《菌物學(xué)報》中文投稿-參考模板講課稿

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。菌物學(xué)報中文投稿-參考模板-河北省馬鈴薯早疫病菌群體遺傳結(jié)構(gòu)的研究張福光楊志輝朱杰華*張宏磊魏巍河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院河北保定071000摘要：通過對20092010年河北省145株及外省30株馬鈴薯早疫病菌對代森錳鋅的敏感性、產(chǎn)孢量兩個表型性狀和AFLP基因型的測定，揭示了河北省早疫病菌群體的遺傳結(jié)構(gòu)。毒力測定表明所有供試菌株對代森錳鋅均表現(xiàn)敏感，其EC50范圍介于1.044.86g/mL之間，平均為2.93g/mL。被測河北省47株早疫病菌產(chǎn)孢量平均為85個孢子/mm2，大大高于30個對照菌株的產(chǎn)

2、孢量，對照菌株的平均產(chǎn)孢量為50個孢子/mm2，菌株間產(chǎn)孢量存在明顯差異。AFLP聚類分析揭示出了馬鈴薯早疫病菌豐富的遺傳多樣性，每個菌株都具有獨(dú)特的AFLP基因型。早疫病菌AFLP基因型與地理來源存在著密切的相關(guān)性，與菌株產(chǎn)孢量有一定的相關(guān)性，但與代森錳鋅敏感性無相關(guān)性。關(guān)鍵詞：茄鏈格孢，代森錳鋅，產(chǎn)孢量，擴(kuò)增片段長度多態(tài)性PopulationstructureofAlternariasolanionpotatoinHebeiProvinceZHANGFu-GuangYANGZhi-HuiZHUJie-Hua*ZHANGHong-LeiWEIWeiCollegeofPlantProtecti

3、on,AgriculturalUniversityofHebei,Baoding,Hebei071000,ChinaAbstract:Thepopulationgeneticstructureof145isolatesofAlternariasolanicollectedfrompotatoinHebeiProvinceand30onesinotherfourprovincesinChinafrom2009to2010wasrevealedbyphenotypessuchasvirulenceofMancozebandsporulationcapacityincombinationwithAF

4、LPgenotype.ThetestofvirulencesshowedthatalltestedisolatesofA.solaniweresensitivetoMancozeb,withEC50valuesof1.044.86g/mL,averaging2.93g/mL.Averagesporulationquantityofthetested47isolatesinHebeiProvinceand30onesinotherfourprovincesusedascontrolwere85and50conidia/mm2repectively,showingsignificantdiffer

5、ence.AFLPgenotypesrevealedahighdiversityofA.solanicollectedfrompotatoandeachisolatehadaspecificAFLPgenotype.AFLPgenotypeofisolateswascloselyrelatedtothegeographicorigin,andrelatedtoacertainextenttosporulationquantity,butnotcorrelatedwithsensitivityofmancozebtopathogen.Keywords:Alternariasolani,Manco

6、zeb,sporulationquantity,AFLP近年來，馬鈴薯早疫病已逐漸成為河北省馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的一種為害嚴(yán)重的重要病害，給當(dāng)?shù)伛R鈴薯生產(chǎn)造成了巨大損失。已引起現(xiàn)代馬鈴薯產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專家組、馬鈴薯病害專家、馬鈴薯生產(chǎn)單位以及管理部門的高度重視，已將其列為“十二五”期間馬鈴薯病害上急需解決的重點(diǎn)生產(chǎn)難題。該病由茄鏈格孢Alternariasolani侵染引起ADDINNE.Ref.3DBD5F1E-303E-4632-A0A7-E58B139E282E（Ellis&Martin1882）。該菌在我國分布亦十分廣泛，幾乎遍布各個省、市、自治區(qū)，可以引起多種植物病害ADDINNE.Ref.F

