多糖藥物檢測方法規(guī)范

1、關于多糖藥物檢測方法規(guī)范第一張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月1、硫酸軟骨素的含量測定酸性粘多糖，維持組織和免疫機能（1）長期應用于防治冠心病、心絞痛、冠狀動脈粥樣硬化、心肌缺血等疾病，無明顯的毒副作用。在動脈和靜脈壁上沉積的脂肪等脂質可以被有效地去除或減少，能顯著降低血漿膽固醇。（2） 用于治療神經痛、神經性偏頭痛、關節(jié)痛等。 （3）預防和治療鏈霉素引起的聽覺障礙，效果顯著。 （4）應用于化妝品以及外傷傷口的愈合劑等。（5）鯊魚軟骨中的軟骨素有抗腫瘤的作用。（ 6）硫酸軟骨素還用于滴眼劑。第二張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月家畜、鯊魚類動物是主要的軟骨來源。但家畜的軟骨產量很低

2、， 鯊魚多是靠天然捕獲。因此, 需要進一步尋求其它易得而又穩(wěn)定的軟骨來源,。鱘魚的軟骨含量相當高, 而且鱘魚養(yǎng)殖技術已成熟。以匙吻鱘的軟骨為原料, 用稀堿- 酶相結合的方法提取硫酸軟骨素匙吻鱘軟骨80 恒溫蒸煮6 h洗凈冷凍80 烘干粉碎料液比16， 3 %堿提取，提取溫度40 濾液胰蛋白酶酶降解（用量1 0001.5，酶解溫度45 ）氯仿萃取棄氯仿層95 %乙醇沉淀（沉淀時的pH7.0 ）過濾 60 干燥成品硫酸軟骨素提取率為36.52 %、純度為97 %、蛋白質含量為0.075 %、水分為10.52 %。第三張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測方法（1）比色法適量樣品用6M HCL

3、 酸水解2小時，中和 與乙酰丙酮反應25分鐘，生成色原物質，冷卻，然后再與無醛乙醇60反應1小時，525nm 處測定吸光度,鹽酸氨基葡萄糖做對照(2)紫外法 樣品與硫酸95共熱水解1小時,288nm 處測吸光值。 需做標準曲線第四張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月（3）毛細細管電泳測定硫酸軟骨素毛細管電泳條件：毛細管內徑50m ；有效長度50cm 緩沖鹽：50m M磷酸二氫鉀溶液，pH=3.5 進樣量：5sec, 0.5 毫升 分離電壓：28kV樣品處理：稱取各種待測樣品約1.0g，用10mL乙腈分散，定容至100mL。氨基葡萄糖標準曲線（5.070mg/mL-0.507mg/mL）：y

4、=8338.7x+1607.7， R2=0.9999硫酸軟骨素標準曲線（4.731 mg/mL-0.473mg/mL）：y=344781x+58652， R2=0.9958第五張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月香菇多糖的測定 香菇多糖是主鏈是（13）糖苷鏈連接的葡聚糖。 用這種多糖以2mg/kg劑量腹腔注射已移植腫瘤的大鼠連續(xù)5天，結果表明它對肉瘤的抑制率達83%，而相同劑量的經切支水解后得到的較小分子香菇多糖對肉瘤的抑制量更高，達97%以上。 第六張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月機理：有人合成了含有同位素的香菇多糖，并在移植了腫瘤的小鼠身上做示蹤試驗，結果發(fā)現它不具備直接殺傷腫

5、瘤細胞的能力。隨后的大量試驗表明它是作為調節(jié)機體免疫反應的T細胞促進劑，通過刺激抗體的產生提高機體的免疫能力，從而達到抵抗腫瘤的作用。香菇多糖注射液(治慢性肝炎及腫瘤治療的輔助藥); 香菇多糖的測定多糖水解成單糖進行測定（滴定法）含量=樣品水解后單糖總含量- 未水解樣品中單糖的含量第七張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月香菇多糖的提取方法1.預處理：取干香菇，搗碎。2.提?。簩v碎的干香菇，在攪拌的條件下加67倍量水混勻，加熱至90，攪拌保溫60 min。 降溫至40時轉移到40水浴保溫，p H64，攪拌反應60 min，然后迅速升溫到90-100，滅活1min降溫后紗布過濾，收集濾液。3

