生物制藥酶類藥物

1、關(guān)于生物制藥酶類藥物第一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 藥用酶類的概述第二張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于酶，你已經(jīng)知道了哪些知識(shí)？還想知道哪些知識(shí)？第三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶的分類第四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月“綠色健康，“酶”力無(wú)限醫(yī)藥、洗滌劑、紡織、淀粉制糖、發(fā)酵、酒精、食品（包括果蔬汁、啤酒釀造、谷物食品、蛋白水解、和功能食品以及食用油脂）、飼料、皮革、造紙和化工等工業(yè)領(lǐng)域 第五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月淀粉酶類與淀粉糖業(yè)第六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月果汁生產(chǎn)與果膠酶乳制品與凝乳酶第七

2、張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶蛋白成為藥物應(yīng)具備的條件在生理pH下,具有最高活性和穩(wěn)定性對(duì)基質(zhì)具有較高親和力(低Km值)血清中半衰期較長(zhǎng)純度高免疫原性低或無(wú)免疫原性不需要外源輔助因子第八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶類藥物在疾病治療方面的應(yīng)用酶 名來(lái) 源用 途淀粉酶胰臟、麥芽、微生物治療消化不良，食欲不振蛋白酶胰臟、胃、植物、微生物治療消化不良，食欲不振，消炎，消腫，創(chuàng)愈，降壓脂肪酶胰臟、微生物治療消化不良，食欲不振纖維素酶霉菌治療消化不良，食欲不振溶菌酶蛋清、細(xì)菌治療各種細(xì)

3、菌性和病毒性疾病尿激酶人尿治療心肌梗塞，結(jié)膜下出血，黃斑部出血鏈激酶鏈球菌治療血栓性靜脈炎，咳痰，血腫，下出血，骨折青霉素酶蠟狀芽孢桿菌治療青霉素引起的變態(tài)反應(yīng)L-天冬酰胺酶大腸桿菌治療白血病超氧化物歧化酶微生物，植物，動(dòng)物預(yù)防輻射損傷，治療紅斑狼瘡，皮肌炎，結(jié)腸炎凝血酶動(dòng)物，蛇，細(xì)菌，酵母等治療各種出血病膠原酶細(xì)菌分解膠原，消炎，化膿，脫痂，治療潰瘍右旋糖酐酶微生物預(yù)防齲齒 膽堿酯酶細(xì)菌治療皮膚病，支氣管炎，氣喘溶纖酶蚯蚓溶血栓彈性蛋白酶胰臟治療動(dòng)脈硬化，降血脂核糖核酸酶胰臟抗感染，祛痰，治肝癌尿酸酶牛腎治療痛風(fēng)第十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十二張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作

4、于2022年6月第十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月栓溶酶類與心血管疾病第十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月凝血酶第十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月健美生消化酶幫助腸胃蠕動(dòng)【產(chǎn)品規(guī)格】90片瓶【食用方法】成人每日3片，隨主餐服用【成分(每片含)】1)消化蛋白質(zhì)：木瓜蛋白酶50毫克、菠蘿蛋白酶30毫克；2)消化脂肪：脂肪酶30毫克；3)消化碳水化合物/淀粉：淀粉酶50毫克；4)消化乳制品：乳糖酶30毫克；5)消化纖維：纖維素酶15毫克。另含：能抑制過(guò)多胃酸的葡萄糖酸鈣，能緩解反胃薄荷葉和茴香【適用人群】消化不良

5、者腸胃疾病患者大病初愈者消化酶類第十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 酶類藥物的制造過(guò)程一、原料的選擇1. 不同酶的用料選擇 乙?；福澑危⒛?牛血）、透明質(zhì)酸酶（羊睪丸）、溶菌酶（雞蛋清），超氧化物歧化酶（血、肝）第十八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2. 注意不同生長(zhǎng)發(fā)育情況及營(yíng)養(yǎng)狀況3. 原料來(lái)源豐富4. 從簡(jiǎn)化提純步驟著手5. 如用動(dòng)物組織作原料，應(yīng)在此動(dòng)物宰殺后立即取材。第十九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、微生物酶制劑高產(chǎn)菌株的選育菌種是工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)酶制劑的重要條件。優(yōu)良菌種不僅可以提高酶制劑產(chǎn)量和發(fā)酵原料的利用率，而且還與增加品種

