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文檔簡介

1、生物化學(xué)課后答案張麗萍(1)9糖代謝1 假設(shè)細胞勻漿中存在代謝所需要的酶 和輔酶等必需條件,若葡萄糖的C-1處用14C標(biāo) 記,那么在下列代謝產(chǎn)物中能否找到14C標(biāo)記。CO2; (2)乳酸;(3)丙氨酸。解答:(1)能找到14C標(biāo)記的CO2 葡萄糖 丙酮酸(*C1)一氧化脫竣生成標(biāo)記的CO2。(2)能找到14C標(biāo)記的乳酸丙酮酸(*C1)加NADH+H +還原成乳酸。(3)能找到14C標(biāo)記的丙氨酸 丙酮酸(*C1) 加谷氨酸在谷丙轉(zhuǎn)氨酶作用下生成14C標(biāo)記的 丙氨酸。.某糖原分子生成n個葡糖-1-磷酸, 該糖原可能有多少個分支及多少個a - (1 6) 糖普鍵(*設(shè):糖原與磷酸化酶一次性作用生 成

2、)?如果從糖原開始計算,lmol葡萄糖徹底 氧化為CO2和H2O,將凈生成多少 mol?ATP?解答:經(jīng)磷酸化酶作用于糖原的非還原末 端產(chǎn)生n個葡萄糖-1-磷酸,則該糖原可能有 n+1個分支及n+1個a- (16)糖背鍵。如 果從糖原開始計算,lmol葡萄糖徹底氧化為 CO2 和 H2O,將凈生成 33molATP。.試說明葡萄糖至丙酮酸的代謝途徑,在有氧與無氧條件下有何主要區(qū)別?解答:(1)葡萄糖至丙酮酸階段,只有甘 油醛-3-磷酸脫氫產(chǎn)生NADH+H + 。 NADH+H +代謝去路不同,在無氧條件下去還 原丙酮酸;在有氧條件下,進入呼吸鏈。(2)生成ATP的數(shù)量不同,凈生成2mol AT

3、P;有氧條件下凈生成 7mol ATP。葡萄糖至丙酮酸階段,在無氧條件下,經(jīng) 底物磷酸化可生成4mol ATP (甘油酸-1,3-二 磷酸生成甘油酸-3磷酸,甘油酸-2-磷酸經(jīng)烯 醇丙酮酸磷酸生成丙酮酸),葡萄糖至葡糖-6- 磷酸,果糖-6-磷酸至果糖1,6二磷酸分別消耗 了 1mol ATP,在無氧條件下凈生成 2mol ATP。在有氧條件下,甘油醛-3-磷酸脫氫產(chǎn) 生 NADH+H +進入呼吸鏈將生成 2X2.5mol ATP ,所以凈生成7mol ATP。. O2沒有直接參與三竣酸循環(huán),但沒有 O2的存在,三竣酸循環(huán)就不能進行,為什么?丙 二酸對三竣酸循環(huán)有何作用?解答:三竣酸循環(huán)所產(chǎn)生

4、的3個 NADH+H +和1個FADH2需進入呼吸鏈,將 H+和電子傳遞給 O2生成H2。沒有O2將造 成NADH+H +和FADH2的積累,而影響三竣 酸循環(huán)的進行。丙二酸是琥珀酸脫氫酶的競爭 性抑制劑,加入丙二酸會使三竣酸循環(huán)受阻?;寄_氣病病人丙酮酸與a酮戊二酸含 量比正常人高(尤其是吃富含葡萄糖的食物后),請說明其理由。解答:因為催化丙酮酸與 a酮戊二酸氧 化脫竣的酶系需要TPP作酶的輔因子,TPP是 VB的衍生物,患腳氣病病人缺 VB,丙酮酸與 a酮戊二酸氧化受阻,因而含量比正常人高。.油料作物種子萌發(fā)時,脂肪減少糖增 加,利用生化機制解釋該現(xiàn)象,寫出所經(jīng)歷的 主要生化反應(yīng)歷程。解答:

