微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)c道病毒及檢驗(yàn)課件

1、腸道病毒屬小核糖核酸病毒科有72型人類腸道病毒：脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩奇病毒埃可病毒新型腸道病毒（甲型肝炎病毒為72型）腸道病毒共同特征球形，20面體立體對(duì)稱，無不包膜單股正鏈RNA細(xì)胞中增殖，引起細(xì)胞病變對(duì)脂溶劑敏感，耐酸經(jīng)糞口途徑傳播臨床表現(xiàn)多樣化小核糖核酸病毒電鏡圖腸道病毒微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集:糞便、肛拭、咽拭、 腦脊液檢驗(yàn)程序：病毒鑒定： 中和試驗(yàn) 分子生物學(xué)方法：檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中病毒基因組血清學(xué)試驗(yàn)：取雙份血清進(jìn)行中和試驗(yàn)檢測抗體脊髓灰質(zhì)炎病毒是引起脊髓灰質(zhì)炎（小兒麻痹癥）的病原體生物學(xué)形狀形態(tài)結(jié)構(gòu)：球形，無包膜，單股正鏈RNA，有四種核衣殼蛋白培養(yǎng)特性：采用細(xì)胞培養(yǎng)，引起典型的細(xì)胞病變

2、分型：采用中和試驗(yàn)將Polio病毒分為、型，各型間無交叉反應(yīng)抵抗力：在外界環(huán)境中抵抗力較強(qiáng)，在酸性環(huán)境中較穩(wěn)定，對(duì)濕熱、紫外線較敏感致病性與免疫性傳染源 ：病人、帶毒者傳染途徑：糞口途徑致病機(jī)制：臨床特征 90的感染為隱性感染 12為非麻痹性脊髓灰質(zhì)炎或無菌性腦膜炎 僅約0.1%出現(xiàn)永久性弛緩性肢體麻痹 極少數(shù)發(fā)展為延髓麻痹病后對(duì)同型Polio.v有牢固免疫力微生物學(xué)檢查糞便標(biāo)本細(xì)胞培養(yǎng)中和試驗(yàn)血清標(biāo)本中和試驗(yàn)病毒培養(yǎng)血清學(xué)診斷基因檢測核酸雜交技術(shù)聚合酶聯(lián)反應(yīng)（PCR ）防治原則接種疫苗 小兒麻痹糖丸（口服） 滅活疫苗（注射）柯薩奇病毒和?？刹《究滤_奇病毒分A、B 兩組，共29個(gè)血清型?？刹《?/p>

3、有31個(gè)血清型消化道感染，很少引起腸道癥狀臨床表現(xiàn)多樣血清學(xué)檢查核核酸檢測有助于病原學(xué)診斷尚無疫苗進(jìn)行預(yù)防柯薩奇病毒與埃可病毒所致疾病疾病柯薩奇病毒?？刹《緹o菌性腦膜炎麻痹疾病皰疹性咽峽炎普通感冒流行性肌痛手足口病報(bào)道不一心包炎新生兒心肌炎不明原因發(fā)熱皮疹嬰幼兒腹瀉輪狀病毒屬輪狀病毒科球形；雙股RNA；雙層衣殼，有放射狀突起，呈輪狀經(jīng)糞口途徑傳播，引起腹瀉以糞便為標(biāo)本，查糞便中的病毒顆粒或病毒抗原疫苗尚在研制中輪狀病毒分組及其致病性A組 引起嬰幼兒腹瀉B組 感染人-成人C組 感染豬，偶爾也感染人 D組 感染鳥類 E組 感染豬輪狀病毒電鏡圖減毒活疫苗與滅活疫苗的比較項(xiàng)目活疫苗死疫苗接種方法口服糖

