ISO-水質(zhì)流動分析方法對亞甲基藍(lán)活性物質(zhì)（MBAS）的測定

1、國際標(biāo)準(zhǔn) ISO 16265:2009(E)水質(zhì)流動分析方法對亞甲藍(lán)活性物質(zhì)（MBAS）的測定流動注射分析（FIA）和連續(xù)流動分析（CFA）1 概述本方法為亞甲藍(lán)活性物質(zhì)（MBAS）檢測的國際標(biāo)準(zhǔn)，其檢測范圍為0.05mg/L或0.5mg/L至5.0mg/L，適用于多種水樣（如：河水，飲用水，地表水，廢水和浸提液）。陰離子表面活性劑最重要特征是具有亞甲基藍(lán)活性，因此本方法可用于檢測水中的表面活性劑含量（包括羧酸鹽類的陰離子表面活性劑）。同時其他物質(zhì)也可與亞甲基藍(lán)反應(yīng)從而引起結(jié)果偏高，所以統(tǒng)稱陰離子表面活性劑和此類物質(zhì)為亞甲基藍(lán)活性物質(zhì)。根據(jù)具體情況，本方法測定的線性范圍可以調(diào)整，以保證測量的準(zhǔn)

2、確性。2 參考標(biāo)準(zhǔn)本文將涉及以下參考標(biāo)準(zhǔn)，無特殊說明情況下均依據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行ISO 648，實驗室玻璃器皿標(biāo)準(zhǔn)移液管ISO1042，實驗室玻璃器皿刻度容量瓶ISO3696，實驗室分析用水內(nèi)容和實驗方法3干擾以下是可能干擾本方法的物質(zhì)：陽離子化合物能夠與亞甲基藍(lán)中的活性物質(zhì)形成強(qiáng)離子對。腐殖酸濃度大于20mg/L。具有表面活性的物質(zhì)（如 非亞甲基藍(lán)表面活性劑濃度大于50mg/L時）具有強(qiáng)烈還原性質(zhì)的物質(zhì)，可使亞甲基藍(lán)褪色（如S2- SO32- S2O32- OCl-）此類物質(zhì)需前處理（如用H2O2）除去。高濃度的無機(jī)陰離子（如硝酸根，氯離子，溴離子）可引起陽性干擾可與顯色劑形成有顏色的化合物并能

3、夠被氯仿萃取出的物質(zhì)（不包括亞甲基藍(lán)活性物質(zhì)）測定前需過濾樣品以除去大于100m的不溶物。否則這些不溶物質(zhì)將造成蠕動泵管的損壞！當(dāng)必須過濾時，有可能會造成檢測結(jié)果的改變。如果樣品中含有顏色，可采用與亞甲基藍(lán)混合和不與亞甲基藍(lán)混合的比對的方式解決，其計算的結(jié)果通過計算后可得到比較。樣品中MBAS物質(zhì)含量大于5.0mg/L時，需要提前稀釋4原理 在流動注射系統(tǒng)中，樣品與堿性亞甲基藍(lán)溶液混合，樣品中的某類物質(zhì)（如 陰離子表面活性劑）可與其形成具有顏色的離子對物質(zhì)。這些離子對物質(zhì)可被三氯甲烷萃取出。三氯甲烷有機(jī)相再與酸性亞甲基藍(lán)溶液混合反應(yīng)，最后進(jìn)入分光光度計在650nm10nm波長下進(jìn)行檢測。5試劑

4、除特殊提到外，所有的試劑均為分析純度5.1 水 采用ISO3696中的1級水5.2 氫氧化鈉試劑，NaOH5.3 四硼酸鈉，Na2B4O710H2O5.4 磷酸二氫鈉，NaH2PO4H2O5.5 磷酸二氫鉀，KH2PO4H2O5.6 硫酸，H2SO4 (H2SO4)=1.84g/mL5.7 鹽酸，HCl (HCl)=1.18g/mL5.8 亞甲基藍(lán),C16H18N3SCl2H2O5.9 甲醇，CH3OH5.10 乙醇，C2H5OH w96%5.11 三氯甲烷，CHCl3三氯甲烷可在陰暗處保存3個月，使用前需要通入氦氣或超聲除氣5.12 十二烷基硫酸鈉，CH3(CH2)11OSO3Na5.13