7、DC3BA7D-9D8D-420D-8117-0931CD67C4EF（張?zhí)煊?003）。以前由于茄鏈格孢引起的病害一般為害程度較輕，以至于對病原菌有關(guān)群體生物學(xué)特性方面的研究相對較少，為了更好和更有效地防控河北省日趨嚴(yán)重的馬鈴薯早疫病，對病原菌群體遺傳學(xué)研究顯得十分重要。病原菌群體結(jié)構(gòu)與病害的發(fā)生密切相關(guān)，了解馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢量、對藥劑的敏感性及其基因型，可為深入分析馬鈴薯早疫病發(fā)生與流行規(guī)律提供依據(jù)ADDINNE.Ref.3593A316-A223-49AC-A528-C3B4A91D0701（Rotem1994）。國外學(xué)者已將同工酶、RAPD、RFLP和AFLP等分子標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用于馬鈴

8、薯早疫病菌及相關(guān)種類的遺傳多樣性研究。Petrunak&Christ（1992）研究結(jié)果表明，同工酶技術(shù)不適于分析早疫病菌種內(nèi)的遺傳差異。Weiretal.（1998）的研究表明，RAPD標(biāo)記可鑒別出不同寄主的早疫菌，但不能區(qū)分不同地理來源地菌株。Sharma&Tewari（1998）利用RAPD技術(shù)分析了寄生于十字花科的3種鏈格孢屬真菌Alternariabrassicae，A.brassicicola和A.raphani，發(fā)現(xiàn)其基因型分化和地理來源密切相關(guān)。Adachietal.（1996）通過RFLP標(biāo)記技術(shù)分析了A.alternata遺傳多樣性和其對殺菌劑抗性之間的關(guān)系，結(jié)果表明二者之

9、間并沒有明顯關(guān)系。Martnezetal.（2004）利用AFLP技術(shù)分析了早疫病菌的遺傳多樣性，發(fā)現(xiàn)AFLP分子標(biāo)記適用于早疫病菌的遺傳多樣性分析，病原菌具有豐富的多樣性，其遺傳多樣性與地理來源和寄主有一定相關(guān)性。然而，我國對馬鈴薯早疫病的研究仍停留在初級階段，主要集中在室內(nèi)毒力測定和田間藥效防治，此外還有一些與寄主抗病性有關(guān)的零星報道。梁偉伶等（2009）通過室內(nèi)試驗(yàn)篩選出了抑制馬鈴薯早疫病的藥劑，代森錳鋅與嘧菌酯9:1混配時抑制效果最好，其EC50小于1g/mL；劉洋等（2006）研究發(fā)現(xiàn)草酸、KCl、FeSO4均可誘導(dǎo)馬鈴薯塊莖產(chǎn)生對早疫病的抗性；臺蓮梅等（2010）研究發(fā)現(xiàn)PAL、P

10、OD、PPO和CAT這4種防御酶與馬鈴薯對早疫病的抗病性有一定關(guān)系；張振粉等（2010）對番茄早疫病菌致病力進(jìn)行了初步研究。然而，在我國有關(guān)馬鈴薯早疫病菌群體結(jié)構(gòu)方面的研究未見報道。本研究擬通過測定馬鈴薯早疫病菌對代森錳鋅的敏感性、產(chǎn)孢量以及AFLP基因型，揭示河北省馬鈴薯早疫病菌的遺傳多樣性，分析不同區(qū)域早疫病菌對代森錳鋅的敏感性、產(chǎn)孢量和AFLP基因型之間的關(guān)系，為探討河北省馬鈴薯早疫病菌近年來發(fā)生流行規(guī)律的變化以及防治提供參考。1材料與方法1.1材料1.1.1供試菌株：供試馬鈴薯早疫病菌均由本研究室自田間采集的具同心輪紋的典型早疫病癥狀的病葉經(jīng)組織分離法分離獲得ADDINNE.Ref.5

