主管檢驗(yàn)技師考試臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)講義第13章病原性球菌及檢驗(yàn)

1、第 第9頁(yè) 共 11 頁(yè)病原性球菌及檢驗(yàn)考點(diǎn)葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、奈瑟菌屬生物學(xué)性狀 微生物學(xué)檢查法臨床意義（致病性、所致疾?。緝?nèi)容講解】普及共性，單記個(gè)性生物學(xué)性狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)：革蘭染色性，菌體形態(tài)，大小，排列狀態(tài)，特殊結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)特性：對(duì)氣體需求，營(yíng)養(yǎng)要求，最適pH 值，最適溫度，在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象。生化反應(yīng)：特殊生化?？乖?分類：致病性致病物質(zhì)所致疾病微生物學(xué)檢查：針對(duì)生物學(xué)性狀和致病性。一、葡萄球菌屬一群革蘭陽(yáng)性球菌，因常堆聚成葡萄串狀而得名。（一）生物學(xué)特性形態(tài)與結(jié)構(gòu)G （列），。培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，最適pH7.43537。普皿：圓形、凸起、表面光滑濕潤(rùn)

2、、邊緣整齊并且不透明的菌落，直徑為23mm，如金黃色、白色、檸檬色色素。血瓊脂平板：幾乎所有的葡萄球菌可產(chǎn)生 和溶血素液體培養(yǎng)基：生長(zhǎng)迅速呈均勻混濁狀。生化反應(yīng)觸酶試驗(yàn)（+）；多數(shù)能分解葡萄糖、麥芽糖及蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；分解甘露醇產(chǎn)酸、液化明膠和產(chǎn)生血漿凝固酶（多數(shù)致病性葡萄球菌）?？乖瑼。型多糖抗原；B 型多糖抗原；C原。分類伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)古典分類法抵抗力對(duì)理化因素抵抗力強(qiáng)，耐熱，耐干燥，耐高鹽。是抵抗力最強(qiáng)的無(wú)芽胞細(xì)菌。（二）臨床意義葡萄球菌感染的特點(diǎn)是感染部位組織的化膿、壞死和膿腫形成。金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起臨床感染最常見(jiàn)的葡萄球菌。致病物質(zhì)：血漿凝固酶；葡

3、萄球菌溶血素；殺白細(xì)胞素；腸毒素；表皮溶解毒素；毒性休克綜合征毒素。表皮葡萄球菌存在于皮膚的正常棲居菌，為醫(yī)院感染的重要病原菌，它是導(dǎo)致血培養(yǎng)污染的常見(jiàn)細(xì)菌之一。腐生葡萄球菌導(dǎo)致尿路感染的常見(jiàn)病原菌之一。（三）微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集（不同疾病采集不同標(biāo)本）：膿汁、滲出液、傷口分泌物、血液、尿液、糞便、痰液以及脊髓液等。鑒定試驗(yàn)：報(bào)告：檢出“XXX耐藥性檢測(cè)（MRS（MRS耐萬(wàn)古霉素的表皮葡萄球菌。（四）治療原則由于耐藥菌株日益增多，治療葡萄球菌感染時(shí)，應(yīng)根據(jù)體外藥敏試驗(yàn)選擇抗生素。如果是危、急、重癥感染，應(yīng)首先根據(jù)經(jīng)驗(yàn)選藥，如萬(wàn)古霉素等，待體外敏感試驗(yàn)結(jié)果回報(bào)后，再調(diào)整用藥，針對(duì)治療。二、鏈球菌

4、屬（一）生物學(xué)特性形態(tài)與染色G （散在）。無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞，某些菌株在血清肉湯中可有莢膜。培養(yǎng)特性大多為需氧或兼性厭氧菌，少數(shù)微需氧及專性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求較高。最適溫度為3537，最適pH 為7.47.6，在 5%CO2環(huán)境下生長(zhǎng)更好。液體培養(yǎng)基：溶血性菌株呈絮狀或顆粒狀沉淀生長(zhǎng)。上層液體澄清，可有菌膜。不溶血菌株則均勻渾濁生長(zhǎng)。血瓊脂平板：灰白色、圓形、凸起、細(xì)小菌落，不同溶血環(huán)。生化反應(yīng)觸酶試驗(yàn)（-），能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，對(duì)其他糖類的分解因不同菌株而異。分類根據(jù)溶血能力分類：甲型（ ）溶血性鏈球菌：本菌為條件致病菌。乙型（ ）丙型（ ）。根據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁抗原（即C）分類，即常用Lancef

