大二上課程生物化學酶

1、1、金屬離子的作用:金屬酶（metalloenzyme）：金屬離子與酶蛋白結(jié)合緊密，成為酶結(jié)構(gòu)中不可缺少的組成成分。如碳酸酐酶含Zn；谷胱甘肽過氧化物酶含硒；堿性磷酸酶含Zn，羧肽酶A含Zn。金屬激活酶（metal activated enzyme）：金屬離子與酶結(jié)合疏松，但需金屬離子活化，故金屬實際上是酶的激活劑。如激酶需Mg和Mn。有的酶類兼含有機輔基和金屬。如琥珀酸脫氫酶含黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)和Fe。金屬離子能與酶、底物形成各種形式的三元絡合物，保證了酶與底物的正確定向結(jié)合，而且還可作為催化基團。Fe、Cu及Mo等金屬離子可以通過氧化還原而傳遞電子完成多種物質(zhì)的氧化還原。如鐵卟啉

2、是很多血紅素蛋白的輔基。2、小分子有機化合物：小分子有機化合物主要參與酶的催化過程，在反應中傳遞電子、質(zhì)子或一些基團，多為維生素。維生素：維持細胞正常功能所必需，但需要量很少，動物體內(nèi)不能合成，必須由食物供給的一類有機化合物。水溶性維生素：VB1、VB2、Vpp、VB6、VC、VB12、泛酸、葉酸、肌醇脂溶性維生素：VA、VD、VE、VK第二節(jié) 酶促反應的特點和機制一、酶促反應的特點1、酶促反應具有極高的催化效率 酶促反應速度比非催化反應高1081020倍，比一般催 化反應高1071013。從初態(tài)轉(zhuǎn)化為過渡態(tài)需要能量，即為活化能（Energy of activation，EACT），活化能越大

3、，中間產(chǎn)物越難形成，反應越難進行。降低活化能、升高溫度可以加速化學反應。酶的催化作用有賴于降低反應的活化能?；罨苌杂薪档停俣葧@著增大。2、酶促反應有高度的特異性或?qū)Ｒ恍裕╯pecificity）一種酶只能作用于某一類或某一種特定的物質(zhì)。底物專一性1、結(jié)構(gòu)專一性： （1）絕對專一性：只作用于一個底物。與底物結(jié)構(gòu)類似 的化合物只能成為競爭性抑制劑或無影響。 （2）相對專一性：作用對象不只一種底物，要求略低一 些?？煞郑?（1）基團專一性：對鍵兩端的基團要求程度不同， 一個要求嚴，另一個不嚴； （2）鍵專一性：只作用于鍵，對鍵兩端的基團無嚴 格要求。2、立體異構(gòu)專一性： 底物的立體構(gòu)型影響酶和

4、底物的結(jié)合與催化。（1）旋光異構(gòu)專一性：當?shù)孜锞哂行猱悩?gòu)體時，酶只作用于其中的一種。如精氨酸酶只能催化L-精氨酸水解,對D-精氨酸則無作用,這種立體異構(gòu)專一性是由于酶活性中心與相應底物的結(jié)合必須是二者在構(gòu)型或構(gòu)象上彼此匹配才能建立。（2）幾何異構(gòu)專一性：當?shù)孜锞哂许樂磶缀萎悩?gòu)體時，酶只作用于其中的一種。延胡索酸(反丁烯二酸)L(+)蘋果酸3、酶易失活凡易使蛋白質(zhì)變性的因素都能使酶失去催化活性。4、酶的活性調(diào)控 有抑制調(diào)控、共價修飾調(diào)控、反饋調(diào)控、酶原調(diào)控、激素調(diào)控等。5、 催化活力與輔酶、輔基、及金屬離子有關。二、酶的活性中心（active center） （一）概念：1、對于不需要輔酶的酶

5、來說，活性中心就是酶分子在三維結(jié)構(gòu)上比較靠近的少數(shù)幾個氨基酸殘基或是這些殘基上的某些基團，它們在一級結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠，甚至位于不同的肽鏈上，通過肽鏈的盤繞，折疊而在空間構(gòu)象上相互靠近；2、對于需要輔酶的酶來說，輔酶分子或其某一部分往往就是活性中心的組成部分。（二）功能部位： 活性中心有兩個功能部位：1、結(jié)合部位：一定的底物靠此部位結(jié)合到酶分子上；2、催化部位：底物的鍵在此部位被打斷或形成新的鍵， 從而發(fā)生一定的化學變化。 （三）酶活性中心的特點：1、活性部位在酶分子的總體中只占相當小的部分：往往只由幾個氨基酸殘基組成（p.384，表10-1）；2、酶的活性部位是一個三維實體：活性部位的三維結(jié)

