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1、苛養(yǎng)菌及人畜共患詳解演示文稿第一頁(yè),共四十五頁(yè)。(優(yōu)選)苛養(yǎng)菌及人畜共患第二頁(yè),共四十五頁(yè)。第一節(jié) 嗜血桿菌屬(Haemophilus)嗜血桿菌屬為一群無(wú)動(dòng)力、無(wú)芽胞、菌體呈球桿狀的革蘭陰性小桿菌,生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求高,培養(yǎng)時(shí)需人工加入新鮮血液(X因子和V因子)才能生長(zhǎng),故稱嗜血桿菌。對(duì)人類有致病意義的種有:流感嗜血桿菌(H.influenzae)、副流感嗜血桿菌(H.parainfluenzae)、杜克雷嗜血桿菌(H.ducreyi)、嗜沫嗜血桿菌(H.aphrophilus)第三頁(yè),共四十五頁(yè)。一、生物學(xué)性狀形態(tài)與染色:菌體短小、兩端鈍圓、革蘭陰性小桿菌。從病灶中新分離的菌株多呈球桿狀或雙球狀,
2、有時(shí)可呈短鏈。在陳舊培養(yǎng)物中呈多形性,有長(zhǎng)桿狀或絲狀體。粘液型菌株有莢膜,有莢膜菌株多伴較強(qiáng)的毒力。痰標(biāo)本涂片革蘭染色(流感嗜血桿菌)第四頁(yè),共四十五頁(yè)。培養(yǎng)特性:需氧或兼性厭氧,初次分離需510%CO2才能生長(zhǎng)良好,營(yíng)養(yǎng)要求苛刻,在加入新鮮血液(含X因子和V因子)的巧克力培養(yǎng)基上經(jīng)24h培養(yǎng),見灰白色、圓形、光滑、半透明、直徑 0.5 1mm小菌落。 部分毒性菌株(b型Hi) 可見粘液型菌落。第五頁(yè),共四十五頁(yè)。X因子V因子X因子是對(duì)熱穩(wěn)定的物質(zhì),存在于血紅蛋白中的一種血紅蛋白衍生物,是一種含鐵的卟啉。它是細(xì)菌合成過(guò)氧化物酶、過(guò)氧化氫酶、細(xì)胞色素氧化酶的輔基,這些酶類提供細(xì)菌氧化還原時(shí)進(jìn)行電
3、子傳遞。V因子是對(duì)熱不穩(wěn)定的維生素B類物質(zhì),存在于血液和某些植物組織中。它是一種脫氫酶的輔酶,在細(xì)菌的呼吸中起遞氫作用。可以根據(jù)細(xì)菌對(duì)XV因子需要的不同進(jìn)行嗜血桿菌屬細(xì)菌的鑒定(見P295表19-1)第六頁(yè),共四十五頁(yè)。培養(yǎng)特性:衛(wèi)星現(xiàn)象:金黃色葡萄球菌和流感嗜血桿菌共同培養(yǎng),由于金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子,可以促進(jìn)流感嗜血桿菌的生長(zhǎng),故在平板上可見金黃色葡萄球菌菌落周圍生長(zhǎng)的流感嗜血桿菌菌落大,而相對(duì)較遠(yuǎn)處的流感嗜血桿菌菌落較小,此現(xiàn)象稱為“衛(wèi)星現(xiàn)象”第七頁(yè),共四十五頁(yè)。衛(wèi)星現(xiàn)象第八頁(yè),共四十五頁(yè)。生化反應(yīng)對(duì)流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌的鑒別常使用吲哚、脲酶、鳥氨酸脫羧酶等試驗(yàn)進(jìn)行(見