5、油料作物種子萌發(fā)時,脂肪減少, 糖增加,表明脂肪轉(zhuǎn)化成了糖。轉(zhuǎn)化途徑是:脂 肪酸氧化分解成乙酰輔酶A,乙酰輔酶A經(jīng)乙 醛酸循環(huán)中的異檸檬酸裂解酶與蘋果酸合成 酶催化,生成草酰乙酸,再經(jīng)糖異生轉(zhuǎn)化為糖。.激烈運動后人們會感到肌肉酸痛,幾天 后酸痛感會消失.利用生化機制解釋該現(xiàn)象。解答:激烈運動時,肌肉組織中氧氣供應(yīng) 不足,酵解作用加強,生成大量的乳酸,會 感到肌肉酸痛,經(jīng)過代謝,乳酸可轉(zhuǎn)變成葡萄 糖等其他物質(zhì),或徹底氧化為 CO2和H2O, 因乳酸含量減少酸痛感會消失。.寫出UDPG的結(jié)構(gòu)式。以葡萄糖為原 料合成糖原時,每增加一個糖殘基將消耗多少 ATP?解答:以葡萄糖為原料合成糖原時,每 增加

6、一個糖殘基將消耗3molATP。過程如下:葡萄糖ATPf ?G 6 P ADP (激酶催化),G 6 P幡穴1P (己糖磷酸異構(gòu)酶催化),G 1 P UTP! ? UDPG PPi PPi H2G 1 P UTP! ? UDPG PPi PPi H2O2Pi(UDPG 焦磷酸化酶催化),再在糖原合成酶催化下,UDPG將葡萄糖殘基加到糖原引物非還原端形成a-1,4-糖普鍵。.在一個具有全部細胞功能的哺乳動物 細胞勻漿中分別加入 1mol下列不同的底物, 每種底物完全被氧化為 CO2和H2O時,將產(chǎn) 生多少摩爾?ATP分子?(1)丙酮酸(2)烯醇丙酮酸磷酸乳酸 (4) 果糖-l , 6-二磷酸(5

7、)二羥丙酮磷酸(6)草酰琥珀酸解答:(1)丙酮酸被氧化為 CO2和H2O 時,將產(chǎn)生12.5mol ATP;(2)磷酸烯醇式丙酮酸被氧化為CO2和H2O 時,將產(chǎn)生 13.5mol ATP;(3)乳酸被氧化為CO2和H2O時,將產(chǎn) 生 15mol ATP ;(4)果糖1,6二磷酸被氧化為CO2和H2O 時,將產(chǎn)生34mol ATP ;(5)二羥丙酮磷酸被氧化為 CO2和H2O 時,將產(chǎn)生17moi ATP ;(6)草酰琥珀酸被氧化為CO2和H2O時, 將產(chǎn)生20moi ATP o脂質(zhì)的代謝.脂肪是如何分解和合成的?解答:生物體利用三酰甘油是通過脂肪酶 水解三酰甘油生成甘油與脂肪酸。甘油和脂肪

8、酸在組織內(nèi)進一步氧化生成 CO2、水及能量。 合成脂肪所需的甘油-3-磷酸可由糖酵解產(chǎn)生 的二羥丙酮磷酸還原而成,亦可由脂肪動員產(chǎn) 生的甘油經(jīng)脂肪組織外的甘油激酶催化與 ATP作用而成。脂肪酸經(jīng)活化生成的脂酰輔酶 A與甘油-3-磷酸縮合生成磷脂酸;二羥丙酮 磷酸也能與脂酰CoA作用生成脂酰二羥丙酮 磷酸,然后還原生成溶血磷脂酸,溶血磷脂酸 和脂酰CoA作用可生成磷脂酸。磷脂酸在磷 脂酸磷酸酶作用生成二酰甘油及磷酸。 二酰甘 油與另一分子的脂酰 CoA縮合即生成三酰甘 油。詳見10.2和10.3節(jié)。.什么是6-氧化? 1mol硬脂酸徹底氧 化可凈產(chǎn)生多摩爾ATP?解答:脂肪酸氧化作用是發(fā)生在 B

