分子生物學(xué)檢驗(yàn)：移植配型及法醫(yī)物證學(xué)的分子生物學(xué)檢驗(yàn)

1、移植配型及法醫(yī)物證學(xué)的分子生物學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)：移植配型的分子生物學(xué)檢驗(yàn)器官移植是指用自體或異體的正常器官、組織或細(xì)胞，置換病變的或功能缺損的器官、組織或細(xì)胞，以維持和重建機(jī)體的生理功能。目前影響器官移植成功率的主要因素是機(jī)體的免疫排斥反應(yīng)，配型良好的受者具有較高的長(zhǎng)期生存率，因此是移植配型是移植前非常重要的準(zhǔn)備工作移植配型移植配型就是指在移植之前對(duì)供受者抗原的相容性進(jìn)行檢測(cè)，又稱(chēng)組織配型，通過(guò)移植配型選擇移植物，盡量減少供受者的組織相容性抗原差異，提高移植成功率。ABO血型抗原人類(lèi)白細(xì)胞抗原HLA一、HLA免疫學(xué)及分子生物學(xué)基礎(chǔ)白細(xì)胞膜上的抗原：紅細(xì)胞血型抗原白細(xì)胞本身特有的抗原與其他組織共有的

2、，也是最強(qiáng)的同種抗原，即人類(lèi)白細(xì)胞抗原（human leucocyte antigen, HLA）同種異體移植時(shí)，供受者HLA不相容，會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，其相容性是影響移植后長(zhǎng)期生存率的重要因素之一HLA抗原HLA抗原受控于MHC的基因組，人類(lèi)HLA抗原位于人第6號(hào)染色體短臂上，由一個(gè)DRA和多個(gè)DRB基因編碼HLA-抗原的特異性取決于重鏈，由HLA-A、B、C位點(diǎn)編碼，其輕鏈?zhǔn)?微球蛋白，15號(hào)染色體。目前300種以上HLA- 抗原受控于HLA-D區(qū)，由A、B基因分別編碼重鏈和輕鏈， 抗原多態(tài)性取決于輕鏈。目前350種以上HLA-2A、2B和2D抗原由于與造血干細(xì)胞移植和器官移植的效果相關(guān)，

3、稱(chēng)為“移植抗原”二、HLA分型技術(shù)發(fā)展HLA分型的發(fā)展階段：血清學(xué)分型，以補(bǔ)體依賴(lài)細(xì)胞毒性試驗(yàn)為基礎(chǔ)，交叉反應(yīng)、HLA-C，與DNA序列不一致細(xì)胞學(xué)分型，受限多，如淋巴細(xì)胞的純度、實(shí)驗(yàn)繁瑣DNA分型三、分子生物學(xué)在HLA分型中的應(yīng)用RFLP與PCR-RFLP分型技術(shù)：HLA-DR、HLA-DQ、HLA-B44和HLA-C亞型PCR-SSCP技術(shù)：HLA-A、HLA-DRB1、HLA-DQB1測(cè)序技術(shù)PCR-SSO技術(shù)PCR-SSP技術(shù)基因芯片技術(shù) FACS技術(shù)氨基酸殘基配型標(biāo)準(zhǔn)分型技術(shù)合理選擇HLA基因分型技術(shù)HLA配型在器官移植中具有重要臨床意義，是影響移植物存活的主要因素之一，腎、心、肺，

4、尤其是骨髓移植骨髓移植中，由于其中含有大量的免疫細(xì)胞，如果供受不符，所發(fā)生的移植物搞宿主反應(yīng)不易被免疫抑制劑控制，要求高根據(jù)需要選擇不同的分型技術(shù)第二節(jié)：法醫(yī)物證學(xué)的分子生物學(xué)檢驗(yàn)法醫(yī)學(xué)是運(yùn)用免疫學(xué)、生物學(xué)、生物化學(xué)以及分子生物學(xué)的理論和方法，通達(dá)人類(lèi)遺傳標(biāo)記的檢驗(yàn)與分析，對(duì)生物學(xué)檢測(cè)的種類(lèi)、種屬及個(gè)體來(lái)源進(jìn)行鑒定個(gè)體識(shí)別親子鑒定性別鑒定種族和種屬認(rèn)定一、個(gè)體識(shí)別和親子鑒定的概念個(gè)體識(shí)別就是對(duì)兩分份物證材料進(jìn)行同一性認(rèn)定，又稱(chēng)同一認(rèn)定，屬于法醫(yī)物證學(xué)。有體態(tài)、性別、年齡面貌等，但某些遺傳標(biāo)志是最有效的方法 親子鑒定是通過(guò)對(duì)人類(lèi)遺傳標(biāo)記的檢測(cè)，根據(jù)遺傳規(guī)律分析，對(duì)有爭(zhēng)議的父母與子女血緣關(guān)系的鑒定。二、遺傳學(xué)及分子生物學(xué)基礎(chǔ)雙等位基因遺傳標(biāo)記DNA的長(zhǎng)度多態(tài)性和序列多態(tài)性HLA分型技術(shù)，RFLP也稱(chēng)為指紋技術(shù)VN