梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷課件

1、梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷歷史的回顧性病是一個(gè)歷史悠久的疾病，多數(shù)認(rèn)為梅毒是年由印度傳入我國(guó)廣東嶺南。梅毒是一個(gè)曾經(jīng)廣泛流行的性病，解放初期，估計(jì)的性病（主要是梅毒）患者約為萬。年之后，全國(guó)逐漸形成了一個(gè)“四級(jí)”皮膚性病防治體系。年，實(shí)現(xiàn)了全國(guó)梅毒基本消滅的目標(biāo)。2”通過閱讀科技書籍，我們能豐富知識(shí)，培養(yǎng)邏輯思維能力；梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷歷史的回顧性病是一個(gè)歷史悠久的疾病，多數(shù)認(rèn)為梅毒是年由印度傳入我國(guó)廣東嶺南。梅毒是一個(gè)曾經(jīng)廣泛流行的性病，解放初期，估計(jì)的性?。ㄖ饕敲范荆┗颊呒s為萬。年之后，全國(guó)逐漸形成了一個(gè)“四級(jí)”

2、皮膚性病防治體系。年，實(shí)現(xiàn)了全國(guó)梅毒基本消滅的目標(biāo)。2歷史的回顧性病是一個(gè)歷史悠久的疾病，多數(shù)認(rèn)為梅毒是年由印度傳性病死灰復(fù)燃上世紀(jì)年代末，改革開放后，性觀念的改變性產(chǎn)業(yè)的出現(xiàn)性生活方式的變化高危人群規(guī)模在不斷的增加，如：暗娼、男男性接觸者、流動(dòng)人口等。性病在我國(guó)死灰復(fù)燃，再度流行。3性病死灰復(fù)燃上世紀(jì)年代末，改革開放后，3445566現(xiàn)況嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題和社會(huì)問題；臨床認(rèn)知水平不夠，實(shí)驗(yàn)室診斷水平參差不齊；實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)各流程存在不規(guī)范現(xiàn)象；新的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)不斷出現(xiàn)而又缺乏了解；部分（如私人診所）醫(yī)療工作存在過度診療或診療不規(guī)范，延誤患者的最佳診療時(shí)機(jī)；無癥狀感染者成為維系性病流行的重要的傳

3、染源。7現(xiàn)況嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題和社會(huì)問題；7如何就目前高發(fā)的性病，尤其是對(duì)梅毒進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)和控制？如何對(duì)高危人群與潛在易感人群進(jìn)行篩查，主動(dòng)發(fā)現(xiàn)無癥狀的性病感染者？如何確定感染的病原體種類？需要完善的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作，包括檢測(cè)能力建設(shè)和質(zhì)量控制8如何就目前高發(fā)的性病，尤其是對(duì)梅毒進(jìn)行有效監(jiān)測(cè)和控制？8性病防治工作的重點(diǎn) 兩個(gè)系統(tǒng) 疫情監(jiān)測(cè)系統(tǒng) 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力和質(zhì)量控制 一個(gè)服務(wù) 規(guī)范化醫(yī)療服務(wù)9性病防治工作的重點(diǎn)91010常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)血清學(xué)檢測(cè)11常用梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法病原學(xué)檢測(cè)11梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類（）非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（非特異性梅毒抗體）（）梅毒螺旋

4、體抗原血清學(xué)試驗(yàn)（特異性梅毒抗體）12梅毒血清學(xué)檢測(cè)分類12非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理梅毒螺旋體一旦感染人體，在周產(chǎn)生抗類脂質(zhì)抗原的和的混合抗體（也叫反應(yīng)素）。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應(yīng)素可長(zhǎng)期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應(yīng)素可以逐漸減少至轉(zhuǎn)陰。13非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理梅毒螺旋體一旦感染人體，在周產(chǎn)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理反應(yīng)素與心磷脂形成抗原抗體反應(yīng)，卵磷脂可加強(qiáng)心磷脂的抗原性，膽固醇可增強(qiáng)抗原的敏感性。心磷脂、卵磷脂與膽固醇都是醇溶性脂類、遇水形成膠體溶液，膽固醇遇水形成結(jié)晶。14非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理反應(yīng)素與心磷脂形成抗原抗體反應(yīng)非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理示

