人胚胎干細(xì)胞研究進(jìn)展

1、關(guān)于人胚胎干細(xì)胞研究進(jìn)展第一張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月干細(xì)胞的基本概念胚胎干細(xì)胞系的建立過(guò)程胚胎干細(xì)胞研究的進(jìn)展情況胚胎干細(xì)胞的研究意義胚胎干細(xì)胞研究的困難及解決辦法第二張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 人體發(fā)生過(guò)程： 受精 卵裂 受精后72h 受精后5-7天精子+卵子 合子 卵裂球 桑椹胚 囊胚 滋養(yǎng)層胎盤(pán)及胎兒附屬結(jié)構(gòu)囊胚 內(nèi)胚層消化道、呼吸道上皮和腺體；肝；膽；胰。 內(nèi)細(xì)胞群 中胚層結(jié)締組織；血液；肌肉；骨骼；泌尿生殖系統(tǒng) 外胚層體表結(jié)構(gòu)；神經(jīng)系統(tǒng)第三張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第五張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2

2、022年6月第六張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月干細(xì)胞的基本概念1、定義：具有自我復(fù)制的能力，在一定條件下能夠分化成各種功能細(xì)胞。2、分類(lèi)：（1）全能干細(xì)胞，包括：胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells, ES細(xì)胞） 生殖干細(xì)胞（embryonic germ cells, EG細(xì)胞） 具有全能性，能夠分化成全身200多種細(xì)胞類(lèi)型， 進(jìn)一步形成機(jī)體的任何組織和器官。（2）多能干細(xì)胞：具有分化成多種細(xì)胞和組織的潛能，但卻失去了發(fā) 育成完整個(gè)體的能力。（3）專(zhuān)能干細(xì)胞：只能向一種或密切相關(guān)的兩種類(lèi)型的細(xì)胞分化。第七張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第八張，PPT共四十頁(yè)，

3、創(chuàng)作于2022年6月橫向分化：部分干細(xì)胞在特定條件下可以轉(zhuǎn)化為其它細(xì)胞，如肌肉干細(xì)胞在特定條件下可以分化為各種血細(xì)胞系。第九張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月衍生自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始外胚層的細(xì)胞；永生化(immortal)；能維持穩(wěn)定的正常的二倍體染色體結(jié)構(gòu)；有穩(wěn)定的發(fā)育潛能，能被誘導(dǎo)增殖或分化；能參與胎兒所有組織的發(fā)育過(guò)程； 胚胎干細(xì)胞的性質(zhì)第十張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月胚胎干細(xì)胞系的建立過(guò)程第十一張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十二張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月1、干細(xì)胞來(lái)源：(1) 發(fā)育良好的囊胚，從中分離內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞ES細(xì)胞(2) 從5-9周的

4、胚胎生殖腺中分離出人的EG細(xì)胞（embryonic germinate cells）(3)惡性胚胎腫瘤或畸胎瘤細(xì)胞 （embryonal carcinoma, EC)(4) 生殖克?。ㄖ委熜钥寺。后w細(xì)胞核轉(zhuǎn)移（SCNT）去核卵細(xì)胞 + 體細(xì)胞核 克隆 囊胚 分離內(nèi)細(xì)胞群 ES細(xì)胞第十三張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十四張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第十五張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月2、胚胎干細(xì)胞的分離酶消化后培養(yǎng)免疫方法去處滋養(yǎng)層細(xì)胞流式細(xì)胞儀分離法第十六張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月3、培養(yǎng)條件：(1) 特殊的培養(yǎng)液：用DMEM培養(yǎng)液，其中胎牛血

5、清的濃度和質(zhì)量很重要，還要加非必須氨基酸；-巰基乙醇。(2) 以人或胚鼠的成纖維細(xì)胞為飼養(yǎng)細(xì)胞。(3) 必須加入LIF，抑制細(xì)胞分化。第十七張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月4、胚胎干細(xì)胞的鑒別胚胎干細(xì)胞具有以下特點(diǎn)：(1) 細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性高(2)端粒酶活性高(3) 不被Hoechst33342 和Rhodamine123染色(4) 細(xì)胞膜表面有特殊的標(biāo)記：SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60, TRA-1-81(5) 能分化成三個(gè)胚層的細(xì)胞，將胚胎干細(xì)胞植 入免疫缺陷小鼠皮下可產(chǎn)生畸胎瘤(6) 可誘導(dǎo)分化為各種成體干細(xì)胞第十八張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第

6、十九張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十一張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十二張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月干細(xì)胞特性第二十三張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第二十四張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的常用方法（1）加入誘導(dǎo)細(xì)胞分化的因子或化學(xué)物質(zhì)， 如VGEF、bFGF 、DMSO和RA等（2）將ES細(xì)胞與特定的細(xì)胞共培養(yǎng) （3）將某種分化誘導(dǎo)因子的基因轉(zhuǎn)入ES細(xì) 胞內(nèi) 第二十五張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月鑒定干細(xì)胞的常用方法：（1） 細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)（2）細(xì)胞功能（3）細(xì)胞表