11、E3B3720-3FED-4C14-961B-CEB65C0C1E71（方中達(dá)1998）。供試菌株共計175株，其中河北省菌株包括3市11縣共145株，河北省外的對照菌株30株，其采樣時間、地點(diǎn)及菌株數(shù)目等信息見表1。1.1.2培養(yǎng)基及試劑：PCA培養(yǎng)基參考張?zhí)煊睿?003）的配方，經(jīng)改良后每1,000mL中含馬鈴薯20g和胡蘿卜20g。80%代森錳鋅為美國陶氏益農(nóng)公司產(chǎn)品。1.2代森錳鋅對早疫病菌的毒力測定采用菌落直徑法測定代森錳鋅對早疫病菌的毒力，計算EC50ADDINNE.Ref.0D6A4907-09FB-4E24-834F-4395D48C12E3（梁偉伶等2009）。1.3早疫病菌

12、產(chǎn)孢量的測定將早疫病菌置于PCA培養(yǎng)基上，25光照培養(yǎng)（16h光照，8h黑暗）7dADDINNE.Ref.6EAB5210-737B-490F-A9A4-D62680F3CD9B（Fourtounietal.1998；Rotem&Esther1969）。由于馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢量很低，制成孢子懸浮液很難觀測，所以本研究采用將培養(yǎng)皿直接置于顯微鏡下進(jìn)行，每皿取20個視野（1010倍下每個視野下觀察到的實(shí)際面積為0.25mm2）計算單位面積（mm2）分生孢子個數(shù)（n）。當(dāng)0n40時，界定為I級；40n80，界定為II級；n80，界定為=3*ROMANIII級ADDINNE.Ref.1D415323-

13、909C-457F-AD8A-E73820292DF3（Charlton1953）。1.4AFLP分析馬鈴薯早疫病菌基因組DNA提取采用改表1供試馬鈴薯早疫病菌菌株的信息Table1InformationofAlternariasolanicollectedfrompotatointhetest年份Year地點(diǎn)Location數(shù)量No.年份Year地點(diǎn)Location數(shù)量No.2010河北保定淶源Laiyuan,Baoding,Hebei62010河北張家口萬全Wanquan,Zhangjiakou,Hebei112010河北承德豐寧Fengning,Chengde,Hebei82009河北張

14、家口張北Zhangbei,Zhangjiakou,Hebei52009河北承德圍場Weichang,Chengde,Hebei52010河北張家口張北Zhangbei,Zhangjiakou,Hebei202010河北承德圍場Weichang,Chengde,Hebei172009內(nèi)蒙古呼倫貝爾扎蘭屯Zhalantun,Hulunber,InnerMongolia52010河北承德隆化Longhua,Chengde,Hebei12009內(nèi)蒙古包頭達(dá)茂DarhanMuminggan,Baotou,InnerMongolia52010河北張家口尚義Shangyi,Zhangjiakou,Hebei

15、172009陜西榆林定邊Dingbian,Yulin,Shaanxi52010河北張家口懷安Huaian,Zhangjiakou,Hebei122009黑龍江齊齊哈爾克山Keshan,Qiqihar,Heilongjiang52010河北張家口康保Kangbao,Zhangjiakou,Hebei122009黑龍江大興安嶺加格達(dá)奇Jiagedaqi,DaHingganLing,Heilongjiang52010河北張家口崇禮Chongli,Zhangjiakou,Hebei162009云南昆明西山Xishan,Kunming,Yunnan52010河北張家口沽源Guyuan,Zhangjiak

16、ou,Hebei15良的CTAB法ADDINNE.Ref.C253FFA7-2C41-4A47-A1C9-62DF1D99B68B（Pipeetal.2000）。AFLP反應(yīng)體系參考Vosetal.（1995）和Martnezetal.（2004）的方法，并略作改進(jìn)。預(yù)擴(kuò)增采用E+1和M+1引物組合（E-A/M-A），選擇性擴(kuò)增采用E+2和M+2的3對引物組合（E-AA/M-GA，E-AG/M-AG和E-AT/CC）。擴(kuò)增產(chǎn)物采用毛細(xì)管熒光電泳技術(shù)進(jìn)行分離檢測。擴(kuò)增條帶采用生物學(xué)統(tǒng)計軟件NTSYSpc2.1進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)錄入NTedit1.2獲得數(shù)據(jù)組，利用Similarity程序組中的Sim