5、意圖15非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)原理示意圖15非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法包括：（）快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)（）甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（)（）性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)（）所用抗原基本成分是：心磷脂、卵磷脂和膽固醇16非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)方法包括：16試驗(yàn)抗原組成與特點(diǎn)抗原組成：心磷脂、卵磷脂、膽固醇抗原需新鮮配制，不能保存待檢血清需滅活需要在顯微鏡下觀察結(jié)果目前主要用于腦脊液檢查，特異性較高是診斷神經(jīng)梅毒的重要依據(jù)，但檢測(cè)陰性不能排除神經(jīng)梅毒17試驗(yàn)抗原組成與特點(diǎn)17試驗(yàn)儀器材料、水平旋轉(zhuǎn)儀、顯微鏡、試劑盒：抗原原液、緩沖液、抗原滴管與針頭、帶直徑為漆圈的玻璃反應(yīng)板、試驗(yàn)結(jié)果判讀用參

6、照涂片、平底玻璃小瓶、生理鹽水18試驗(yàn)儀器材料18試驗(yàn)標(biāo)本采集、血清：新鮮血清或凍存血清；、腦脊液：采用腰穿術(shù)獲得 一般來說，送檢試驗(yàn)的腦脊液應(yīng)采集兩份，一份作腦脊液常規(guī)（白細(xì)胞*、蛋白含量）測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果與另一份用作試驗(yàn)的腦脊液樣本同時(shí)送性病實(shí)驗(yàn)室19試驗(yàn)標(biāo)本采集19試驗(yàn)操作步驟、抗原配制；、玻片定性試驗(yàn)（）滅活：血清標(biāo)本滅活分鐘；（）吸樣：吸取血清放入反應(yīng)板圈中，并涂布于整個(gè)圈內(nèi)；（）加抗原：用標(biāo)準(zhǔn)針頭加入滴抗原；（）反應(yīng)：置水平旋轉(zhuǎn)儀上旋轉(zhuǎn)，次，立即置低倍顯微鏡下觀察。20試驗(yàn)操作步驟20試驗(yàn)操作步驟、定量試驗(yàn)（）加稀釋液：在圈內(nèi)加入生理鹽水；（）樣本稀釋：吸取樣本與第一個(gè)圈內(nèi)生理鹽水混

7、合，混勻后，吸取加至第二個(gè)圈，做系列稀釋，并將稀釋樣本涂布于整個(gè)圈內(nèi)（）同定性試驗(yàn)的（）、（）。21試驗(yàn)操作步驟21試驗(yàn)結(jié)果判讀凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)：鏡下見中等大小或大的絮狀物，液體清亮； ：絮狀物較小，液體較清亮； ：絮狀物較小，均勻分布，液體渾濁； ：抗原復(fù)合物顆粒稍粗； ：抗原顆粒均勻、細(xì)小。定性試驗(yàn)：鏡下可見的絮狀凝集物為陽性，不產(chǎn)生凝集為陰性；定量試驗(yàn)：鏡下可見絮狀凝集物的樣本最高稀釋倍數(shù)為其滴度。22試驗(yàn)結(jié)果判讀22試驗(yàn)臨床意義 腦脊液試驗(yàn)是神經(jīng)梅毒的標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)，陽性結(jié)果可診斷為神經(jīng)梅毒，但陰性結(jié)果不能排除診斷，存在假陰性。23試驗(yàn)臨床意義23試驗(yàn)在試劑成分的基礎(chǔ)上，加入黑色活性碳顆粒，

8、作為凝集的指示物；與待檢血清（漿）中的反應(yīng)素結(jié)合，形成肉眼可見的黑色絮狀物。用白色硬紙片代替玻片；血清不需要滅活；不需要顯微鏡觀察結(jié)果可作定性和定量試驗(yàn)24試驗(yàn)24試驗(yàn)原理和成分以與操作與試驗(yàn)相同用紅色的甲苯胺紅替代了活性碳顆粒，在與待檢血清（血漿）中的反應(yīng)素結(jié)合，形成肉眼可見的紅色絮狀物25試驗(yàn)25快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本類型：血清、血漿、腦脊液樣本保存：短期（周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可存放于；保存一周以上的應(yīng)置于 以下冰箱保存；長(zhǎng)期保存應(yīng)置于 以下冰箱中保存。26快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本類型：血清、血漿、腦脊液2快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本運(yùn)送： 應(yīng)按照生物安全要求進(jìn)行包

