細胞免疫學實驗

1、免疫學實驗內(nèi)容提要E花環(huán)實驗淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗2大吞噬實驗3小吞噬實驗4E花環(huán)試驗人外周血T淋巴細胞上能與綿羊紅細胞結(jié)合的受體，稱為E受體，即CD2分子或LFA-2 （淋巴細胞功能相關(guān)抗原-2） ；在一定的試驗條件下，綿羊紅細胞能與該受體結(jié)合形成以T細胞為中心，四周繞以綿羊紅細胞的玫瑰花團，故稱E花環(huán)形成試驗。 TTBSRBCCD2固定、染色固定：取出孵育后的細胞，滴加0.8%戊二醛200l （等體積），輕輕懸浮混勻，4孵育放置20-30min。涂片：向上述細胞懸液中加50l美蘭染液，混勻，靜置5min，取一滴于載玻片上，加蓋玻片。鏡檢鏡檢：淋巴細胞呈藍色，SRBC呈紅色圍繞淋巴細胞形成花環(huán)，凡

2、表面粘附有3個或3個以上SRBC者為花環(huán)形成細胞（即E陽性細胞） 計數(shù)200個淋巴細胞，算出花環(huán)形成百分率，并推測其T淋巴細胞百分率。正常值為：5080%。注意：計數(shù)及搖勻細胞時動作應輕柔，避免打散已形成的花環(huán)結(jié)果E花環(huán)分類Ea-RFC(效應T細胞)：正常值為1535%。 （activated rosette formation cells,A-RFC）。 E-RFC(總和)：正常值為6080%。意義： E-受體為T細胞所特有，是鑒定T細胞的重要標志之一，還用于T細胞的分離。 用于檢測患者外周血中T細胞的比例及數(shù)目，間接反映患者細胞免疫功能。視頻動畫內(nèi)容提要淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗2E花環(huán)實驗1大吞噬

3、實驗3小吞噬實驗4淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）選擇性刺激T細胞增殖；脂多糖（LPS）、葡萄球菌A蛋白（SPA）可刺激B細胞增殖；T細胞、B細胞表面具有抗原識別受體和有絲分裂原受體美洲商陸淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗原理當T淋巴細胞在體外培養(yǎng)時，加入PHA或ConA刺激， T淋巴細胞可轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞，同時伴有DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成的增加，最終導致細胞分裂。根據(jù)其轉(zhuǎn)化率可測定T淋巴細胞的功能，從而反映機體的細胞免疫功能。 DNA合成分化淋巴母細胞刺激物細胞變大細胞漿擴大空泡核仁明顯核染色質(zhì)疏松T淋巴細胞未轉(zhuǎn)化細胞過渡態(tài)細胞淋巴母細胞 轉(zhuǎn)化淋巴細胞的判斷標準細胞類別形態(tài)特征

4、轉(zhuǎn)化的淋巴細胞未轉(zhuǎn)化的淋巴細胞淋巴母細胞過渡型細胞胞體大小（直徑）1020m或更大1216m68m胞 核位 置多偏于一側(cè)，少數(shù)位于中央中央或稍偏多位于中央染 色 質(zhì)疏松，呈粒狀較疏松致密團聚核 仁清晰，可見13個有或無無有絲分裂有時可見無無胞 漿量豐富，核之一側(cè)較寬廣稍寬較少，常呈一窄環(huán)嗜堿性+空 泡常可見有或無無偽 足?？梢娪谢驘o無內(nèi)容提要大吞噬實驗3淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗2E花環(huán)實驗1小吞噬實驗4原理巨噬細胞對顆粒性抗原有強大的吞噬能力。常用細胞型抗原如雞紅細胞、白色念珠菌、酵母細胞等與巨噬細胞孵育，檢測巨噬細胞的吞噬能力。原理16大吞噬試驗雞紅細胞大吞噬細胞對雞紅細胞消化程度分級：級：未消化，

5、雞紅細胞核清晰，著色正常。級：輕度消化，雞紅細胞核模糊，核腫脹，著色淡。級：完全消化，雞紅細胞核溶解，染色極淡。 結(jié)果計算可觀察雞紅細胞的消化程度，以判斷巨噬細胞胞內(nèi)殺傷功能。吞噬百分比吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/所計數(shù)的巨噬細胞總數(shù)（吞噬的未吞噬的）100%吞噬指數(shù)100個巨噬細胞吞噬的雞紅細胞總數(shù)/100個巨噬細胞臨床意義參考值：正常人吞噬百分比為60%65%，吞噬指數(shù)1%左右臨床意義：可作為機體抗腫瘤能力的判斷指標。惡性腫瘤病人吞噬百分比為34%38%。吞噬指數(shù)為0.6%左右。有人報告，食道癌、胃癌、腸癌、乳腺癌以及其它惡性腫瘤患者的吞噬百分比都在45%以下，吞噬指數(shù)也降低。不少患者在術(shù)后有不同程度的回升，提示本試驗也可作為判斷腫瘤療效及預后的一個參考指標。內(nèi)容提要3214E花環(huán)實驗淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗大吞噬實驗小吞噬實驗原理血液中的中性粒細胞通稱小吞噬細胞。有強大的吞噬和消化異物的功能，構(gòu)成機體天然抵抗力。在機體固有免疫和適應性免疫中