2012年度院所生物安全培訓(xùn)課件

1、 實(shí)驗(yàn)室生物平安2021.09實(shí)驗(yàn)室生物平安實(shí)驗(yàn)室生物平安實(shí)驗(yàn)室生物平安Laboratory Biosafety 是指以實(shí)驗(yàn)室為科研和工作場所時(shí)，防止危險(xiǎn)生物因子造成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措施。 當(dāng)實(shí)驗(yàn)室工作人員所處理的實(shí)驗(yàn)對(duì)象含有致病的微生物及其毒素時(shí)，通過使用個(gè)體防護(hù)裝置一級(jí)屏障、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)建造二級(jí)屏障和嚴(yán)格遵從標(biāo)準(zhǔn)化的工作及操作程序三級(jí)屏障等綜合措施: 1確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)對(duì)象侵染。 2確保周圍環(huán)境不受其污染。實(shí)驗(yàn)室感染相關(guān)事故1941年美國發(fā)生74例實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的吸入性布氏桿菌感染事故1974年丹麥某醫(yī)院臨床生化檢驗(yàn)室的工作人員肝炎發(fā)病率比普通人群高出

2、7倍1976年英國某醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人員高5倍1992年美國報(bào)告職業(yè)性感染艾滋病者13例，其中1例是實(shí)驗(yàn)室工作者，12例是臨床醫(yī)護(hù)人員實(shí)驗(yàn)室感染相關(guān)事故1993年國內(nèi)某醫(yī)院報(bào)告225名醫(yī)院工作人員醫(yī)生、護(hù)士、食堂工作人員、檢驗(yàn)人員HBV檢測結(jié)果，其中檢驗(yàn)人員感染率最高，陽性率為81.2%1998年，我國某高校學(xué)生在用大白鼠進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，有兩名學(xué)生被大白鼠咬傷，還有一些學(xué)生在解剖的過程中，未按照要求戴手套操作，結(jié)果在29名實(shí)驗(yàn)人員中，有9人感染了流行性出血熱2004年新加坡、中國臺(tái)灣、中國CDC SARS實(shí)驗(yàn)室感染2021年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)28名師生因動(dòng)物實(shí)驗(yàn)使用了未經(jīng)

3、檢疫的山羊感染了布魯氏菌病 中國醫(yī)務(wù)人員職業(yè)感染途徑 (n=1891) 調(diào)查時(shí)間：年年最常報(bào)告的感染：乙型肝炎、肺結(jié)核、傷寒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎、布魯氏菌病我國HIV職業(yè)暴露事故統(tǒng)計(jì)19972005年 中國輸血雜志 , 2006，19(6) : 449-451. 實(shí)驗(yàn)室生物平安事故原因工作人員主觀麻痹大意；未遵守實(shí)驗(yàn)室生物平安規(guī)那么和程序；生物平安實(shí)驗(yàn)室存在平安隱患；實(shí)驗(yàn)室感染可控性可控性：只要重視，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室平安監(jiān)督管理，認(rèn)真對(duì)待是可以防止此類事故發(fā)生的。例如： 領(lǐng)導(dǎo)重視：生物平安意識(shí)、態(tài)度和責(zé)任； 科學(xué)管理：條例、完善、預(yù)案、可行性； 可靠的硬件：設(shè)施過硬、設(shè)備齊全、驗(yàn)證； 高素質(zhì)的隊(duì)伍：堅(jiān)持

4、、培養(yǎng)、提高； 標(biāo)準(zhǔn)和程序：不斷完善的技術(shù)和SOP。生物平安管理體系相關(guān)法規(guī)、條例組織機(jī)構(gòu) 管理體系相關(guān)法規(guī)、條例法規(guī) 國務(wù)院?病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物平安管理?xiàng)l例?中華人民共和國傳染病防治法中華人民共和國國境衛(wèi)生檢疫法突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例相關(guān)法規(guī)、條例技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)國家標(biāo)準(zhǔn)?實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求?GB19489-2004 ?生物平安實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)?GB50346 -2004 ?微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物平安通用準(zhǔn)那么?WS 233-2002 ?人間傳染的病原微生物名錄?WS 2006?可感染人類的高致病性病原微生物菌毒種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定? WS 第45號(hào) 2006生物恐怖的

