蘭花組織培養(yǎng)演示文稿

1、蘭花組織培養(yǎng)演示文稿第一頁，共十九頁。優(yōu)選蘭花組織培養(yǎng)第二頁，共十九頁。第三頁，共十九頁。蘭花是整個蘭科植物( Orchidaceae)的總稱，是開花植物中最大的家族之一，是單子葉植物中最高度演化的一科，有6個亞科730多屬25000余種，廣泛分布于全球各地。蘭花在中國約有170個屬1200余種，分布較為廣泛，幾乎全國各省都有分布。蘭花具有極高的觀賞價值，形成蘭花產(chǎn)業(yè)。蘭花具有藥用價值。第四頁，共十九頁。蘭花主要繁殖方法分株繁殖種子繁殖組織培養(yǎng)第五頁，共十九頁。原球莖和類原球莖原球莖(Protocorm)是指蘭花種子萌發(fā)過程中的一種形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)：種子的幼胚吸水膨脹，中部的胚細(xì)胞分裂增殖，突破合點

2、端種皮形成球形或橢球形 。在蘭科植物的組織培養(yǎng)中，根尖、葉片等適宜外植體也可誘導(dǎo)類似原球莖組織結(jié)構(gòu)，即類原球莖或擬原球莖。類原球莖(Protocorm-like body, PLB)一詞是由Morel在1960年提出的，用來描述蘭科植物組培過程中產(chǎn)生的類似種子萌發(fā)過渡形態(tài)原球莖的一種特殊組織結(jié)構(gòu):在蘭花組織培養(yǎng)中，可由莖尖分生組織等（而不是種子）誘導(dǎo)形成類似其種子原球莖的組織結(jié)構(gòu)。 第六頁，共十九頁。蘭花外植體的選擇和類原球莖增殖外植體的選擇直接關(guān)系到類原球莖的誘導(dǎo)。在組織培養(yǎng)中幼嫩部位一般不容易褐化，因此常選取較幼嫩且生長旺盛的部位誘導(dǎo)類原球莖。莖尖、葉片和種子是誘導(dǎo)類原球莖的理想外植體來源

3、?；ò辍⑤嗥?、子房、休眠芽、側(cè)芽、花梗節(jié)間段、根尖等均可作為外植體誘導(dǎo)出原球莖。第七頁，共十九頁。莖尖和側(cè)芽作為外植體莖尖和側(cè)芽是最早也是使用頻率最高的蘭花外植體。莖尖和側(cè)芽頂端分生區(qū)細(xì)胞的分裂能力強，容易誘導(dǎo)出類原球莖。大花蕙蘭（Cymbidium） 、卡特麗亞(Cattleya) 、石斛蘭( Dendrobium )、墨蘭和建蘭等均成功用莖尖誘導(dǎo)出大量類原球莖。對蝴蝶蘭( Phalaeanopsis ) 、仙指甲蘭( Aerides) 等用莖尖作為外植體有可能影響開花性狀， 因此需要尋找其他外植體。第八頁，共十九頁。葉片作為外植體葉片作為外植體既可減少對母株的傷害，取材又不受季節(jié)的限制，且

4、數(shù)量多，是比較理想的外植體材料來源。研究表明雖然葉片具有誘導(dǎo)出類原球莖的能力，但成熟葉誘導(dǎo)出類原球莖的能力極弱。幼葉誘導(dǎo)出類原球莖能力較成熟葉強，但誘導(dǎo)率也很低對，于大花蕙蘭僅為33%左右第九頁，共十九頁。Plant regeneration through direct somatic embryogenesis from leaf explants of Phalaenopsis amabilis: 第十頁，共十九頁。種子作為外植體在自然條件下蘭花種子雖多，但由于其不具有發(fā)育完全的胚，且種皮致密、透性差或種皮中含有抑制物使種子很難萌發(fā)。自Noel Bernared在1899年創(chuàng)立了蘭花種子

5、共生萌發(fā)法后，研究者們接著發(fā)現(xiàn)大部分蘭花種子可以通過無菌萌發(fā)的方式進(jìn)行，即非共生萌發(fā)。蘭花種子的非共生萌發(fā)已在蝴蝶蘭、石斛蘭、文心蘭等蘭花中取得成功。第十一頁，共十九頁。蘭花蒴果消毒及果實內(nèi)部 第十二頁，共十九頁。開裂果實種子消毒方法過濾方法1第十三頁，共十九頁。開裂果實種子消毒方法過濾方法2第十四頁，共十九頁。蘭花種子離體萌發(fā)第十五頁，共十九頁。花梗節(jié)間作為外植體一般較少用花梗節(jié)間段作為外植體。但蝴蝶蘭組織培養(yǎng)中多采用花梗作為外植體，從花梗節(jié)間段誘導(dǎo)出類原球莖，并且通過研究表明花梗節(jié)間段形成類原球莖的頻率明顯高于其它外植體（莖尖、根尖）。栽培條件下蝴蝶蘭花梗節(jié)間分化幼芽第十六頁，共十九頁。蝴蝶蘭花梗組織培養(yǎng)第十七頁，共十九頁。根作為外植體Stewart等用樹蘭(Epidendrum )的根首次成功地培養(yǎng)出了原球莖和從愈傷組織分化出不定芽。之后，根的離體培