6、構(gòu)是由酶的一級結(jié)構(gòu)所決定的。活性部位的氨基酸殘基在一級結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠，但在肽鏈的盤繞、折疊而在空間結(jié)構(gòu)上相互靠近；3、酶活性部位的誘導契合：酶的活性部位并不是和底物的形狀正好互補的，而是在酶和底物結(jié)合過程中，底物分子或/和酶分子構(gòu)象發(fā)生一定變化后才互補的，即“誘導契合”；4、酶活性部位是一個疏水區(qū)域：酶的活性部位是位于酶分子表面的一個裂縫內(nèi)，這是相當疏水區(qū)域，非極性基團較多，產(chǎn)生一個微環(huán)境，提高與底物的結(jié)合能力；而其內(nèi)少量的極性氨基酸殘基可與底物結(jié)合而發(fā)生催化作用；5、底物通過次級鍵較弱的力結(jié)合到酶上：酶與底物結(jié)合成ES復合物主要靠次級鍵：氫鍵、鹽鍵、范德華力和疏水相互作用；6、酶活性部位

7、具有柔性或可運動性。三、酶促反應機制1、趨近效應和定向效應趨近效應：指兩個反應的分子，它們反應的基團需 要互相靠近，才能反應。 酶促反應速度與底物濃度成正比。在反應系統(tǒng)的關鍵區(qū)域底物濃度增高，反應速度也增加。因此，底物與酶活性中心的靠近，提高活性中心的底物有效濃度能大大提高酶促反應速度。定向效應: 指酶的催化基團與底物的反應基團之間的正確定 向。 除了“靠近”效率外，當?shù)孜锱c活性中心結(jié)合時，酶蛋白經(jīng)誘導而發(fā)生構(gòu)象變化，底物反應部位（基團或鍵）與酶的催化部位發(fā)生楔合，即“定向”作用，從而造成活性中心局部的底物濃度大大提高。2、酶使底物分子的敏感鍵發(fā)生“變形”（張力），使其易斷裂 底物分子受酶的作

8、用也發(fā)生構(gòu)象變化，使其敏感鍵中的某些基團的電子云密度發(fā)生變化，產(chǎn)生“電子張力”而引起敏感鍵的一端更加敏感，發(fā)生反應（p.390，圖10-3）。3、共價催化作用 底物與酶形成一個反應活性很高的共價中間物，反應活化能由此大大降低。 酶的親核基團（如羥基、巰基和咪唑基）對底物的親電子中心進行攻擊。親核基團含有可提供電子的原子，向底物親電子的原子提供電子，由此形成不穩(wěn)定的共價中間物。但酶的親核基團易變，所形成的共價中間物不穩(wěn)定，在隨后步驟中會被水分子或第二種底物攻擊而給出所需的產(chǎn)物，由此可加快中間物的分解而釋放出產(chǎn)物（p.392，圖10-7）。酶蛋白分子上的主要親核基團：絲氨酸的羥基、半胱氨酸的巰基、

9、組氨酸的咪唑基。 4、酸堿催化作用 酶活性中心上有的基團是質(zhì)子供體，有的為質(zhì)子受體，均可進行催化作用。（1）狹義酸堿催化劑：通過水分子的H+與OH-離子進行的催化。由于酶反應的最適pH接近中性，故作用不大；（2）廣義酸堿催化劑：即質(zhì)子供體和質(zhì)子受體。在酶反應中有重要作用。酶蛋白中起廣義酸堿催化作用的功能基：氨基、羰基、羧基、硫氫基、酚羥基和咪唑基。組氨酸的咪唑基：既是很強的親核基團，又是有效的廣義酸堿功能基。1）其解離常數(shù)約6.0，即其解離下來的質(zhì)子濃度與水中的H+相近，所以在中性條件下，有一半以酸形式存在，另一半以堿形式存在，即可作為質(zhì)子供體，又可作質(zhì)子受體而在酶反應中起催化作用；2）其供出

