實(shí)驗(yàn)課苯妥英鈉吸收實(shí)驗(yàn)

1、苯妥英鈉吸收實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^檢測苯妥英鈉的血藥濃度，掌握該藥的吸收特點(diǎn)。通過對血藥濃度的監(jiān)測，了解治療藥物監(jiān)測的方法和意義。實(shí)驗(yàn)材料動物：家兔（2.5-3.0 kg）藥品：1%肝素、苯妥英鈉片、苯妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品、卡馬西平標(biāo)準(zhǔn)溶液（5 g/ml）、甲醇（色譜純）、乙酸乙酯器材：木制開口器、導(dǎo)尿管、一次性注射器、刀片、EP管、離心機(jī)、水浴鍋、微量進(jìn)樣器、HPLC色譜儀、負(fù)壓過濾裝置。實(shí)驗(yàn)步驟與方法血樣采集1、取家兔一只，稱重。2、耳緣靜脈采血：固定家兔，剪去擬采血耳殼上的毛，用刀片在耳緣靜脈上切一小口，讓血液自然流出，收集1 ml于EP管中（事先加入1%肝素50 l），作為空白對照。采血完畢，用棉球

2、壓住切口，止血。3、將苯妥英鈉片（20 mg/kg）研磨后加水溶解至10 ml左右，給家兔灌胃。4、在灌胃后15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、24 h時間點(diǎn)分別進(jìn)行采血1 ml。5、將各點(diǎn)血樣，離心3000 rpm、5 min。取上清血漿于EP管中，-20C保存?zhèn)溆谩Ｑ獦犹幚?、將凍存血漿融化，取0.25 ml于玻璃離心管中，加50 l卡馬西平作為內(nèi)標(biāo)，漩渦震蕩混勻，然后加入乙酸乙酯1.5 ml。2、漩渦震蕩2 min后，離心3000 rpm，5 min。3、吸取乙酸乙酯層1 ml于另一干凈玻璃離心管中，55C水浴風(fēng)干，4C保存?zhèn)溆?。HPL

3、C檢測1、配制流動相：甲醇（色譜純）：水（重蒸餾水）為60：40，配好的流動相用微孔濾膜過濾，超聲15 min除去氣泡。2、平衡機(jī)器：開機(jī)、除氣，待基線平穩(wěn)后進(jìn)樣。3、樣品溶解：取風(fēng)干后樣品，加50 l甲醇溶解，旋渦振蕩溶解樣品。4、檢測：進(jìn)樣10 l，紫外波長220 nm，流速1 ml/min。數(shù)據(jù)處理記錄，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線估算各樣品中苯妥英鈉濃度以時間為橫坐標(biāo)，苯妥英鈉濃度為縱坐標(biāo)，繪制苯妥英鈉吸收曲線。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，形成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備1、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：精密稱取苯妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解后定容成800 g/ml，4C保存。2、取7支玻璃離心管，分別加入不同體積苯妥英鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成不同濃度的血漿樣品0.25 ml，并于各管中加入50 l卡馬西平作為內(nèi)標(biāo)，漩渦震蕩混勻，再加乙酸乙酯1 ml萃取。3、處理及檢測同前。4、記錄。5、以濃度為橫