食用菌制種技術

1、食用菌制種技術第1頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四教學目標、重點、難點教學目的：熟練使用制種用品、用具、設備、設施進行制種生產。本節(jié)重點：食用菌制種條件，制種工具的使用。 第2頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四一、食用菌菌種的概念與級別(一)、菌種的概念菌種是指經人工培養(yǎng)并可供進一步繁殖或栽培使用的食用菌菌絲體，常常包括供菌絲體生長的基質在內，共同組成繁殖材料。菌種是食用菌生產的首要條件，菌種性狀的優(yōu)劣直接影響到生產的成敗。常言道：“有收無收在于種（種子），多收少收在于種（栽培）”第3頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（

2、二）菌種的級別1.一級種（母種）用分離法首次得到的純次生菌絲體 概念概況培養(yǎng)環(huán)境試管、斜面培養(yǎng)基用途再生母種擴大原種保藏用種菌絲弱而少、不可直接栽培特點第4頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第5頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四2.二級種（原種）將母種擴大至粗放培養(yǎng)基上形成的菌種概念概況培養(yǎng)環(huán)境菌絲較多而壯、適應性較強特點用途擴大栽培種大口瓶、較粗放的液體或固體培養(yǎng)基第6頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第7頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四3.三級種（栽培種）將原種擴大至粗放培養(yǎng)基上形成的菌種概念

3、概況培養(yǎng)環(huán)境菌絲多而壯、適應性強特點用途栽培生產菌種袋、較粗放的液體或固體培養(yǎng)基不可再擴第8頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第9頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四母種、原種和栽培種第10頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四二、制種常用的設備與用品（一）、滅菌設備1、手提式高壓滅菌鍋第11頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四使用壓力：1.5kg/c滅菌時間：2530min對象：玻璃器皿、母種培養(yǎng)基、無菌水等。可用高壓飯鍋替代，但滅菌時間延長至40min第12頁，共66頁，2022年，5月20日，15點4

4、7分，星期四2、臥式高壓滅菌鍋第13頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四使用壓力：1.5kg/c滅菌時間：1.52h對象：原種、栽培種培養(yǎng)基的滅菌使用方便，但造價高，一般菇農用常壓滅菌灶。第14頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四3、常壓滅菌灶第15頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四使用溫度：100-105滅菌時間：維持810h對象：原種、栽培種培養(yǎng)基的滅菌第16頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（二）、制種容器第17頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（三）、接種設備與工具1、接

5、種設備（1）、超凈工作臺（局部凈化設備空，氣過濾除菌）第18頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（2）、接種箱第19頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四2、接種工具接種針、接種環(huán)、接種刀、接種鏟、鑷子等第20頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（四）、 菌種培養(yǎng)設備放置接種后各級菌種，并提供適宜溫度和通氣條件，使菌絲生長良好的專用設備第21頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四1、恒溫培養(yǎng)箱根據需要使溫度恒定在一定范圍內,一般用于培養(yǎng)斜面試管和少部分原種。第22頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47

6、分，星期四2、培養(yǎng)室培養(yǎng)架：以操作方便為宜,寬0.71.2米，層間40cm調溫：電爐、紅外線、暖氣管、門窗、抽風機測溫：干濕球溫度計 照明：避免使用藍光 滅菌：紫外燈第23頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第24頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四三、菌種的制作(一)母種的制作1、母種培養(yǎng)基PDA培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，水1000亳升，PH值自然。適合以一般母種的培養(yǎng)第25頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四. PDA加富培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200克，麥麩100克，葡萄糖20克，瓊脂20克，水100

7、0亳升，PH值自然。適合母種的復壯培養(yǎng)。. PDA綜合培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂20克，磷酸二氫鉀3克，硫酸鎂1.5克，維生素B1510mg，水1000亳升，PH值自然。適合草菇、靈芝、猴頭菇、茯苓母種的培養(yǎng)。 . 母種保藏培養(yǎng)基：在PDA培養(yǎng)基中加10g蛋白胨。第26頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四粉狀條狀屬天然植物多糖融點96以上凝點40 以下冷水中不溶透明度好、粘著力強不被微生物分解利用特性第27頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四2、 母種培養(yǎng)基的制備PDA培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯200g、蔗糖20g、瓊脂15-20g、水1

