常用pH緩沖液配置方法及注意關(guān)鍵事項(xiàng)

1、常用pH緩沖溶液的配制和pH值序號(hào)溶液名稱配制措施pH值1氯化鉀-鹽酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 與 25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均勻后，加水稀釋至100 ml1.72氨基乙酸-鹽酸在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加480 ml濃鹽酸，再加水稀釋至1L2.33一氯乙酸-氫氧化鈉在200 ml水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH, 溶解完全后再加水稀釋至1L2.84鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸把25.0 ml 0.2 mol/L勺鄰苯二甲酸氫鉀溶液與6.0 ml0.1 mol/L HCl混合均勻，加水稀釋至100 ml3.65鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化

2、 鈉把25.0 ml 0.2 mol/L勺鄰苯二甲酸氫鉀溶液與17.5ml 0.1 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml4.86六亞甲基四胺-鹽酸在200 ml水中溶解六亞甲基四胺40 g,加濃HCl 10 ml, 再加水稀釋至1L5.47磷酸二氫鉀-氫氧化鈉把 25.0 ml 0.2 mol/L 勺磷酸二氫鉀與 23.6 ml 0.1mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml6.88硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L勺硼酸-氯化鉀與4.0 ml 0.1mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml8.09氯化銨-氨水把0.1 mol/L

3、氯化銨與0.1 mol/L氨水以2： 1比例混合均勻9.110硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0 ml 0.2 mol/L勺硼酸-氯化鉀與43.9 ml 0.1mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml10.011氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化鈉把49.0 ml 0.1 mol/L氨基乙酸-氯化鈉與51.0 ml0.1 mol/L NaOH混合均勻11.612磷酸氫二鈉-氫氧化鈉把 50.0 ml 0.05 mol/L NJ1HPO4與 26.9 ml 0.1 mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml12.013氯化鉀-氫氧化鈉把 25.0 ml 0.2 mol/L KCl 與 6

4、6.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均勻，加水稀釋至100 ml13.0、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事項(xiàng)藥物要有較好日勺質(zhì)量試劑分為優(yōu)級(jí)純（保證試劑，Guaranteed reagent, G.R.）、分 析試劑(Antalytical reagent, A. R.)化學(xué)純(Chemical pure, C. P.)和實(shí)驗(yàn)試劑(Laboratory reagent, L. R.）等等。工業(yè)用日勺化學(xué)試劑，雜質(zhì)較多，只在個(gè)別狀況下應(yīng)用，如配洗液 用日勺硫酸、配干燥劑日勺氯化鈣等。藥物稱量要精確。配制試劑用水應(yīng)用新鮮日勺去離子水或雙蒸餾水，比電阻值在50萬歐姆以上，pH在5.57.

5、0 之間才可應(yīng)用，在組織培養(yǎng)等特殊用途時(shí)應(yīng)注意此項(xiàng)規(guī)定，配制一般化驗(yàn)用溶液只規(guī)定用雙 蒸餾水或去離子水。配好后日勺溶液，應(yīng)立即除菌解決（如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)），以防雜菌生長(zhǎng)。（二）0.067 （1/15） Mol/L 磷酸緩沖液1/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液日勺配制：稱取磷酸二氫鉀（KH2PO4，A. R.） 9.08g，用蒸餾 水溶解后，傾入1000ml容量瓶?jī)?nèi)，再稀釋至刻度（1000ml）。1/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液日勺配制：稱取無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4, A.R. ） 9.47g （或者 Na2HPO42H2O 11.87g）用蒸餾水溶解后，放入1000ml容量瓶?jī)?nèi)

6、，再加蒸餾水稀釋至刻度（1000ml）。按附表日勺比例，配制成不同pH值日勺緩沖溶液。附表1磷酸鹽緩沖液配制法（單位：毫升）pH1/15Mol/L Na HPO1/15Mol/L KH POpH1/15Mol/L Na HPO1/15Mol/L KH PO242424245.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27

7、.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na HPO (ml)0.15Mol/L NaH PO (ml)6.42426.52473.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO4 2H2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含 26.7

8、g/L。Na2HPO4 12H2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含 53.7g/L。NaH2PO4 H2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含 20.7g/L。NaH2PO4 2H2O 分子量=156.03 0.15Mol/L 溶液含 23.4g/L。0.2Mol/L PB緩沖液附表3 0.2mol/L PB緩沖液配制法pH0.2 Mol/L Na HPO (ml)0.2Mol/L NaH PO (ml)5.8248.02492.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.0

9、7.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO4 2 H2O 溶液 35.61g/LNa2HPO4 12 H2O 溶液含 71.64g/L0.2Mol/LNaH2PO4 H2O 溶液含 27.60g/LNaH2PO4 2 H2O 溶液含 31.21g/L欲配0.1Mol/L PB緩沖液則在0.2Mol/L PB緩沖液日勺基本上加H O稀釋1倍即可。欲配制PBS 2液時(shí)，則在溶液中加0.85%勺NaCl溶液即可。（五）無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0gKC

10、l 0.2gNa2HPO4 1.15g（如為 Na2HPO4 12H2O,則為 2.89g）KH2PO4 0.2g將上述試劑依次溶于1 000ml去離子水中，完全溶解后，115C高壓滅菌10min15min,存在4C冰箱中備用。此液可用于配制和稀釋細(xì)胞分散劑以及洗滌細(xì)胞培養(yǎng)物。（六）硼酸鹽緩沖液（Borate saline buffer）硼酸（H3BO3）0.2Mol/L 硼酸：硼酸 12.37g 加水至 1 000ml。硼砂（Na2B4O7）0.05Mol/L 硼砂：硼砂 19.07g 加水至 1 000ml。附表4不同pH勺0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法pH0.05Mol/L 硼砂（ml）0.2Mol/L