4、丸肌肉注射抗體產(chǎn)生血清抗體、分泌型抗體血清抗體細(xì)胞免疫有無間接免疫通過接種者糞便排毒無穩(wěn)定性差，不易保存易保存副作用極少數(shù)引起疫苗相關(guān)脊灰無免疫效果更好好致病機(jī)制Polio病毒糞口途徑小腸粘膜、淋巴結(jié)入血 第一次病毒血癥 單核吞噬細(xì)胞 第二次病毒血癥 脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)原小兒麻痹癥脊髓灰質(zhì)炎病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原體已知的肝炎病毒： 甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型肝炎病毒甲型肝炎病毒是引起甲型肝炎的病原體生物學(xué)形狀屬腸道病毒72型形態(tài)：呈球形結(jié)構(gòu)：直徑2732nm,單股正鏈RNA，無包膜動(dòng)物模型：黑猩猩對(duì)HAV易感 細(xì)胞培養(yǎng)：原代獼猴肝細(xì)胞、猴胚腎細(xì)胞，一般不產(chǎn)生細(xì)胞病變抗原型別

5、單一抵抗力：抵抗力強(qiáng)，對(duì)乙醚 、酸、熱等較穩(wěn)定致病性與免疫性傳染源：病人傳染方式：糞口途徑致病機(jī)制： 在肝細(xì)胞內(nèi)增殖，不直接造成肝細(xì)胞損傷， 免疫病理作用導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷免疫性： 刺激機(jī)體產(chǎn)生抗HAV IgG和IgM 抗HAVIgG對(duì)再感染具有免疫力微生物學(xué)檢查免疫電鏡檢測病毒顆粒免疫學(xué)方法檢測病毒抗原檢測抗HAVIgM是確診甲型肝炎的依據(jù) 方法：ELISA法和放射免疫測定PCR法：檢測病毒核酸檢測抗HAVIgG主要用于流行病學(xué)調(diào)查防治原則特異性預(yù)防：接種甲型肝炎病毒減毒活疫苗緊急預(yù)防：肌肉注射丙種球蛋白一般性預(yù)防：加強(qiáng)飲水和食品的衛(wèi)生監(jiān)督管理乙型肝炎病毒是引起乙型肝炎的病原體乙型肝炎易發(fā)展為慢

6、性乙肝乙肝病毒在世界范圍內(nèi)傳播乙肝病毒攜帶者達(dá)10以上生物學(xué)形狀形態(tài)與結(jié)構(gòu)大球形顆粒:又稱Dane顆粒，是完整的HBV小球形顆粒:是病毒組裝后過剩的衣殼蛋白管形顆粒：由小球形顆粒串連而成 乙肝病毒的基因短鏈：為正鏈，長度是長鏈的50100長鏈：為負(fù)鏈，含HBV全部遺傳信息 S區(qū)：編碼HBsAg和前S1抗原和前S2抗原 C區(qū)：編碼HBcAg和HBeAg P區(qū)：編碼DNA 多聚酶 X區(qū)：編碼HBxAg(可能與肝癌發(fā)生有關(guān))乙肝病毒的復(fù)制方式吸附、穿入肝細(xì)胞脫殼轉(zhuǎn)譯外衣殼蛋白轉(zhuǎn)譯內(nèi)衣殼蛋白前基因組復(fù)制子代核酸組裝釋放HBV的抗原組成 HBsAg:以三種不同形式存在于患者血清中HBsAg亞型的分布有明

7、顯地區(qū)差異,并與種族有關(guān)血清HBsAg是感染HBV的重要標(biāo)志HBsAg刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗-HBs是中和抗體,對(duì)機(jī)體有保護(hù)作用關(guān)于前S1和前S2抗原 HBcAg存在于Dane顆粒中不易在血液中檢出可在感染的肝細(xì)胞表面存在刺激機(jī)體產(chǎn)生抗-HBc（IgG、IgM）血清抗-HBcIgM的檢出，表明病毒在肝細(xì)胞中復(fù)制 HBeAg存在于Dane顆粒中游離存在于血液中是病毒復(fù)制及強(qiáng)傳染性的指標(biāo)產(chǎn)生抗HBe，是預(yù)后良好的征象突變株可不產(chǎn)生HBeAgHBV其他生物學(xué)性狀培養(yǎng): 黑猩猩是HBV最敏感的動(dòng)物模型 細(xì)胞培養(yǎng)已獲成功抵抗力:強(qiáng) 能耐受低溫、紫外線、干燥和一般消毒劑10010分鐘、高壓蒸汽滅菌、0.5過氧