5、法規(guī)文件2001年，?刑法?第三次修訂案，把生物恐怖活動(dòng)定為犯罪。2002年，國務(wù)院令第365號(hào)，?中華人民共和國生物兩用品及相關(guān)設(shè)備和技術(shù)出口管制條例?及其管制清單。2006年，管制清單進(jìn)行了修訂和補(bǔ)充，增加了SARS病毒等13種病菌毒種等。2005年12月商務(wù)部、海關(guān)總署公布了?兩用物項(xiàng)和技術(shù)進(jìn)出口許可證管理方法?。組織機(jī)構(gòu) 我國實(shí)驗(yàn)室生物平安管理實(shí)行法人責(zé)任制及實(shí)驗(yàn)室主任和工程負(fù)責(zé)人責(zé)任制設(shè)立生物平安領(lǐng)導(dǎo)小組和生物平安委員會(huì)負(fù)責(zé)生物平安工作實(shí)驗(yàn)室設(shè)置專職或兼職平安監(jiān)督員 最高管理者法定代表人生物平安委員會(huì)實(shí)驗(yàn)室主任(生物平安負(fù)責(zé)人)工程負(fù)責(zé)人生 物 安 全 防 護(hù) 實(shí) 驗(yàn) 室生物平安領(lǐng)導(dǎo)

6、小組相關(guān)職能科室相關(guān)業(yè)務(wù)科室后勤保障部門平安監(jiān)督員平安管理體系組織結(jié)構(gòu)框圖 實(shí)驗(yàn)室生物平安防護(hù)三項(xiàng)技術(shù)措施實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程和技術(shù) 標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程 特殊的操作規(guī)程 平安設(shè)備一級(jí)屏障 特殊設(shè)計(jì)和建筑要求二級(jí)屏障生物平安分級(jí)BSLs生物平安實(shí)驗(yàn)室硬件:實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造 實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置 個(gè)人防護(hù)裝備軟件:管理規(guī)程 標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序確保: 工作人員 周圍環(huán)境 實(shí)驗(yàn)因子實(shí)驗(yàn)室生物平安防護(hù) 三項(xiàng)技術(shù)措施樣品隔離技術(shù)機(jī)械、氣幕，防止傳染因子進(jìn)入環(huán)境接觸人體定向流技術(shù)三級(jí)負(fù)壓系統(tǒng)，防止傳染因子擴(kuò)散消毒滅菌技術(shù)物理、化學(xué)，滅活傳染因子實(shí)驗(yàn)室生物平安一級(jí)屏障primary barrier是操作者和被操作對(duì)象之間的隔離

7、，也稱一級(jí)隔離如生物平安柜 分3級(jí)-I、II、III級(jí)個(gè)體防護(hù)裝備 口罩、面具、眼鏡，防護(hù)衣、帽、褲、鞋、靴、襪、手套、正壓服等個(gè)人防護(hù)裝備PPE一級(jí)屏障 一級(jí)屏障 生物平安柜BSC-Biosafety cabinet一級(jí)屏障-生物平安柜生物平安柜的作用防護(hù)實(shí)驗(yàn)對(duì)象、人員和環(huán)境。處理感染性物質(zhì)特別是高濃度感染性物質(zhì)。進(jìn)行有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(shí)，如離心，研磨，劇烈震動(dòng)，超聲破碎，翻開內(nèi)外壓力不同的感染性物質(zhì)的容器，動(dòng)物鼻腔接種等。一級(jí)屏障-生物平安柜生物平安柜與超凈臺(tái)生物平安柜提供了對(duì)樣品、人、環(huán)境的保護(hù)超凈臺(tái)僅提供對(duì)樣品的保護(hù)生物平安柜類別級(jí)別工作口平均進(jìn)風(fēng)速m/s循環(huán)風(fēng)比例（%）排風(fēng)比例（

