體液葡萄糖檢驗和測定

1、體液葡萄糖檢驗和測定1本章內容概要：第二節(jié) 體液葡萄糖測定第一節(jié) 概述2本章教學要求：1、掌握血糖、糖化血紅蛋白、糖化血清蛋白測定的推薦方法及臨床意義，口服葡萄糖耐量試驗的程序和臨床應用。2、熟悉糖尿病的實驗室檢測項目和診斷程序 3、了解血糖濃度的調節(jié)機制、糖代謝紊亂。31、氧化供能：分解代謝提供人體75%能量； 2、人體組成成分之一：糖占人體干重的2%; 合成糖原儲存在肝臟與肌肉中； 形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受體等）、糖脂（神經組織和細胞膜重要組分）； 3、轉變：其它糖及糖衍生物（核糖、脫氧核糖、氨基多糖）；非糖物質（脂肪、氨基酸和核酸）。 糖的生理功能（能量資源和結構材料）糖代謝紊

2、亂 一系列代謝變化4體液糖的測定項目：血糖濃度測定口服糖耐量試驗 糖化血紅蛋白試驗糖化血清白蛋白測定胰島素測定C-肽測定等5第一節(jié) 概 述血糖及正常血糖水平:血糖：指血液中的葡萄糖.正常血糖濃度： 空腹波動在（70110mg/dl） 餐后2h內應（140mg/dl）。 6 7（一） 血糖的來源、去路和調節(jié)一、血糖的來源、去路和調節(jié)6.11 8二、血糖濃度的調節(jié)1、肝臟調節(jié)作用:雙向調控功能：從器官水平通過神經-激素的作用，使肝細胞內各種糖代謝的酶活性改變。升糖調節(jié)1：具有活性很高的葡萄糖-6-磷酸酶，可促進肝糖原水解， 補充和升高血糖。升糖調節(jié)2：肝臟具有活性高且易誘導的糖異生酶類，禁食或饑餓

3、時能將非糖物質轉化為糖（占55-90%）。降糖調節(jié)：促進組織攝取葡萄糖，促進肝糖原和脂肪合成、和抑制肝糖原分解、抑制糖異生。9、激素調節(jié)作用降低血糖濃度的激素 胰島素胰島素樣生長因子升高血糖濃度的激素胰高血糖素腎上腺素生長激素皮質醇 甲狀腺激素10胰島素 胰島素結構 胰島素作用于靶細胞的機制 影響胰島素生物活性效應的因素 胰島素功能11 胰島細胞（核糖體） 前胰島素原（100個氨基酸殘基） 胰島素原（86個氨基酸） 切掉4個氨基酸殘基胰島素（51個氨基酸） C肽（31個氨基酸） 有活性 無活性胰島素結構:51個氨基酸殘基的蛋白類激素 等摩爾12胰島素作用于靶細胞的機制13胰島素的生物活性效應取

4、決于：1、靶細胞上胰島素受體的絕對或相對數(shù)量2、到達靶細胞的胰島素濃度3、胰島素與靶細胞受體的親和力4、胰島素與受體結合后的細胞內改變情況胰島素降血糖機理:1、加快葡萄糖轉運速率2、促進糖原合成3、加速糖氧化分解4、促進糖轉化為脂肪5、抑制糖異生14胰島素樣生長因子IGF 與胰島素結構類似 與特異性蛋白質結合 活性低 檢測機體營養(yǎng)狀況15胰高血糖素 與胰島素作用相反 促進肝糖原的分解和糖異生 抑制葡萄糖分解 與腎上腺素協(xié)同作用16、神經調節(jié)作用部位 1、下丘腦 2、自主神經（交感和副交感神經） 方式： 1、直接作用于肝臟； 2、調節(jié)激素的分泌而影響血糖。內臟神經迷走神經17糖代謝紊亂： 高血糖

5、癥與糖尿病 低血糖癥 酮癥 半乳糖血癥二、 糖代謝紊亂18(一)高血糖癥與糖尿病、高血糖癥:空腹血漿血糖（FPG） mmol/L（130mg/dl）生理性：包括飲食性（高糖飲食）或情感性（情緒緊張，腎上腺分泌增加）病理性：見于糖尿病；內分泌腺（甲狀腺、腎上腺皮質或髓質、胰島細胞功能亢進）；顱內壓升高刺激血糖中樞；嘔吐、腹瀉、高熱等引起的脫水。尿糖：若血糖濃度高于腎糖閾值，出現(xiàn)尿糖。19、糖尿?。╠iabetes mellitus,DM） 定義：是一種慢性、復雜的代謝紊亂性疾病，系胰島素相對或絕對不足，或利用缺陷引起。臨床特征：血糖持續(xù)升高，甚至出現(xiàn)糖尿。長期患有糖尿病常有脂類、蛋白質代謝紊亂以