10、和接受質(zhì)子的速度十分迅速，且供出和接受的速度相等。 五、酶活性中心是低介電區(qū)域 某些酶的活性中心穴內(nèi)相對是非極性的，催化基團被低介電環(huán)境包圍，并排除高極性的水分子。這樣，底物分子的敏感鍵和酶的催化基團之間就會有很大的反應力。 水會減弱極性基團間的相互作用。水的極性和形成氫鍵的能力很大，水的介電常數(shù)極高。這種高極性使它在離子外形成定向的溶劑層，產(chǎn)生自身的電場，從而大大減少了它所所包圍的離子間的靜電作用或氫鍵作用。六、金屬離子催化（1）通過結(jié)合底物為反應定向；（2）通過可逆地改變金屬離子的氧化 態(tài)調(diào)節(jié)氧化還原反應；（3）通過靜電穩(wěn)定或屏蔽負電荷。第三節(jié) 酶的活力 酶的活力是指其在一定條件下催化某一

11、特定反應的能力。一、酶活力與酶反應速度 酶活力：一定條件下催化某一化學反應的反應速度。 反應速度（v）的單位：濃度/單位時間，即單位時間內(nèi)單位體積中底物的減少量或產(chǎn)物的增加量。 產(chǎn)物濃度對反應時間作圖，其曲線的斜率就是反應速度。反應速度只在最初一段時間內(nèi)保持恒定，隨反應時間延長，反應速度逐漸下降。因此研究酶反應速度應該以初速度為準（通常以底物的變化在起始濃度的5%以內(nèi)的速度為初速率）。 二、酶的活力單位 1個酶活力單位：指在特定條件（溫度25，pH和底物濃度等均最適）下，在1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化1mol底物的酶量，或是轉(zhuǎn)化底物中1mol的有關基團的酶量。 習慣用法：如淀粉酶，以每小時催化1g可溶性淀粉

12、液化所需的酶量為1個酶活力單位；也可以每小時催化1ml 2%可溶性淀粉液化所需的酶量表示。三、酶的比活力 每mg酶蛋白所具有的酶活力。 單位：單位/毫克蛋白（U/mg蛋白質(zhì)） 也可：單位/克 或 單位/毫升 比活力可用來比較每單位重量酶蛋白的催化活力。四、酶的轉(zhuǎn)換數(shù)kcat 為每秒鐘每個酶分子轉(zhuǎn)換底物的微摩爾數(shù)（mol）。相當于一旦底物-酶中間物ES形成后，酶將底物轉(zhuǎn)換為產(chǎn)物的效率（相當于米氏方程中的k3）。 第四節(jié) 酶促反應動力學研究酶催化反應過程與速率及各種影響酶催化速率的因素的關系.酶促反應速度：單位時間內(nèi)反應物的消耗或產(chǎn)物的增加（取其初速度）。一、底物濃度的影響1、“中間產(chǎn)物”假說與米

13、氏方程 在一定的酶濃度下將初速度（v）對底物濃度S作圖時：一級反應：當?shù)孜餄舛容^低時，反應速度與底物濃度呈正比關系；混合級反應：隨著底物濃度的增加，反應速度不再按正比升高；零級反應：繼續(xù)增大底物濃度，反應速度遞增為零，這時反應速度已趨向一個極限，說明酶已被底物飽和。 Vmax底物濃度初速度Km 底物濃度對反應速度的影響 解釋這種現(xiàn)象的是“中間產(chǎn)物”假說：酶與底物先絡合成一個絡合物，它是作為過渡態(tài)物質(zhì)，然后絡合物進一步分解，成為產(chǎn)物和游離態(tài)酶。 這個假說的前提是酶與底物反應的“快速平衡”，即在反應的開始階段，兩者反應速度很快，迅速建立平衡關系。 按“穩(wěn)態(tài)平衡”假說，酶促反應分兩步進行：第一步：酶

14、（E）與底物（S）作用，形成酶-底物中間產(chǎn)物 E+SES 第二步：中間產(chǎn)物分解，形成產(chǎn)物（P），釋放出游離酶(E)： ESP+E反應初期，V=K3ESK1K2K3穩(wěn)態(tài)：ES生成=ES分解K1ES=K2ES+K3ESES=ES/KmE=ET-ESES=（ET-ES）S/KmES=ETS/（S+Km）V=K3ES=K3ETS/（S+Km） =VmaxS/（S+Km）1913年，Michaelis與Menten：米孟式方程 v=VmaxS/(S+Km)v=酶促反應的速度，Vmax=在E與ES相等時的酶促反應達到的最大速度，Km=(k2+k3)/k1Km、Vmax意義（1）v=1/2Vmax時，Km=