4、P296表19-2),由于嗜血桿菌屬細(xì)菌生化反應(yīng)的不穩(wěn)定性,現(xiàn)多采用半自動(dòng)化鑒定。第九頁(yè),共四十五頁(yè)。生化反應(yīng)菌種和生物型吲哚尿素酶鳥氨酸脫羧酶流感桿菌生物型IIIIIIIVVVIVIIVIII副流感桿菌生物型IIIIIIIVVVIVIIVIII第十頁(yè),共四十五頁(yè)。二、臨床意義流感嗜血桿菌:以b型有莢膜株致病為主,以兒童為主,成人較少。在引起肺炎的革蘭陰性菌中本菌占第3位,僅次于銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌。副流感嗜血桿菌:在某些地區(qū)致病情況與流感相似,甚至超過(guò)前者。嗜沫、副嗜沫、溶血嗜血桿菌:上呼吸道常居菌,條件致病。杜克雷嗜血桿菌:軟性下疳的病原菌。第十一頁(yè),共四十五頁(yè)。三、微生物學(xué)檢查(一
5、)標(biāo)本采集 根據(jù)病變部位采集不同標(biāo)本。肺部感染患者應(yīng)盡量減少上呼吸道分泌物的污染。(二)檢驗(yàn)程序:見P297流程圖第十二頁(yè),共四十五頁(yè)。三、微生物學(xué)檢查(三)檢驗(yàn)方法1、直接鏡檢:多用于腦脊液和膿液標(biāo)本的檢驗(yàn),對(duì)呼吸道標(biāo)本一般不采用直接鏡檢方法,總體意義不大。2、分離培養(yǎng):氣體環(huán)境、培養(yǎng)基、XV因子需要、抑菌物質(zhì)(每毫升巧克力瓊脂內(nèi)加萬(wàn)古霉素50ug,桿菌肽300ug,氯林可霉素1ug)、衛(wèi)星現(xiàn)象第十三頁(yè),共四十五頁(yè)。檢驗(yàn)方法X因子V因子需要試驗(yàn)菌 名生長(zhǎng)需要X因子V因子流感副流感流感嗜血桿菌副流感嗜血桿菌第十四頁(yè),共四十五頁(yè)。四、預(yù)防措施對(duì)Hib感染最有效的預(yù)防措施是肌肉注射Hib偶聯(lián)菌苗。
6、芬蘭赫爾辛基于70年代后期在04歲兒童中Hib腦膜炎的發(fā)病率為43/10萬(wàn)。注射上述菌苗后到1991年發(fā)病率降為0。Hib的PRP可與4種蛋白載體(變異性白喉?xiàng)U菌蛋白Oligosaccharide CRM197 protein, HbOC、白喉?xiàng)U菌類毒素Diphtheria toxoids, D、腦膜炎雙球菌外膜蛋白復(fù)合物Outer membrane protein compound, OMPC和破傷風(fēng)桿菌類毒素Tetanus toxoid,T)偶聯(lián),分別構(gòu)成4種類型的偶聯(lián)菌苗:PRP-HbOC、PRP-D、PRP-OMPC和PRP-T。目前至少有25個(gè)國(guó)家將Hib偶聯(lián)菌苗列入兒童的免疫計(jì)劃。
7、Hib偶聯(lián)菌苗價(jià)格較昂貴,限制了它在發(fā)展國(guó)家內(nèi)應(yīng)用,因此有人報(bào)道了一種經(jīng)濟(jì)的接種方案,即是給嬰兒接種1/2或1/3 三針全劑量的Hib偶聯(lián)菌苗,借此替代常規(guī)3針全劑量免疫的接種方案。以替代方案接種后91100的嬰兒仍可達(dá)到保護(hù)性抗體的濃度30.15mg/ml),與3針全劑量的接種方案所產(chǎn)生的結(jié)果相似。若采用替代的接種方案可減少菌苗接種的費(fèi)用,以利于在發(fā)展國(guó)家中推廣應(yīng)用Hib偶聯(lián)菌苗。第十五頁(yè),共四十五頁(yè)。補(bǔ)充資料 軟下疳1:該圖為典型的鏈狀排列的杜克雷嗜血桿菌,用人血液培養(yǎng)后取材涂片,革蘭氏染色陰性,鏈狀排列。第十六頁(yè),共四十五頁(yè)。補(bǔ)充資料軟下疳3:左側(cè)腹股溝部有一個(gè)潛行性較深潰瘍,邊緣不整齊