5、石油醚5.14 聚乙基十二烷基醚5.15 堿性硼酸溶液溶解15.83g四硼酸鈉（5.3）和3.3g氫氧化鈉（5.2）于800mL去離子水中，再用去離子水（5.1）定容于1L容量瓶中。5.16 亞甲基藍(lán)儲備液溶解0.35g亞甲基藍(lán)與500mL乙醇中（5.10），用去離子水（5.1）定容于1L容量瓶中。此溶液可在室溫下穩(wěn)定6個月。5.17 堿性亞甲基藍(lán)溶液將100mL亞甲基藍(lán)儲備液（5.16）和50mL堿性硼酸儲備液混合（5.15）。用20mL三氯甲烷（5.11）萃取混合液，萃取3次直到有機(jī)相中沒有藍(lán)色物質(zhì)，每次均棄掉有機(jī)相。用25mL石油醚（5.13）萃取水相，除去其中殘留的三氯甲烷。然后用0.

6、45m過濾膜過濾水相并用去離子水（5.1）定容于500mL容量瓶中。5.18 酸性亞甲基藍(lán)溶液將6.8mL硫酸（5.6）與42.5mL亞甲基藍(lán)儲備液混合（5.16）。再加入50g 磷酸二氫鈉（5.4）于混合溶液中。用去離子水（5.1）定容至1L容量瓶中。5.19 三氯甲烷萃取液在1000mL三氯甲烷中加入1mL聚乙基十二烷基醚（5.14）。此溶液可在室溫中保存一周。5.20 進(jìn)樣器清洗液溶解1.1g磷酸二氫鉀（5.5）溶液于800mL水中，用去離子水定容于1L容量瓶中。5.21 甲醇溶液800mL甲醇（5.9）與100mL鹽酸（5.7）混合后，用甲醇定容于1L容量瓶中。此溶液可在室溫儲存6個月

7、。5.22 十二烷基硫酸鈉溶液5.22.1 十二烷基硫酸鈉儲備液，=1000mg/L在1L容量瓶中用去離子水溶解1000mg1mg的十二烷基硫酸鈉（5.12）并定容至刻度。此溶液可儲存在玻璃瓶中，室溫下穩(wěn)定3個月。5.22.2 十二烷基硫酸鈉溶液，=100mg/L在100mL容量瓶中，加入10mL十二烷基硫酸鈉儲備液（5.22.1）并用去離子定容。此溶液可儲存在玻璃瓶中，室溫下穩(wěn)定1周。5.23 工作曲線5.23.1 概述用十二烷基硫酸鈉溶液（5.22.2）配制工作曲線溶液。工作曲線溶液的玻璃容器需清洗干凈。工作曲線點至少需要5個。例如，如果采用6個工作曲線點，可按以下配制工作曲線I和曲線II

8、5.23.2 曲線I（0.05mg/L至0.5mg/L）用標(biāo)準(zhǔn)移液管吸取0.5mL，1mL ，2mL，3mL，4mL和5mL十二烷基硫酸鈉溶液（5.22.2）加入到系列1000 mL容量瓶中并用去離子水定容。5.23.3曲線II（0.5 mg/L至5 mg/L）用標(biāo)準(zhǔn)移液管吸取0.5 mL，1 mL，2 mL，3 mL，4 mL和5 mL十二烷基硫酸鈉溶液（5.22.2）用去離子水定容至系列100mL容量瓶中。這一系列的十二烷基硫酸鈉工作曲線的濃度分別為0.5mg/L，1 mg/L，2 mg/L，3 mg/L，4 mg/L和5mg/L。另外，可配制一個0.25 mg/L點以進(jìn)行每日曲線校正。6

9、 儀器除實驗室通用設(shè)備外，以下為流動注射注意事項：6.1流動注射系統(tǒng)以圖A1所示的流動注射系統(tǒng)為例，其他流動注射系統(tǒng)如符合程序8中的要求也可使用。6.1.1試劑瓶6.1.2低壓蠕動泵系統(tǒng)，需配置配管卡子6.1.3蠕動泵管，包括泵管連接裝置和三通連接裝置，需要盡量小的死體積6.1.4相分離器，能夠?qū)⑺嗪陀袡C(jī)相分離的裝置。如重力分離器。6.1.5帶有流通池的分光光度計，波長范圍為650nm10nm。6.1.6數(shù)據(jù)處理單元，如圖形記錄器，具備數(shù)據(jù)積分功能的數(shù)據(jù)采集裝置；通常以峰高計算。6.1.7自動進(jìn)樣器，必須具備清洗系統(tǒng)以保障分析系列樣品時無殘留效應(yīng)（如配有清洗池的注射系統(tǒng)，可用甲醇/水混合液進(jìn)