6、，縮短生產(chǎn)周期，改進(jìn)發(fā)酵和提煉工藝條件等密切相關(guān)。優(yōu)良菌種獲得的三種途徑：（1）從自然界分離篩選;（2）用物理或化學(xué)的方法處理，誘變;（3）用基因重組與細(xì)胞融合技術(shù)。第二十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月三、微生物酶制劑生產(chǎn)的發(fā)酵技術(shù)（一）培養(yǎng)基1. 碳源（甘薯、玉米、麩皮、米糠）2. 氮源 （豆餅、花生餅、菜籽餅、硫酸銨、尿素）3. 無(wú)機(jī)鹽4. 生長(zhǎng)因子和產(chǎn)酶促進(jìn)劑第二十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）培養(yǎng)方法1. 固體培養(yǎng)法 固體培養(yǎng)法也稱麩曲培養(yǎng)法，該法是利用麩皮或米糠為主要原料，另外視需要添加其它谷糠、豆餅等，加水拌成含水適度半固態(tài)物料作為培養(yǎng)基。 2.液體

7、培養(yǎng)法 液體培養(yǎng)法是利用液體培養(yǎng)進(jìn)行微生物的生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)酶。根據(jù)通氣方法的不同，又分為液體表面培養(yǎng)和液體深層培養(yǎng)。深層通氣培養(yǎng)是目前應(yīng)用最廣的方法。第二十二張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3.影響酶產(chǎn)生的一些因素 除培養(yǎng)基，發(fā)酵工藝參數(shù)對(duì)產(chǎn)酶的影響也十分明顯。 (1) 溫度 (2) pH (3) 通氣 (4) 攪拌第二十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(5)泡沫 發(fā)酵過(guò)程中，由于發(fā)酵液受到強(qiáng)烈的通氣攪拌，培養(yǎng)基中某些成分的變化及代謝中產(chǎn)生氣體，會(huì)形成較多的泡沫，而且氣泡不易消失，是由于培養(yǎng)基中蛋白質(zhì)分子排在氣泡表面形成一層吸附膜，聚集成泡沫層之故。 消泡劑：天然油類，醇類

8、，脂肪酸類，胺類，酰胺類，磷酸酯類，金屬皂類，聚硅氧烷等。第二十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(6) 添加誘導(dǎo)劑和抑制劑 誘導(dǎo)酶 抑制劑（表面活性劑）第二十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月四、酶類藥物的提取和純化 原料選擇生物材料的預(yù)處理提取濃縮純化結(jié)晶第二十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1. 動(dòng)物材料的預(yù)處理：（1）機(jī)械法：有絞碎、刨碎、勻漿、研磨、超聲波、擠壓等方法。有些酶用機(jī)械法處理后仍不能有效的提取，可結(jié)合其他處理法。（2）凍融：冷到-10左右，再緩慢溶解至室溫，如此反復(fù)多次。由于細(xì)胞中冰晶的形成，及剩下液體中鹽濃度的增高，能使細(xì)胞中顆粒及整個(gè)細(xì)

9、胞破碎，使酶釋放出來(lái)。（3）丙酮粉：組織經(jīng)丙酮迅速脫水干燥制成丙酮粉，不僅可以減少酶的變性，同時(shí)因細(xì)胞結(jié)構(gòu)成分的破碎使蛋白質(zhì)與脂質(zhì)結(jié)合的某些化學(xué)鍵打開(kāi)，促使某些結(jié)酶釋放到溶液中。材料的預(yù)處理第二十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2. 微生物材料的預(yù)處理 胞外酶:除去菌體后再直接從發(fā)酵液中吸附提取酶。 胞內(nèi)酶:將菌體細(xì)胞破壁，制成無(wú)細(xì)胞的懸浮液后再行提取。第二十八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1.干燥法:干燥后菌體產(chǎn)生自溶（1）空氣干燥:適用于熱穩(wěn)定的酶（2）真空干燥:適于細(xì)菌（3）冷凍干燥:適用于較敏感的酶2.機(jī)械法（1）研磨法（2）組織勻漿法（3）超聲波法（4）高壓勻

