動物細胞培養(yǎng)綜合

1、第一頁，共三十頁。細胞工程植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體技術胚胎移植核移植植物細胞工程技術動物細胞工程技術第二頁，共三十頁。所采用技術的理論根底 植物細胞工程通常采用的技術手段 植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物細胞的全能性植物組織培養(yǎng)第三頁，共三十頁。動物細胞培養(yǎng)第四頁，共三十頁。 燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？ 許多動物的細胞能夠分泌蛋白質,如抗體等.但是,單個細胞產生的蛋白質量是很少的,怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢?第五頁，共三十頁。一、動物細胞培養(yǎng)條件 P461

2、、無菌、無毒的環(huán)境 添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液2、營養(yǎng)葡萄糖、氨基酸、微量元素、無機鹽、促生長因子、動物血清、血漿等。3、溫度和PH 36.5+-0.5度, 7.2-7.44、氣體環(huán)境： O2和CO295%空氣和5% CO2 保證細胞順利的生長增殖第六頁，共三十頁。二、動物細胞培養(yǎng)概念 P441、概念：2、目的：3、理論根底：細胞增值獲得細胞和細胞產物 就是從動物機體內取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。三、動物細胞培養(yǎng)過程 P44-46第七頁，共三十頁。動物胚胎或幼齡動物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個細胞加培養(yǎng)液制成細胞懸浮液 原代培養(yǎng)細

3、胞增殖去掉組織間蛋白 傳代培養(yǎng)胰蛋白酶10代細胞50代細胞50代以后核型不變核型改變遺傳物質改變三、動物細胞培養(yǎng)過程：第八頁，共三十頁。四、動物細胞培養(yǎng)技術的應用 P47大規(guī)模生產有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等為基因工程提供受體細胞用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性科學家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。第九頁，共三十頁。獲得細胞或細胞產物細胞的全能性植物體培養(yǎng)結果快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較工程植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較

4、細胞群體第十頁，共三十頁。1、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是 A原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系B原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞系細胞株C傳代培養(yǎng)細胞系原代培養(yǎng)細胞株D原代培養(yǎng)細胞系傳代培養(yǎng)細胞株2、動物細胞培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于A 培養(yǎng)基不同B 動物細胞培養(yǎng)不需要在與菌條件下進行C 動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能D 動物細胞能大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株第十一頁，共三十頁。3、以下有關動物細胞培養(yǎng)的表達，正確的選項是A 動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白B 細胞遺傳物質的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中C 在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D 動物細胞培養(yǎng)液中通常含有

5、葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等 4、動物細胞培養(yǎng)技術的用途有 生產有價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素等 生產基因工程技術中所用的受體細胞可以用于檢測有毒物質培養(yǎng)的各種細胞可直接用于生理、病理、藥理等方面的研究 A B C D 第十二頁，共三十頁。 (1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 (2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是，然后用酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是 (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行，這時的細胞培養(yǎng)稱為。 (4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用處理，然后配置成，再分裝。 (5)有少數的細胞能存活下來，繼續(xù)傳下去，一般能傳到4050 代，

6、這種傳代細胞叫做。這種細胞的遺傳物質與前面的細胞相同，不同。6這種細胞傳至50代后一般不能再傳，但有少數細胞遺傳物質發(fā)生改變，帶有 細胞的特征，有可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳下去。 胚胎或幼齡動物組織器官剪碎胰蛋白使每個細胞都能與培養(yǎng)液接觸原代培養(yǎng)胰蛋白酶懸浮液細胞株相同癌第十三頁，共三十頁。動物體細胞核移植技術和克隆動物第十四頁，共三十頁。動物體細胞核移植概念:將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物核移植胚胎細胞核移植體細胞核移植難度高受體細胞：M期的卵母細胞第十五頁，共三十

7、頁。、動物的克隆與植物克隆一樣嗎？不、用動物體細胞進行克隆的過程,其實際操作過程是什么？動物克隆過程的實際是細胞核移植、閱讀課本P48，簡述高產牛體細胞核移植過程第十六頁，共三十頁。第十七頁，共三十頁。思考題、核在進行體細胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細胞的核？為使核移植動物的遺傳物質全部來自有利用價值的動物提供的細胞。、用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞，為什么？10代以內的細胞保持一般保持正常二倍體的核型，未突變3、細胞核移植生產的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？不是，克隆動物絕大局部DNA來自供體細胞核，但核外還有少局部DNA如線粒體DNA來自

8、受體卵母細胞第十八頁，共三十頁。克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反響器，生產醫(yī)用蛋白2.改進動物品種 3.治療人類疾病，作為供體4.保護瀕危動物體細胞核移植技術存在的問題：許多克隆動物表現出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調等。第十九頁，共三十頁。動物細胞融合與單克隆抗體第二十頁，共三十頁。如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！動物細胞也能融合嗎？第二十一頁，共三十頁。動物細胞融合1.定義：2.原理：3.融合方法：4.意義：5.應用：細胞膜具有流動性生產單克隆抗體第二十二頁，共三十頁。1、動物細胞融合過程不同

9、DNA的兩個細胞滅活病毒誘導細胞融合融合后的細胞進行有絲分裂第二十三頁，共三十頁。主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學方法同左滅活的病毒物理離心、振動、電刺激化學聚乙二醇誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較工程植物、動物細胞融合的比較第二十四頁，共三十頁。設計方案：一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？雜種細胞二、單克隆抗體1.傳統獲取抗體方法： 缺點：反復注射，血清中獲取第二十五頁，共三十頁。動物細胞融合技術

10、B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤只有雜交細胞才能活動物細胞培養(yǎng)單克隆抗體制備過程獲得產生相應抗體的B淋巴細胞第二十六頁，共三十頁。2.制備過程：獲取效應B細胞，骨髓瘤細胞 通過什么方法獲得效應B細胞？怎樣能得到足夠多的骨髓瘤細胞？人工誘導融合：關鍵： 方法： 結果：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞此細胞特點：體外進行細胞培養(yǎng)膜的融合BB B B瘤 瘤瘤 瘤迅速大量增值產生專一抗體第二十七頁，共三十頁。 克隆雜交細胞，再篩選， 目的： 體外或體內克隆 提取單克隆抗體3.單克隆抗體優(yōu)點：篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞特異性強靈敏度高可以大量制備第二十八頁，共三十頁。4.單克隆抗體的應用： 在根底理論研究中具有重要意義 在疾病診斷、治療和預防方面，具有 特異性高、靈敏度高等優(yōu)越性。生物導彈第二十九頁，共三十頁。內容總結細胞工程。36.5+-0.5度, 7.2-7.4。用于檢測有毒物質，