9、裝和運(yùn)送。（）第一層容器（如試管） （）第二層容器 （）第三層容器27快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本運(yùn)送：27快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本接收：（）檢查標(biāo)本管有無破損和溢漏；（）核對(duì)標(biāo)本與送檢單；（）檢查標(biāo)本的狀況;（）如標(biāo)本不能接收，怎么處理？（）樣本交接應(yīng)在接收單上雙方簽字確認(rèn)注意：應(yīng)把每一份樣本當(dāng)作強(qiáng)陽性樣本來處置和對(duì)待！28快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)樣本接收：注意：應(yīng)把每一份樣本快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀（要求？）試劑盒：（）含有活性碳的抗原懸液；（）一個(gè)標(biāo)定的號(hào)針頭（）；（）壓印有個(gè)直徑圓圈的封塑環(huán)狀卡片；（）內(nèi)部對(duì)照； 為了保證試驗(yàn)結(jié)果的可靠性，以

10、與每批試劑間的可比性，應(yīng)制備外部對(duì)照血清（）量程移液器和吸頭（）無菌生理鹽水29快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)儀器：水平旋轉(zhuǎn)儀（要求？）29快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)定性試驗(yàn)（）試劑準(zhǔn)備：復(fù)室溫分鐘（）加標(biāo)本：樣本量；（）加抗原：抗原量（滴，約滴）（）反應(yīng)：反應(yīng)時(shí)間（）讀取結(jié)果30快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)定性試驗(yàn)30快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)定量試驗(yàn)抗原滴 抗原滴 抗原滴 抗原滴 抗原滴標(biāo)本（全血）標(biāo)本吸取吸取吸取棄掉標(biāo)本稀釋順序涂布順序31快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)定量試驗(yàn)標(biāo)本標(biāo)本吸取吸取吸取棄快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)結(jié)果判讀判讀凝集反應(yīng)強(qiáng)度分級(jí)： ：圓圈內(nèi)出現(xiàn)中到大

11、的黑色絮狀物，液體清亮； ：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小到中的黑色絮狀物，液體較清亮； ：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小的黑色絮狀物，液體渾濁； ：圓圈內(nèi)僅見碳顆粒集于中央一點(diǎn)或均勻分散。32快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)結(jié)果判讀323333快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)結(jié)果報(bào)告（）定性試驗(yàn)： 出現(xiàn)強(qiáng)度的凝集反應(yīng)報(bào)告陽性（） 不產(chǎn)生凝集反應(yīng)報(bào)告陰性（）（）定量試驗(yàn)： 出現(xiàn)凝集反應(yīng)的血清最高稀釋倍數(shù)為抗體滴度，結(jié)果報(bào)告滴度為：。 也可將每個(gè)稀釋度的反應(yīng)強(qiáng)度依次報(bào)告，如（全血）（）、（）、（）、（）、（）。有利于療效觀察34快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)結(jié)果報(bào)告34快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)質(zhì)量控制（）內(nèi)部對(duì)照： 試劑盒含有的

12、陽性質(zhì)控血清，用于檢查該盒試劑的有效性。 新開試劑，以與每天工作開始前或每批試驗(yàn)開始前，應(yīng)常規(guī)進(jìn)行內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控。（）外部對(duì)照： 可采取自留陽性標(biāo)本用作外部對(duì)照。 新開試劑或更換試劑批次，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行外部對(duì)照試驗(yàn)，用于檢查每批試驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和可比性。35快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)質(zhì)量控制35快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)質(zhì)量控制（）移液器質(zhì)量控制：強(qiáng)檢和定期校準(zhǔn)；（）旋轉(zhuǎn)儀質(zhì)量控制：檢查轉(zhuǎn)速；（）人員的質(zhì)量控制：有經(jīng)驗(yàn)人員的指導(dǎo)下開展工作、雙人核對(duì)結(jié)果；（）操作的質(zhì)量控制：反復(fù)操作、正確操作。36快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)質(zhì)量控制36快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)臨床意義（）產(chǎn)生的抗類脂

13、質(zhì)抗體，未經(jīng)治療可長(zhǎng)期存在；（）經(jīng)適當(dāng)治療后，抗體可以逐漸減少至轉(zhuǎn)為陰性；（）定性試驗(yàn)結(jié)果可用于現(xiàn)癥梅毒診斷；（）定量試驗(yàn)結(jié)果可用于療效觀察與判愈。37快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)臨床意義37快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)梅毒血清反應(yīng)假陽性 即非梅毒患者的梅毒血清反應(yīng)呈陽性的現(xiàn)象。（）技術(shù)性假陽性反應(yīng) 由于標(biāo)本保存不當(dāng)（如細(xì)菌污染或溶血）、試劑質(zhì)量差或過期、或試驗(yàn)操作錯(cuò)誤等所造成。（）生物學(xué)假陽性反應(yīng) 非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)采用的抗原為脂類混合物，所檢測(cè)的抗心磷脂抗體亦可見于其他多種疾病，如自身免疫性疾病、懷孕的婦女，麻風(fēng)病人。38快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)梅毒血清反應(yīng)假陽性38 王

