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文檔簡介

1、實驗十二 脂肪酸的氧化實驗目的：了解脂肪酸的氧化作用實驗原理： 脂肪酸 乙酰輔酶A。 2乙酰輔酶A 乙酰乙酸。 乙酰乙酸 丙酮 羥丁酸 縮 合氧化脫 羧還 原本實驗用新鮮肝糜與丁酸保溫，生成的丙酮在堿性條件下與碘生成碘仿： 2NaOH + I2 NaOI + NaI +H2O CH3COCH3 + 3NaOI CHI3 + CH3COONa +2NaOH 剩余的碘可用標準硫代硫酸鈉溶液滴定： NaOI + NaI + 2HCl I2 + 2NaCl + H2O I2 + 2Na2S2O3 Na2S4O6 + 2NaI根據(jù)滴定樣品與滴定對照所消耗的硫代硫酸鈉溶液體積之差，可以計算由丁酸氧化生成丙

2、酮的量。 器 材：5ml微量滴定管恒溫水裕吸管剪刀、鑷子50ml錐形瓶漏斗試管、試管架試劑、材料家兔0.1淀粉溶液 20ml0.9氯化鈉溶液 200ml0.5當量/升 丁酸溶液 150ml15三氯乙酸溶液 200ml10氫氧化鈉溶液 150ml10鹽酸溶液 150ml0.1當量/升 碘溶液 200ml標準0.02當量/升 硫代硫酸鈉溶液 500ml1/15 mol/升 pH7.6磷酸鹽緩沖液 200ml操作方法 制備肝糜 取樣（有對照組） 沉淀蛋白 濾液 酮體的測定（滴定） 計算丙酮含量保溫1.5小時（430C）過濾肝糜制備處死家兔，取出肝臟用0.9氯化鈉溶液洗去血污，并吸去表面水分取5g肝組

3、織，少量0.9氯化鈉溶液在研缽中研磨成細漿用0.9氯化鈉溶液將細漿稀釋至10ml取樣1/15 mol/l pH7.6的磷酸緩沖液50ml錐形瓶（目的組）50ml錐形瓶（對照組）取3ml取3ml加入2ml正丁酸加入2ml肝組織糜加入2ml肝組織糜沉淀蛋白質(zhì)目的組對照組加入3ml15三氯乙酸溶液加入3ml15三氯乙酸溶液加入2ml正丁酸靜置15分鐘后過濾酮體的測定目的組對照組取濾液2ml取濾液2ml加入加入50ml錐形瓶（新）50ml錐形瓶（新）加入3ml0.1當量/升碘溶液3ml10氫氧化鈉溶液搖勻，靜置加入6ml20鹽酸加入3ml0.1當量/升碘溶液3ml10氫氧化鈉溶液搖勻，靜置加入6ml20鹽酸用標準硫代硫酸鈉滴定，滴至淺黃即加入淀粉溶液作指示劑，滴至藍色消失1.已知1毫升0.1N的碘溶液(或Na2S2O3溶液)相當于0.9673毫克丙酮.根據(jù)實驗過程試擬出丙酮含量的計算公式.思考題樣品中丙酮的含量是多少？樣品中丙酮的含量= (V1-V2) x C Na2S2O3 x 1/

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