6、及眼、腎的微血管病變及神經病變等并發(fā)癥。嚴重者還可出現(xiàn)水、電解質紊亂及酸堿平衡紊亂，表現(xiàn)為高脂血癥，酮癥酸中毒等，重者可致死亡。2021發(fā)病機制：1、胰腺細胞的自身免疫性損傷2、機體對胰島素的作用產生抵抗DM的實驗室檢測項目： 血糖測定、尿糖測定、OGTT、血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白測定、胰島素與胰島素抗體測定、肽測定、胰島素釋放試驗以及相關代謝產物測定。 22糖尿病的診斷標準：，不主張作第三次OGTT試驗。23（二）低血糖癥 1、概念：低血糖癥 是指血糖濃度低于（葡萄糖氧化酶法）時臨床出現(xiàn)一系列因血糖濃度過低引起的癥候群。發(fā)病原因：來源 去路激素效應：升血糖激素缺乏，降血糖激素過剩。肝病

7、變：肝功嚴重損傷致肝糖原減少和糖異生嚴重障礙。長期饑餓或劇烈運動時代謝率增加，血糖消耗過多。24分類：低血糖癥空腹性低血糖刺激性低血糖反應性低血糖癥外源性低血糖癥酒精性低血糖癥半乳糖性低血糖癥餐后性低血糖癥功能性低血糖癥型糖尿病或糖耐量受損伴有的低血糖癥營養(yǎng)性低血糖25（三）酮癥1、概念：酮體：乙酰乙酸、-羥丁酸及丙酮三者統(tǒng)稱為酮體20%78%2%酮血癥：酮體形成過多引起血中含量增高，稱為酮血癥。酮體形成過多的原因糖尿病：糖攝取不足：脂肪動員糖原貯積?。褐緞訂T堿中毒：代償262、酮體的生成：糖代謝障礙脂肪酸分解3、酮體的測定及臨床意義：（不能同時檢測酮體三種成分）Gerhardts 氧化鐵試

8、驗乙酰乙酸硝普納反應丙酮測定臨床意義：1、如有酮體存在，需確定酮酸中毒狀態(tài) 2、酮血癥的診斷對指導胰島素治療最有價值。27（四）半乳糖血癥1、概念： 半乳糖血癥是機體不能轉化利用半乳糖及其中間代謝產物的一種常染色體隱性遺傳病，主要特征為血和尿中半乳糖增高。2、生化缺陷：酶的缺陷半乳糖半乳糖-1-磷酸葡萄糖-1-磷酸UDPGUDP-半乳糖葡萄糖-6-磷酸半乳糖激酶半乳糖-1-磷酸尿苷轉移酶 （最常見）UDP-半乳糖-4-差向酶臨床表現(xiàn)：酶缺乏導致半乳糖和半乳糖-1-磷酸沉積在肝臟、腎腦、眼晶狀體和紅細胞中，引起相應的病變。代謝過程：28第二節(jié) 體液葡萄糖測定一、血糖測定測定方法無機化學法有機化學

9、法酶法29（一）無機化學法：Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的還原性（二）有機化學法：鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等Cu2+OH-Cu+ Glu磷鉬酸顯色鄰甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏堿 藍綠色化合物縮合脫水分子重排特異性差干擾因素多（三）酶法（1）己糖激酶法（HK）（2）葡萄糖氧化酶法（GOD法）30 葡萄糖ATP葡萄糖-磷酸ADP 葡萄糖-6-磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖內酯+NADPH NADPH在340nm有吸收峰，其吸光度增加與標本中的葡萄糖濃度成正比。原理：評價：本法特異性高，靈敏度高，干擾因素少，適用于自動化分析，為葡萄糖測定的參考方法，但是試劑較貴。

10、、己糖激酶法（法）31 操作簡單，特異性較高，是血糖測定的首選方法但溶血、 GSH、Vc、膽紅素，GSH可引起測定結果負偏差。2、葡萄糖氧化酶法(GOD)原理：葡萄糖O2+H2O GOD 葡萄糖酸內酯2O222O2 + 4-氨基安替比林+酚 POD 紅色醌類化合物 + 2O +O2評價32二、血糖測定的臨床意義（一） 生理性高血糖 見于情緒激動時交感神經興奮促使腎上腺素等分泌增加，也可見于 一次性食入大量糖。（二） 病理性高血糖1. 糖尿病血糖測定是糖尿病最簡單的篩查試驗糖尿病治療效果評價血糖水平監(jiān)控有利于糖尿病患者調整飲食攝入量和胰島素注射量，對降低其長期并發(fā)癥有積極作用。2. 內分泌腺功能