9、碳原子 上,逐步將碳原子成對地從脂肪酸鏈上切下, 這個作用即B -氧化。它經(jīng)歷了脫氫(輔酶 FAD),加水,再脫氫(輔酶NAD+),硫解四步 驟,從脂肪酸鏈上分解下一分子乙酰CoA o1mol硬脂酸(十八碳飽和脂肪酸)徹底氧化 可凈產(chǎn)生 120mol 摩爾 ATP 。1.5 8+2,5 *+10 9-2=12+20+90-2=120molATPO詳見10.2. 2中的“脂肪酸B-氧化過程中 的能量轉(zhuǎn)變”。.脂肪酸除B-氧化途徑外,還有哪些氧 化途徑?解答:脂肪酸除主要進行B-氧化作用外, 還可進行另兩種方式的氧化,即口 -氧化與3- 氧化。在a -氧化途徑中長鏈脂肪酸的a -碳在加單氧酶的催化

10、下氧化成羥基生成a -羥脂酸。羥脂酸可轉(zhuǎn)變?yōu)橥?,然后氧化脫竣轉(zhuǎn)變 為少一個碳原子的脂肪酸。此外脂肪酸的末端 甲基(3 -端)可經(jīng)氧化作用后轉(zhuǎn)變?yōu)?3 -羥脂 酸,然后再氧化成, -二竣酸進行B-氧化, 此途徑稱為3 -氧化。含奇數(shù)碳原子的脂肪酸 也可進行B-氧化,但最后一輪,產(chǎn)物是丙酰 CoA和乙酰CoAo丙酰CoA經(jīng)代謝生成琥珀 酰CoAo也可以經(jīng)其他代謝途徑轉(zhuǎn)變成乳酸 及乙酰CoA進行氧化。詳見10. 2.3中的“奇數(shù)碳鏈脂肪酸的氧 化”和10. 2. 3中的氧化和3 -氧化”。. C16:1與相同碳原子數(shù)的飽和脂肪酸 氧化途徑有何區(qū)別?解答:幾乎所有生物體的不飽和脂肪酸都只 含有順式雙

11、鍵,且多在第9位,而B -氧化中的 2-反烯脂酰CoA水化酶和B-羥脂酰CoA 脫氫酶具有高度立體異構(gòu)專一性,所以不飽和 脂肪酸的氧化除要有 B-氧化的全部酶外,還 需要 3-順,?-反烯脂酰CoA異構(gòu)酶和4 2- 反,,-順二烯脂酰CoA還原酶。詳見 10. 2. 2. 5 “不飽和脂肪酸的氧化”。不飽和脂 肪酸Cl6:1比相同碳原子數(shù)的飽和脂肪酸少生 成 1.5 個 ATP。.酮體是如何產(chǎn)生和氧化的?為什么肝中 產(chǎn)生的酮體要在肝外組織才能被利用解答:丙酮、乙酰乙酸、B -羥丁酸在醫(yī) 學(xué)上稱為酮體,其如何產(chǎn)生和氧化詳見 10. 2. 4. 1 “酮體的生成”和 10. 2. 4. 2 “酮

12、體的氧化”。肝產(chǎn)生的酮體要在肝外組織才能 被利用,是因為肝中有活力很強的生成酮體的 酶,但缺少利用酮體的酶。脂肪酸是如何進行生物合成的? 解答:詳見10.3.2 “脂肪酸的生物合成”。. 1mol三辛脂酰甘油在生物體內(nèi)分解成 CO2和H2O時,可凈產(chǎn)生多少摩爾 ATP?解答:1mol三辛脂酰甘油在生物體內(nèi)加 H2O分解成1mol甘油和3mol辛酸。甘油氧 化成CO2和H2O時,可凈產(chǎn)生18.5mol ATP, 3mol辛酸經(jīng)3次0-氧化)生成4mol乙酰 CoA。3mol 辛酸:3X【1.5 3+2.5 3+10M-2】 =150mol ATP, 1mol三辛脂酰甘油可凈產(chǎn)生 168.5mol

