幾種培養(yǎng)基差異

1、DMEM-高糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)，更適合高密度懸浮 細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞 和 DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM-低糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼 壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。DMEM/F12DMEM/F12 培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。 F12 培養(yǎng)基成分復(fù)雜，含有多種微量元素，和 DMEM 以 1：1 結(jié) 合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium）,作為開發(fā)無血清配方的

2、基礎(chǔ)，以利用F12含有較豐富的 成分和 DMEM 含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。 為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在DMEM/F12（1： 1）中加入15mMHEPES緩沖液。DMEM/F12添加了谷氨酰胺幾種膠原酶差異：膠原酶的分類和用途點(diǎn)擊次數(shù)： 502 發(fā)布時(shí)間： 2011-11-17膠原酶背景介紹膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶（Collagenase），它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋 白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì)，因此，這對溫度、PH 和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏

3、感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)象和性質(zhì)。膠原酶（collage nase）是從溶組織梭狀細(xì)胞芽抱桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬 消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原 成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶 解離細(xì)胞法。 膠原酶僅對細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上 皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為最終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或 0.03%0.3%。膠原酶分為I、II、III、IV、V型以及肝細(xì)胞專用膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類 型選擇膠原酶類型。1、膠原酶I用

4、于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個(gè)細(xì) 胞， 用于哺乳動細(xì)胞的分離。2、膠原酶II適用于肝臟，骨，甲狀腺，心臟和唾液腺組織。3、膠原酶IV包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。4、膠原酶V包含至少7種蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離，將結(jié)締 組織分離成單個(gè)細(xì)胞。膠原酶的配置：膠原酶溶液同胰蛋白酶一樣配制、消毒滅菌和儲藏。注意：因?yàn)镮型膠原酶分子顆粒比胰酶大，不容易過濾，因此可以用蔡式濾器過濾除菌。鈣、鎂離子和血清成分不會影響膠原酶的消化作用，因而可用BSS（如D-hanks或者PBS）或

5、含血清的培養(yǎng)液配制。幾種膠原酶的區(qū)別2009-07-27 10:20膠原酶I產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價(jià) 格C8140-100 100mg 440.00說明：膠原酶I用于上皮、肺，脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離。別名： Clostridiopeptidase ACAS：9001-12-1外觀：棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末R：36/37/38-42 S：22-24-26-36/37儲存條件：-20CFrom Sigma C0130膠原酶II產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價(jià) 格C8150-100 100mg 440.00說明：膠原酶II適用于肝臟，骨，甲狀腺，心臟和唾液腺組織細(xì)胞的分離。別名： Clostridiopeptid

6、ase ACAS： 9001-12-1外觀：棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末R：36/37/38-42 S：22-24-26-36/37儲存條件： -20CFrom Sigma C6885膠原酶III產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價(jià) 格C8490-1500 1500u（原裝）3650.00說明：用于消化組織中連接部分使其成為單個(gè)細(xì)胞，用于哺乳動物組織細(xì)胞解離別名： Clostridiopeptidase ACAS： 9001-12-1外觀：凍干粉膠原消化活力： 400u/mg 固體來源：Clostridium histolyticumR： 36/37/38-42 S： 22-24-26-36/37儲存條件：？ 20

7、CFrom Sigma C0255Collagenase IV膠原酶IV產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價(jià) 格C8160-100 100mg 440.00說明：膠原酶IV包含至少7中蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。別名： Clostridiopeptidase ACAS： 9001-12-1外觀：棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末R：36/37/38-42 S：22-24-26-36/37儲存條件： -20CFrom Sigma C5138Collagenase V膠原酶V產(chǎn)品編號 規(guī) 格 價(jià) 格C8170-100 100mg 780.00說明：膠原酶V包含至少7中蛋白酶成分，分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離，將結(jié) 締組織分離成單個(gè)細(xì)胞。別名： Clostridiopeptidase ACAS： 900