液相芯片技術(shù)的原理與應用進展

1、液相芯片技術(shù)的原理與應用進展【摘要】液相芯片是20世紀90年代中期發(fā)展起來的被喻為后基因組時代的新型芯片技術(shù)，具有高通量、靈活、快速、準確、重復性好、操作簡便等眾多優(yōu)點，可用作蛋白質(zhì)和核酸等生物分子的高通量檢測平臺。本文簡要介紹其原理、優(yōu)點，并對該技術(shù)在基礎(chǔ)研究、臨床診斷等方面的應用進展作一綜述?！娟P(guān)鍵詞】液相芯片；Luminex；xMAP技術(shù)【Abstract】Suspensionarray,anovelandpowerfulpostgenomiceratool,wasfirstdevelopedin1997basedonLuminexthroughput,flexibility,rapid

2、nessandmultiplexingability,suspensionarrayprovidesanopenplatformforassaysofprotein,andreviewedapplicationsofthisnewarraytechnologyinbasicresearchandclinicaldiagnosis.【Keywords】suspensionarray;Luminex;xMAPtechnology液相芯片，也稱為微球體懸浮芯片（suspensionarray，liquidchip），是基于xMAP（flexibleMultiAnalyteProfiling）技術(shù)的新

3、型生物芯片技術(shù)平臺，它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原抗體、酶底物、配體受體的結(jié)合反應及核酸雜交反應，通過紅、綠兩束激光分別檢測微球編碼和報告熒光來達到定性和定量的目的，一個反應孔內(nèi)可以完成多達100種不同的生物學反應，是繼基因芯片、蛋白芯片之后的新一代高通量分子檢測技術(shù)平臺。迄今為止十年時間，全球已有數(shù)百套基于xMAP技術(shù)的檢測平臺用于免疫學、蛋白質(zhì)、核酸檢測、基因研究等領(lǐng)域，該技術(shù)已成為一種新的蛋白質(zhì)組學和基因組學研究工具，也是最早通過美國食品與藥物管理局（FDA）認證的可用于臨床診斷的生物芯片技術(shù)。1液相芯片技術(shù)的原理液相芯片體系由許多大小均一的圓形微球（直徑m）為主要基質(zhì)構(gòu)成，每種微球

4、上固定有不同的探針分子，將這些微球懸浮于一個液相體系中，就構(gòu)成了一個液相芯片系統(tǒng)，利用這個系統(tǒng)可以對同一個樣品中的多種不同分子同時進行檢測，這種被稱之為xMAP的檢測技術(shù)是1997年由美國Luminex公司開發(fā)出來的。在液相系統(tǒng)中，為了區(qū)分不同的探針，每一種固定有探針的微球都有一個獨特的色彩編號，或稱熒光編碼。在微球制造過程中摻入了紅色和橙色兩種熒光染料（這兩種染料各有10種不同區(qū)分），從而把微球分為100種不同的顏色，形成一個具有獨特光譜地址的含有100種不同微球的陣列。不同顏色微球在分類激光激發(fā)下產(chǎn)生的熒光互不相同，這種分類熒光是識別不同微球的唯一途徑。利用這100種微球，可以分別標記上100種不同的探針分子。檢測時先后加入樣品和報告分子與標記微球反應，樣品中的目的分子（待檢測的抗原或抗體、生物素標記的靶核酸片段、酶等）能夠與探針和報告分子特異性結(jié)合，使交聯(lián)探針的微球攜帶上報告分子藻紅蛋白，隨后利用儀器（如Luminex100）對微球進行檢測和結(jié)果分析。Luminex1