8、%）連接方式I級(jí)0.360100密閉連接II級(jí)A10.380.517030可排到房間或設(shè)置局部排風(fēng)罩A20.517030可排到房間或設(shè)置局部排風(fēng)罩B10.513070密閉連接B20.510100密閉連接III級(jí)/0100密閉連接級(jí)生物平安柜 保護(hù)工作人員和環(huán)境 不保護(hù)試樣。級(jí)生物平安柜級(jí)生物平安柜一級(jí)屏障-生物平安柜平安柜操作要點(diǎn)將實(shí)驗(yàn)器具放置于平安柜中，紫外滅菌15分鐘后，通風(fēng)10-15分鐘。檢測氣流是否正常。標(biāo)準(zhǔn)有序進(jìn)行試驗(yàn)，防止手臂頻繁進(jìn)出平安柜紊亂氣流，同時(shí)防止實(shí)驗(yàn)材料擋住風(fēng)口。實(shí)驗(yàn)完畢清潔平安柜內(nèi)部。紫外滅菌15分鐘，通風(fēng)10-15分鐘后關(guān)閉平安柜。一級(jí)屏障-生物平安柜本卷須知HEP

9、A濾器不能截留化學(xué)氣體，同時(shí)，揮發(fā)的化學(xué)品可能損壞HEPA濾器。濾器風(fēng)扇以及平安柜內(nèi)插座可能產(chǎn)生電火花，如果在平安柜中操作易燃易揮發(fā)液體易引起火災(zāi)或者爆炸。實(shí)驗(yàn)室生物平安二級(jí)屏障(secondary barrier) 生物平安實(shí)驗(yàn)室和外部環(huán)境的隔離，也稱二級(jí)隔離 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)通風(fēng)空調(diào)系統(tǒng) 給水排水電氣和控制系統(tǒng)二級(jí)隔離的防護(hù)能力取決于實(shí)驗(yàn)室分區(qū)和定向氣流 一般按照實(shí)驗(yàn)因子污染的概率把實(shí)驗(yàn)室分為潔凈、半污染和污染三個(gè)區(qū) 實(shí)驗(yàn)室生物平安水平分級(jí)根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護(hù)措施，將實(shí)驗(yàn)室生物平安防護(hù)水平biosafety level，BSL分為4級(jí)，I級(jí)防護(hù)水平最低，IV級(jí)防護(hù)水平

10、最高以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物平安防護(hù)水平以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物平安防護(hù)水平一級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室 適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)健康成年人無致病作用，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和環(huán)境的潛在危害很小。一級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室 舉例：大腸桿菌耐格里原蟲感染性犬肝炎病毒枯草芽孢桿菌一級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室減少含微生物液體噴濺和氣溶膠的形成每日清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，及時(shí)清理實(shí)驗(yàn)廢棄物標(biāo)準(zhǔn)的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作限制實(shí)驗(yàn)區(qū)人員走動(dòng)嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)區(qū)飲食防止使用口吸式移液實(shí)驗(yàn)服/乳膠手套/防護(hù)面具、眼鏡。二級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室 適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)人和環(huán)境具有 中等潛在危

11、害。二級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室乙肝病毒 沙門氏菌 HIV血清學(xué)檢測麻疹病毒舉例：* 有有效的疫苗或治療措施二級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室人員實(shí)行限制進(jìn)入制度，實(shí)驗(yàn)中限制出入；應(yīng)設(shè)可關(guān)閉的帶鎖的門，可使用感應(yīng)式、肘開式或腳踏式等非手動(dòng)操作水龍頭；洗眼裝置；配備消毒滅菌的設(shè)備；實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有存放備用物品的條件。* 特別要警惕污染的針頭或者銳器三級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室 適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是通過呼吸途徑使人感染導(dǎo)致嚴(yán)重的甚至是致死性疾病的致病微生物或其毒素。三級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室例如： 結(jié)核桿菌 炭疽桿菌 鼠疫桿菌通常已有預(yù)防疫苗四級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室 適用于實(shí)驗(yàn)對(duì)象是對(duì)人具有高度危險(xiǎn)性，表現(xiàn)出通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明的目前