15、S。 Km不依賴于酶濃度， Km就是酶促反應速度為最大速度一半時底物濃度。 Km的單位是mol/L.（2）Vmax=K3ET，Vmax與加入的酶量成正比。（3） Km為酶的特征常數(shù)。每種酶都有其Km值， Km只與酶的結(jié)構(gòu)和酶的底物有關，與酶的濃度無關.（4） Km可表示酶與底物的親和力。 Km越大，酶與底物的親和力越小。（5）一種酶催化幾種底物時有不同的Km，其中Km最小的底物為該酶的天然底物或最適底物。多底物反應的酶對于不同的底物有不同的Km。（6）酶的轉(zhuǎn)換數(shù)（K3）：當酶被底物充分飽和時，單位時間內(nèi)每個酶分子催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的分子數(shù)。K3=Vmax/E2、多種底物的反應 大多數(shù)酶反應包含

16、一種以上的底物，至少是雙底物反應： A+BP+Q 雙底物反應的三種機理：1) 依次反應機理： B P E+A EA EAB EPQ EQ E+Q 需要NAD+或NADH+的脫氫酶的反應屬于這類型。2) 隨機機理： E+AEA B Q EPE+P EABEPQ E+BEB A P EQE+Q3) 乒乓反應機理： A P B Q E E 轉(zhuǎn)氨酶的反應屬于這類型。 二、酶濃度對反應速度的影響在酶促反應體系中，當?shù)孜餄舛却蟠蟪^酶的濃度，使酶被底物飽和時，反應速度與酶的濃度變化成正比關系。V=K3E。VE三、溫度對反應速度的影響溫度較低時，反應速度隨溫度升高而加快，溫度超過一定數(shù)值后，酶受熱變性，反應

17、速度反而減慢，形成倒V型曲線，在此曲線頂點所代表的溫度時反應速度最大，稱為最適溫度（optimum temperature）。酶的最適溫度不是酶的特征常數(shù)，它與反應進行的時間有關。低溫一般不使酶破壞。溫度回升后，酶可以恢復活性。低溫麻醉、低溫保存菌種、低溫保存酶制劑。溫度系數(shù)：在達到最適溫度之前提高溫度，可增加反應速度。反應溫度提高10，其反應速度與原來的反應速度之比稱為反應的溫度系數(shù)（Q10）。酶活性溫度pH可影響酶分子尤其是活性中心上必需基團和催化基團的解離程度，也可影響底物和輔酶的解離程度，從而影響酶與底物的結(jié)合。在特定pH條件下，酶、底物和輔酶的解離情況適宜于相互結(jié)合，使酶反應速度達到

18、最大值，這個pH稱為最適pH（optimum pH ）。動物體內(nèi)多數(shù)酶的最適pH接近中性。最適pH不是酶的特征常 數(shù)，它受底物濃度、緩 沖溶液的種類、濃度及 酶的純度影響。四、 pH對反應速度的影響五、抑制劑對反應速度的影響 酶的抑制劑（inhibitor）：凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質(zhì)1、不可逆性抑制（irreversible inhibition） 抑制劑與酶的必需基團以牢固的共價鍵結(jié)合，從而使酶活喪失，不能用透析、超濾等去除抑制劑。 如低濃度的重金屬離子Hg2+、Ag+、As3+ 可與酶分子SH結(jié)合，使酶活抑制。又可分：（1）專一性的不可逆抑制：抑制劑僅僅和酶活性部位的

19、 有關基團反應；（2）非專一性的不可逆抑制：抑制劑可和一類或幾類基 團反應。路易士氣（砷）巰基酶失活的酶活性中心含有巰基的酶：重金屬鹽引起的巰基酶中毒可用二巰基丙醇（BAL）解毒。BAL農(nóng)藥敵百蟲、敵敵畏、1059等有機磷化合物能特異地與膽堿酯酶（Choline esterase）活性中心絲氨酸殘基的羥基結(jié)合，使酶失活。+ROPOOXRHOEROPOOOREHX有機磷化合物羥基酶失活的酶活性中心含有羥基的酶：敵百蟲敵敵畏有機磷殺蟲劑膽堿乙?；改憠A酯酶膽堿乙酰膽堿乙酰膽堿為生物體內(nèi)傳遞神經(jīng)沖動的重要物質(zhì)。膽堿酯酶為羥基酶，有機磷殺蟲劑中毒時，此酶活受抑制，結(jié)果造成乙酰膽堿的堆積，造成神經(jīng)過度興