14、千秋教授等檢測(cè)了份血清樣本，假陽性率為（）。假陽性中： 例為有高危性行為的常規(guī)檢查者 例孕婦 皮肌炎、尖銳濕疣、龜頭破潰各例39 王千秋教授等檢測(cè)了份血清樣本，假陽性率為（）。39快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)梅毒血清反應(yīng)假陽性的處理（）技術(shù)性假陽性反應(yīng)：實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的有效性、重復(fù)操作排除人為操作錯(cuò)誤等；（）生物學(xué)假陽性反應(yīng)：應(yīng)做()等試驗(yàn)進(jìn)行排除 單一（非特異性抗體血清試驗(yàn)）結(jié)果陽性，不能作為梅毒的確定型診斷試驗(yàn)結(jié)果，需用梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)進(jìn)行確證。40快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)梅毒血清反應(yīng)假陽性的處理 快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)前帶現(xiàn)象 指非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)中，有時(shí)血

15、清中存在高濃度的反應(yīng)素導(dǎo)致抗原抗體濃度不匹配，出現(xiàn)弱陽性、不典型或陰性反應(yīng)的結(jié)果，而臨床上又像早期梅毒（一期和二期），此時(shí)將血清稀釋后再進(jìn)行試驗(yàn)，可出現(xiàn)陽性結(jié)果的現(xiàn)象。 41快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)前帶現(xiàn)象41快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)血清固定 指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在一定時(shí)期內(nèi)不陰轉(zhuǎn)。 早期的血清固定常與治療不足或不規(guī)則治療、復(fù)發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關(guān)。 病期不明的潛伏梅毒患者血清固定發(fā)生率顯著增高，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)潛伏梅毒的篩查和與時(shí)治療。42快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)血清固定42快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)用于腦脊液的檢測(cè)，近年來也有不少研究。 有

16、作者在對(duì)例各期梅毒患者與例非梅毒神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者的腦脊液進(jìn)行試驗(yàn)并作統(tǒng)計(jì)分析： 腦脊液敏感性為、特異性為 腦脊液敏感性為、特異性為 結(jié)論：可以代替用于神經(jīng)梅毒的診斷。 但是？43快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)用于腦脊液的檢測(cè)，近年來也有不快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（)注意事項(xiàng)、使用無菌生理鹽水；標(biāo)本無嚴(yán)重脂血、溶血和細(xì)菌污染、正確操作，移液器吸頭保證在血清血漿液面以下但不能接觸反應(yīng)紙板；防止產(chǎn)生氣泡；、每批次標(biāo)本數(shù)量不宜過多，防止干燥或血清水分揮發(fā)，、實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查水平旋轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)速，常規(guī)進(jìn)行質(zhì)量控制；、稀釋后攤開液面是順序應(yīng)從低濃度向高濃度進(jìn)行；、反應(yīng)完畢應(yīng)與時(shí)觀察結(jié)果。44快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片

17、試驗(yàn)（)注意事項(xiàng)44梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)原理： 以梅毒螺旋體特異蛋白為抗原，檢測(cè)梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。 感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗(yàn)呈陽性，則患者幾乎終生陽性。45梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)原理：45梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)方法：（）梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)（）（）梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)（）（）梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（）（）梅毒免疫層析法梅毒快速檢測(cè)（）（）熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（）（）化學(xué)發(fā)光免疫分析法（）（）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗(yàn)（）46梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)方法：46 感染梅毒螺旋體后周內(nèi)，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生特異的梅毒螺旋體抗體。具有較高的敏感性和

18、特異性。 是目前公認(rèn)的梅毒抗原血清學(xué)試驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)。4747試驗(yàn)原理圖48試驗(yàn)原理圖48試驗(yàn)儀器耗材（）試劑盒 “”溶解液：用于溶解致敏顆粒“”和非致敏顆?！啊?“”血清稀釋液：用于血清標(biāo)本的稀釋 “”凍干的致敏顆粒 “”凍干的非致敏顆粒 “”陽性質(zhì)控血清：為含梅毒抗體的兔血清制品，最終滴度，（）微量振蕩器（）移液器與吸頭（）保濕盒 49試驗(yàn)儀器耗材49試驗(yàn)檢驗(yàn)流程（）試劑準(zhǔn)備：試驗(yàn)前復(fù)溫分鐘（）加稀釋液（液）（）標(biāo)本稀釋（）加致敏、未致敏顆粒（）混合：微量振蕩器震蕩秒（）反應(yīng)：置濕盒，至少小時(shí)（）觀察凝集反應(yīng)強(qiáng)度50試驗(yàn)檢驗(yàn)流程50試驗(yàn)檢驗(yàn)流程稀釋液標(biāo)本稀釋液稀釋液稀釋液吸取吸取吸取棄掉未致敏