12、尚無有效的疫苗和治療措施的致病微生物及其毒素。四級(jí)生物平安實(shí)驗(yàn)室有暴露于通過氣溶膠傳播或者傳播途徑不明確的致病菌潛在可能感染可能致死 例如：黃病毒埃博拉病毒SNV中歐蜱傳腦炎病毒病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物平安傳染病的巨大危害生物武器的潛在威脅。生物恐怖的現(xiàn)實(shí)威脅。生物技術(shù)的非和平應(yīng)用微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的平安隱患。 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物平安的核心是防擴(kuò)散和防感染！十八大實(shí)驗(yàn)室生物平安重點(diǎn)病原微生物危害等級(jí)(GB 19489)GB 19489-2004?實(shí)驗(yàn)室 生物平安通用要求? 2004年10月1日實(shí)施分級(jí)依據(jù)微生物的致病性；傳播方式和宿主范圍；具有的有效預(yù)防措施；具有的有效治療措施分級(jí)3.1 危害等級(jí)I

13、 低個(gè)體危害，低群體危害3.2 危害等級(jí) (中等個(gè)體危害，有限群體危害)3.3 危害等級(jí) III 高個(gè)體危害，低群體危害3.4 危害等級(jí) (高個(gè)體危害，高群體危害)微生物危害等級(jí)(國務(wù)院條例)?病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物平安管理?xiàng)l例? 分級(jí)依據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度將病原微生物分為四類一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物 微生物危害等級(jí)(國務(wù)院條例)三類是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成

14、嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物四類是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物 各種病原微生物的危害等級(jí)分類參見衛(wèi)生部?人間傳染的病原微生物名錄?2006.01病原微生物的危險(xiǎn)等級(jí)分布種類危害等級(jí)危害等級(jí) 危害等級(jí)危害等級(jí)病毒185114219細(xì)菌311901真菌635寄生蟲1232臨床檢驗(yàn)相關(guān)病原生物危險(xiǎn)等級(jí)分布病原微生物運(yùn)輸運(yùn)輸包裝要求運(yùn)輸包裝要求A類：對(duì)健康人或動(dòng)物造成永久性殘疾或致命疾病的感染性物質(zhì)。包裝：三層包裝，并附上完整的危險(xiǎn)品申報(bào)單，培訓(xùn)運(yùn)輸人員。運(yùn)輸包裝要求 B類：不

15、符合列入A類標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)。運(yùn)輸專用名稱為B類生物物質(zhì)代替 診斷標(biāo)本或臨床標(biāo)本。 包裝：三層包裝,不需要危險(xiǎn)品申報(bào)單。運(yùn)輸工具高致病性樣本應(yīng)不少于兩人護(hù)送實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行標(biāo)準(zhǔn)儀器設(shè)備的使用標(biāo)準(zhǔn)針對(duì)感染性材料的試驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)個(gè)人防護(hù)用品的使用標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室消毒規(guī)程危險(xiǎn)廢棄物的處置規(guī)程鋒利器具的平安操作規(guī)程實(shí)驗(yàn)緊急情況處理規(guī)程 生物危害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估評(píng)估目的生物危害評(píng)估是對(duì)微生物和毒素可能給人或環(huán)境帶來的危害所進(jìn)行的評(píng)估目的是為確定生物平安防護(hù)等級(jí)、實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程提供重要依據(jù) 在危害評(píng)估的根底上，按不同級(jí)別的防護(hù)要求選擇適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備防止工作人員發(fā)生感染，同時(shí)防止過分防護(hù)在群眾中

16、造成恐慌 生物危害風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估評(píng)估內(nèi)容生物因子的種類的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料來源傳染性、致病性傳播途徑在環(huán)境中的穩(wěn)定性感染劑量、濃度動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)預(yù)防和治療實(shí)驗(yàn)室生物平安管理制度準(zhǔn)入制度設(shè)施設(shè)備監(jiān)測、檢測和維護(hù)制度健康醫(yī)療監(jiān)督制度生物平安工作自查制度實(shí)驗(yàn)室資料檔案管理制度生物平安管理及實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)制度其它必須的制度 生物平安工作自查制度 實(shí)驗(yàn)室生物平安工作應(yīng)定期進(jìn)行自查形式可以參考質(zhì)量管理體系有關(guān)不符合檢測的控制、內(nèi)審、內(nèi)務(wù)管理等程序必須列出與生物平安相關(guān)的各個(gè)環(huán)節(jié)逐一檢查 實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)制度 保證所有實(shí)驗(yàn)室 工作人員必需接受培訓(xùn)并經(jīng)考核合格，持證上崗新工作人員經(jīng)過培訓(xùn)通過考核