17、Qual程序計算相似系數(shù)（SM），利用SHAN程序采用不加權(quán)算術(shù)平均數(shù)法（UPGMA）對數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析，構(gòu)建樹狀聚類圖。2結(jié)果與分析2.1代森錳鋅對早疫病菌的毒力測定毒力測定結(jié)果表明，馬鈴薯早疫病菌不同菌株對代森錳鋅的敏感性存在一定差異，其EC50介于1.044.86g/mL之間，平均為2.93g/mL，最敏感的菌株出現(xiàn)在河北承德圍場，而最不敏感的菌株出現(xiàn)在河北張家口懷安。不同地區(qū)間菌株對代森錳鋅的平均EC50也存在一定差異，河北萬全最為敏感，平均EC50為1.77g/mL；河北懷安最不敏感，平均EC50為3.79g/mL（圖1）。綜上所述，盡管代森錳鋅對不同地理來源菌株的毒力具有一定的差異

18、，但都表現(xiàn)敏感，仍可作為生產(chǎn)上防治馬鈴薯早疫病的優(yōu)選藥劑。2.2早疫病菌產(chǎn)孢量的測定本文測定了河北省張家口張北和承德圍場共計47菌株和云南、內(nèi)蒙古、黑龍江和陜西等四省6縣的30個對照菌株的產(chǎn)孢量，結(jié)果表明，河北兩縣早疫病菌的產(chǎn)孢量明顯高于對照地區(qū)的產(chǎn)孢量（表2）。被測河北圍場22株和張北25株菌產(chǎn)孢量范圍分別為28160個孢子/mm2和44140個孢子/mm2，其平均產(chǎn)孢量分別為88個孢子/mm2和84個孢子/mm2。兩地菌株產(chǎn)孢能力全部劃分在II和III級，沒有I級菌株出現(xiàn)。而黑龍江大興安嶺加格達(dá)奇、齊齊哈爾克山、內(nèi)蒙古呼倫貝爾扎蘭屯和云南昆明西山4地縣區(qū)的菌株產(chǎn)孢量較小，平均產(chǎn)孢量分別為5

19、6、37、50和18個孢子/mm2。以上四地菌株全部劃分為I或II級，未發(fā)現(xiàn)III級菌株。綜合分析，河北省各縣區(qū)馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢能力（85個孢子/mm2）高于其他省份早疫病菌（50個孢子/mm2），菌株產(chǎn)孢差異與地理來源存在一定的相關(guān)性。2.3馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型分析利用10株地理來源差異較大的菌株從36對選擇性擴(kuò)增引物組合中，篩選出3對多態(tài)性高、穩(wěn)定性好的引物組合，對175株菌進(jìn)行了AFLP擴(kuò)增，共計擴(kuò)增出231條譜帶，多態(tài)性譜帶為100%，這與Martnez（2004）的研究結(jié)果相同。AFLP聚類分析結(jié)果表明，被測馬鈴薯早疫病菌之間存在較大的遺傳差異。在相似系數(shù)0.82時，被測菌

20、株可劃分為兩大分支，即和（圖2）。分支中共包含145株早疫病菌，其遺傳差異較分支小。在相似系數(shù)0.85時，分支又可劃分為A、B兩組，A組由108個菌株組成，B組共37個菌株。其中，A可分為、3個亞組，亞組含19個菌株，亞組含23個菌株，亞組含66個菌株；B組可分為和兩個亞組。分支共包含30株早疫病菌，與分支相比，其菌株間的遺傳差異大，也可以分為C和D兩個組。其中C組包含12株菌，D組包含18株菌。因此，AFLP分子標(biāo)記可用于揭示馬鈴薯早疫病菌群體的遺傳差異。圖1代森錳鋅對馬鈴薯早疫病菌的毒力Fig.1VirulenceofMancozebtoAlternariasolaniisolates.表

