《體外分析技術》課件

1、體 外 分 析 技 術 體外分析技術In vitro analysis techniques：是指離體的組織、血液或體液等作為生物樣本，在人體外進行的、分析樣本成分或其含量的檢測技術。特點：超微量分析的靈敏度，高強度的特異性以及簡便快速的方法領先于其他定量分析技術。非放射免疫分析 3重點講述體外分析技術臨床應用4放射免疫分析 1免疫放射分析 2第一節(jié) 放射免疫分析免疫技術：以抗原-抗體反應原理為基礎，對樣品中相應抗原或抗體進行檢測。標記技術：將可被探測的示蹤物質用化學方法與化合物連接。標記免疫分析：用可微量或超微量檢測的示蹤劑標記抗原、抗體，檢測免疫反應結果并確定待檢物。第一節(jié) 放射免疫分析基

2、本原理標記抗原（Ag*）和非標記抗原（Ag）與限量抗體(Ab)競爭性結合。Ag*和Ag與Ab親和力相同?；驹硪訟g*Ab復合物為B，未結合的Ag*為F，則B/F或B/(BF)與Ag的量變存在著函數關系，由此可的制作該反應的標準曲線 。第一節(jié) 放射免疫分析基本試劑抗體親和力特異性滴度標記 抗原比活度放射性化學純度免疫活性標準品與被測物免疫活性相同放射化學純度高定量精確抗原抗體復合物分離方法雙抗體法沉淀法雙抗+沉淀吸附法固相分離法第一節(jié) 放射免疫分析室內質量控制1.零標準管結合率2.非特異性結合率3.最低濃度管和最高濃度管差4.標準曲線連線回歸的參數5.E25、E50、E756.質控品7.質控

3、圖第一節(jié) 放射免疫分析 RIA質量控制常用指標靈敏度精密度特異性準確度穩(wěn)定性健全性多次重復測定結果的一致性最小可檢出量測定值與真實值符合程度抗體特異性，交叉反應少有效期保持原有性能不變評價標準品與被測物的免疫活性第一節(jié) 放射免疫分析第二節(jié) 免疫放射分析基本原理將過量的標記抗體與抗原結合，分離結合的標記抗體與未結合的多余的標記抗體，測定復合物的放射性，其活度與待測抗原的量呈正相關。RIAIRMA原理檢測范圍特異性標準曲線靈敏度標記物抗原競爭性結合相對低窄差結合率與測值成反比抗體非競爭結合高寬1-2數量級優(yōu)結合率與測值成正比第二節(jié) 免疫放射分析第三節(jié) 非放射性免疫分析熒光免疫分析化學發(fā)光免疫分析酶

4、標免疫分析電化學發(fā)光分析第三節(jié) 非放射性免疫分析基本原理:以熒光素標記抗體或抗原作為示蹤劑的一種新的免疫分析技術，其原理與ELISA相似。該法既可對液體中的抗原和抗體定量，也可對組織切片中的抗原、抗體進行定性和定量。一般以鑭系元素作為熒光標記（示蹤劑）。熒光免疫分析（FIA）第三節(jié) 非放射性免疫分析基本原理：利用化學或生物發(fā)光系統作為抗原抗體反應的指示系統，借以定量檢測抗原或抗體的方法，發(fā)光物質可直接作為抗原抗體的標記物，也可以游離形式用于催化劑（酶）和輔助劑標記的抗原或抗體的發(fā)光反應中。化學發(fā)光免疫技術（CLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析化學發(fā)光免疫技術（CLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析第三節(jié) 非放射性免疫分析ECLIA 是目前最先進的標記免疫測定技術，是繼RIA、ELISA、FIA、CLIA以后的新一代標記免疫測定技術，具有敏感、快速和穩(wěn)定的特點。直接以Ru(bpy)32+標記，反應時標記物直接發(fā)光，ECLIA 與普通化學發(fā)光的主要差異在于是電啟動發(fā)光反應，循環(huán)及多次發(fā)光，因此ECLIA反應易精確控制，重復性極好。電化學發(fā)光免疫技術（ECLIA ）第三節(jié) 非放射性免疫分析第四節(jié) 體外分析技術臨床應用第四節(jié) 體外