17、后，還須與有資格的工作人員一同工作1個(gè)月，才能獲得上崗證所有人員每年至少要接受一次新的培訓(xùn)對(duì)培訓(xùn)內(nèi)容、考核方式也應(yīng)作出規(guī)定建立并保存人員培訓(xùn)和考核記錄檔案 洗手實(shí)驗(yàn)室工作人員在實(shí)際或可能接觸了血液、體液或者其他污染材料后，即使戴了手套也應(yīng)立即洗手。摘除手套后、使用衛(wèi)生間前后、離開實(shí)驗(yàn)室前、進(jìn)食應(yīng)洗手。實(shí)驗(yàn)室生物平安本卷須知六步洗手法標(biāo)準(zhǔn)搓揉20s6步法第一步，五指并攏、掌心搓掌心；第二步，手指交錯(cuò)、掌心搓掌背； 第三步，手指交錯(cuò)、掌心搓掌心；第四步，兩手互握，互相摩擦；第五步，拇指在掌心旋轉(zhuǎn)； 第六步，指尖摩擦掌心。 防護(hù)口罩外科手術(shù)口罩：不是呼吸防護(hù)保護(hù)他人口罩的存放及效期(通風(fēng)、枯燥，2-

18、3年)呼吸防護(hù)口罩強(qiáng)調(diào)適配性，兒童不宜使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書佩戴、摘除流程掌握更換時(shí)機(jī)，不得隨意丟棄提示：N95防護(hù)不含油氣溶膠，過濾效果最低可達(dá)95 N95是所有認(rèn)證等級(jí)中最低、最根本的一個(gè)等級(jí)。離心管破碎，應(yīng)立即停機(jī)，并于30分鐘后翻開。戴乳膠手套后，再套上厚橡皮手套，用鑷子取出離心碎片。全部碎管和套管等應(yīng)放入無腐蝕性的消毒液中浸泡24小時(shí)，或采用高壓滅菌。離心機(jī)轉(zhuǎn)頭應(yīng)采用無腐蝕性的消毒液擦拭干凈，擦布也需經(jīng)高壓滅菌。離心機(jī)廢棄物處理應(yīng)置于耐用、 防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。 普通廢棄物和含感染性物質(zhì)的廢棄物分別處理。 含感染性物質(zhì)的針頭等鋒利廢棄物應(yīng)放于鞏固的容器中，統(tǒng)一處理。非一次性利

19、器放入厚壁容器中最好高溫高壓蒸氣消毒處理。廢棄物處理禁止將針頭丟棄在塑料袋或普通垃圾箱中蒸汽滅菌壓力蒸汽滅菌器是所有滅菌器中歷史最久、應(yīng)用最廣、價(jià)格最廉價(jià)的滅菌設(shè)備之一；適用于耐高溫、耐高濕物品的滅菌，也適合處理微生物污染的廢水和固體廢物。物品裝放時(shí)，難于滅菌的物品放在上層，較易滅菌的物品放在下層；金屬物品放下層，織物包放上層，上下左右相互間均應(yīng)間隔一定距離以利蒸汽置換空氣。不正確的習(xí)慣廢針頭和碎玻璃不經(jīng)包裝丟棄自己或他人被刺、被感染?；旌厢t(yī)學(xué)垃圾和生活垃圾感染和污染環(huán)境。向下水道排放未經(jīng)徹底消毒的有害病菌或高濃度的有害化學(xué)品致癌物、致畸物、重金屬鹽溶液等。意外暴露的處置 預(yù)防措施處理原那么意外情況處理事故的評(píng)估和改進(jìn) 刺傷、切割傷或擦傷