10、行清洗）。6.2其他設(shè)備。6.2.1玻璃容量瓶，符合ISO1042，包括100mL,200 mL,1000 mL。6.2.2玻璃移液管，符合ISO640，包括0.5 mL至10 mL。7.取樣和樣品保存樣品應(yīng)保存在玻璃瓶中，在低溫（2至5度）條件下可保存3天。保存更長的時間則需謹(jǐn)慎檢查。一些陰離子表面活性劑可能被樣品中的微生物迅速代謝。所以有必要加入一些穩(wěn)定劑以儲存樣品。保存劑加入能夠保證樣品儲存的時間大于24小時。每升樣品中可加入1%的40%甲醛溶液，這樣可使樣品穩(wěn)定至少4天以上。不要在樣品中加入任何無機(jī)酸。樣品可以采用離心分離的方式除去懸浮物；然而一些表面活性劑可能吸附在懸浮中被過濾掉。8

11、測試流程8.1測試前準(zhǔn)備建立流動注射系統(tǒng)，如6.1（圖1）。運行蠕動泵，使水充滿流路。15分鐘后，將甲醇溶液通入三氯甲烷泵管，將其他泵管從水中移出。5分鐘后，將三氯甲烷泵管通入三氯甲烷。通入酸性亞甲基藍(lán)，幾分鐘后再通入堿性亞甲基藍(lán)。穩(wěn)定系統(tǒng)10分鐘后，等待基線平穩(wěn)，調(diào)整基線歸零。但基線不再有任何波動后，系統(tǒng)可以進(jìn)行樣品的測定。檢測步驟見8.2至8.5清洗管路可采用1比10的次氯酸溶液，每周清洗30分鐘即可。8.2 檢查測試系統(tǒng)8.2.1檢查試劑空白以去離子水為樣品，去離子水取代酸性亞甲基藍(lán)混合。等待基線穩(wěn)定后，測定吸光度。建立最初的流動注射分析體系，再測量其吸光度的變化。如果其吸光度的變化大于

12、0.03cm-1，則表示試劑或水中可能存在一些陰離子表面活性劑的污染物質(zhì)，必須要去除這些干擾才能繼續(xù)測試。如果分光光度計（6.1.5）不能讀取吸光度值，可采用外置式類似的分光光度裝置讀取。8.2.2 靈敏度測試和噪音測試曲線I中的0.05mg/L和曲線II中的2.5mg/L應(yīng)該至少有0.025cm-1的吸光度響應(yīng)值。曲線I中的0.05mg/L和曲線II中的0.5mg/L的信號峰高至少是噪音的三倍。8.3 工作曲線建立一條滿足工作需要的標(biāo)準(zhǔn)曲線（5.23）?？梢苑謩e測定不同范圍的曲線。開始測定工作曲線，調(diào)整輸出信號為零。逐個測定試劑空白和標(biāo)準(zhǔn)工作曲線各點。記錄測量峰值。以相同步驟測定樣品。以IS

13、O8466-1方法繪制工作曲線，計算曲線方程：y=a+b其中y 吸光度測量值，以儀器相關(guān)的單位表示。 濃度，以mg/L，十二烷基硫酸鈉計。a 縱截距，以儀器相關(guān)的單位表示，方程參數(shù)。b 斜率，以儀器相關(guān)單位mg/L表示，方程參數(shù)。8.4 測量結(jié)果用此分析系統(tǒng)（6.1），以測定標(biāo)準(zhǔn)的相同方式測定樣品。如果樣品中被測物含量過高，應(yīng)改變成合適的曲線或者采用稀釋的方法。推薦每測定超過20個樣品時，可使用標(biāo)準(zhǔn)曲線點進(jìn)行校正。如果樣品的濃度過低于或高于使用的曲線，則需要更換曲線。必要時請重做工作曲線。9計算結(jié)果用如下方程（2）計算樣品的質(zhì)量濃度： （2）其中各字母所代表意義與8.4中相同。在定量范圍內(nèi)根據(jù)上式計算樣品濃度。不適用于超過工作曲線定量范圍