10、漿法3.酶法處理第二十九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(二) 酶的提取1.水溶液法 常用稀鹽溶液或緩沖液提取。經(jīng)過(guò)預(yù)處理的原料，包括組織糜，勻漿，細(xì)胞顆粒以及丙酮粉等，都可以用水溶液抽提。 許多酶再蒸餾水中不溶解，而在低鹽濃度下易溶解，所以提取時(shí)加入少量鹽可提高酶的溶解度。第三十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.有機(jī)溶劑法 某些結(jié)合酶如微粒體和線粒體膜的酶，由于和脂質(zhì)牢固結(jié)合，用水很難提取，為此必須除去結(jié)合的脂質(zhì)，且不能使酶變性，最常用的有機(jī)溶劑是丁醇。 丁醇具有以下特點(diǎn)：（1）親脂性強(qiáng)，特別是親磷脂的能力；（2)兼具親水性，在0在水中的溶解度為10.5%；（3）在脂與

11、水分子間能起類似去垢劑的橋梁作用。3.表面活性劑法第三十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(三) 酶制劑的工業(yè)提取法1. 發(fā)酵液的預(yù)處理及過(guò)濾 絮凝劑2. 酶液的脫色 0.11.5%活性炭3. 鹽析法4. 有機(jī)溶劑法5. 噴霧干燥直接制備粉末酶制劑第三十二張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶的分離提純?nèi)齻€(gè)基本環(huán)節(jié)：第一抽提，即把酶從材料轉(zhuǎn)入溶劑中制成酶溶液； 第二純化，即把雜質(zhì)從酶溶液中除掉或從酶溶液中把酶分離出來(lái)；第三制劑，即將酶制成各種劑型。在酶的分離純化過(guò)程中每步都須做三件事：第一，測(cè)定酶活力(IU/m1)；第二，測(cè)定蛋白質(zhì)含量(mg/m1)；第三，測(cè)量體積(m1)。第

12、三十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶是生物活性物質(zhì)，操作條件要溫和，一般在05間進(jìn)行。初分：用分離蛋白質(zhì)的方法，如鹽析、等電點(diǎn)沉淀、有機(jī)溶劑分級(jí)、選擇性熱變性等方法可從酶粗提液中初步分離酶。細(xì)分：再采用吸附層析、離子交換層析、凝膠過(guò)濾、親和層析、疏水層析及高效液相色譜法等層析技術(shù)或各種制備電泳技術(shù)進(jìn)一步純化酶，以得到純的酶制品結(jié)晶:酶的結(jié)晶過(guò)程進(jìn)行得很慢，需要數(shù)天或數(shù)星期。第三十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月凡用于蛋白質(zhì)的純化手段均適用于酶的純化酶的提純常包括兩方面的工作:(1) 濃縮：把酶制劑從很大體積濃縮到比較小的體積，(2) 去雜蛋白：把酶制劑中大量的雜質(zhì)蛋白

13、和其他大分子物質(zhì)分離出去。(四) 酶的純化第三十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一般原則：防止強(qiáng)酸、強(qiáng)堿, 要求加入的化學(xué)試劑不使酶變性；在低溫下操作，全部操作在低溫04；在分離提純過(guò)程中，避免劇烈攪拌；在提純?nèi)軇┲屑右恍┍Ｗo(hù)劑，如少量EDTA、少量-巰基乙醇； 在不破壞所需酶的條件下，可使用各種“激烈”的手段。第三十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(一) 雜質(zhì)的除去酶提取液中，除所需酶外，還含有大量雜蛋白，多糖，脂類和核酸等，需要除去。（1）pH和加熱沉淀法 利用蛋白質(zhì)酸堿變性性質(zhì)的差異可以通過(guò)調(diào)pH和等電點(diǎn)除去某些雜蛋白，也可以利用不同蛋白質(zhì)對(duì)熱穩(wěn)定性的差異。（SO

14、D酶）（2）蛋白質(zhì)表面變性法 利用蛋白質(zhì)表面變性性質(zhì)的差別，也可以除去雜蛋白。 制備過(guò)氧化氫酶，加入氯仿除雜蛋白。第三十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(3) 選擇性變性法 利用蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的不同，除去雜蛋白。(4) 核酸沉淀劑法 在微生物制備酶時(shí)，常含有較多核酸，可用核酸酶降解，離心分離，用核酸沉淀劑如三甲基十六烷基溴化銨，硫酸鏈霉素等。(5) 將酶與底物結(jié)合，用加熱法除去雜蛋白。 近來(lái)發(fā)現(xiàn)，酶和底物結(jié)合或競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑結(jié)合后，穩(wěn)定性大大提高，這樣可以用加熱法除去雜蛋白。第三十八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月基本操作程序：分離： 先進(jìn)行凈化處理（過(guò)濾，絮凝，離心脫色），