20、奮直至抽搐而死?？捎媒饬锥▉碇委?。2、可逆性抑制 抑制劑與酶以非共價鍵結(jié)合。能用透析、超濾等去除抑制劑。 （1）競爭性抑制特點 ：抑制劑與底物結(jié)構(gòu)相似； 抑制劑與底物結(jié)合在酶的同一位點； 抑制作用可被高濃度的底物減低以至消除； Km增大，Vmax不變。1/V1/S1/Vmax-1/Km(1+I/Ki)競爭性抑制無抑制劑抑制劑 斜率=Km/Vm(1+I/Ki)丙二酸、蘋果酸、草酰 乙酸為琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制劑。GluPABA（對氨基苯甲酸）喋呤 HHNHCHCH2COOHCH2COOHNNNNCH2NHCOOHH2NSO2NHRH2N磺胺藥PABA+二氫喋呤+GluFH2FH4磺胺藥與PAB

21、A結(jié)構(gòu)相似，可與PABA競爭FH2合成酶的活性中心，F(xiàn)H2合成受抑制，F(xiàn)H4隨之減少，使核酸合成障礙，細菌生長繁殖受到抑制。FH2還原酶FH2合成酶四氫葉酸FH4氨甲喋呤（MTX）是FH2還原酶的競爭性抑制劑，抑制人體內(nèi)FH4的合成，以致抑制腫瘤的生長。FAFH2還原酶FH2FH2還原酶FH4葉酸二氫葉酸四氫葉酸（2）非競爭性抑制 酶可同時與底物及抑制劑結(jié)合： EI+SESI或ES+IESI， 但中間物ESI不能進一步分解為產(chǎn)物。 這類抑制劑是與酶活性中心以外的基團結(jié)合；若Ki=Ki，則Vmax減小而Km不變，稱非競爭性抑制。1/V1/S-1/Km(1+I/Ki)/Vmax非競爭性抑制無抑制劑

22、抑制劑3、反競爭性抑制特點：S、I結(jié)構(gòu)不相似，結(jié)合位點不同，增加S反而加強抑制，Km減小，Vmax減小。酶只有在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合：ES+IESI，而ESI不能進一步分解為產(chǎn)物。1/S1/V(1+I/Ki)/Vmax無I反競爭性抑制斜率=Km/Vm各種類型抑制的表觀Km及Vmax第四節(jié) 酶的活性調(diào)節(jié)方式一、別構(gòu)調(diào)節(jié)別構(gòu)酶：當代謝物分子可逆地結(jié)合到酶的某一非催化部位時，可改變酶的構(gòu)象，進而改變酶的活性，這種調(diào)節(jié)稱別構(gòu)調(diào)節(jié)，受別構(gòu)調(diào)節(jié)的酶稱別構(gòu)酶。特點：1、常含有多個亞基（有四級結(jié)構(gòu)）；2、除催化部位外，還有調(diào)節(jié)部位；3、酶分子的催化部位和調(diào)節(jié)部位有的在同一亞基上，也有的不在同一亞基上

23、；4、不符合米氏方程，存在協(xié)同效應。別構(gòu)激活：因別構(gòu)而導致酶活性增加別構(gòu)抑制：因別構(gòu)而導致酶活性降低別構(gòu)酶結(jié)構(gòu)：除有結(jié)合底物和起催化作用的活性中心外，還有可結(jié)合調(diào)節(jié)物的別構(gòu)中心。前者負責對底物的結(jié)合和催化，后者負責調(diào)節(jié)反應速度。兩個中心位于酶蛋白的不同部位上（或不同亞基上，或同一亞基不同部位上）。1、調(diào)節(jié)物：1）同促效應：調(diào)節(jié)物是底物。酶分子 上有兩個以上的底物結(jié)合 中心，調(diào)節(jié)作用取決于酶 上有多少個底物結(jié)合中心 被結(jié)合； 2）異促效應：調(diào)節(jié)物不是底物，而是 其他代謝分子。天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶（ATCase）為例（p.413）： 底物N-氨甲酰磷酸和天冬氨酸促進ATCase活性，為同促效應；CT