13、 ATPO.試以磷脂酰膽堿為例敘述磷脂合成和 分解的途徑。解答:磷脂酰膽堿的合成詳見10.4節(jié),分 解見10. 1.2 “磷脂的酶促水解”。9,膽固醇在體內(nèi)是如何生成、轉(zhuǎn)化和排 泄的?解答:詳見10. 5節(jié)。蛋白質(zhì)分解和氨基酸代謝.蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)不斷地降解又合成有 何生物學(xué)意義?解答:細胞不停地將氨基酸合成蛋白質(zhì), 并又將蛋白質(zhì)降解為氨基酸。這種看似浪費的 過程對于生命活動是非常必要的。首先可去除 那些不正常的蛋白質(zhì),它們的積累對細胞有 害。其次,通過降解多余的酶和調(diào)節(jié)蛋白來調(diào) 節(jié)物質(zhì)在細胞中的代謝。研究表明降解最迅速 的酶都位于重要的代謝調(diào)控位點上, 這樣細胞 才能有效地應(yīng)答環(huán)境變化和代謝的

14、需求。 另外 細胞也可以蛋白質(zhì)的形式貯存養(yǎng)分,在代謝需 要時將其降解產(chǎn)生能量供機體需要。,何謂氨基酸代謝庫?解答:所謂氨基酸代謝庫即指體內(nèi)氨基酸 的總量。,氨基酸脫氨基作用有哪幾種方式?為什么說聯(lián)合脫氨基作用是生物體主要的脫氨基方式?解答:氨基酸的脫氨基作用主要有氧化脫 氨基作用、轉(zhuǎn)氨基作用、聯(lián)合脫氨基作用和非 氧化脫氨基作用。生物體內(nèi) L-氨基酸氧化酶 活力不高,而L-谷氨酸脫氫酶的活力卻很強, 轉(zhuǎn)氨酶雖普遍存在)但轉(zhuǎn)氨酶的作用僅僅使氨 基酸的氨基發(fā)生轉(zhuǎn)移并不能使氨基酸真正脫 去氨基。故一般認為 L-氨基酸在體內(nèi)往往不 是直接氧化脫去氨基,主要以聯(lián)合脫氨基的方 式脫氨。詳見11.2.1氨基酸

15、的脫氨基作用。.試述磷酸叱哆醛在轉(zhuǎn)氨基過程中的作 用。解答:轉(zhuǎn)氨酶的種類雖多,但其輔酶只有 一種,即叱哆醛-5 -磷酸,它是維生素B6的 磷酸酯。毗哆醛-5 -磷酸能接受氨基酸分子 中的氨基而變成叱哆胺-5 -磷酸,同時氨基 酸則變成a -酮酸。叱哆胺-5 -磷酸再將其氨 基轉(zhuǎn)移給另一分子a-酮酸,生成另一種氨基 酸,而其本身又變成叱哆醛-5 -磷酸,毗哆 醛-5 -磷酸在轉(zhuǎn)氨基作用中起到轉(zhuǎn)移氨基的 作用。假如給因氨中毒導(dǎo)致肝昏迷的病人注 射鳥氨酸、谷氨酸和抗生素,請解釋注射這幾 種物質(zhì)的用意何在?解答:人和哺乳類動物是在肝中依靠鳥氨10 酸循環(huán)將氨轉(zhuǎn)變?yōu)闊o毒的尿素。鳥氨酸作為C 和N的載體,