19、粒子致敏粒子51試驗(yàn)檢驗(yàn)流程稀釋液稀釋液稀釋液稀釋液吸取吸取吸取棄掉未致敏粒試驗(yàn)結(jié)果判讀 首先觀察未致敏粒子反應(yīng)孔是否出現(xiàn)凝集（第孔） 如出現(xiàn)凝集，則為無效試驗(yàn)。 如無凝集，則根據(jù)致敏粒子反應(yīng)孔標(biāo)本與致敏粒子是否產(chǎn)生凝集反應(yīng)，判斷結(jié)果。52試驗(yàn)結(jié)果判讀52凝集反應(yīng)分級(jí)：粒子光滑覆蓋整個(gè)孔底，有時(shí)邊緣有折疊；：粒子光滑覆蓋大部分孔底；：粒子光滑聚集覆蓋孔底，周圍有一細(xì)胞環(huán)；：粒子光滑聚集覆蓋孔子，周圍有一明顯細(xì)胞環(huán)；：粒子沉集孔底，中央形成一小點(diǎn)；：粒子緊密沉積孔底中央。53凝集反應(yīng)分級(jí)535454結(jié)果報(bào)告 未致敏粒子反應(yīng)孔不出現(xiàn)凝集，致敏粒子反應(yīng)孔出現(xiàn)凝集反應(yīng)報(bào)告陽性（）； 未致敏粒子與致敏粒

20、子反應(yīng)孔均未出現(xiàn)凝集反應(yīng)報(bào)告陰性（）55結(jié)果報(bào)告55重吸收試驗(yàn) 如標(biāo)本與非致敏和致敏顆粒均產(chǎn)生凝集者，標(biāo)本需作重吸收試驗(yàn)：（）加非致敏顆粒溶液于小試管內(nèi)；（）加入血清充分混勻，置室溫吸收分鐘以上；（）離心分鐘，吸取上清液加入第孔；（）第孔加血清稀釋液；（）孔吸取至孔，混勻后棄去；（）分別加致敏與未致敏顆粒（試驗(yàn)方法同上）56重吸收試驗(yàn)56臨床意義、特異性高（），陽性可確證為現(xiàn)癥或既往感染。、終生陽性，不能作為療效觀察的指標(biāo)。、不能區(qū)分現(xiàn)癥或既往感染。 57臨床意義57梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（） 是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和酶標(biāo)記的單克隆羊抗人免疫球蛋白抗體或酶標(biāo)記

21、的梅毒螺旋體基因重組抗原，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶標(biāo)儀判定陽性反應(yīng)。 可用于大樣本的血清檢測(cè)。 58梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（）58（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)） 試驗(yàn)原理：是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上待檢血清或血漿和酶標(biāo)記的梅毒螺旋體基因重組抗原，形成抗原抗體復(fù)合物與酶標(biāo)記物結(jié)合，用酶標(biāo)儀判定陽性反應(yīng)。 59（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）59（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)） 檢測(cè)流程：與其他檢測(cè)方法相同，按試劑盒說明書進(jìn)行對(duì)照的設(shè)置與檢測(cè)。 結(jié)果判讀及報(bào)告： 、根據(jù)陽性、陰性對(duì)照的值是否在規(guī)定的數(shù)值范圍內(nèi)以判斷試驗(yàn)的有效性，并根據(jù)陽性、陰性值設(shè)定閾值（); 、標(biāo)

22、本值大于或等于值報(bào)告陽性，否則報(bào)告陰性。 60（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）60（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)） 臨床意義： 、同，可用于非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)陽性標(biāo)本的確證試驗(yàn)； 、可用于大樣本篩查檢測(cè)，但陽性標(biāo)本需進(jìn)一步進(jìn)行非梅毒螺旋體血清試驗(yàn)復(fù)檢，確證是否為梅毒現(xiàn)癥感染者； 、如對(duì)結(jié)果存在疑問，可用或其他方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)。 61（雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）61關(guān)于重組抗原 目前已重組的抗原多種，包括：、等。的反應(yīng)性比較高，趨向于將種或種以上重組抗原聯(lián)合使用，綜合其特性，從而獲得更高的特異性和敏感性。62關(guān)于重組抗原 62梅毒螺旋體抗體快速免疫層析檢測(cè)法（） 檢測(cè)原理： 以硝酸纖維素膜為載體