21、2馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢量Table2TestofsporulationquantityofAlternariasolanicollectedfrompotato采集地點(diǎn)Location菌株數(shù)目No.平均產(chǎn)孢量Averagesporulationquantity(mm2)產(chǎn)孢級別LevelofsporulationcapacityIIIIII數(shù)量No.百分比Percentage(%)數(shù)量No.百分比Percentage(%)數(shù)量No.百分比Percentage(%)河北圍場Weichang,Hebei2288001254.51045.5河北張北Zhangbei,Hebei2584001248.01

22、352.0黑龍江大興安嶺DaHingganLing,Heilongjiang556120.0480.000黑龍江齊齊哈爾Qiqihar,Heilongjiang537480.0120.000內(nèi)蒙古呼倫貝爾Hulunber,InnerMongolia550240.0360.000內(nèi)蒙古包頭Baotou,InnerMongolia556005100.000陜西榆林Yulin,Shaanxi56900360.0240.0云南昆明Kunming,Yunnan518480.0120.000合計Total77571114.34153.22532.52.4馬鈴薯早疫病菌基因型與表型的關(guān)系2.4.1基因型與地

23、理來源之間的關(guān)系：AFLP數(shù)據(jù)所構(gòu)建的聚類樹狀圖分為和兩大分支，分支共包括早疫病菌145株，其中河北省菌株141株，4株為外省對照菌株。而在分支共包含早疫病菌30株，其中河北省外對照菌株26株，河北省菌株僅4株。在分支A組中，共包含108株早疫病菌，其中101株菌采自河北省張家口市所屬各縣，占絕大多數(shù)（93.5%）。另7株分別為內(nèi)蒙古包頭達(dá)茂旗1株，內(nèi)蒙古呼倫貝爾扎蘭屯3株，河北保定淶源3株。而B組所包含37株菌均采自河北省，其中承德31株，占B組全部菌株的83.8%，張家口懷安3株，保定淶源3株。在分支A組的亞組所有19株菌中，其中17株采自張家口尚義，其他2株為張家口康保所屬。亞組23株菌

24、全部采自張家口張北。=3*GB3亞組共66株菌，其中59株為河北張家口所屬各縣菌株，占89.4%。分支B組37株菌全部采自河北省。B組的亞組所包含的23株菌，均采自承德市各縣，其中圍場21株，豐寧1株，隆化1株。亞組包含的14株菌，地理來源相對較為分散，其中主要為承德豐寧7株，其次保定淶源3株，張家口懷安3株，承德圍場1株。綜上所述，每個分支、分組和亞組都代表著某個區(qū)域范圍內(nèi)早疫病菌的優(yōu)勢基因型，如分支代表河北省早疫病菌的優(yōu)勢基因型；A組表示河北張家口早疫病菌優(yōu)勢基因型，亞組為張家口尚義早疫病菌優(yōu)勢基因型。故馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型與地理來源存在著密切的相關(guān)性。2.4.2基因型與產(chǎn)孢量的關(guān)

25、系：分支菌株產(chǎn)孢量明顯高于分支。分支共測定了51株早疫病菌的產(chǎn)孢量，產(chǎn)孢水平均為=2*ROMANII或=3*ROMANIII級，其數(shù)量分別為28株和23株，占總數(shù)的54.9%和45.1%。而分支26株被測菌株的產(chǎn)孢量差異比較大，I、II和III級均存在，其中I級11株，占總數(shù)42.3%；II和III級菌株數(shù)分別為13株和2株，分別占50.0%和7.7%。A組共測定了29株菌的產(chǎn)孢水平，產(chǎn)孢量高，產(chǎn)孢水平為II和III級，其數(shù)量分別為16株和13株，分別占55.2%和44.8%。B組共測定22株，產(chǎn)孢水平與A組相似，產(chǎn)孢水平均為II和III級，數(shù)量分別為12株和10株，分別占54.5%和45.5