8、,略呈蛇形,潰瘍基底有膿性滲出物,潰瘍周圍皮膚呈現(xiàn)紫紅色暈。另有三個(gè)豆大、一個(gè)指頭大衛(wèi)星狀潰瘍性病損。病損觸之疼痛。橫痃第十七頁(yè),共四十五頁(yè)。第三節(jié) 鮑特菌屬(Bordetella)百日咳鮑特菌(B.pertussis)俗稱百日咳桿菌副百日咳鮑特菌(B.parapertussis)支氣管敗血鮑特菌(B.branchiseptica)鳥鮑特菌(B.avium)第十八頁(yè),共四十五頁(yè)。一、生物學(xué)性狀(百日咳鮑特菌)形態(tài)染色:革蘭陰性小桿菌,無(wú)芽胞,有莢膜。在液體培養(yǎng)基中可呈短鏈狀存在。培養(yǎng):專性需氧。營(yíng)養(yǎng)要求高,在鮑-金培(bordet-gengou)養(yǎng)基上需3-5天才能長(zhǎng)出可見菌落。生化反應(yīng):見P
9、301表19-5對(duì)抗生素的敏感性:紅霉素首選,其次氨芐青霉素、阿莫西林、利福平、復(fù)方SMZ等。第十九頁(yè),共四十五頁(yè)。二、臨床意義:百日咳鮑特菌是百日咳的病原菌1、疾病分期:卡他期:癥狀無(wú)特異性,與病毒性感冒類似,1-2周,此期傳染性最強(qiáng),采集標(biāo)本陽(yáng)性率最高。痙攣期:以陣發(fā)性劇烈咳嗽為主,1-4周,日平均發(fā)生10-20次(類似雞鳴),但嬰幼兒的咳嗽癥狀可以不明顯,而以合并癥為主,如肺炎、出血、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等?;謴?fù)期:陣咳減輕,完全 恢復(fù)需數(shù)周到數(shù)月。第二十頁(yè),共四十五頁(yè)。痙咳期:咳嗽由單聲咳變?yōu)殛嚳?,連續(xù)十余聲至數(shù)十聲短促的咳嗽,繼而一次深長(zhǎng)的吸氣,因聲門仍處收縮狀態(tài),故發(fā)出雞鳴樣吼聲,以后又是
10、一連串陣咳,如此反復(fù),直至咳出粘稠痰液或吐出胃內(nèi)容物為止。每次陣咳發(fā)作可持續(xù)數(shù)分鐘,每日可達(dá)十?dāng)?shù)次至數(shù)十次,日輕夜重。陣咳時(shí)患兒往往面紅耳赤,涕淚交流、面唇發(fā)紺,大小便失禁。少數(shù)病人痙咳頻繁可出現(xiàn)眼瞼浮腫、眼結(jié)膜及鼻粘膜出血,舌外伸被下門齒損傷舌系帶而形成潰瘍。成人及年長(zhǎng)兒童可無(wú)典型痙咳。嬰兒由于聲門狹小,痙咳時(shí)可發(fā)生呼吸暫停,并可因腦缺氧而抽搐,甚至死亡。此期短則12周。長(zhǎng)者可達(dá)2月。二、臨床意義(補(bǔ)充)第二十一頁(yè),共四十五頁(yè)。二、臨床意義:2、毒素(共有3種)百日咳毒素(PT):該菌的主要毒力因子,與陣發(fā)性劇咳等臨床表現(xiàn)有關(guān)。絲狀血細(xì)胞凝集素(FHA):促進(jìn)病原體與纖毛上皮細(xì)胞粘附。腺嘌呤
11、環(huán)酶毒素(ACT):使吞噬細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度升高從而抑制其氧化活性,使呼吸道粘膜的抵抗力下降。第二十二頁(yè),共四十五頁(yè)。三、微生物學(xué)檢查(一)標(biāo)本采集: 通常在發(fā)病早期(1周內(nèi))采集鼻、咽拭子,做床邊接種或立即送至實(shí)驗(yàn)室,采時(shí)間越遲陽(yáng)性率越低,對(duì)小兒也可用咳碟法。(二)檢驗(yàn)程序:見P302流程圖第二十三頁(yè),共四十五頁(yè)。三、微生物學(xué)檢查(三)直接檢查(無(wú)特異性)DFA直接熒光抗體檢查:可見外周黃綠色螢光,中心暗色的球桿菌,5個(gè)典型形態(tài)者為陽(yáng)性。抗原檢出:用單克隆抗體如ELISA法。PCR法檢測(cè)核酸:目前缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。第二十四頁(yè),共四十五頁(yè)。(四)分離培養(yǎng)培養(yǎng)基:鮑-金培養(yǎng)基或活性炭-馬血