23、，將重組的梅毒螺旋體抗原固定在膜上，待檢標(biāo)本與標(biāo)記的梅毒螺旋體特異性抗原結(jié)合并沿著固相載體遷移，陽性結(jié)果在膜上抗原部位形成重組抗原特異性抗體標(biāo)記的特異性抗原復(fù)合物，顯示出有色條帶，可直接判讀結(jié)果。 63梅毒螺旋體抗體快速免疫層析檢測(cè)法（）63檢測(cè)流程： 全血和血清血漿標(biāo)本檢測(cè)步驟不一樣，但基本流程為： 、加樣 、加緩沖液 、反應(yīng) 、判讀結(jié)果64檢測(cè)流程：64臨床意義：、同、?？刹捎萌獧z測(cè)，適合于單樣本快速篩查；、簡(jiǎn)單、快速，如結(jié)果存在疑問，可用或其他方法進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)。65臨床意義：65注意事項(xiàng)：、如出現(xiàn)無效結(jié)果，應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書，并用新的試條重新測(cè)試，如問題仍然存在，應(yīng)停止使用該批號(hào)產(chǎn)品

24、；、注意試劑盒的儲(chǔ)存條件，以與反應(yīng)的溫度條件；、按試劑盒說明書，反應(yīng)時(shí)間應(yīng)足夠、加樣量也要準(zhǔn)確。66注意事項(xiàng)：66梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)67梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)67梅毒螺旋體熒光抗體吸收試驗(yàn)（） 檢測(cè)原理： 以梅毒螺旋體作為抗原，與經(jīng)吸收劑吸收的梅毒血清抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素（）標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，形成帶有熒光的抗原抗體復(fù)合物，在熒光顯微鏡下螺旋體顯出綠色熒光。 68梅毒螺旋體熒光抗體吸收試驗(yàn)（）68 儀器耗材： 、熒光顯微鏡 、試劑盒（梅毒螺旋體抗原片、吸收劑、熒光素標(biāo)記抗體、陽性對(duì)照血清、緩沖液、固定劑） 、血清稀釋板 、移液器69 儀器耗材：69 檢測(cè)流程： 、

25、血清滅活：將血清標(biāo)本于滅活分鐘，備用； 、血清稀釋：待檢血清用吸收劑稀釋，陽性血清與陰性血清分別用緩沖液和吸收劑稀釋。置 濕盒內(nèi)，分鐘； 、加樣：每個(gè)涂片分別加入稀釋后的血清或?qū)φ?，?濕盒內(nèi)，分鐘； 、洗滌：用液洗玻片次，每次,最后用蒸餾水洗一次，冷風(fēng)干燥； 、加熒光抗體：每個(gè)涂片加按要求稀釋的熒光抗體，置 濕盒內(nèi)，分鐘； 、洗滌：同步驟； 、封片鏡檢：用固定劑封片，讀片。70 檢測(cè)流程：70 對(duì)照設(shè)置： 每次試驗(yàn)必須設(shè)個(gè)對(duì)照涂片，包括： 、緩沖液 、吸收劑 、液稀釋陽性血清 、液稀釋陰性血清 、吸收劑稀釋陽性血清 、吸收劑稀釋陰性血清71 對(duì)照設(shè)置：71 結(jié)果判讀： 對(duì)照與涂片熒光強(qiáng)度應(yīng)符

26、合如下結(jié)果方可判讀試驗(yàn)有效：、陽性對(duì)照（）： 、強(qiáng)陽性對(duì)照（吸收劑）： 、陰性對(duì)照（）： 、陰性對(duì)照（吸收劑）： 、空白對(duì)照（）： 、空白對(duì)照（吸收劑）： 標(biāo)本涂片在熒光顯微鏡下見到不同程度發(fā)綠色熒光的螺旋體報(bào)告陽性（），無熒光或微顯淡綠色熒光報(bào)告陰性（）72 結(jié)果判讀：72 臨床意義： 是梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”，其臨床意義同試驗(yàn)。 腦脊液的試驗(yàn)陰性可排除神經(jīng)梅毒，但特異性不高，存在假陽性。 操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，需要高質(zhì)量熒光顯微鏡和技術(shù)熟練的操作人員，一般不作為常規(guī)臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。73 臨床意義：73梅毒螺旋體抗體化學(xué)發(fā)光免疫分析法（) 檢測(cè)原理： 利用雙抗原夾心法化學(xué)發(fā)光免疫分