26、%。因此，馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型和產(chǎn)孢量存在一定程度的相關(guān)性。2.4.3基因型與毒力的關(guān)系：有關(guān)代森錳鋅對早疫病菌的毒力，分支中EC50介于1.044.70g/mL之間，分支中EC50介于1.874.86g/mL之間，兩分支大多數(shù)菌株間EC50相互重疊。此外，代森錳鋅對、分支分組以及亞組的早疫病菌的毒力大小分布無一定順序分布規(guī)律。因此，馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型與代森錳鋅對其毒力之間不存相關(guān)性。3討論AFLP分子標(biāo)記可以揭示馬鈴薯早疫病菌豐富的遺傳多樣性。3對AFLP引物組合在被測175株早疫病菌中共擴(kuò)增出了231條譜帶，多態(tài)性譜帶比例為100%，可以作為早疫病菌菌株分型鑒定的指紋圖譜

27、。該研究揭示的早疫病菌遺傳多樣性與Weiretal.（1998）利用RPAD標(biāo)記技術(shù)對美國早疫病菌的遺傳多樣性相比要大得多；而與Martnezetal.（2004）利用AFLP標(biāo)記技術(shù)對古巴、巴西、美國等國家早疫病菌的遺傳多樣性研究結(jié)果一致。本研究中所揭示的早疫病菌的基因型豐富的多態(tài)性，與供試材料取樣相對廣泛以及采用先進(jìn)的毛細(xì)管熒光電泳檢測技術(shù)密切相關(guān)ADDINNE.Ref.05711B15-3D46-4616-A092-D9B91357E902（王輝和林炳承2002），也表明了熒光標(biāo)記的AFLP可很好地揭示病原菌群體的遺傳多樣性。物種的遺傳變異與其生存的地理生態(tài)環(huán)境之間的關(guān)系一直是物種群體遺

28、傳學(xué)演化普遍關(guān)注的焦點(diǎn)問題。一些研究認(rèn)為鏈格孢屬某些種的基因型與其地理來源之間存在一定的相關(guān)性ADDINNE.Ref.40EC1CF7-913B-48F5-B814-E11A0EE1DD99（Sharma&Tewari1998；Morrisetal.2000；Martnezetal.2004）。而本研究結(jié)果表明馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型與地理來源存在密切的相關(guān)性，在AFLP聚類分支圖中，每一層次分支都具有各自的優(yōu)勢群體，且與地理來源密切相關(guān)。例如：分支為河北省所屬的優(yōu)勢群體，在其內(nèi)部A組為張家口所屬的優(yōu)勢群體，而B組包括絕大多數(shù)承德市所屬的優(yōu)勢群體。在A組內(nèi)部的=1*GB3亞組以張家口尚義菌

29、株為優(yōu)勢群體，=2*GB3亞組以張家口張北菌株為優(yōu)勢群體。同樣，在分支C組中共包含12株早疫病菌，其中黑龍江省10株，占絕大多數(shù)。這一現(xiàn)象可能由于馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢量較少ADDINNE.Ref.E56F32D4-33F1-4D7B-A540-B4D62E5640A3（Fourtounietal.1998），孢子跨區(qū)域長距離傳播的能力較低ADDINNE.Ref.46EEFEF8-240C-4F45-B7F2-812CAC6BB9CF（Martnezetal.2004），早疫病菌在當(dāng)?shù)亟?jīng)過長期的有絲分裂，已定殖形成特定的優(yōu)勢群體，各區(qū)域之間菌株的基因交流較少，從而造成了各區(qū)域早疫病菌間存在明顯不同

30、的基因型。而近年來隨著種薯調(diào)運(yùn)等人為因素的干擾，造成了各地菌株的不規(guī)律人為遷移ADDINNE.Ref.AADC229C-28E5-4F0C-94B2-B3E4311A5E77（Aradhyaetal.2001），因而，不同地區(qū)出現(xiàn)了一定程度的多樣性。但由于地區(qū)內(nèi)部早疫病菌的群體優(yōu)勢明顯，其優(yōu)勢基因型仍占主導(dǎo)地位，類似情況也曾在A.alternata的報道中出現(xiàn)ADDINNE.Ref.8A63A601-5A17-43DD-9634-866ED7157580（Weiretal.1998；Guoetal.2004）。有研究表明，病原菌產(chǎn)孢量與病害的流行密切相關(guān)ADDINNE.Ref.3F3629B5