15、再采用沉淀法分離（鹽析法，沉淀法，超離心等）。第三十九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶分離方法有：分子大小: 如離心分離法、篩膜分離法、凝膠過(guò)濾法等。溶解度大小: 如鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、共沉淀法、選擇性沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法等。所帶正負(fù)電荷: 如離子交換分離法、電泳分離法、聚焦層析法等。穩(wěn)定性差異: 如選擇性熱變性法、表面變性法等親和作用的差異: 如親和層析法等.第四十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月純化： 采用離子交換層析，凝膠過(guò)濾，液相色譜，親和色譜和超濾等方法。第四十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1. 凝膠過(guò)濾法(分子篩)原理 將樣品混合物通過(guò)一定孔

16、徑的凝膠介質(zhì),由于流經(jīng)路徑的差異,使不同分子質(zhì)量的組分分離；大分子物質(zhì)直接從凝膠顆粒外通過(guò)，走得快；小分子物質(zhì)進(jìn)入凝膠顆粒的內(nèi)部再出來(lái)，走得慢。第四十二張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2. 離子交換法原理 利用溶液中各種帶電粒子與離子交換劑之間結(jié)合力的差異進(jìn)行物質(zhì)分離。DEAE是一種陰離子交換劑，將樣品的pH值調(diào)至等電點(diǎn)以上，使樣品帶負(fù)電荷，采用鹽溶液洗脫，通過(guò)高濃度的帶同種電荷的離子(Cl-)置換被分離的組分T離子強(qiáng)度蛋白濃度T第四十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月+ - - - - - - - - 帶負(fù)電荷 的被吸附上

17、帶負(fù)電荷少的先被置換帶負(fù)電荷多的后被置換第四十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 NaCl Tris連續(xù)梯度洗脫:梯度混合儀第四十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3. 親和層析法原理 親和吸附劑一般是由固相載體和能與目的酶專一可逆結(jié)合的配體共價(jià)結(jié)合而成的將親和吸附劑填充層析柱，讓酶溶液流過(guò)層析柱，則目的酶能迅速而又選擇件地吸附在親和吸附劑上，用適當(dāng)?shù)娜芤哼M(jìn)行洗脫，除去些非專性的雜質(zhì)后再用濃度高的或親和力強(qiáng)的配體溶液邊行親和洗脫，酶便脫離層析柱上的配體而流出柱外。洗脫方法 改變溫度的洗脫 改變pH、離子強(qiáng)度及溶劑系統(tǒng)組成進(jìn)行洗脫。第四十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022

18、年6月親合層析原理圖解洗脫液支持物被分離物的抗體其它物質(zhì)被分離物第四十八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月表 些互為配基的物質(zhì)。第四十九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2.酶的濃縮:（1）工業(yè)上：超濾、真空減壓濃縮、薄膜濃縮、冷凍濃縮、離子交換法、（2）實(shí)驗(yàn)室： 除上述方法外，對(duì)少量樣品可用下列方法 1. 用G-15或G-25濃縮 2. 用聚乙二醇(PEG)濃縮 3. 凝膠吸水第五十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（二）脫鹽和濃縮1. 脫鹽 （1）透析 玻璃紙袋（2）凝膠過(guò)濾 Sephadex G10第五十二張，P

19、PT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(3) 復(fù)合結(jié)晶法 有時(shí)可以利用某些酶與有機(jī)化合物或金屬離子形成復(fù)合物或成鹽的性質(zhì)來(lái)結(jié)晶。(4) 透析平衡 利用透析平衡進(jìn)行結(jié)晶也是常用方法之一。(5) 等電點(diǎn)法第五十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(三)酶的結(jié)晶 特征：有序性，對(duì)稱排列，周期性的重復(fù)結(jié)構(gòu) 為空間結(jié)構(gòu)研究提供x-衍射樣品既是純化的結(jié)果又是純化的手段第五十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月把酶提純到一定純度以后，可使其結(jié)晶。蛋白質(zhì)分子多數(shù)處于含水的環(huán)境中，蛋白質(zhì)分子與水分子結(jié)晶形成穩(wěn)定的水合物。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的濃度非常高的時(shí)候，溶液中沒(méi)有足夠可以與蛋白質(zhì)結(jié)合的水分子用于形成水合