27、析原理，采用多種梅毒螺旋體特異抗原包被固相發(fā)光微孔板，用辣根過氧化物酶標(biāo)記相同蛋白抗原作為標(biāo)記抗原，與樣本中梅毒螺旋體 抗體形成雙抗原夾心復(fù)合物后，加入化學(xué)發(fā)光底物，測(cè)定其發(fā)光值（），根據(jù)值判斷結(jié)果74梅毒螺旋體抗體化學(xué)發(fā)光免疫分析法（)74儀器耗材 、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀； 、微孔洗板機(jī)（全自動(dòng)系統(tǒng)無需單獨(dú)配置）； 、微量振蕩器（全自動(dòng)系統(tǒng)無需單獨(dú)配置）； 、恒溫箱： （全自動(dòng)系統(tǒng)無需單獨(dú)配置）； 、移液器、計(jì)時(shí)器； 、新鮮制備的蒸餾水或去離子水；75儀器耗材75手工操作檢測(cè)方法 、試劑準(zhǔn)備：試劑自冰箱中取出，室溫平衡分鐘； 、微孔板條準(zhǔn)備：根據(jù)試劑盒要求設(shè)置的對(duì)照、以與樣本數(shù)量準(zhǔn)備微孔板條；

28、 、加樣：空白對(duì)照孔不加任何對(duì)照和樣本，其余分別按要求加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照及待檢樣本各； 、加酶標(biāo)記物：除空白對(duì)照孔外，其余每孔加入酶標(biāo)記物； 、溫育：用微量振蕩器震蕩混勻，封閉微孔板，置溫育箱；76手工操作檢測(cè)方法76手工操作檢測(cè)方法 、洗板：用稀釋后的洗滌液洗板次，每次洗滌液不少于 ，每次浸泡，最后在干凈的吸水紙上拍干； 、加底物液：每孔加入現(xiàn)配的化學(xué)發(fā)光底物工作液 ，用微量振蕩器震蕩混勻； 、檢測(cè)：室溫靜置（ ）、避光反應(yīng)，立刻測(cè)量各孔發(fā)光值。77手工操作檢測(cè)方法77 結(jié)果判讀與報(bào)告 根據(jù)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)量的發(fā)光值（）自動(dòng)判讀結(jié)果。 標(biāo)本值大于或等于值，報(bào)告陽性； 標(biāo)本值小于值，報(bào)

29、告陰性。的臨床意義同 年有文獻(xiàn)報(bào)道，以作為金標(biāo)準(zhǔn)，其 敏感性： 特異性：78 結(jié)果判讀與報(bào)告78 注意事項(xiàng)、檢測(cè)結(jié)果需要與時(shí)進(jìn)行測(cè)量；、血清標(biāo)本若含少許紅、白細(xì)胞，會(huì)導(dǎo)致假陽性結(jié)果；、黃疸或嚴(yán)重污染的樣本將導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果；、不能用疊氮鈉做樣本的防腐劑；、確保血清樣本離心處理前已充分凝集；、消毒液等強(qiáng)氧化劑能引起發(fā)光底物液發(fā)生反應(yīng)；、嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時(shí)間和溫度，各試劑必須搖勻后使用，且應(yīng)平衡至少分鐘，盡量縮短加樣、加試劑的時(shí)間；、加發(fā)光底物的移液器建議專用。吸頭應(yīng)確保無污染。79 注意事項(xiàng)79梅毒抗體檢測(cè) 細(xì)菌、病毒感染后的早期體液免疫應(yīng)答反應(yīng)，結(jié)果是抗體的產(chǎn)生，在梅毒螺旋體的感染中也不例外。

