免疫學(xué)基礎(chǔ)第五章免疫學(xué)的應(yīng)用課件

1、第五章 免疫學(xué)應(yīng)用免疫學(xué)的臨床應(yīng)用有兩個(gè)方面：一是應(yīng)用免疫學(xué)的理論來闡明疾病的發(fā)病機(jī)理及發(fā)展規(guī)律；二是應(yīng)用免疫學(xué)的原理來診斷和防治疾病。第五章 免疫學(xué)應(yīng)用第一節(jié) 免疫學(xué)預(yù)防人工給機(jī)體注入特異性抗原或抗體，使機(jī)體獲得特異性免疫力，達(dá)到預(yù)防疾病的目的稱免疫學(xué)預(yù)防 。用微生物及其代謝產(chǎn)物以及人和動(dòng)物的免疫血清、細(xì)胞等（來自于生物體）制成的供預(yù)防、治療和診斷用的生物制劑稱為生物制品。第一節(jié) 免疫學(xué)預(yù)防一、人工主動(dòng)免疫制劑人工的方法給機(jī)體接種抗原，使機(jī)體獲得特異性免疫力的方法。常用的生物制品主要是疫苗和類毒素。（一）疫苗。（二）類毒素第一代疫苗： 死疫苗、活疫苗。第二代疫苗：亞單位疫苗、基因工程疫苗第三

2、代疫苗： DNA疫苗又稱核酸疫苗。細(xì)菌外毒素經(jīng)0.30.5甲醛處理，失去毒性，保留抗原性制成類毒素。一、人工主動(dòng)免疫制劑（一）疫苗第一代疫苗： 死疫苗、活疫苗。死疫苗與活疫苗的比較死疫苗活疫苗制劑特點(diǎn)死病原體，強(qiáng)毒株活病原體，減毒株接種量及次數(shù) 量較大，23次量較小，1次保存及有效期 易保存，有效期1年不易保存，4數(shù)周免疫效果較差，維持?jǐn)?shù)月2年較好，維持35年甚至更長安全性安全免疫缺陷個(gè)體可發(fā)生感染或致死死疫苗與活疫苗的比較死疫苗活疫苗制劑特點(diǎn)死病原體，強(qiáng)毒株二、人工被動(dòng)免疫制劑人工的方法給機(jī)體注射特異性抗體等制劑，使機(jī)體獲得特異性免疫力稱為人工被動(dòng)免疫。常用的生物制品有：（一）抗毒素 通常是

3、用類毒素多次免疫馬，取其血清分離、純化而制成的。（二）人免疫球蛋白制劑 是從大量的人混合血漿或胎盤血中分離制成，分別稱為人血漿丙種球蛋白和胎盤球蛋白。二、人工被動(dòng)免疫制劑人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫的比較人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫輸入物質(zhì)抗原抗體等免疫效應(yīng)物質(zhì)免疫力產(chǎn)生時(shí)間14周輸入后立即生效免疫力維持時(shí)間數(shù)月數(shù)年23周應(yīng)用特異性預(yù)防緊急預(yù)防或治療人工主動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫的比較人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫輸?shù)诙?jié) 免疫治療一、以抗體為基礎(chǔ)的免疫治療（一）抗感染血清：抗毒素血清、抗病毒血清、人丙種球蛋白等。（二）抗淋巴細(xì)胞丙種球蛋白：（三）單克隆抗體：抗細(xì)胞表面的單克隆抗體 、抗細(xì)胞因子的單克隆抗體、

4、抗體導(dǎo)向藥物治療第二節(jié) 免疫治療二、以細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫細(xì)胞因子療法是應(yīng)用重組細(xì)胞因子對(duì)疾病進(jìn)行治療。例如，IFN-主要用于病毒感染性疾病和腫瘤的治療；IFN-用于治療多發(fā)性硬化癥；IL-2最早被批準(zhǔn)用于腎細(xì)胞瘤、黑色素瘤的治療；應(yīng)用紅細(xì)胞生成素治療腎性貧血等。二、以細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫三、細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療（一）骨髓移植1自體骨髓移植2異體骨髓移植3臍血干細(xì)胞移植（二）免疫效應(yīng)細(xì)胞1同種淋巴細(xì)胞被動(dòng)轉(zhuǎn)移2自體免疫效應(yīng)細(xì)胞過繼免疫療法三、細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療四、免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑免疫增強(qiáng)劑有左旋咪唑、西咪替丁、卡介苗、短小棒狀桿菌、轉(zhuǎn)移因子、免疫核糖核酸、胸腺肽、豬

5、苓、靈芝等。免疫抑制劑有環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤、環(huán)孢素A、FK-506、抗淋巴細(xì)胞血清、抗全T細(xì)胞血清、單克隆抗體、雷公藤、青蒿素等。免疫抑制劑大多有明顯的毒副作用，如骨髓抑制、肝、腎毒性、導(dǎo)致嚴(yán)重感染等。四、免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑第三節(jié) 免疫學(xué)診斷一、抗原或抗體的檢測二、細(xì)胞免疫功能的檢測第三節(jié) 免疫學(xué)診斷一、抗原或抗體的檢測（一）抗原抗體檢測的原理體外抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)肉眼可見反應(yīng)現(xiàn)象。實(shí)踐中常用已知的抗原或抗體來檢測相應(yīng)的抗體或抗原，并可進(jìn)行定性、定量、定位的檢測。一、抗原或抗體的檢測（二）常用的抗原抗體檢測方法1.凝集反應(yīng)2.沉淀反應(yīng)3.免疫標(biāo)記技術(shù)（二）常用的抗原抗體檢