11、障礙 甲狀腺功能、腎上腺皮質及髓質功能亢進等引起的升高血糖的激素分泌過多出現(xiàn)高血糖。3. 顱內壓增高:4. 脫水引起的高血糖嘔吐、腹瀉和高熱等也可使血糖輕度增高。33 葡萄糖耐量試驗 概念 適應證 操作方法 葡萄糖耐量曲線 臨床意義第三節(jié)糖耐量試驗34一、糖耐量和葡萄糖耐量試驗（一）糖耐量正常人由于體內有一套完善的調節(jié)血糖濃度的機制，即使一次攝入大量的葡萄糖，血糖濃度也僅暫時升高，不出現(xiàn)糖尿，且于2h內恢復到正常血糖水平，此即為耐糖現(xiàn)象。若調節(jié)功能失調，口服或靜脈注射一定量的葡萄糖后，血糖急劇升高，在一定時限內不能恢復到原有水平，此種現(xiàn)象稱為糖耐量降低。反之給予大量葡萄糖后，血糖升高不明顯，或

12、緩慢地輕度上升，稱糖耐量增加。 35口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）靜脈葡萄糖耐量試（IGTT）（二）葡萄糖耐量試驗葡萄糖耐量試驗是指口服或注射一定量葡萄糖后，每間隔一定時間測定血糖水平進行分析。臨床常用OGTT，靜脈葡萄糖耐量試驗是測定糖尿病患者胰島素分泌的反應性和能力的試驗，但不適用于臨床常規(guī)診斷。 361、空腹血糖水平在臨界值（67mmol/L)而又疑為糖尿病患者；2、空腹或餐后血糖濃度正常，但有發(fā)展為糖尿病可能的人群；3、以前糖耐量異常的危險人群；4、妊娠性糖尿病的診斷；5、臨床上出現(xiàn)腎病、神經病變和視網(wǎng)膜病而又無法做出合理解釋者；6、作為流行病學研究的手段。OGTT試驗適應證：二、口服

13、葡萄糖耐量試驗 37 試驗前三天，受試者每日食物中糖含量不應低于150g，且維持正常活動影響試驗的藥物應在三天前停用，受試前應空腹1016h. 坐位取血后5分鐘內飲入250ml含75g無水葡萄糖的糖水，妊娠婦女用量為100g，兒童按體重給予，不超75g。糖后每隔30分鐘取血1次，共4次。必要時可延長時間，可長達服糖后小時。于采血同時，每隔1小時留取尿液作尿糖試驗。整個過程不可吸煙、和咖啡、喝茶或進食。OGGT方法：H標準化曲線繪制：一般應有5次測定結果。以測定血糖的時間為橫坐標（空腹時為0h），血糖濃度為縱坐標，繪制曲線。 38參考范圍：空腹血糖；服糖后3060分鐘血糖升高達峰值，一般10mm

14、ol；服糖后小時內恢復至空腹血糖水平。同時測定上述各時間的尿糖均為陰性。臨床意義：糖尿病性糖耐量糖耐量受損空腹血糖濃度，服糖后3060min血糖急劇升高，峰值超過10mmol/L，并出現(xiàn)尿糖；隨后血糖濃度恢復緩慢，2 h后仍高于空腹水平。空腹血糖濃度，但2h血糖7.8 mmol/L，為糖耐量減退（IGT）；空腹血糖濃度6.1 mmol/L，但，2h血糖為空服血糖損害（IFG）。 39三、妊娠期糖尿病診斷方法： 在孕2428周內，口服50g葡萄糖后，測定1小時血糖濃度,若在以上者，則提示妊娠性糖尿病的可能性，應作OGTT：測定空腹血糖濃度，糖負荷量100g，然后每小時檢測一次血糖濃度，連續(xù)3小時

15、。診斷標準： 空腹、1h10.5 mmol/L、2h9.2 mmol/L、3h8.0 mmol/L，2個結果超過以上檢測值，方可診斷為妊娠性糖尿病。40四、糖尿病診斷程序41 血清糖化血紅蛋白（Hb)的檢測*臨床意義：GHb可反應測定前較長時間（68周）的血糖水平 1. 在糖尿病門診, 常用GHb評價糖尿病患者血糖控制水平，當糖尿病控制不佳時GHb可高達正常2倍以上。2. GHb測定對監(jiān)測糖尿病微小血管并發(fā)癥、慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展都有積極意義。3. GHb測定在糖尿病篩選普查中對輕型、“隱性”糖尿病有早期提示作用。4. GHb測定也可用于鑒別糖尿病性高血糖及應激性高血糖，前者GHb水平多增高，后者正常。第四節(jié) 血清糖化血紅蛋白和糖化血清蛋白測定42果糖胺血清糖化白蛋白測定（Alb）*臨床意義：血清白蛋白比血紅蛋白半衰期短