8、000ml馬鈴薯去皮，切片，稱取200克，沸水煮20-30分鐘，過濾，取濾汁添水至1000ml，加葡萄糖或蔗糖20克、瓊脂15-20克煮熔，pH自然，常規(guī)滅菌即可。第28頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四準備工作第29頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四 稱量、材料預處理按配方準確稱量各營養(yǎng)物質。將馬鈴薯去皮、挖掉芽眼后稱量200g，切成1cm見方的小塊。瓊脂剪碎后用水浸泡。第30頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四熬煮將切好的馬鈴薯塊加適量水后放入電飯鍋中，煮至酥而不爛。第31頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47

9、分，星期四過濾、加可溶藥物 用雙層沙布過濾，取濾汁，放在電飯鍋中加 入糖第32頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四熬瓊脂、定容 在沸騰狀態(tài)下加入瓊脂，直到瓊脂完全溶化為止，定容至1000ml。第33頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四母種培養(yǎng)基制作流程1. 分裝試管 2. 塞棉塞 3. 打捆 4. 滅菌 5. 擺斜面第34頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（1）、裝管：18 mm180 mm或20 mm200 mm的玻璃試管，分裝量掌握在試管長度的1/4-1/5，原則上是擺放成斜面后，斜面的長度為試管長度的1/2-2/3。（2

10、）、滅菌：母種培養(yǎng)基滅菌時，需用1.051.1 kg/cm2的壓強，溫度為121，滅菌（保持121）30 min。（3）、斜面的擺置：趁熱擺好斜面第35頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四擺斜面滅菌結束后鍋蓋開1/5的小縫，用余熱烘干報紙和棉塞，然后擺斜面。斜面長是試管總長的1/2第36頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第37頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四3、種菇的組織分離（1）種菇的選擇：外觀典型、大小適中、無任何污染、7-8成熟、第12茬的子實體。（2）接種箱與分離工具的消毒接種箱：科達氣霧消毒粉23g或高錳酸鉀5g

11、，甲醛10ml混合氣霧消毒30min.分離工具的消毒：用70-75酒精擦拭后，再在酒精燈上反復灼燒。第38頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（3）種菇的解剖分離縱剖（撕）菇體尖頭鑷取柄蓋交界處綠豆粒大的組織放入新斜面中部第39頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四金針菇是橫切菌蓋上薄的菌肉或取未開傘的幼嫩子實體的菌褶片第40頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四靈芝組織分離所取的部位是菌蓋邊緣的白色生長圈第41頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四木耳等膠質菌類的菌肉薄，子實體經無菌水反復沖洗后，撕開子實體或用

12、刀片將兩層耳片切開，挑取一小塊菌肉組織即可。第42頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（4）種菇分離后的觀察培養(yǎng) 將分離好的試管放入23-25的溫箱中培養(yǎng)，2436h后開始萌發(fā)菌絲，23d后形成菌落，此時注意淘汰雜菌污染或菌絲生長希弱的試管，10d左右菌絲可長滿試管，放入冰箱中儲存。 選擇適宜的季節(jié)做出菇試驗。第43頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四4、母種的轉管培養(yǎng)母種的接種必須在嚴格的無菌條件下進行。否則將會造成嚴重污染，給生產造成造成巨大損失。然后將所有試管及接種器具放入接種箱里進行消毒滅菌，力求滅菌徹底。在點燃酒精燈火焰上進行操作，將菌種試