6、測方法1凝集反應(yīng)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)可見的凝集現(xiàn)象稱為凝集反應(yīng)。（1）直接凝集反應(yīng)玻片法：已知的抗體鑒定未知的抗原。試管法：已知的抗原測定患者血清中相應(yīng)抗體的含量。1凝集反應(yīng)（2）間接凝集反應(yīng) 將可溶性抗原吸附在與反應(yīng)無關(guān)的載體顆粒表面做成診斷試劑，再與標(biāo)本中相應(yīng)的抗體結(jié)合，可出現(xiàn)載體顆粒的被動(dòng)凝集現(xiàn)象。（2）間接凝集反應(yīng) 將可溶性抗原吸附在與反應(yīng)無關(guān)的載體顆粒間接凝集抑制試驗(yàn)：將已知的抗體與標(biāo)本可溶性抗原先反應(yīng)，再加入致敏的顆粒，如標(biāo)本中含有抗原就會(huì)結(jié)合、消耗先加入的已知抗體，致敏的膠乳顆粒不再出現(xiàn)凝集，該反應(yīng)稱間接凝集抑制試驗(yàn)。間接凝集抑制試驗(yàn)：將已知的抗體與標(biāo)本可溶

7、性抗原先反應(yīng)，再加入2沉淀反應(yīng) 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一定條件下出現(xiàn)可見沉淀物的現(xiàn)象。沉淀反應(yīng)的應(yīng)用有環(huán)狀法、絮狀法、瓊脂擴(kuò)散法和免疫比濁法。臨床常用的有瓊脂擴(kuò)散法。（1）單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（2）雙向瓊脂擴(kuò)散（3）對(duì)流免疫電泳2沉淀反應(yīng) 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在一單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)示意圖免疫學(xué)基礎(chǔ)第五章免疫學(xué)的應(yīng)用課件3免疫標(biāo)記技術(shù)是用熒光素、酶、放射性同位素等標(biāo)記物標(biāo)記抗體或抗原來進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)。（1）免疫酶技術(shù) 是用酶標(biāo)記抗體或抗原，通過酶催化相應(yīng)底物顯色，觀察顏色的有無或深淺來判定抗原或抗體的有無或含量。3免疫標(biāo)

8、記技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ ELISA） 將抗原或抗體吸附在固相載體表面，加入標(biāo)本，再加入酶標(biāo)記的抗體或抗抗體，洗滌去未結(jié)合的物質(zhì)，加入酶的底物，通過顏色變化來判定抗原或抗體的存在與否及其含量。常用的有間接法和雙抗體夾心法，間接法是檢測抗體最常用的方法，而雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ ELISA） 將抗原或抗體吸附在固相載ELISA試驗(yàn)原理示意圖ELISA試驗(yàn)原理示意圖（2）免疫熒光法 用熒光素標(biāo)記抗體，用熒光抗體浸染標(biāo)本，如有相應(yīng)抗原存在，則熒光抗體與其結(jié)合，不易被洗脫，熒光顯微鏡下可見抗原抗體復(fù)合物呈現(xiàn)熒光，借此可對(duì)標(biāo)本中的抗原進(jìn)行鑒定和定位。常用的有直接法和間

9、接法（2）免疫熒光法 用熒光素標(biāo)記抗體，用熒光抗體浸染標(biāo)本，如有免疫熒光技術(shù)原理示意圖免疫熒光技術(shù)原理示意圖（3）同位素標(biāo)記技術(shù) 用放射性同位素標(biāo)記抗原或抗體來進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，通過測定反應(yīng)物的同位素放射性來反映抗原或抗體的量。常用的方法為放射免疫分析 。（3）同位素標(biāo)記技術(shù) 用放射性同位素標(biāo)記抗原或抗體來進(jìn)行抗原二、細(xì)胞免疫功能的檢測（一）T細(xì)胞數(shù)量檢測通過檢測T細(xì)胞表面的CD（CD3分子）抗原來了解外周血T細(xì)胞數(shù)量和亞群的變化。一般采用免疫熒光法測定。正常外周血淋巴細(xì)胞中熒光陽性細(xì)胞占60%80%。二、細(xì)胞免疫功能的檢測（二）T細(xì)胞亞群檢測T細(xì)胞的不同亞群各有其特有的分化抗原，如CD4Th

10、細(xì)胞, CD8Tc細(xì)胞，因此可用其相應(yīng)的單克隆抗體進(jìn)行檢測。正常值為CD4 占淋巴細(xì)胞數(shù)的55%60%，CD8占淋巴細(xì)胞數(shù)的20%30%；CD4CD8為2:1。（二）T細(xì)胞亞群檢測（三）T細(xì)胞功能檢測1淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是檢測T細(xì)胞功能的體外試驗(yàn)。當(dāng)T細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)受到有絲分裂原 PHA 、ConA 等刺激后能轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，根據(jù)T細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，來判斷機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)。正常值為70%左右。（三）T細(xì)胞功能檢測淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)是檢測T細(xì)胞功能的體外試2檢測細(xì)胞免疫功能的皮膚試驗(yàn)（1）植物血凝素(PHA)皮膚試驗(yàn)PHA是一種常用的非特異性有絲分裂原,皮內(nèi)注射后與注射局部的T淋巴細(xì)胞表面的相應(yīng)絲裂原受體結(jié)合,刺激T細(xì)胞發(fā)生有絲分裂,增殖的淋巴細(xì)胞612小時(shí)在局部出現(xiàn)紅腫硬結(jié), 2448小時(shí)達(dá)高峰。2檢測細(xì)胞