7、面的特殊標(biāo)志 （4）細(xì)胞內(nèi)特異基因的表達(dá)第二十六張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月造血干細(xì)胞的鑒定：（1） 細(xì)胞形態(tài) ：集落呈非貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)較?。?）細(xì)胞表面標(biāo)志：flk-1（Fetal Liver Kinase 1); L/TAL-1； CD34；GATA-1；（3）基因表達(dá)：TAL-1；GATA-2 ；H1；主要珠蛋白 第二十七張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 內(nèi)皮細(xì)胞 :（1）細(xì)胞形態(tài)：扁平貼壁狀態(tài) ；Weibel-Palade小體；廣泛胞內(nèi)連接；大量吞飲泡 （2）細(xì)胞標(biāo)志：血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子PECAM-1或CD31；細(xì)胞粘附分子整合素v3 ；CD34 ；JAM(

8、Junctional Adhesion Membrane) ；MECA-32以及MEC-14，7抗原 （3）特異基因表達(dá)：flk-1；flt-1 ；tie-2 第二十八張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月心肌干細(xì)胞：（1）細(xì)胞結(jié)構(gòu)：細(xì)胞內(nèi)含糖原顆粒，大量線粒體以及廣泛的未形成成熟肌原纖維的粗絲和細(xì)絲 （2）細(xì)胞功能：節(jié)律性收縮 ；心肌特異離子流。利用膜片鉗技術(shù)可檢測(cè)L型Ica，Ina，Ito，Ik，Ik1，Ik，ACH和If （3）基因表達(dá)：及心肌球蛋白重鏈 第二十九張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 神經(jīng)干細(xì)胞 :（1）細(xì)胞形態(tài)：胞體很小，從胞體伸出許多長(zhǎng)的神經(jīng)突 （2）細(xì)胞功能：

9、電壓控制性Na+，K+，Ca2+通道；神經(jīng)遞質(zhì)的受體 （3）細(xì)胞標(biāo)志：TH（酪氨酸羥化酶），微管相關(guān)蛋白tau，MAP2，微管蛋白3（TuJ-1），GFAP（膠質(zhì)原纖維酸性蛋白），巢蛋白，突觸泡蛋白以及NF-L（68KDa的神經(jīng)絲蛋白），NF-H（200KDa的神經(jīng)絲蛋白），NF-M（160KDa的神經(jīng)絲蛋白）；Nurr1和Ptx3（中腦多巴胺能神經(jīng)元的標(biāo)志） （4）特異基因表達(dá)：5天的EBs中有NF-L，NF-M和突觸泡蛋白的表達(dá)，2天后表達(dá)編碼神經(jīng)聚糖（腦特異蛋白多糖）的基因，6天后表達(dá)編碼微管相關(guān)蛋白tau的基因。也有檢測(cè)發(fā)現(xiàn)分化細(xì)胞中有Brain-3，谷氨酰胺受體亞單位GluR-4和G

10、luR-6，遞質(zhì)合成酶TH和GAD67，GAD65，GFAP和NF-L的表達(dá) 第三十張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 胰島細(xì)胞 :細(xì)胞標(biāo)志：GATA-4（胚胎和胚外內(nèi)胚層的標(biāo)志），HNF3（胚胎內(nèi)胚層的標(biāo)志）；胰島素淀粉樣多肽IAPP；葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2（Glut-2） ；胰島細(xì)胞的特征及特定標(biāo)記物：胰島GK和GLUT2（葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)子）；轉(zhuǎn)錄因子IPF1/PDX1和NgN3（Neurogenin3） 第三十一張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2002年3月，美國(guó)麻省理工學(xué)院的科學(xué)家宣布，他們首次利用人體胚胎干細(xì)胞培育出毛細(xì)血管，證明了胚胎干細(xì)胞技術(shù)在治療心血管疾病等領(lǐng)域的應(yīng)用潛力。 目前已有報(bào)導(dǎo)ES細(xì)胞能在適當(dāng)條件下分化為心肌細(xì)胞，胰島細(xì)胞，血管內(nèi)皮細(xì)胞，肝細(xì)胞等。第三十三張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十四張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 1999年12月，美國(guó)科學(xué)雜志公布了當(dāng)年世界科學(xué)進(jìn)展的評(píng)定結(jié)果，干細(xì)胞的研究成果列在舉世矚目耗資巨大的人類(lèi)基因組工程之前，名列十大科學(xué)進(jìn)展首位。 第三十五張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十六張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十七張，PPT共四十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月解決胚胎來(lái)源有限的途徑： 未成