12、瓊脂,培養(yǎng)3-5天可檢出菌落。第二十五頁(yè),共四十五頁(yè)。(五)鑒定依據(jù)革蘭陰性小桿菌,無(wú)動(dòng)力DFA法陽(yáng)性普通血平板或巧克力平板不生長(zhǎng)鮑-金培養(yǎng)基生長(zhǎng)緩慢觸酶陽(yáng)性,氧化酶陽(yáng)性第二十六頁(yè),共四十五頁(yè)。人獸共患病原菌布魯菌屬(小細(xì)菌)鼠疫耶爾森菌(腸桿菌科)土拉熱弗朗西斯菌(小細(xì)菌)鼻疽假單胞菌(假單胞菌)紅斑丹毒絲菌(需氧革蘭陽(yáng)性桿菌)炭疽芽胞桿菌(需氧革蘭陽(yáng)性桿菌)第二十七頁(yè),共四十五頁(yè)。第二節(jié) 布魯菌屬Brceulla P298經(jīng)DNA-DNA雜交證實(shí)只有一個(gè)種,其它均為生物變種。對(duì)人類有致病的生物變種有:牛布魯菌:流產(chǎn)布魯菌羊布魯菌:馬爾他布魯菌豬布魯菌犬布魯菌第二十八頁(yè),共四十五頁(yè)。一、生物
13、學(xué)性狀形態(tài)染色:革蘭陰性小球桿菌,革蘭染色復(fù)染效果不好需延時(shí)至3min。培養(yǎng)特性:需氧,初次需5%-10%CO2。營(yíng)養(yǎng)要求高。生化反應(yīng):觸酶、氧化酶陽(yáng)性(對(duì)人類有致病者)第二十九頁(yè),共四十五頁(yè)。二、臨床意義該病原菌引起人類布魯菌病,可以通過(guò)皮膚、呼吸道、消化道進(jìn)入人體感染。感染人群多與動(dòng)物性食品、毛皮加工或食用未消毒的牛奶感染?;颊咧饕獮榫Y表現(xiàn):發(fā)熱(波浪熱)和其它全身癥狀。第三十頁(yè),共四十五頁(yè)。第五節(jié) 弗朗西斯菌屬Francisella P304該屬只有一個(gè)種:土拉熱弗朗西斯菌,引起人類土拉熱。病原菌常由野兔攜帶,又稱野兔熱桿菌??梢蛑苯咏佑|而感染,也可因動(dòng)物咬傷、蚊蟲叮咬、食入污染食物
14、、吸入等途徑感染。感染后表現(xiàn)為發(fā)熱、劇烈頭痛、關(guān)節(jié)痛,甚至發(fā)生衰竭和休克,表現(xiàn)與傷寒類似。局部感染時(shí)可出現(xiàn)潰瘍,局部淋巴結(jié)腫大、壞死等。第三十一頁(yè),共四十五頁(yè)。第三節(jié) 紅斑丹毒絲菌Erysipelothrix rhusiopathiae P262本菌為紅紅斑丹毒絲菌病的病原菌。急性傳染,多發(fā)于家畜,人也可因接觸而引起皮膚軟組織感染,稱類丹毒。生物學(xué)性狀:革蘭陽(yáng)性桿菌,厭氧或微需氧,觸酶氧化酶均陰性。臨床意義:多發(fā)生于屠宰工人和魚、肉加工人員或獸醫(yī)。類丹毒為一種傳染性皮炎,常始于傷口,局部形成病灶,皮膚紅腫有水皰,局部淋巴結(jié)腫大,可伴有關(guān)節(jié)炎或全身癥狀。因可以產(chǎn)生蔓延性水腫,民間俗稱“流火”。第
15、三十二頁(yè),共四十五頁(yè)。丹毒左側(cè)大腿內(nèi)側(cè)鮮紅一片,境界清楚,稍高出皮表,壓之皮色變白,放手即紅。大腿根部起紫色水泡,水泡破潰,基底色赤,痛如火燎,伴惡寒發(fā)熱,腿根部有腫大臖核。第三十三頁(yè),共四十五頁(yè)。丹毒耳郭局部潮紅,邊緣清晰,與正常皮膚界限分明,皮膚表面有光澤并稍隆起。第三十四頁(yè),共四十五頁(yè)。第二節(jié) 炭疽芽胞桿菌Bacillus anthracis P256炭疽芽胞桿菌簡(jiǎn)稱炭疽桿菌,引起人或動(dòng)物炭疽病。宿主廣泛,傳播方式多樣,芽胞抵抗力很強(qiáng),病死率很高。9.11事件后曾在美國(guó)部分地區(qū)引起大恐慌。第三十五頁(yè),共四十五頁(yè)。(一)生物學(xué)性狀本菌為致病性細(xì)菌中最大的革蘭陽(yáng)性桿菌。菌體兩端平齊,培養(yǎng)后呈
