內(nèi)脂素基因啟動子多態(tài)性與中國人2型糖尿病脂代謝紊亂的相關(guān)性

1、內(nèi)脂素基因啟動子多態(tài)性與中國人2型糖尿病脂代謝紊亂的相關(guān)性內(nèi)脂素基因啟動子多態(tài)性與中國人2型糖尿病脂代謝紊亂的相關(guān)性【關(guān)鍵詞】內(nèi)脂素;多態(tài)性;2型糖尿病;血脂異?！菊磕康挠懻搩?nèi)脂素基因啟動子-1535/t多態(tài)性的分布及其與中國人2型糖尿病(t2d)脂代謝紊亂的關(guān)系。方法采用聚合酶鏈反響-限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)，檢測208例初診t2d患者和162例糖耐量正常(ngt)者的內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t多態(tài)性，分析該基因多態(tài)性與腰圍、bi、血漿內(nèi)脂素及血脂代謝指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果兩組內(nèi)脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);但與t、基因型患者比擬，t2d組tt基因型患者甘油

2、三酯升高、hdl-降低(p0.05)。熒光素酶活性比擬，pgl3-1535t的相對熒光素酶表達(dá)活性較pgl3-1535下降了約28%(p0.01)。結(jié)論內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t多態(tài)性與中國人t2d脂代謝紊亂有相關(guān)性?！娟P(guān)鍵詞】內(nèi)脂素;多態(tài)性;2型糖尿病;血脂異常內(nèi)脂素是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新脂肪因子，序列分析顯示其為前b細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子，因在內(nèi)臟脂肪組織中高表達(dá)而命名。內(nèi)脂素具有類胰島素的降糖作用，并參與脂肪代謝及多種炎癥反響，已成為代謝及炎癥相關(guān)疾病的研究熱點。有研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)脂素啟動子區(qū)基因snps存在有意義的變異位點，部分位點的單核苷酸多態(tài)性(snps)與2型糖尿病(t2d)、肥胖有關(guān)1。

3、本文旨在討論內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t多態(tài)性與t2d脂代謝的關(guān)系。1資料與方法1.1一般資料2021年1月至2021年8月，隨機(jī)選擇無親緣關(guān)系的鎮(zhèn)江地區(qū)漢族人370例，根據(jù)1999年h制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中確診為初診t2d(t2d組)208例，男112例，女96例，年齡3475歲，平均(59.379.68)歲;糖耐量正常(ngt組)162例，男86例，女76例，年齡3377歲，平均(56.758.75)歲。兩組均未承受過降糖降脂治療，排除糖尿病急性并發(fā)癥、高血壓、其他心血管疾并肝腎功能損害，各種感染、創(chuàng)傷與應(yīng)激等影響因素。兩組患者年齡、性別經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析均無顯著差異(p0.05)，具有可

4、比性。1.2方法2結(jié)果2.1內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t多態(tài)性分析兩組內(nèi)脂素基因啟動子-1535位點單核苷酸存在/t多態(tài)性?；蛐蜑闀r存在srfi限制性內(nèi)切酶的酶切位點，酶切產(chǎn)物電泳后有103和229bp兩條帶;基因型為tt時該酶切位點消失，只有332bp條帶;基因型為t時有103、229和332bp三條帶。2.2內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t基因型分布和等位基因頻率：兩組基因型分布均符合hardy-einberg定律，說明本研究人群符合平衡群體。兩組內(nèi)脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。見表1。表1兩組內(nèi)脂素基因型分布及等位基因頻率比擬2.3內(nèi)脂素基因啟動子-153

5、5/t基因型分布和等位基因頻率與肥胖的關(guān)系將受試者以bi25kg/2為界分為肥胖組和非肥胖組，兩組內(nèi)脂素基因型分布及等位基因頻率比擬無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。見表2。2.4內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t基因型與糖脂代謝的關(guān)系單因素方差分析顯示，t2d組內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t基因型與hdl-和tg相關(guān)，與t、基因型患者比擬，tt基因型患者tg升高、hdl降低(p0.05);內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t基因型與其他檢測指標(biāo)比擬均無統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05)。ngt組內(nèi)脂素基因啟動子-1535/t基因型與各檢測指標(biāo)均無相關(guān)性(p0.05)。見表3。表2肥胖組和非肥胖組內(nèi)脂素基因型分布及等位

