還原糖蛋白質(zhì)脂肪鑒定

1、關(guān)于還原糖蛋白質(zhì)脂肪的鑒定第一張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 1.實(shí)驗(yàn)原理第二張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月 斐林試劑蘇丹橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹 雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)原理第三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月方法步驟： 1實(shí)驗(yàn)材料、儀器和試劑的選擇 2設(shè)計(jì)記錄表格，記錄預(yù)測結(jié)果 3檢測的方法步驟 (1)還原糖的檢測和觀察; (2)脂肪的檢測和觀察; (3)蛋白質(zhì)的檢測和觀察;第四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第五張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作

2、于2022年6月第六張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第七張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月選材：含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾)，蘋果、梨最好 。 實(shí)驗(yàn)流程(步驟)1.可溶性還原糖 制備組織樣液：制漿：去皮、切塊、研磨，過濾：（用單層紗布）取液：（mL）顯色反應(yīng) mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現(xiàn)象： 呈現(xiàn)藍(lán)色變成磚紅色(用前混勻)5065.C水浴加熱2min第八張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月還原糖的檢測和觀察：第九張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月還原糖的檢測結(jié)果第十張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十一張，PPT共

3、二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十二張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月2.脂肪的鑒定 取材：花生種子（浸泡h），去皮，將子葉削成薄片 制片：選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加蘇丹(或蘇丹) 染液2 3滴，染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液12滴，洗去浮色(多余的蘇丹 )吸去余液，滴1-2滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片顯微觀察：先在低倍鏡下找到已著色的薄片，后用高倍鏡觀察現(xiàn)象：有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第十三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月脂肪的檢測結(jié)果第十四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月第十五張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6

4、月3.蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備組織樣液：黃豆組織樣液（或雞蛋蛋清稀釋液）黃豆浸泡 去皮切片研磨過濾濾液 顯色反應(yīng)mL組織樣液雙縮脲試劑mL現(xiàn)象：無色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)第十六張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第十七張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月蛋白質(zhì)的鑒定-雙縮脲試劑雞蛋清溶液 NaOH 溶液滴加CuSO2 溶液, 每次滴加均需搖勻結(jié)果顯示: 紫色第十八張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵與注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于實(shí)驗(yàn)材料的選擇： 在做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中，最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組

5、織(或器官)，而且組織的顏色較淺，最好是白色或近于白色的植物組織，這樣可以避免材料自身顏色對實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋。經(jīng)實(shí)驗(yàn)比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。 在做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子，且徒手切片要成功，要求實(shí)驗(yàn)技能較高，不妨改成刮取花生子葉泥制作臨時裝片，易做，效果又好。 在做糖和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)時，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋，鑒定之前需要留出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色做比較，這樣可增強(qiáng)說服力。 第十九張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實(shí)驗(yàn)時，為什

6、么要留出一部分樣液？作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加34滴而不能過量？ 過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍(lán)色，而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久？ 時間太長，Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。深化第二十張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月2.注意事項(xiàng)：A.可溶性還原糖 (1)斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO溶液)分別配制、儲存，使用時，再臨時配制，將45滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。 (2) 鑒定可溶性還

7、原糖，加熱試管時，應(yīng)該用試管夾夾住試管上部，放入盛開水的大燒杯加熱；注意試管底部不接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者，以免試管內(nèi)溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰，可以提起試管夾，使試管與沸水接觸面減少，以免溶液溢出。 第二十一張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月B.脂肪的鑒定 (1) 在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中，若用花生種子作實(shí)驗(yàn)材料，必須提前浸泡34小時，浸泡時間短了，不容易切片，浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形，切片要盡可能的薄。 (2) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色，染色和洗浮色時間不宜過長（否則酒精將脂肪溶解影響實(shí)驗(yàn)效果），觀察時找最薄處最好

8、只有12層細(xì)胞。第二十二張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月C.蛋白質(zhì)的鑒定 (1)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，若用蛋白質(zhì)作實(shí)驗(yàn)材料，必須稀釋，如果稀釋不夠，與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不徹底，且試管不易洗刷干凈。 (2)雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先雙縮脲加試劑A(0.1g/mL的NaOH溶液)，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，再加試劑B(0.01g/mL的CuSO溶液)。第二十三張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同？新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。先加入Na0H1mL，然后再加CuS044滴，搖勻。(不能過量)水浴加熱不需要第二十四張，PPT共二十六頁，創(chuàng)作于2022年6月5、實(shí)驗(yàn)的材料的選擇和處理有什么要求？材料的選擇材料的處理還原性糖的鑒定脂