5、ield將鏈球菌分為、DT18（其中IJ），對(duì)人類有致病性的90%屬AD、G 群鏈球菌感染較少見(jiàn)。對(duì)理化因素的抵抗力不強(qiáng)，對(duì)各種常用消毒劑敏感，60加熱30 分鐘即可殺滅。（二）臨床意義A 群溶血性鏈球菌致病物質(zhì)鏈球菌溶血素透明質(zhì)酸酶鏈激酶，鏈道酶所致疾病急性化膿性感染（丹毒、癰、蜂窩組織炎、咽炎、鼻竇炎、中耳炎、腦膜炎、產(chǎn)褥熱）致熱外毒素致熱外毒素M 蛋白猩紅熱變態(tài)反應(yīng)性疾?。L(fēng)濕熱，腎小球腎炎）草綠色鏈球菌：屬條件致病菌，常與亞急性心內(nèi)膜炎相關(guān)。B 群鏈球菌：是新生兒肺炎、腦膜炎和敗血癥的病原體。D 群鏈球菌：引起呼吸道和泌尿道感染。治療原則：A 群鏈球菌感染，青霉素G 被列為首選。B 群

6、鏈球菌常常采用青霉素G 和一種氨基糖苷類合用。（三）微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集（不同疾病采集不同標(biāo)本）： 鑒定試驗(yàn)：三、肺炎鏈球菌（一）生物學(xué)特性形態(tài)與染色G（成），無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞。培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧；最適的溫度為3537；最適的pH 7.68.0；營(yíng)養(yǎng)要求較高。血瓊脂平板：形成灰色扁平、中心凹陷（因菌落發(fā)酵所致）直徑為0.51.0mm 的菌落，周圍有草綠色溶血圈。液體培養(yǎng)基：均勻混濁。但培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可因產(chǎn)生自溶，培養(yǎng)液可變澄清，管底沉淀。生化反應(yīng)多數(shù)菌株分解菊糖、膽汁溶解試驗(yàn)陽(yáng)性、Optochin 敏感試驗(yàn)陽(yáng)性。（肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌的鑒別）。（二）臨床意義 所致疾?。捍笕~性肺炎、支氣管

7、炎?？衫^發(fā)胸膜炎、膿胸，也可引起中耳炎、鼻竇炎、腦膜炎及敗血癥。（三）微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集試驗(yàn)方法及鑒定。分離培養(yǎng)：血液、腦脊液需增菌培養(yǎng)，呈均勻混濁，而且有綠色熒光。膿汁或腦脊液沉渣接種血瓊脂，置 5%10%C02環(huán)境中培養(yǎng)。鑒定試驗(yàn)?zāi)懼芙庠囼?yàn)菊糖發(fā)酵試驗(yàn)0ptochin4）莢膜腫脹試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)：小白鼠對(duì)肺炎鏈球菌極為敏感。快速乳膠凝集試驗(yàn)四、腸球菌屬腸球菌屬是腸道的正常棲居菌。（一）生物學(xué)形狀1.形態(tài)和結(jié)構(gòu) G2.培養(yǎng)特性膽汁七葉苷和含 6.5%NaCl （此點(diǎn)可與鏈球菌鑒別血平板上主要表現(xiàn)為 -和 3.生化反應(yīng)觸酶（-），多數(shù)腸球菌能水解吡咯烷酮- -萘基酰胺（PYR）。與同科鏈球菌的