30、 抗體出現(xiàn)在感染的潛伏期、早期梅毒患者與晚期病人。 抗體不能通過胎盤屏障及完整無損的血腦屏障，因此：若在新生兒血中檢測(cè)到抗體是產(chǎn)前感染的診斷依據(jù)；若在完整無損的血腦屏障的腦脊液中出現(xiàn)，則提示患有活動(dòng)性神經(jīng)梅毒。 80梅毒抗體檢測(cè) 細(xì)菌、病毒感染后的早期體液免疫應(yīng)答反應(yīng)梅毒抗體檢測(cè) 可采用抗單克隆抗體的酶標(biāo)法、蛋白印跡法等進(jìn)行檢測(cè)。 目前測(cè)定抗體的方法的敏感性不高，但檢查到抗體則有助于以下病例的臨床診斷：先天梅毒、早期一期梅毒、晚期梅毒、非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的抗體陽轉(zhuǎn)前的早期感染病人的判愈試驗(yàn)以與有梅毒史或其他螺旋體感染史病人的再感染。81梅毒抗體檢測(cè) 可采用抗單克隆抗體的酶標(biāo)法、蛋白印跡法

31、等 龔匡隆教授等就現(xiàn)用梅毒血清試驗(yàn)臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行了評(píng)估治療前的敏感度 一期梅毒（硬下疳） 二期梅毒 早期潛伏梅毒 正規(guī)治療月后的敏感度 一期梅毒（硬下疳） 二期梅毒 早期潛伏梅毒 82 龔匡隆教授等就現(xiàn)用梅毒血清試驗(yàn)臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)先天梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷方法依據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)診斷查到螺旋體；非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)滴度持續(xù)上升；滴度高于母親倍（高于個(gè)稀釋滴度）；檢測(cè)到抗梅毒的特異性抗體陽性；隨訪個(gè)月觀察抗體的變化（主要是指特異性抗體）。83先天梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷方法依據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)診斷83神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)梅毒螺旋體血清學(xué)檢測(cè)陽性；腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)或蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果異常；腦脊液試驗(yàn)陽性；腦脊液

32、檢測(cè)到抗體。84神經(jīng)梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)84檢測(cè)方法評(píng)價(jià) 各種檢測(cè)方法在臨床應(yīng)用中都存在一定的局限性。、梅毒的臨床診斷：（）特征性皮損中檢測(cè)到梅毒螺旋體；（）血清中檢測(cè)到抗體。、梅毒的表現(xiàn)非常復(fù)雜，感染后可不出現(xiàn)皮損或皮損不明顯，檢測(cè)不到抗原；、感染極早期或窗口期的存在，檢測(cè)不到抗體。85檢測(cè)方法評(píng)價(jià) 各種檢測(cè)方法在臨床應(yīng)用中都存在檢測(cè)方法評(píng)價(jià)血清學(xué)檢測(cè)是目前提供診斷依據(jù)的主要的梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。、但檢測(cè)腦脊液中的抗體時(shí)，更具有臨床診斷價(jià)值。、對(duì)病人進(jìn)行治療效果的隨訪觀察，需根據(jù)或定量試驗(yàn)與抗體滴度的變化進(jìn)行判斷。、抗原血清試驗(yàn)都是檢測(cè)特異性梅毒螺旋體抗體。無論采用哪一種梅毒螺旋體

33、抗原抗體檢測(cè)方法，都不能代替非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的臨床意義。86檢測(cè)方法評(píng)價(jià)血清學(xué)檢測(cè)是目前提供診斷依據(jù)的主要的梅毒實(shí)驗(yàn)室檢8787非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖治療前治療后陽性：陰性：一期：二期：早期潛伏：晚期潛伏：三期：早期晚期88非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖治療前治療后陽性：陰梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖治療前治療后陽性：陰性：一期：二期：早期潛伏：晚期潛伏：三期：早期晚期89梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果解釋示意圖治療前治療后陽性：陰性梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的臨床意義匯總試驗(yàn)結(jié)果主要臨床意義等等現(xiàn)癥梅毒或接受過治療的晚期梅毒排除梅毒感染或極早期梅毒（窗口期）或極晚期非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)假陽性臨床治愈的早期梅毒（既往感染）或極早期梅毒90梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果的臨床意義匯總試驗(yàn)結(jié)果等等現(xiàn)癥梅毒排除梅毒應(yīng)用策略梅毒血清學(xué)檢測(cè)的目的：臨床診療、血液篩查、流行病學(xué)監(jiān)測(cè)、高危人群篩查和干預(yù)等。無論什么目的，都需要根據(jù)非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)這兩類血清學(xué)檢測(cè)方法的特性進(jìn)行結(jié)果判斷。91應(yīng)用策略梅毒血清學(xué)檢測(cè)的目的：臨床診療、血液篩查、流行病學(xué)監(jiān)應(yīng)用策略在實(shí)際應(yīng)用中，可根據(jù)實(shí)際目的選擇任何一類梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法作為篩查；但初篩陽性結(jié)果需經(jīng)另一類梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法復(fù)檢確