6、基因頻率比擬表3不同基因型間臨床和實驗室指標(biāo)的比擬2.5hepg2細(xì)胞熒光素酶的相對表達(dá)活性的測定包含內(nèi)脂素基因-1535/t多態(tài)性的兩種表達(dá)載體pgl3-1535t及pgl3-1535以及作為陰性對照的pgl3-basi表達(dá)載體的熒光素酶的相對活性見圖1。相對熒光素酶活性的比擬顯示pgl3-1535t的相對熒光素酶表達(dá)活性(73.064.28)較pgl3-1535(88.105.31)下降了約28%(p0.01)，pgl3-basi的相對熒光素酶活性為22.132.26。圖1三種表達(dá)載體構(gòu)造示意圖3討論已有研究證實，小鼠轉(zhuǎn)染含內(nèi)脂素基因的質(zhì)粒后，其血糖和胰島素均顯著下降;敲除內(nèi)脂素基因小鼠那

7、么血漿內(nèi)脂素下降，血糖升高，胰島素?zé)o明顯變化1，這提示內(nèi)脂素在t2d中起重要作用。人類內(nèi)脂素基因位于染色體7q22.17q31.33，長37.4kb，含11個外顯子和10個內(nèi)含子3。遺傳學(xué)研究證明，正常墨西哥裔美國人血清tg、hdl-與染色體7q22.2有相關(guān)性4。祝爾健等5證實，內(nèi)脂素基因啟動子-3186位點存在snp，其變異與t2d患者的bi有一定關(guān)系。tkunaga等6在日本t2d人群中未發(fā)現(xiàn)與內(nèi)脂素snp-1535有相關(guān)性;而正常人群snp-1535t/t基因型血清hdl-顯著升高，tg顯著降低。因此認(rèn)為，內(nèi)脂素具有獨立于胰島素的類胰島素作用效應(yīng)。本研究顯示，中國人內(nèi)脂素基因啟動子-1

8、535位點的snp存在t變異，呈現(xiàn)3種基因型;且其基因型分布在t2d和ngt人群中無統(tǒng)計學(xué)差異，在肥胖和非肥胖者間亦無統(tǒng)計學(xué)差異;與t、基因型患者比擬，tt基因型患者tg升高、hdl-降低，而3種基因型患者的其他檢測指標(biāo)比擬均無統(tǒng)計學(xué)差異。相對熒光素酶活性的比擬顯示pgl3-1535t的相對熒光素酶表達(dá)活性較pgl3-1535下降了約28%，提示其位點的基因多態(tài)性影響該基因啟動子的轉(zhuǎn)錄活性。ye等7報道，內(nèi)脂素-1535t基因較-1535基因的啟動子活性下降1.8倍，內(nèi)脂素基因啟動子的轉(zhuǎn)錄活性改變對糖尿病患者的脂代謝有一定影響。tkunaga等6發(fā)現(xiàn)，內(nèi)脂素基因位點的基因突變與血中脂聯(lián)素有相關(guān)

9、趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義。這說明內(nèi)脂素基因可能與其他因子共同構(gòu)成復(fù)雜的脂肪因子調(diào)節(jié)系統(tǒng)，調(diào)控機(jī)體糖脂代謝。綜上所述，內(nèi)脂素-1535t/與中國t2d人群的hdl-和tg有相關(guān)性，提示內(nèi)脂素基因多態(tài)性可能對糖脂代謝有一定影響，其作用機(jī)制值得進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1fukuharaa，atsuda，nishizaa,etal.visfatin:aprteinseretedbyviseralfatthatiistheeffetsfinsulinj.siene,2022;307(5078):426-30.2俞力，陳軍建.人類pf基因轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)上游的基因多態(tài)性對基因轉(zhuǎn)錄的影響j.江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2

10、022;16(6)：473-8.3saalb,suny,stearnsg,etal.lningandharaterizatinfthednaendinganvelhuanpre-b-elllny-enhaningfatrj.lellbil,1994;14(2):1431-7.4aryar,blangerj,illiask,etal.fatrsfinsulinresistanesyndre-relatedphentypesarelinkedtgenetilatinsnhrses6and7innndiabetiexian-aeriansj.diabetes,2002;51(3):841-7.5祝爾健，丁百靜，樸云峰，等.內(nèi)脂素基因多態(tài)性與2型糖尿病的關(guān)系j.山東醫(yī)藥，2021;48(7)：27-9.6tkunagaa,iuraa,kanhiy,the-1535prtervariantfthevisfatingeneisassiatedithserutriglyerideandhdl-hlesterllevelsinja