31、-A761-489B-AC39-7A329D40A8C7（Johnson&Taylor1976；Xu&Ridout1998）。在產(chǎn)孢量實(shí)驗(yàn)中，馬鈴薯早疫病菌產(chǎn)孢量不高，這與前人的研究結(jié)果ADDINNE.Ref.C5DC5B4C-14E4-4419-BF15-55E33BF7C8F5（Charlton1953；Fourtounietal.1998）和發(fā)病葉片直接在顯微鏡下觀察所得到的結(jié)果是一致的。馬鈴薯早疫病菌的產(chǎn)孢量（5085分生孢子/mm2）遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于晚疫病（2464,346孢子囊/mm2）等其他馬鈴薯真菌病害病原菌的產(chǎn)孢量（Guoetal.2002），使其很難在短時間內(nèi)大規(guī)模爆發(fā)和流行。供試

32、河北省圍場和張北兩縣早疫病菌產(chǎn)孢量大于對照省份菌株的產(chǎn)孢量，這一結(jié)果也解釋了近年來河北省圍場、張北等部分地區(qū)早疫病發(fā)生和流行日趨嚴(yán)重的原因。所有供試馬鈴薯早疫病菌對代森錳鋅均表現(xiàn)敏感，這主要是由于代森錳鋅作用位點(diǎn)多ADDINNE.Ref.DB839091-A4C8-49DE-8FF1-45D7EEBCB15E（Staub&Sozzi1984）、抗性風(fēng)險低、防效高等特點(diǎn)ADDINNE.Ref.F74550CC-4580-4999-AC9C-6C9C11AC1164（Russell1995）。同時，本研究結(jié)果與Shtienberg&Blachinsky（1996）和梁偉伶等（2009）報道的代森錳

33、鋅對早疫病菌毒力的研究結(jié)果一致。但不同菌株之間對代森錳鋅敏感性水平表現(xiàn)出一定的差異，這種差異可能是由于菌株個體之間遺傳差異和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)誤差而造成的ADDINNE.Ref.43C20B66-9498-4934-81B0-B83CA8E03795（Kumaretal.2008）。病原菌對代森錳鋅的敏感性與AFLP基因型無相關(guān)性，與Adachietal.（1996）報道的鏈格孢對殺菌劑抗性與RAPD基因型無關(guān)的結(jié)果一致，主要是因?yàn)镽APD和AFLP基因型揭示了病原菌整個基因組水平的遺傳變異，而病原菌對代森錳鋅的敏感性差異僅僅反映了極少特定基因的差異，因此，病原菌的基因型與其對藥劑的毒力無相關(guān)性ADDI

34、NNE.Ref.795CAF53-EE75-4E8F-9E1E-DF1C4123A64D（Kolmeretal.1995；Vosetal.1995）。本文研究結(jié)果表明，河北省馬鈴薯早疫病菌AFLP基因型具有明顯的分化現(xiàn)象，其基因型分化與地理來源存在著密切的相關(guān)性，而與菌株產(chǎn)孢量存在一定的相關(guān)性，但與代森錳鋅對菌株的毒力無相關(guān)性。REFERENCESAdachiY,WatanabeH,TsugeT,1996.RelationshipsbetweengeneticpolymorphismsandfungicideresistancewithinAlternariaalternata.Phytopa

35、thology,86:1248-1254AradhyaMK,ChanHM,ParfittDE,2001.Geneticvariabilityinthepistachiolateblightfungus,Alternariaalternata.MycologicalResearch,105(3):300-306CharltonKM,1953.ThesporulationofAlternariasolaniinculture.TransactionsoftheBritishMycologicalSociety,36(4):349-355EllisJB,MartinGB,1882.Newspecie

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