24、P為最終產(chǎn)物，降低了酶與底物的親和性，抑制ATCase活性；ATP為非底物分子，但可增強酶與底物的親和性而激活ATCase，所以起到了異促效應。2、別構(gòu)酶的性質(zhì)：（1）別構(gòu)酶一般是寡聚酶，通過次級鍵由多亞基構(gòu)成：別構(gòu) 酶的活性中心（活性部位）和別構(gòu)中心（調(diào)節(jié)部位）可 能在同一亞基上，也可能分別在不同的亞基上；每個別 構(gòu)酶分子可以有一個以上的活性部位和調(diào)節(jié)部位。（2）別構(gòu)酶的動力學：因別構(gòu)酶有協(xié)同效應，所以其S對v 的動力學曲線不是雙曲線，而是S形曲線（正協(xié)同）或 表觀雙曲線（負協(xié)同）。S形曲線：表明酶結(jié)合一分子底物（或調(diào)節(jié)物）后， 酶的構(gòu)象發(fā)生變化，從而大大增加對后 續(xù)底物分子的親和性，促進后

25、續(xù)分子與 酶的結(jié)合，表現(xiàn)為正協(xié)同性，這種酶稱 為具有正協(xié)同效應的別構(gòu)酶；表觀雙曲線：在底物濃度較低范圍內(nèi)酶的活力上升 很快，但隨后底物濃度雖有較大的提 高，但反應速度升高卻很小，表現(xiàn)為 負協(xié)同性，這種酶稱為具有負協(xié)同效 應的別構(gòu)酶。怎么區(qū)分米氏酶與別構(gòu)酶？ koshland建議用飽和比值（saturation ratio, Rs） 典型的米氏酶 RS=81 具有正協(xié)同效應的別構(gòu)酶 RS81 （3）K型效應物和V型效應物：能改變底物的K0.5而不改變反應Vmax的效應物稱為K型效應物；能改變Vmax而不改變K0.5的效應物稱為V型效應物（p.419，圖10-58）。（4）別構(gòu)酶的脫敏作用：別構(gòu)酶

26、經(jīng)加熱或化學試劑處理，可引起別構(gòu)酶解離，失去調(diào)節(jié)活性，稱為脫敏作用。脫敏后的酶表現(xiàn)為米氏酶的動力學雙曲線（p.420，圖10-59）。 二、酶的共價修飾（covalent modification）酶蛋白肽鏈上的某些殘基側(cè)鏈在另一組酶的催化下發(fā)生可逆的共價修飾 ，從而引起酶活性改變，調(diào)節(jié)酶的活性：磷酸化、乙酰化、甲基化、腺苷化。磷酸化修飾：通過各種蛋白激酶的催化可使酶蛋白中絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸的羥基進行磷酸化修飾，又可通過各種蛋白磷酸酶催化使此類磷酸基團水解出來，從而形成可逆的共價修飾來改變酶的構(gòu)象，調(diào)節(jié)酶的活性。磷酸化修飾特點：1、磷酸化及脫磷酸化分別由蛋白激酶及蛋白磷酸酶催化。2、可連鎖

27、進行，逐級磷酸化或脫磷酸化，出現(xiàn)級聯(lián)放大。3、磷酸化僅需以ATP供給磷酸基團，耗能遠小于合成酶蛋白，作用快速。4、磷酸化修飾常與別構(gòu)調(diào)節(jié)相互協(xié)作。三、酶原的激活酶原（Zymogen）：有些酶（絕大多數(shù)為蛋白酶）在細胞內(nèi)合成及初分泌時，沒有活性酶原的激活：在一定條件下，酶原可轉(zhuǎn)化成有活性的酶。酶原激活的機制是分子內(nèi)肽鍵一處或多處斷裂，使分子構(gòu)象發(fā)生一定程度改變，從而形成酶的活性中心。酶原激活也存在級聯(lián)反應。胰蛋白酶原腸激酶胰蛋白酶+六肽胰凝乳蛋白酶原胰蛋白酶-凝乳蛋白酶+兩個二肽羧基肽酶原胰蛋白酶羧 基肽酶 A+幾個碎片同工酶(isoenzyme)同工酶：指催化相同的化學反應，而酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學性質(zhì)不同的一組酶。由不同基因或等位基因編碼的多肽鏈所組成，或由同一基因轉(zhuǎn)錄生成的mRNA翻譯成不同多肽鏈組成的蛋白質(zhì)。同工酶存在 于同一種屬或同一個體的不同組織或同一細胞的不同亞細胞結(jié)構(gòu)中。乳酸丙酮酸乳酸脫氫