16、可以促進鳥氨酸循環(huán)。谷氨酸 可以和氨生成無毒的谷氨酰胺??股乜梢砸?制腸道微生物的生長,減少氨的生成。,什么是鳥氨酸循環(huán),有何實驗依據(jù)?合 成lmol尿素消耗多少高能磷酸鍵?解答:尿素的合成不是一步完成,而是通 過鳥氨酸循環(huán)的過程形成的。此循環(huán)可分成三 個階段:第一階段為鳥氨酸與二氧化碳和氨作 用,合成瓜氨酸。第二階段為瓜氨酸與氨作用, 合成精氨酸。第三階段精氨酸被肝中精氨酸酶 水解產(chǎn)生尿素和重新放出鳥氨酸。反應(yīng)從鳥氨 酸開始,結(jié)果又重新產(chǎn)生鳥氨酸,形成一個循 環(huán),故稱鳥氨酸循環(huán)(又稱尿素循環(huán))。合成 1mol尿素需消耗4mol高能鍵。詳見11.2.3 排泄”和“(2)尿素的生 成機制和鳥氨

17、酸循環(huán)” o,什么是生糖氨基酸、生酮氨基酸、生 酮兼生糖氨基酸?為什么說三竣酸循環(huán)是代 謝的中心?你是如何理解的?解答:在體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑陌被岱Q為 生糖氨基酸,其按糖代謝途徑進行代謝;能轉(zhuǎn) 變成酮體的氨基酸稱為生酮氨基酸,其按脂肪 酸代謝途徑進行代謝;二者兼有的稱為生糖兼 生酮氨基酸,部分按糖代謝,部分按脂肪酸代 謝途徑進行。一般說,生糖氨基酸分解的中間ii 產(chǎn)物大都是糖代謝過程中的丙酮酸、草酰乙 酸、口-酮戊二酸,琥珀酰CoA或者與這幾種 物質(zhì)有關(guān)的化合物。生酮氨基酸的代謝產(chǎn)物為 乙酰輔酶A或乙酰乙酸。在絕大多數(shù)生物體 內(nèi),三竣酸循環(huán)是糖、脂肪、蛋白質(zhì)、氨基酸 等物質(zhì)的共同分解途徑。另一

18、方面三竣酸循環(huán) 中的許多中間體如口-酮戊二酸、琥珀酸、延 胡索酸、蘋果酸、草酰乙酸等又是生物體各物 質(zhì)合成的共同前體。因此三竣酸循環(huán)是各物質(zhì) 代謝的中心。,什么是必需氨基酸和非必需氨基酸 ? 解答:生物體自身不能合成必需由食物供 給的氨基酸為必需氨基酸。如成年人體不能合 成蘇氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、苯丙 氨酸、繳氨酸、亮氨酸和異亮氨酸等8種氨基 酸,此8種氨基酸稱為必需氨基酸,缺少其中 任一種都將影響生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成。 而生 物體自身能合成的氨基酸為非必需氨基酸。何謂一碳單位?它與氨基酸代謝有何 聯(lián)系?解答:生物化學(xué)中將具有一個碳原子的基 團稱為一碳單位。在物質(zhì)代謝過程中常遇到一

19、碳基團從一個化合物轉(zhuǎn)移到另一個化合物的 分子上去,而一碳單位的載體往往為四氫葉 酸,體內(nèi)一碳單位的產(chǎn)生與下列氨基酸代謝有 關(guān)。12甘氨酸、絲氨酸的分解反應(yīng)可產(chǎn)生N5,N10-亞甲基四氫葉酸,組氨酸降解為谷氨酸的 過程中可以形成N5-亞氨甲基四氫葉酸,蘇氨 酸在代謝過程中可產(chǎn)生甘氨酸所以也能生成 N5, N10-亞甲基四氫葉酸。另外甲硫氨酸也是 體內(nèi)重要的甲基化試劑,可以為很多化合物提 供甲基。詳見11.3.2 “氨基酸代謝與一碳單 位”。.氨基酸生物合成途徑可分為哪幾種衍 生類型?解答:不同氨基酸生物合成途徑不同,但 許多氨基酸生物合成都與機體內(nèi)的幾個主要 代謝途徑相關(guān)。因此,可將氨基酸生物合