13、管和接種用斜面培養(yǎng)基放在火焰旁。撥去棉塞，把消毒滅菌的接種針伸入菌種試管內，挑小塊菌種放入斜面培養(yǎng)基中，一支母種可移栽3040支試管。原始母種可轉管24代。第44頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四圖3-14斜面試管轉管接種第45頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四培養(yǎng)：將移接好的試管放入20-25的溫箱中培養(yǎng)，同時注意反復觀察，清雜去劣，經10d左右菌絲可長滿試管。第46頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（二）原種的制作1、原種培養(yǎng)基配方與配制 木屑培養(yǎng)基：木屑78%，麩皮或谷粒20%，石膏1%，磷肥1%，水適量。適用于培養(yǎng)

14、平菇、木耳、香菇、猴頭。 棉子殼培養(yǎng)基：棉子殼78%，麩皮或谷粒20%，石膏1%，磷肥1%，水適量。水適量。適用于培養(yǎng)平菇、猴頭、金針菇、雞腿菇。 第47頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四谷粒配方：稻谷98%，石膏粉2%棉子殼谷粒配方：棉子殼50%，谷粒,49%，石膏粉1%第48頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四培養(yǎng)料的配制 木屑、棉籽殼培養(yǎng)料的拌料配制 木屑、棉籽殼培養(yǎng)料按配方稱量后，堆制混和，加水拌料，配方中的糖也可先溶于水中再拌入。拌料時要控制料的含水量在60左右 。第49頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四 谷粒培養(yǎng)

15、料的配制 谷粒因其營養(yǎng)較豐富，制作的菌種具有菌絲萌發(fā)早、吃料快、抗衰老能力強、產量高等優(yōu)點，在生產中應用較多。一般是采用浸泡法或煮熟法，也可用石灰水浸泡。注：煮熟至將開口為度第50頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四2、裝瓶 滅菌 將培養(yǎng)料拌勻裝入菌種瓶（或袋）內、裝料松緊適宜，上下一致，裝料高度以齊瓶（袋）肩為宜。然后用手指在瓶的中央向下大一個小洞，以利接種定植，塞上棉塞。裝好的料瓶（袋）要當天滅菌，以免培養(yǎng)料發(fā)霉變質。第51頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四培養(yǎng)基的滅菌 通常采用高壓蒸氣滅菌法和常壓蒸氣滅菌法以達到滅菌的目的。高壓滅菌2小時或常

16、壓滅菌于100維持8-10小時，滅菌后培養(yǎng)基最好放在適溫下，空白培養(yǎng)5-7天，以檢查培養(yǎng)基滅菌的效果。如在此期間沒有出現任何雜菌，說明滅菌效果良好。待其冷卻30以下可接種。也可高壓滅菌（1.52h)第52頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四3、原種的接種接原種用接種耙取蠶豆大母種放于瓶中接種穴內，一支母種可46瓶原種。第53頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四4、原種的培養(yǎng)培養(yǎng)室的大小和床架數量應根據生產規(guī)模來定。注意：適溫培養(yǎng)，對多數食用菌而言，可保 持2025，定期檢查雜菌。時間2540天 。正常菌絲：潔白、粗壯。雜菌：有黃、綠、黑橘紅等多種顏色

17、，且生長速度快，稀疏無力。第54頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第55頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四（三）、栽培種的制作基本上同原種，可參照執(zhí)行。容器可用15cm30cm0.005cm聚丙烯朔料袋加套環(huán)替代。第56頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四接栽培種用接種匙（鑷、鏟）取棗大原種放于袋的兩端或瓶中料面上注意表面老菌絲及老種塊勿接入返回本節(jié)第57頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第58頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四第59頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四四、菌種的保藏（一）菌種的保藏的原理及設備1、菌種的保藏的原理：采用干燥、低溫、隔氧等方法，盡可能地降低菌種的代謝活動，并保證原種的純度。2、菌種的保藏的設備：普通冰箱或超低溫冰箱、真空干燥器（機）第60頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四特點簡便保藏時間短易污染及退化不適于草菇等菌類 1.斜面低溫法斜面菌種置46冰箱中（34個月）返回本節(jié)（二）菌種常用的保藏方法第61頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四返回本節(jié)第62頁，共66頁，2022年，5月20日，15點47分，星期四2、礦油保藏法：將高溫滅菌后的礦油（液體石蠟、石蠟油）