6、.濃縮：將以上濾液濃縮至l/5體積。4.沉淀：將濃縮液加1倍量乙醇，然后靜置過夜。過濾得沉淀物，濾液再加3倍量乙醇，得沉淀物。第八張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月5.二次沉淀：將沉淀物置于搪瓷缸中，加約70倍量的水，攪拌均勻，在猛烈攪拌下，滴加0.2mol/L氫氧化十六烷基三甲基胺水溶液，逐步調PH至12.8時產生大量沉淀，離心，沉淀用乙醇洗滌，收集沉淀。6.除蛋白：沉淀用氯仿、正丁醇洗滌去蛋白，水層加3倍量乙醇沉淀，收集沉淀。7.洗滌：沉淀依次用甲醇、乙醚洗滌，收集沉淀。8.干燥：將沉淀置真空干燥器干燥，即為香菇多糖。第九張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月靈孢多糖 靈芝，又稱萬

7、年蕈、靈芝草，為靈芝屬真菌, 有著悠久的藥用歷史。目前，有關靈芝活性元素的研究主要集在：靈芝多糖類、靈芝三萜類等成分上。 靈芝多糖可抑制腫瘤細胞的無限、快速分裂能力，還具有提高機體免疫力，提高機體耐缺氧能力，降血糖降血脂作用。靈芝多糖產品：靈芝多糖片、靈芝復方糖漿等(主要用于腫瘤輔助治療，慢性氣管炎、高血壓、神經衰弱、糖尿病、高血脂等);第十張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測方法(1)對照品溶液的制備 取葡萄糖，加水制成1.0mg/ml的溶液。(2)供試品溶液的制備 取本品3.0ml，加水定容至200ml。(3)標準曲線的制備 精密量取對照品溶液1.0ml，2.0ml，4.0ml，6

8、.0ml，和8.0ml，加水定容至100ml。各精密量取1.0ml，分別置具塞試管中，置冰浴中，分別加入蒽酮試劑5.0ml，搖勻，各試管加完后浸入沸水浴中，加熱1min后，加塞。自水浴重新沸騰起，開始計時，10min后取出，用自來水冷卻，室溫放置10min，立即在620nm分別測定吸光度，以測得的吸光度對相應的濃度計算回歸方程，相關系數不得低于0.99。(4)含量測定（含多糖以葡萄糖計） 精密量取供試品1.0ml，照標準曲線制備項下自“分別置具試管中”起，依法同步操作，測定吸光度，由回歸方程計算多糖含量。第十一張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月肝素的檢測1.結構與性質 肝素分子是有六糖或

9、八糖重復單位組成的線形分子，含2-硫酸艾杜糖醛酸6-硫酸-N-硫酸氨基葡萄糖及葡萄糖醛酸等殘基。由不同鏈長的許多組分組成。 肝素的N-硫酸基對酸水解敏感，與氧化劑反應，能被降解成酸性產物。肝素呈弱酸性，某聚陰離子與各種陽離子反應生成鹽，與堿性染料反應，對染料的光吸收有影響。第十二張，PPT共十四頁，創(chuàng)作于2022年6月2.效價的測定（1）天青A法 含氨基堿性染料（天青A、甲苯胺藍、天青）有一定最大吸收，結合了肝素后，則最大吸收向短波移動。使用天青A比色測定肝素效價。 標準曲線繪制：精密量取肝素標準液（1.2U/ml）1ml 2ml 3ml 4ml 5ml 各以蒸餾水補足到5ml，在各加巴以妥緩沖液（PH=6.8）1ml及0.1%西黃耆膠溶液1ml，0.018%天青A溶液1ml，搖勻后，于505nm處測吸光度。以效價單位為