8、乙酸等能使HBV滅活傳染源與傳播途徑傳染源：乙肝病人、無癥狀病毒攜帶者傳播途徑：血液、血制品等途徑傳播母嬰垂直傳播臨床表現(xiàn)： 無癥狀攜帶者 急性乙肝 慢性乙肝暴發(fā)性肝炎 肝外表現(xiàn)：發(fā)熱、皮疹、血管炎等致病機(jī)制細(xì)胞免疫介導(dǎo)的免疫損傷免疫復(fù)合物性的免疫損傷：肝外損傷自身免疫反應(yīng)的免疫損傷病毒變異：逃逸免疫免疫性抗-HBs：一般于感染后45月陽轉(zhuǎn)，持續(xù)6個(gè)月或數(shù)年，是保護(hù)性抗體抗-HBc：一般于感染后35周陽轉(zhuǎn)，無保護(hù)作用，IgM可作為急性一干的診斷指標(biāo)，IgG是HBV既往感染的指標(biāo)抗-HBe：一般在HBeAg消失時(shí)出現(xiàn)，是病情開始恢復(fù)的征兆HBV誘導(dǎo)免疫應(yīng)答對(duì)機(jī)體的雙重作用免疫保護(hù)作用 抗HBS和

9、抗前S對(duì)病毒的中和作用 CTL對(duì)細(xì)胞內(nèi)病毒的清除作用免疫損傷作用 肝細(xì)胞損傷 肝外損傷機(jī)體免疫狀態(tài)與HBV感染的轉(zhuǎn)歸免疫功能正常隱性感染或急性乙肝，病毒被清除免疫低下慢性乙肝免疫過強(qiáng)暴發(fā)性肝炎免疫耐受HBV無癥狀攜帶HBV與原發(fā)性肝癌流行病學(xué)方面動(dòng)物模型病毒分子結(jié)構(gòu)微生物學(xué)檢查HBV抗原抗體系統(tǒng)的檢測HBV五項(xiàng)指標(biāo) HBsAg、抗HBs HBeAg、抗HBe 抗HBcHBV抗原抗體檢測的應(yīng)用乙型肝炎的診斷判斷傳染性判斷預(yù)后篩選獻(xiàn)血員檢測疫苗接種效果流行病學(xué)調(diào)查HBV抗原抗體檢測結(jié)果的臨床分析HBsAgHBeAg抗-HBs抗-HBe抗-HBc結(jié)果分析 HB V感染或無癥狀攜帶 急慢性乙肝或無癥狀

10、攜帶 急慢性乙肝（大三陽） 趨于恢復(fù)（小三陽） 既往感染恢復(fù)期 既往感染或接種過疫苗防治原則控制傳染源，切斷傳播途徑人工自動(dòng)免疫： 疫苗（血源性、基因工程)人工被動(dòng)免疫： 高效價(jià)人血清球蛋白（HBIg）丙型肝炎病毒（HCV）球形，有包膜，屬RNA病毒傳染源：病人、病毒攜帶者傳播途徑：輸血、注射、性接觸等引起丙型肝炎比乙型肝炎更易轉(zhuǎn)為慢性病后免疫力不牢固ELISA法檢測抗HCV抗體丁型肝炎病毒（HDV）屬缺陷病毒，由HBsAg構(gòu)成其外殼經(jīng)輸血等途徑傳播只感染HBsAg陽性的人與HBV協(xié)同或同時(shí)感染戊型肝炎病毒（HEV）球形，無包膜，屬RNA病毒傳染源：病人傳播途徑：糞口途徑病情較重，孕婦感染死亡率高乙肝病毒感染經(jīng)過與免疫反應(yīng)關(guān)系（隱性感染）HBsAg抗HBs抗HBc(IgG)抗HBeHBeAg0 3月 5月 8月 1年 5年乙肝病毒感染經(jīng)過與免疫反應(yīng)關(guān)系（慢性持續(xù)性肝炎）HBsAg抗HBc(IgG)抗HBe0 3月 1年 10年 20年 30年HBe