動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)綜合

1、第一頁(yè)，共三十頁(yè)。細(xì)胞工程植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)胚胎移植核移植植物細(xì)胞工程技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)第二頁(yè)，共三十頁(yè)。所采用技術(shù)的理論根底 植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段 植物組織培養(yǎng) 植物體細(xì)胞雜交植物細(xì)胞的全能性植物組織培養(yǎng)第三頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)第四頁(yè)，共三十頁(yè)。 燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植，但對(duì)于大面積燒傷病人來(lái)講，健康皮膚很有限，請(qǐng)同學(xué)們想一想如何來(lái)治療該病人？ 許多動(dòng)物的細(xì)胞能夠分泌蛋白質(zhì),如抗體等.但是,單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)量是很少的,怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢?第五頁(yè)，共三十頁(yè)。一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件 P461

2、、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液2、營(yíng)養(yǎng)葡萄糖、氨基酸、微量元素、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清、血漿等。3、溫度和PH 36.5+-0.5度, 7.2-7.44、氣體環(huán)境： O2和CO295%空氣和5% CO2 保證細(xì)胞順利的生長(zhǎng)增殖第六頁(yè)，共三十頁(yè)。二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)概念 P441、概念：2、目的：3、理論根底：細(xì)胞增值獲得細(xì)胞和細(xì)胞產(chǎn)物 就是從動(dòng)物機(jī)體內(nèi)取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。三、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程 P44-46第七頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮液 原代培養(yǎng)細(xì)

3、胞增殖去掉組織間蛋白 傳代培養(yǎng)胰蛋白酶10代細(xì)胞50代細(xì)胞50代以后核型不變核型改變遺傳物質(zhì)改變?nèi)?、?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：第八頁(yè)，共三十頁(yè)。四、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 P47大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等為基因工程提供受體細(xì)胞用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性科學(xué)家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細(xì)胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。第九頁(yè)，共三十頁(yè)。獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物細(xì)胞的全能性植物體培養(yǎng)結(jié)果快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較工程植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較

4、細(xì)胞群體第十頁(yè)，共三十頁(yè)。1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的正確過(guò)程是 A原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系B原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞系細(xì)胞株C傳代培養(yǎng)細(xì)胞系原代培養(yǎng)細(xì)胞株D原代培養(yǎng)細(xì)胞系傳代培養(yǎng)細(xì)胞株2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于A 培養(yǎng)基不同B 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在與菌條件下進(jìn)行C 動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D 動(dòng)物細(xì)胞能大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株第十一頁(yè)，共三十頁(yè)。3、以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是A 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白B 細(xì)胞遺傳物質(zhì)的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過(guò)程中C 在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有

5、葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)素和動(dòng)物血清等 4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的用途有 生產(chǎn)有價(jià)值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素等 生產(chǎn)基因工程技術(shù)中所用的受體細(xì)胞可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì)培養(yǎng)的各種細(xì)胞可直接用于生理、病理、藥理等方面的研究 A B C D 第十二頁(yè)，共三十頁(yè)。 (1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自 (2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是，然后用酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。這樣做的目的是 (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，這時(shí)的細(xì)胞培養(yǎng)稱為。 (4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用處理，然后配置成，再分裝。 (5)有少數(shù)的細(xì)胞能存活下來(lái)，繼續(xù)傳下去，一般能傳到4050 代，

6、這種傳代細(xì)胞叫做。這種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)與前面的細(xì)胞相同，不同。6這種細(xì)胞傳至50代后一般不能再傳，但有少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，帶有 細(xì)胞的特征，有可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制的傳下去。 胚胎或幼齡動(dòng)物組織器官剪碎胰蛋白使每個(gè)細(xì)胞都能與培養(yǎng)液接觸原代培養(yǎng)胰蛋白酶懸浮液細(xì)胞株相同癌第十三頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物第十四頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物體細(xì)胞核移植概念:將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物核移植胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植難度高受體細(xì)胞：M期的卵母細(xì)胞第十五頁(yè)，共三十

7、頁(yè)。、動(dòng)物的克隆與植物克隆一樣嗎？不、用動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行克隆的過(guò)程,其實(shí)際操作過(guò)程是什么？動(dòng)物克隆過(guò)程的實(shí)際是細(xì)胞核移植、閱讀課本P48，簡(jiǎn)述高產(chǎn)牛體細(xì)胞核移植過(guò)程第十六頁(yè)，共三十頁(yè)。第十七頁(yè)，共三十頁(yè)。思考題、核在進(jìn)行體細(xì)胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細(xì)胞的核？為使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。、用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，為什么？10代以內(nèi)的細(xì)胞保持一般保持正常二倍體的核型，未突變3、細(xì)胞核移植生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？不是，克隆動(dòng)物絕大局部DNA來(lái)自供體細(xì)胞核，但核外還有少局部DNA如線粒體DNA來(lái)自

8、受體卵母細(xì)胞第十八頁(yè)，共三十頁(yè)?？寺?dòng)物的研究意義1.克隆動(dòng)物作為生物反響器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白2.改進(jìn)動(dòng)物品種 3.治療人類疾病，作為供體4.保護(hù)瀕危動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過(guò)大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調(diào)等。第十九頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體第二十頁(yè)，共三十頁(yè)。如果將牛的細(xì)胞與植物細(xì)胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽(yáng)就可以擠出牛奶啦！動(dòng)物細(xì)胞也能融合嗎？第二十一頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞融合1.定義：2.原理：3.融合方法：4.意義：5.應(yīng)用：細(xì)胞膜具有流動(dòng)性生產(chǎn)單克隆抗體第二十二頁(yè)，共三十頁(yè)。1、動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程不同

9、DNA的兩個(gè)細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂第二十三頁(yè)，共三十頁(yè)。主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法同左滅活的病毒物理離心、振動(dòng)、電刺激化學(xué)聚乙二醇誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性原理動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交比較工程植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較第二十四頁(yè)，共三十頁(yè)。設(shè)計(jì)方案：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖如何獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體？雜種細(xì)胞二、單克隆抗體1.傳統(tǒng)獲取抗體方法： 缺點(diǎn)：反復(fù)注射，血清中獲取第二十五頁(yè)，共三十頁(yè)。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

10、B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤只有雜交細(xì)胞才能活動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)單克隆抗體制備過(guò)程獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞第二十六頁(yè)，共三十頁(yè)。2.制備過(guò)程：獲取效應(yīng)B細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 通過(guò)什么方法獲得效應(yīng)B細(xì)胞？怎樣能得到足夠多的骨髓瘤細(xì)胞？人工誘導(dǎo)融合：關(guān)鍵： 方法： 結(jié)果：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞此細(xì)胞特點(diǎn)：體外進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)膜的融合BB B B瘤 瘤瘤 瘤迅速大量增值產(chǎn)生專一抗體第二十七頁(yè)，共三十頁(yè)。 克隆雜交細(xì)胞，再篩選， 目的： 體外或體內(nèi)克隆 提取單克隆抗體3.單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)：篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)靈敏度高可以大量制備第二十八頁(yè)，共三十頁(yè)。4.單克隆抗體的應(yīng)用： 在根底理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預(yù)防方面，具有 特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。生物導(dǎo)彈第二十九頁(yè)，共三十頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)細(xì)胞工程。36.5+-0.5度, 7.2-7.4。用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，