頭痛寧片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1、頭痛寧片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究【關(guān)鍵詞】頭痛寧片；,薄層色譜法；,高效液相色譜法摘要：目的建立頭痛寧片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法用薄層色譜法對片劑中的制何首烏、防風(fēng)、當(dāng)歸、天麻進(jìn)展了定性鑒別；采用高效液相色譜法測定了片劑中大黃素含量。結(jié)果薄層色譜斑點(diǎn)明晰,空白樣品無干擾；大黃素在0.05250.525g范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，r=1.000,平均加樣回收率為99.28%,RSD為1.971%(n=5)。結(jié)論該方法簡便，準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好,可作為該制劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：頭痛寧片；薄層色譜法；高效液相色譜法QualityStandardfrTutngningTabletAbstrat：bjetiveTestabli

2、shthequalityspeifiatinfTutngningtablet.ethdsRadixplygniultiflripraeparatausuglyinesstae,RadixsapshniRviae,Radixangeliaesinensis,andRhizagastrdiaeintabletsereidentifiedbyTL,edinintabletseredeteinedbyHPL.ResultsTheTLspertsdevelpederefairlylearandtheblanktestshedninterferene.Reveryas99.28%andRSDas1.971

3、%(n=5)fredin.nlusinTheethddevelpedissipleandaurateithgdreprduibility,andtheethdanbeusedfrqudilyntrlfTutngningtablet.Keyrds：Tutngningtablet;TL;HPL頭痛寧片由土茯苓、制何首烏、防風(fēng)、當(dāng)歸、天麻5味中藥組成,具有熄風(fēng)滌痰、逐瘀止痛之成效。用于治療偏頭痛、緊張性頭痛，屬痰瘀阻絡(luò)證。該藥是由頭痛寧膠囊改變劑型而來。為確保制劑質(zhì)量,保證用藥平安有效,在原有標(biāo)準(zhǔn)根底上,對該藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展了進(jìn)一步進(jìn)步。對制劑中制何首烏、防風(fēng)、當(dāng)歸、天麻進(jìn)展了薄層鑒別；并選取制何首烏

4、中的大黃素作為指標(biāo)性成分進(jìn)展含量測定的研究,采用高效液相色譜法建立了該制劑中大黃素的含量測定方法。1儀器與試藥1.1儀器SHIADZUL10AT高效液相色譜儀，SPD10A紫外可見檢測器，DL95色譜工作站，超聲波清洗機(jī)功率250，頻率20KHZ天鵬電子技術(shù)(北京)。1.2試藥甲醇為色譜純，其它試劑為分析純,高效薄層預(yù)制板(青島海洋化工廠),層析用中性氧化鋁(上海五四化學(xué)試劑廠)。大黃素對照品、天麻素對照品，供含量測定用，均購于中國藥品生物制品檢定所。2方法與結(jié)果2.1鑒別2.1.1制何首烏的鑒別取本品研細(xì)的粉末4g，加氯仿20l，超聲處理20in，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供

5、試品溶液。按處方比例和制備工藝制備除去制何首烏的陰性樣品，按供試品溶液制備方法操作，得制何首烏陰性對照溶液，另取大黃素對照品，加甲醇制成每毫升含0.5g的溶液，作為對照品溶液。汲取對照品溶液4l，供試品及陰性對照溶液各8l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚3060甲酸乙酯甲酸1551的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對照那么無對應(yīng)斑點(diǎn)。結(jié)果見圖1。2.1.2防風(fēng)的鑒別取本品研細(xì)的粉末4g，加乙醇30l，加熱回流1h，濾過，濾液濃縮至適量，加于中性氧化鋁柱內(nèi)徑1.5，長5上，用丙酮20l洗脫，

6、搜集洗脫液，揮干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供試品溶液。按處方比例和制備工藝制備除去防風(fēng)的陰性樣品，按供試品溶液制備方法操作，得防風(fēng)陰性對照溶液。另取防風(fēng)對照藥材1g，加氯仿20l，濃氨溶液1l，回流提取1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?l使溶解，作為對照藥材溶液。汲取上述3種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚6090醋酸乙酯73為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的斑點(diǎn)，而陰性對照那么無對應(yīng)斑點(diǎn)。結(jié)果見圖2。2.1.3當(dāng)歸的鑒別取本品研細(xì)的粉末4g，加甲醇20l，超聲處理20in，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?