20、成相 關(guān)代謝途徑的中間產(chǎn)物,看作氨基酸生物合成 的起始物,并以此起始物不同劃分為六大類 型:口-酮戊二酸衍生類型,草酰乙酸衍 生類型,丙酮酸衍生類型,甘油酸 -3-磷 酸衍生類型,赤薛糖-4-磷酸和烯醇丙酮酸 磷酸衍生類型,組氨酸生物合成。詳見 11.3.1 “氨基酸合成途徑的類型”。. 1分子丙氨酸在哺乳動物體內(nèi)徹底氧 化可凈生成多少ATP?解答:丙氨酸通過轉(zhuǎn)氨基作用將氨基轉(zhuǎn)給 a-酮戊二酸產(chǎn)生丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸經(jīng)過 氧化脫竣形成乙酰 CoA和NADH。 1分子乙 酰CoA在細胞內(nèi)徹底氧化可產(chǎn)生 10分子的13ATP J分子NADH通過呼吸鏈的氧化可產(chǎn)生 2. 5分子ATPO谷氨酸在谷氨

21、酸脫氫酶的催化 下形成1分子NADH、1分子e酮戊二酸和1 分子NH/02分子NH4+在哺乳動物體內(nèi)經(jīng)過 尿素循環(huán)轉(zhuǎn)變成尿素需要消耗 4分子ATP o因 此1分子丙氨酸在哺乳動物體內(nèi)被徹底氧化 可凈產(chǎn)生12.5+2.5-2=13 分子的 ATPO如果 是魚類,則脫下的氨基可直接排出體外,不需 要消耗ATP ,那么就可凈產(chǎn)生15分子的ATP。.給哺乳動物喂食15N標(biāo)記的丙氨酸, 能否在動物體內(nèi)找到15N標(biāo)記的蘇氨酸、賴氨 酸和谷氨酸?解答:在動物體內(nèi)可以找到15N標(biāo)記的谷 氨酸,15N標(biāo)記的丙氨酸與 紡?fù)於嵩诠缺?轉(zhuǎn)氨酶的作用下生成谷氨酸和丙酮酸。 蘇氨酸 和賴氨酸是由食物供給的必需氨基酸,

22、 動物體 自身不能合成。12核甘酸代謝.你如何解釋以下現(xiàn)象:細菌調(diào)節(jié)喀咤 核甘酸合成的酶是天冬氨酸-氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶,而人類調(diào)節(jié)喀嗟核甘酸合成的酶主要是氨 基甲酰磷酸合成酶。解答:氨基甲酰磷酸合成酶參與兩種物 質(zhì)的合成)口密嗟核甘酸的合成和精氨酸的合 成。在細菌體內(nèi),這兩種物質(zhì)的合成發(fā)生在相14同的部位(細菌無細胞器的分化),如果調(diào)節(jié) 喀嗟核甘酸合成的酶是此酶的話,對喀嗟核普 酸合成的控制將會影響到精氨酸的正常合成。 而人體細胞內(nèi)有兩種氨基甲酰磷酸合成酶,即定位于線粒體內(nèi)的氨基甲酰磷酸合成酶I和 定位于細胞質(zhì)內(nèi)的氨基甲酰磷酸合成酶n ,它們分別參與尿素循環(huán)(精氨酸合成),喀嗟核 甘酸的合成。假如

23、細胞中存在合成核甘酸的全部前 體物質(zhì)) 從核糖-5-磷酸合成1mol腺甘酸 需要消耗多少摩爾ATP?如果用補救途徑 合成1mol腺甘酸,細胞可節(jié)省多少摩爾 ATP?解答:從核糖-5-磷酸合成磷酸核糖焦 磷酸(PRPP時,需要將1mol焦磷酸基團從 ATP轉(zhuǎn)移到核糖-5-磷酸分子上去,在合成IMP 途徑的后續(xù)步驟中,該焦磷酸被釋放并迅速水 解生成2mol Pi,相當(dāng)于消耗2mol ATR隨后 在生成甘氨酰胺核甘酸、甲酰甘氨咪建核背 酸、5-氨基咪建核甘酸和甲酰胺核甘酸四步反 應(yīng)中,各有1mol ATP的消耗,生成了 IMP。 在IMP轉(zhuǎn)化成腺甘酸時,由腺甘琥珀酸合成酶 催化的反應(yīng)又另外消耗 1m

