呼吸道病毒的微生物學檢驗課件

1、1呼吸道標本的微生物檢查21. 鼻咽拭子 采集時，患者用清水漱口，對光而坐，頭向上仰張大口，用壓舌板輕壓舌根，取無菌鼻咽拭子繞過懸雍垂，在鼻咽腔、懸雍垂后側(cè)反復涂抹數(shù)次小心取出，避免接觸口腔部其他組織。2咽拭子 將拭子用無菌生理鹽水濕潤，用壓舌板輕壓舌根，暴露整個口咽部。先用拭子輕擦扁桃體表面后棄去，再取1支濕潤的拭子輕壓扁桃體，擦取擠壓出的分泌物，或擦取偽膜等病變部位。標本的采集33. 痰液標本 自然咳痰法：受檢者用清水溯口數(shù)次后，用力咳嗽自氣管深部將痰咳出吐至無菌容器中。對痰量少或無痰等咳痰困難者，可霧化吸入45左右的10%氯化鈉水溶液，使痰容易排出。對于幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部氣管，使其

2、咳嗽而取之。標本的采集4血平板巧克力平板中國藍平板 鼻咽拭子 直接涂片染色檢查 革蘭染色異染顆粒初步報告 白喉棒狀桿菌培養(yǎng) 菌落形態(tài)、涂片染色初步報告 生化反應、血清學鑒定檢驗程序常規(guī)培養(yǎng) 百日咳桿菌培養(yǎng) 血清斜面培養(yǎng)基 雞蛋培養(yǎng)基鮑-金培養(yǎng)基亞碲酸鉀血平板純培養(yǎng)菌落形態(tài)、涂片染色5血平板 巧克力平板 中國藍平板 普通培養(yǎng) 普通培養(yǎng) 普通培養(yǎng) 35、1824h 35、1824h 35、1824h痰液標本 肉眼觀察 涂片染色觀察 初步報告 培養(yǎng)前處理 菌落形態(tài)和涂片染色 生化反應、血清學鑒定報告 檢驗程序7 2、涂片檢查：挑選痰液中膿、血性部分涂片，干燥固定后，進行革蘭染色鏡檢。 如發(fā)現(xiàn)形態(tài)典型

3、、有特殊結(jié)構(gòu)，初步可以確定所屬菌屬或種的細菌，可直接報告。 如查見革蘭陽性葡萄狀排列的球菌，可報告“痰液涂片查見革蘭陽性球菌，形似葡萄狀”；痰液標本檢驗操作流程8 如查見革蘭陽性雙球菌、矛頭狀、有明顯莢膜時，可報告“痰液涂片查見革蘭陽性雙球菌，形似肺炎球菌”。 如不能直接確定菌屬或種的細菌，可報告“痰液涂片查見革蘭性菌”。如果痰片中均為鱗狀上皮細胞，則應視為不合格標本。 痰液標本檢驗操作流程10特殊菌的培養(yǎng)1.結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)：無菌吸管加前處理標本2-3滴于羅-琴培養(yǎng)基35孵育至8周，每周觀察一次； 2.嗜肺軍團菌培養(yǎng)：取氣管分泌物接種于活性炭酵母瓊脂(CYE)或費-高(F-G)平板，35、2

4、.5%CO2培養(yǎng)，每天用肉眼觀察，直至第14天；3.百日咳鮑特菌的培養(yǎng)：將標本直接接種在鮑-金培養(yǎng)基上，置有蓋的玻璃缸（缸內(nèi)加少量的水，并在水中加少許硫酸銅，防止細菌及霉菌生長）中，35 孵育35天。 114. 白喉棒狀桿菌培養(yǎng)：將標本接種于血清斜面或雞蛋培養(yǎng)基，35 孵育8-10h觀察；5.流感嗜血桿菌培養(yǎng)：將標本接種于血平板和巧克力平板，并在平板中央接種一直線金黃色葡萄球菌（或四角點種），35、5%-10% CO2環(huán)境孵育18-24h。 6.腦膜炎奈瑟菌培養(yǎng)：將鼻煙拭子接種于已保溫在350C的卵黃雙抗平板上，35、5%-10% CO2環(huán)境孵育1824h。特殊菌的培養(yǎng)12結(jié)果報告1.如發(fā)現(xiàn)可疑致病菌落，則進行涂片染色觀察、生化反應及血清學鑒定得出報告“檢出x x細菌，并報告該菌在培養(yǎng)基中的大慨比例”；2.如無致病菌落生長，則繼續(xù)培養(yǎng)至48h，平板上均為咽部正常菌群生長，無可疑致病菌落生長，則報告“正常菌群生長”；3.如雖在平板上未發(fā)現(xiàn)特定的致病