平手術 化療32腫瘤標志物水平2021/7/2632術后腫瘤標志物水平的變化025507510012515017TM臨床檢測的基本原則TM的定期隨訪原則： 惡性腫瘤治療結束后，應根據病情對治療前升高的TM作定期隨訪監(jiān)測。不同的TM半壽期不同，所以監(jiān)測的時間和周期也不同。 2021/7/2633TM臨床檢測的基本原則TM的定期隨訪原則：2021/7/26主要腫瘤標志物經手術后半壽期腫瘤標志物半壽期參考范圍CEA34天5ng/mLCA19-98.5天37UmlAFP45天10.9ng/mLPSA2.33.2

18、天4ng/mLHCG1220小時2.9mIU/mLCA15-3815天28U/mlCA1254.8天35U/mlSCC20分1.5g/LCYFRA21-14天80% 晚期卵巢癌病人水平升高也見于卵巢癌臨床前期無癥狀患者CA125與超聲檢查聯合使用能提高檢測特異性和陽性預測值CA125 的局限性良性婦科疾病患者也有CA125 水平升高某些其它惡性腫瘤患者也有CA125 水平升高檢測I 期卵巢癌的靈敏度較低CA1252021/7/2647為卵巢癌檢查常用標志物CA1252021/7/2647其它CA125升高的情況良性平滑肌瘤 子宮內膜異位原發(fā)性免疫缺陷病 懷孕出血性囊腫肝病或充血性憩室炎 惡性結

19、腸癌乳腺癌胰腺癌膽管癌肝癌肺癌子宮內膜癌2021/7/2648其它CA125升高的情況良性惡性2021/7/2648Cancer Antigen 125（ CA125）Bast等人在1981年用卵巢癌細胞株OVCA433免疫小鼠，通過雜交瘤技術獲得單克隆抗體（monoclonal antibody，McAb）OC125，該抗體可識別卵巢癌相關抗原CA125，用這種單克隆抗體制備的試劑盒隨后用于卵巢癌的臨床監(jiān)測。2001年Lloyd研究小組克隆了CA125抗原，證實CA125是含有5797個堿基對的跨膜糖蛋白MUC16，定位于染色體19p13.2區(qū)。正常人血清CA125（RIA）的陽性臨界值為3

20、5ku/L。二十多年來，CA125作為上皮性卵巢癌標志物，在臨床上得到廣泛應用 2021/7/2649Cancer Antigen 125（ CA125）202HE4是卵巢癌的一種常見標志物血清HE4 是卵巢癌的早期診斷標志物HE4 和CA125 組合有助于預報匿患卵巢癌的風險性2021/7/2650HE42021/7/2650HE4的生物學特性HE4：人類附睪蛋白4（Human epididymis protein 4）1、基因：WFDC2，編碼蛋白為含有4個2硫鍵核心的酸性乳清蛋白，屬于Whey酸性蛋白家族。2、最初在人的附睪上皮細胞中被發(fā)現3、可能具有抗蛋白酶活性目標蛋白酶尚未確認4、在正常的附睪中與精子成熟相關5、在腫瘤的發(fā)展中可能具有抗炎作用2021/7/26