7、0l使溶解，用乙醚振搖提取3次，15l/次，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供試品溶液。按處方比例和制備工藝制備除去當(dāng)歸的陰性樣品，按供試品溶液制備方法操作，得當(dāng)歸陰性對照溶液，另取當(dāng)歸對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。汲取上述3種溶液各7l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷醋酸乙酯91為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)，而陰性對照那么無對應(yīng)斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。2.1.4天麻的鑒別取本品研細(xì)的粉末2g，置具塞錐形瓶中，加甲醇20l，置60水浴中溫浸2h，超聲波處理20in，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?/p>

8、水20l使溶解，用乙醚振搖提取兩次，20l/次；水液用水飽和正丁醇振搖提取3次，20l/次，合并提取液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇10l溶解，加于中性氧化鋁柱5g，內(nèi)徑1.5，70%乙醇濕法裝柱上，用70%乙醇50l洗脫，搜集全部洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?l使溶解，作為供試品溶液；按處方比例和制備工藝制備除去天麻的陰性樣品，按供試品溶液制備方法操作，得天麻陰性對照溶液，另取天麻素對照品，加甲醇制成每毫升含0.5g的溶液，作為對照品溶液。汲取以上3種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，醋酸乙酯甲醇水910.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，105加熱至斑點(diǎn)明晰，日光下檢視，

9、供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的斑點(diǎn)，而陰性對照那么無對應(yīng)斑點(diǎn)。結(jié)果見圖4。左起大黃素供試陰性圖1制何首烏薄層色譜圖略左起藥材供試陰性圖2防風(fēng)薄層色譜圖略左起藥材供試陰性圖3當(dāng)歸薄層色譜圖略左起天麻素藥材供試陰性圖4天麻薄層色譜圖略2.2頭痛寧片中大黃素的含量測定2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)色譜柱為Dika5184.6250；流動相為甲醇0.1%磷酸8020；流速1l/in；檢測波長254n；柱溫室溫；進(jìn)樣量10l。通過專屬性考察說明在上述色譜條件下其他組分對大黃素峰無干擾別離良好。見圖57。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.2溶液配制對照品溶液制備：精細(xì)稱取大黃素對照

10、品適量，加甲醇制成每毫升含21g的溶液，即得。供試品溶液的制備：取本品研細(xì)，混勻，取1g，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，精細(xì)參加甲醇20l，密塞，稱定重量，超聲波處理20in功率250，頻率20kHz，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.2.3線性關(guān)系的考察分別汲取對照品溶液2.5，5.0，10，15，20，25l，按上述色譜條件測定，結(jié)果見表5。以峰面積為縱坐標(biāo)，大黃素進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y=7000000X-42344，r=1.000，結(jié)果說明大黃素在0.05250.525g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。2.2.4精細(xì)度實(shí)驗(yàn)取本品按供試品溶液制備方法操作得

11、共試品溶液，連續(xù)進(jìn)展5次測定，記錄峰面積，以峰面積計(jì)算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏向，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.25%，說明方法精細(xì)度良好。2.2.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取本品按供試品溶液制備方法操作得共試品溶液，每2h測定1次，連續(xù)進(jìn)展測定，記錄峰面積，計(jì)算其相對標(biāo)準(zhǔn)差，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.77%，說明在12h內(nèi)，供試品溶液穩(wěn)定性良好。2.2.6重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)對同一批樣品按供試品溶液制備方法操作得5份樣品溶液，獨(dú)立進(jìn)展5次測定，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.962%，說明方法重現(xiàn)性良好。圖5大黃素對照品色譜圖略圖6頭痛寧片供試品色譜圖略圖7頭痛寧片陰性對照色譜圖略2.2.7回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法。精細(xì)稱取研細(xì)的樣品5份，置具塞錐形瓶中

12、，精細(xì)參加濃度為0.21g/l的大黃素對照品溶液1l，精細(xì)參加甲醇19l，按供試品溶液的制備方法操作得供試品溶液，測定，計(jì)算回收率。其平均回收率為99.28%，符合要求。結(jié)果見表1。表1回收率實(shí)驗(yàn)略2.2.8樣品含量測定分別取不同批號的本品，按供試品溶液的制備方法操作得供試品溶液。分別汲取對照品及供試品溶液各10l,注入高效液相色譜儀,測定。結(jié)果見表2。表2樣品含量測定略3討論在大黃素光譜掃描過程中發(fā)現(xiàn)其在221288n處均有較強(qiáng)吸收，根據(jù)文獻(xiàn)報道及樣品干擾情況，以254n作為吸收波長可以滿足含量測定要求，應(yīng)選擇254n為測定吸收波長。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，該方法能有效地控制頭痛寧片的質(zhì)量。參考文獻(xiàn)：1楊東輝，蔡少青，王璇.HPL法測定何首烏及復(fù)方蟲草