溶血性貧血實(shí)驗(yàn)室檢測課件

1、 溶血性貧血實(shí)驗(yàn)室檢測 紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn) 【目的】 掌握紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)的原理、方法、注意事項(xiàng)及臨床意義?！緦?shí)驗(yàn)原理】 紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)是檢測紅細(xì)胞對不同濃度低滲鹽溶液抵抗力的一種半定量試驗(yàn)。紅細(xì)胞在低滲鹽溶液中會(huì)因?yàn)樗臐B入而逐漸膨脹，導(dǎo)致溶血，其脆性主要取決于細(xì)胞表面積與其體積之比值。比值愈小，紅細(xì)胞抵抗力愈小，滲透脆性增加。反之，紅細(xì)胞抵抗力愈大，滲透脆性減低。1. 取12支小試管，排成一排，按照下表操作：試管編號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 蒸餾水 （滴） 1%NaCl （滴） NaCl最終 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2

2、 5.6 6.0 6.4 6.8 濃度(g/L)實(shí)驗(yàn)方法 3.各管置于室溫靜置2h，紅細(xì)胞自然沉淀或溶解，從高濃度管開始觀察上層液體的顏色及管底沉淀。 4. 記錄紅細(xì)胞開始溶血（上層液體開始有淡紅色出現(xiàn)，管底尚有多量未溶的紅細(xì)胞）和完全溶血（上層液體呈紅色，管底無紅細(xì)胞）時(shí)NaCl濃度。 1. NaCl必須干燥，準(zhǔn)確稱量，用前新配。2. 加入血液前需將蒸餾水和NaCl溶液混勻.3. 試劑加量要準(zhǔn)確，血液應(yīng)直接滴入液體中，不能沿 管壁流入。4. 空針及針頭必須干燥，以免溶血。紅細(xì)胞在低滲液中很容易被機(jī)械力所破壞，故不應(yīng)用力振蕩。注意事項(xiàng) 蔗糖溶血試驗(yàn) 【實(shí)驗(yàn)原理】 蔗糖溶血試驗(yàn)用于檢測PNH患者

3、的紅細(xì)胞缺陷。患者的紅細(xì)胞在低離子強(qiáng)度的蔗糖溶液中對補(bǔ)體的敏感性增強(qiáng)，經(jīng)孵育，補(bǔ)體與紅細(xì)胞膜結(jié)合加強(qiáng)，使其缺損，結(jié)果導(dǎo)致蔗糖溶液通過缺損處進(jìn)入紅細(xì)胞，引起滲透性溶血。而正常人紅細(xì)胞則不發(fā)生溶血。【實(shí)驗(yàn)方法】 1. 取健康人與患者同型或AB型新鮮血清0.05 ml，加10% 蔗糖溶液0.85 ml，混勻。 2. 加待測者50%的紅細(xì)胞懸液0.1 ml，混勻。 3. 置37 水浴箱30min 后，取出直接觀察或低速離心后觀 察有無溶血。 【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】 上清液呈紅色為陽性，無色為陰性。 1. 取試管兩支，按下表操作： 測定管 對照管 正常人血清（ml）0.5 0.5 0.2 mol/L HCL (ml) 0.05 / 50%被檢者紅細(xì)胞懸液（ml）0.025 0.025 生理鹽水（ml） / 0.05 實(shí)驗(yàn)方法 1. 一切用具要干燥，針頭要粗，以免溶血。 2. 紅細(xì)胞要洗凈，HCL加量要準(zhǔn)確，血清要新鮮，以免補(bǔ)體失活。 3. 加酸時(shí)勿加在管壁上，并將酸與血清混勻后，再加紅細(xì)胞懸液，而且紅細(xì)胞懸液要直接滴入，不要沿管壁流下，以免溶血。 4. 血清酸化后用塞蓋好，以免二氧化碳逸出而降低了血清的酸度，以致溶血程度減低。 5. 若患者經(jīng)多次輸血，其血中所含的不正常紅細(xì)胞將相