16、竹節(jié)狀排列。芽胞多在有氧條件下形成,產(chǎn)毒株有明顯的莢膜。需氧或兼性厭氧,普通培養(yǎng)基上形成灰、粗糙型菌落,邊緣不整、卷發(fā)狀。液體培養(yǎng)基中由于形成長(zhǎng)鏈而呈絮狀生長(zhǎng),在明膠培養(yǎng)基中可使表面液化呈漏斗狀,在深部由于沿穿刺線擴(kuò)散生長(zhǎng)成倒松樹狀。第三十六頁(yè),共四十五頁(yè)。炭疽芽胞桿菌在普通瓊脂平板培養(yǎng)24小時(shí),長(zhǎng)成直徑24mm的粗糙菌落。菌落呈毛玻璃狀,邊緣不整齊,呈卷發(fā)狀,有一個(gè)或數(shù)個(gè)小尾突起,這是本菌向外伸延繁殖所致 。第三十七頁(yè),共四十五頁(yè)。炭疽芽胞桿菌炭疽芽孢桿菌的芽胞:芽胞細(xì)胞質(zhì)(SMp),芽胞類核(SN),芽胞細(xì)胞膜(SM),芽胞細(xì)胞壁(SW),芽胞皮層(SCt),外芽胞膜(OSM),和芽胞殼(
17、SC) 超薄切片,81 000第三十八頁(yè),共四十五頁(yè)。炭疽芽胞桿菌炭疽芽孢桿菌的芽孢:,發(fā)芽中的芽孢,芽胞殼()已崩解;發(fā)芽的芽胞,芽胞殼和胞子囊()均已崩解;,芽孢已釋放,僅存芽胞囊碎片()超薄切片,28 000第三十九頁(yè),共四十五頁(yè)。炭疽芽胞桿菌炭疽是炭疽桿菌所致人和畜類都可發(fā)生的急性傳染病,可分皮膚炭疽,肺炭疽和腸炭疽三型。診斷要點(diǎn):皮膚炭疽通常發(fā)生于面,頸,手和前臂等露出部位的皮膚,往往單發(fā)。組織顯著腫脹及浸潤(rùn),由于組織出血壞死,在病灶的中心區(qū)可形成明顯凹陷的黑色干痂。局部淋巴結(jié)腫大且?;摗2∪顺S邪l(fā)熱,嘔吐,頭痛,關(guān)節(jié)痛及全身不適等癥狀。大部分病例經(jīng)1-2周后黑痂脫落而成潰瘍,愈合
18、成疤。少數(shù)嚴(yán)重病例。局部呈大片水腫及壞死。伴有高熱和嚴(yán)重的全身中毒癥狀,可致死亡。 第四十頁(yè),共四十五頁(yè)。炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌菌落表面的細(xì)胞呈曲線排列()金屬鍍膜,1 500第四十一頁(yè),共四十五頁(yè)。5、抗原結(jié)構(gòu)莢膜多肽抗原,能抑制調(diào)理作用,與細(xì)菌的侵襲力有關(guān),也能抗吞噬; 由D谷氨酸多肽組成,抗原性單一,若以高效價(jià)抗莢膜血清與具莢膜炭疽桿菌作用,在其周邊外發(fā)生抗體的特異性沉淀反應(yīng),鏡下可見莢膜腫脹。菌體多糖抗原, 由等分子量的乙?;咸烟前泛虳半乳糖組成,能耐熱,與毒力無(wú)關(guān)。這種抗原沒(méi)有特異性,能與其他需氧芽胞桿菌,肺炎球菌14型及人類A血型物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)。芽胞抗原,芽胞抗原有免疫原性及血清學(xué)診斷價(jià)值。保護(hù)性抗原,為一種蛋白質(zhì),是炭疽毒素的組成部分,具有很強(qiáng)的免疫原性; 第四十二頁(yè),共四十五頁(yè)。6、毒素炭疽桿菌繁殖體能分泌炭疽毒素,此毒素由第因子(水腫因子,EF)、第因子(保護(hù)性抗原,PA)及第因子(致死因子,LF)所組成的復(fù)合多聚體。3種成分混合注入動(dòng)物體內(nèi)就出現(xiàn)炭疽病典型中毒癥狀。具有抗吞噬作用與免疫原性。 第四十三頁(yè),共四十五頁(yè)。7、抵抗力繁殖體 562小時(shí)、751分鐘 可被殺滅。繁殖體 常用濃度的消毒劑也能迅速殺滅。芽 胞 抵抗力
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