8、顯著區(qū)別：能在高鹽（6.5%NaCl）、高堿（pH9.6）、40%膽汁培養(yǎng)基上和 1045環(huán)境下生長(zhǎng)；對(duì)許多抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥（如復(fù)方增效磺胺、頭孢菌素、克林霉素和低濃度的氨基糖苷類）。（二）臨床意義腸球菌是G+菌中僅次于葡萄球菌屬的重要醫(yī)院感染病原菌。最常見(jiàn)的為尿路感染，其次為腹部和盆腔等部位的創(chuàng)傷和外科術(shù)后感染。臨床上分離率最高的是糞腸球菌，其次是屎腸球菌。聚集物質(zhì)基因和糞腸球菌心內(nèi)膜炎基因等。（三）微生物學(xué)檢驗(yàn)采集標(biāo)本：如尿液、膿汁、膽汁、分泌物或血液等。6.5%NaCl耐藥性檢測(cè)：一般要測(cè)試對(duì) （如青霉素、氨芐西林）苷類（如慶大霉素）的敏感性。同時(shí)也應(yīng)對(duì) -內(nèi)酰胺酶進(jìn)行測(cè)試。（四）

9、結(jié)果評(píng)價(jià)藥敏結(jié)果中必須注明 -內(nèi)酰胺類（如青霉素、氨芐西林）的敏感性。慶大霉素的耐藥水平（高水平耐藥）萬(wàn)古霉素的敏感性以及 （五）治療原則一般采用 霉素或替考拉寧。五、奈瑟菌屬G-，雙球菌，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，有菌毛。專性需氧，氧化酶陽(yáng)性。本屬主要有 9 個(gè)種。其中對(duì)人致病的是腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。腦膜炎奈瑟菌簡(jiǎn)稱腦膜炎球菌，是引起流行性腦脊髓膜炎（簡(jiǎn)稱流腦）的病原體。生物學(xué)特性形態(tài)與染色：G，0.61.5 m。培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求高，屬苛養(yǎng)菌。最適溫度為3537，最適pH7.47.6。生化反應(yīng)：，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（，借此與之鑒別不分解乳糖、甘露醇、半乳糖和果糖，硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性不分解尿素、不產(chǎn)生H

10、2S觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性?？乖胺中停焊鶕?jù)群特異性莢膜多糖抗原不同，將本菌分為A、BC、YZ、1916、29E 和W135 等。目前，對(duì)人致病的主要是A，偶見(jiàn)BC1916臨床意義致病物質(zhì)：菌毛，莢膜，內(nèi)毒素。存在于攜帶者或病人的鼻咽部，借飛沫經(jīng)空氣傳播，冬末春初為流行高峰。微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集：血液；瘀斑滲出液；腦脊液；鼻咽分泌物。注：因本菌能產(chǎn)生自溶酶，易自溶，故采集的標(biāo)本不宜置冰箱，應(yīng)立即送檢。檢驗(yàn)方法及鑒定：粒細(xì)胞內(nèi)（或胞外）革蘭陰性雙球菌，呈腎形成對(duì)排列，可初報(bào)。EPV 瓊脂，置5%10%C02環(huán)境中，35培養(yǎng) 1824h 后可見(jiàn)圓形、灰褐色、濕潤(rùn)、光滑、邊緣整齊、直徑12mm

11、 的小菌落。鑒定：細(xì)菌染色形態(tài)： G-，菌體呈腎形，坦面相對(duì)，成對(duì)排列。氧化酶試驗(yàn)（+）觸酶試驗(yàn)（+）分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣莢膜多糖抗原直接凝集試驗(yàn)治療原則：青霉素G 為首選，三代頭孢對(duì)腦膜炎奈瑟菌也具有很強(qiáng)的抗菌活性。青霉素過(guò)敏的病人可考慮選用三代頭孢或氯霉素。淋病奈瑟菌簡(jiǎn)稱淋球菌，是淋病的病原體，人類是其唯一的天然宿主和傳染源。生物學(xué)特性形態(tài)與染色：G。從患者體內(nèi)新分離的菌株可有莢膜和菌毛，無(wú)芽胞和鞭毛。培養(yǎng)特性：EPVpH375%10%CO2 條件下才能生長(zhǎng)發(fā)育。菌落：表面光滑、凸起、半透明、高亮度、直徑0.51.0mm 的圓形菌落。生化反應(yīng)：不酵解麥芽糖（常借此與腦膜炎奈瑟菌相鑒

