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1、實(shí)驗(yàn)二 改良牛鮑計(jì)數(shù)板使用、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的要求:1.掌握改良牛鮑計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法2.掌握手工顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。1實(shí)驗(yàn)二 改良牛鮑計(jì)數(shù)板使用、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的要求:1(一)改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法 臨指導(dǎo)P7 1. 改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)(見圖)2(一)改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法 臨指導(dǎo)P7233442. 改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的使用方法1)準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板:用綢布擦拭,“推壓”法加蓋玻片2)稀釋的血液:準(zhǔn)確吸取稀釋液和血液,立即混勻。3)充池:充池前充分混勻稀釋液,充池要一次性完成,充液不能過(guò)多、過(guò)少、有氣泡、斷續(xù)充液、充池后移動(dòng)蓋玻片。4)靜置2-3min,待細(xì)胞下沉。 52.
2、改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的使用方法55)顯微鏡計(jì)數(shù):小心移動(dòng);手和顯微鏡鏡頭不能 碰到蓋玻片。6)計(jì)數(shù)原則:逐格計(jì)數(shù); 按一定方向進(jìn)行計(jì)數(shù); 對(duì)壓線細(xì)胞遵循“數(shù)上不數(shù)下,數(shù) 左不數(shù)右”的原則。(一)改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法 65)顯微鏡計(jì)數(shù):小心移動(dòng);手和顯微鏡鏡頭不能(一)改良牛鮑氏771.保證所用器材清潔,勿用手觸膜。2. )充池:充池前充分混勻稀釋液,一次性完成,充液不能過(guò)多、過(guò)少、有氣泡、斷續(xù)充液。3.充池后移動(dòng)蓋玻片。4.計(jì)數(shù)池使用后用蒸餾水沖,紗布輕試,切不可用粗糙織物擦試,以免磨損刻度。3.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板使用注意事項(xiàng)81.保證所用器材清潔,勿用手觸膜。3.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板使用注
3、 (二) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)P141原理 用紅細(xì)胞等滲稀釋液(2.0ml)將血液(10l)稀釋一定倍數(shù),滴入計(jì)數(shù)池,于高倍鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),再換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。9 (二) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)P141原理92.紅細(xì)胞稀釋液(1)Hayem(赫姆氏液)即傳統(tǒng)的紅細(xì)胞稀釋液 成分及作用: 氯化鈉:調(diào)節(jié)滲透壓至等滲 硫酸鈉:提高比密,防止細(xì)胞粘連 氯化高汞:防腐劑 缺點(diǎn):遇高球蛋白血癥患者,球蛋白沉淀使紅細(xì)胞 容易凝結(jié)。(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)102.紅細(xì)胞稀釋液(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)10(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.紅細(xì)胞稀釋液(2)甲醛枸櫞酸鹽成分及作用:枸櫞酸鈉 :抗凝、保持等滲 甲醛:防腐、固定紅細(xì)胞優(yōu)點(diǎn):配
4、制簡(jiǎn)單、紅細(xì)胞不凝集,可保持紅細(xì)胞正常的 圓盤狀數(shù)小時(shí),目前應(yīng)用廣泛。11(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.紅細(xì)胞稀釋液(2)甲醛枸櫞酸鹽11 (3)不含甲醛的枸櫞酸鹽: 成分及作用:31.3g/L的枸櫞酸鈉。 優(yōu)點(diǎn):遇自身凝集素增高者,可使凝集的紅細(xì)胞分散并照常計(jì)數(shù)。 (4)急診時(shí)可用生理鹽水或含1%甲醛的生理鹽水作為紅細(xì)胞稀釋液。 (二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.紅細(xì)胞稀釋液12 (3)不含甲醛的枸櫞酸鹽:(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.3.操作步驟 (1)準(zhǔn)備稀釋液:加紅細(xì)胞稀釋液(赫姆氏液)2.0ml于試管中。 (2)采血:10 l至稀釋液中,立即混勻。 (3)準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板、混勻稀釋液、充池、靜置2-3min。 (4)顯微鏡計(jì)數(shù):高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。 (二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)133.操作步驟(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)134計(jì)算 紅細(xì)胞數(shù)/L =N25/510106200=N1010=N/1001012參考值: 成年男性:4.05.5 * 1012/L; 成年女性:3.55.0 * 1012/L; 初生兒: 6.07.0* 1012/L(二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)144計(jì)算 (二)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)14 5注意事項(xiàng):(1)同白細(xì)胞計(jì)數(shù)(2)紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均,每個(gè)中方格之間相差超過(guò)20個(gè)以上時(shí)要重新充池計(jì)數(shù)。正
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