20、物，在蛋白質(zhì)分子之間也沒(méi)有足夠的水分子可以將它們充分隔開(kāi)，于是蛋白質(zhì)就以無(wú)定形沉淀或結(jié)晶的形式從溶液中析出。第五十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2.結(jié)晶的條件選擇酶的純度酶的濃度金屬離子pH溫度、時(shí)間晶種第五十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶蛋白結(jié)晶的基本條件:(1) 酶的純度 酶只有達(dá)到相當(dāng)純度后才能結(jié)晶。酶的純度越高，結(jié)晶越容易，長(zhǎng)成大的結(jié)晶可能性也越大。(2) 酶的濃度 結(jié)晶母液盡可能保持高的濃度。酶的濃度越高越有利于溶液中溶質(zhì)分子間的相互碰撞聚合，形成結(jié)晶的機(jī)會(huì)也越大。第五十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(3) 溫度(4) 時(shí)間(5) pH 有

21、時(shí)相差0.2pH，只能達(dá)到沉淀，而不能達(dá)到晶體。(6) 金屬離子 許多金屬離子能引起或有助于酶的結(jié)晶。(7) 晶種(8) 結(jié)晶器皿處理。第五十八張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶的結(jié)晶方法(1) 鹽析法 在適當(dāng)?shù)膒H、溫度等條件下，保持酶的穩(wěn)定性，慢慢改變鹽濃度進(jìn)行結(jié)晶。結(jié)晶時(shí)采用的鹽有硫酸銨，檸檬酸鈉，乙酸銨，硫酸鎂等。利用硫酸銨結(jié)晶時(shí)一般是把鹽加入到一個(gè)比較濃的酶溶液中，并使溶液微呈渾濁為止。然后放置，并且非常緩慢地增加鹽濃度。操作要在低溫下進(jìn)行，緩沖液pH要接近酶的等電點(diǎn)。第五十九張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(2) 有機(jī)溶劑法 酶液中滴加有機(jī)溶劑，有時(shí)也能使酶形成

22、結(jié)晶。結(jié)晶用溶劑有：乙醇，丙醇，丁醇，乙腈，異丙醇，二惡烷，二甲亞砜，二氧雜環(huán)已烷。(3) 復(fù)合結(jié)晶法 (4) 透析平衡法(5) 等電點(diǎn)法第六十張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月酶的制劑形式： 結(jié)晶： 固體：干燥（冰凍升華，噴霧干燥，真空干燥） 液體：低溫（0-4，-20） 提高酶蛋白的濃度 加入穩(wěn)定劑 固定化第六十一張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月保存：通常將純化后的酶溶液經(jīng)透析除鹽后冷凍干燥得到酶粉，低溫下可較長(zhǎng)時(shí)期保存。也可將酶溶液制成25甘油或50甘油分別貯于25或50冰箱中保存。注意：酶溶液濃度越低越易變性，因此切記不能保存酶的稀溶液。 第六十二張，PPT共七十二頁(yè)

23、，創(chuàng)作于2022年6月 酶的分離純化工作中的注意事項(xiàng)1. 防止酶蛋白變性2. 防止輔因子丟失3. 防止酶被蛋白 水解酶降解第六十三張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月采取的措施:1.避免泡沫的生成2.加入金屬鏊合劑EDTA3.加入巰基試劑，如巰基乙醇、二硫蘇糖醇(DTT)等4.加入蛋白酶抑制劑 第六十四張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月衡量分離提純方法優(yōu)劣的指標(biāo):總活力的回收 (表示提純過(guò)程中酶的損失情況) . 比活力提高的倍數(shù)(表示提純方法的有效程度) 。第六十五張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月總活力=活力單位數(shù)/ml酶液總體積(m1)比活力=活力單位數(shù)/mg蛋白(氮)=總活力單位數(shù)/總蛋白(氮)mg純化倍數(shù)=每次比活力/第一次比活力回收率(產(chǎn)率)=每次總活力/第一次總活力100%第六十六張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月二、酶活性測(cè)定（一）、酶活性1. 酶活性或酶活力 (Enzyme activity)：在最適條件下(25C,最適底物濃度和最適pH），酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，以酶促反應(yīng)速度表示。第六十七張，PPT共七十二頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 酶活性單位表示方法：酶