12、別氧化酶和觸酶試驗(yàn)均陽(yáng)性。主要抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。抵抗力：對(duì)外界抵抗力極低。臨床意義：肛門直腸的黏膜。如單純性淋病、盆腔炎、淋菌型結(jié)膜炎。微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：膿性分泌物，尿道拭子，宮頸口分泌物，眼結(jié)膜分泌物，血液。檢驗(yàn)方法及鑒定初診。及時(shí)接種含有兩種以上抗生素（萬(wàn)古霉素和多黏菌素等）的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上。 3）鑒定：生化反應(yīng)：氧化酶陽(yáng)性，僅分解葡萄糖產(chǎn)酸；不發(fā)酵麥芽糖與蔗糖，30%H2O2 試驗(yàn)陽(yáng)性可與腦膜炎奈瑟菌等相鑒別。免疫學(xué)方法：熒光抗體染色法、協(xié)同凝集試驗(yàn)。核酸探針雜交法。治療原則觀霉素可作為替代藥物。對(duì)氟喹諾酮類、大觀霉素的耐藥也有報(bào)道。六、卡他布蘭漢菌 0.61

13、.0m，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛。 營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上 182013mm，不透明，灰白色，菌落易從培養(yǎng)基上刮下。氧化酶和觸酶陽(yáng)性，產(chǎn)DNA 酶，大部分菌株還原硝酸鹽和亞硝酸鹽，借此可與奈瑟菌屬相鑒別?？芍轮卸住⒈歉]炎、肺炎?！纠}】SPA 是腸桿菌科的細(xì)菌的抗原C.沙門菌的表面抗原D.核蛋白抗原E.鏈球菌屬表面抗原答疑編號(hào) 502389130201【正確答案】B【例題】鑒別肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌可用A.外斐試驗(yàn)B.肥達(dá)試驗(yàn)C.乳糖發(fā)酵試驗(yàn) D.菊糖分解試驗(yàn) E答疑編號(hào) 502389130202【正確答案】D【例題】B 群鏈球菌不引起下列哪種疾病A.敗血癥B. 肺 炎 C.腦膜炎D.咽喉

14、炎E.風(fēng)濕熱答疑編號(hào) 502389130203【正確答案】E【例題】引起剝脫性皮炎的細(xì)菌是A.肺炎球菌B.鏈球菌第 PAGE 第11頁(yè) 共 11 頁(yè)CD.腦膜炎奈瑟菌 E.腸球菌答疑編號(hào) 502389130204【正確答案】C【例題】淋病奈瑟菌與腦膜炎奈瑟菌鑒別用A.葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)B.麥芽糖發(fā)酵試驗(yàn)C.氧化酶試驗(yàn)D.觸酶試驗(yàn)E.革蘭染色答疑編號(hào) 502389130205【正確答案】 B對(duì)第三代頭孢菌素耐藥，在高鹽 、高堿 9.6）、高膽汁培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。此菌為A.大腸埃希菌 BCD.腸球菌E.肺炎鏈球菌答疑編號(hào) 502389130206【正確答案】D【例題】初步鑒定B 群鏈球菌的試驗(yàn)為A.馬尿酸鈉水解試驗(yàn)B.CAMP 試驗(yàn)C.桿菌肽敏感試驗(yàn) D.膽汁七葉苷試驗(yàn)E.Optochin答疑編號(hào) 502389130207【正確答案】AB【例題】區(qū)分葡萄球菌屬和鏈球菌屬的試驗(yàn)的是A.VP第 第12頁(yè) 共 11 頁(yè)C.氯化鉀試驗(yàn)D.硝酸鹽還原試驗(yàn)E.觸酶試驗(yàn)答疑編號(hào) 502389130208【正確答案】E【例題】關(guān)于肺炎鏈球