24、ol GTPo所以,從 核糖-5-磷酸合成1mol腺甘酸需要消耗7mol ATR 補救途徑合成腺甘酸反應(yīng)為:腺喋吟 +核糖-5-磷酸 - 腺甘+Pi ,腺普+ ATP15 f AMP + ADP ,可見從腺喋吟補救途徑合成 1mol腺甘酸只消耗1mol ATP,比從頭合成核 糖-5-磷酸節(jié)省6mol ATP 。.使用放射性標(biāo)記的尿甘酸可標(biāo)記 DNA 分子中所有的喀嗟堿基,而使用次黃甘酸可標(biāo) 記DNA分子中所有的喋吟堿基,試解釋以上 的結(jié)果。解答:使用放射性標(biāo)記尿甘酸后,尿甘酸(UMP UDPCTACDfPdCDPdCTP UDP dUDPdUMPdTMPdTDAdTTR 放射性標(biāo) 記次黃甘酸后

25、,次黃首酸(IMP) - GMPGDP f dGDP dGTP次黃首酸(IMP)“腺昔琥珀 酸-AMP ADA dADP dATR.為便于篩選經(jīng)抗原免疫的 B細胞和腫 瘤細胞的融合細胞,選用次黃喋吟-鳥喋吟磷 酸核糖轉(zhuǎn)移酶缺陷(HGPRT -)的腫瘤細胞和 正常B細胞融合后在HAT(次黃喋吟-氨甲蝶 吟-胞甘)選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),此時只有融合 細胞才能生長和繁殖,請解釋選擇原理。解答:細胞內(nèi)核甘酸合成有兩條途徑,一 是從頭合成途徑,另一條是補救途徑。對于 B 細胞,由于不能在培養(yǎng)基上繁殖,所以未融合 的B細胞不能在培養(yǎng)基上繁殖。對于腫瘤細 胞,因為是HGPR缺陷型,因而它不能通過補 救途徑合成核

26、甘酸。又因為選擇性培養(yǎng)基 HAT 中含氨甲蝶吟,它是葉酸的拮抗劑,葉酸是喋16吟和喀嗟核甘酸從頭合成途徑中轉(zhuǎn)移一碳單 位的輔酶(四氫葉酸)的來源,所以氨甲蝶吟 抑制了核甘酸的從頭合成途徑,這樣未融合的 腫瘤細胞也不能在選擇性培養(yǎng)基上生長和繁 殖,只有融合細胞具有了雙親的遺傳性,才能在HAT選擇性培養(yǎng)基中利用補救途徑合成核 甘酸,從而生長和繁殖。.簡述5-氟尿喀嗟(5-Fura)、6-疏基喋 吟在體內(nèi)的代謝去向,試解釋它們?yōu)楹文芤种?DNA的復(fù)制。解答:5-澳尿喀嗟是胸腺喀嗟的結(jié)構(gòu)類似 物。它進入人體后,可轉(zhuǎn)化成 5-澳脫氧尿昔 酸(BrdUMP,進一步生成5-澳脫氧尿甘二磷 酸(BrdUDP和5-澳脫氧尿甘三磷酸(BrdUTB, BrdUTP作為dTTP的類似物可摻入到新合成的 DNA連中。但它又可作為一種假的負反饋抑制 劑抑制CDP勺還原,從而抑制DNA勺合成。因 為dTTP作為NDP2S原酶的變構(gòu)抑制劑可抑制 CDP的還原,具有類似的效應(yīng)。CDP2S原的抑

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