cutoff值-參考區(qū)間教學(xué)教材

1、cut off值-參考區(qū)間精品文檔區(qū)別：參考區(qū)間和cutoff值cutoff即臨界值，是判斷檢測結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)。檢測標(biāo)本吸光度（OD值） cutoffiP 判為陽性，cutoff判為陰性?，F(xiàn)在一般用s/co, 1 為陽性，1為陰性。cutoff 的設(shè)置因試劑廠家不同，方法不同而設(shè)置不同，試劑說明書都會有cutoff的設(shè)置。廠家cutoff的設(shè)置是經(jīng)過檢測大量的標(biāo)本（包括正常人、病人），通過統(tǒng) 計學(xué)分析來設(shè)置的。由于國產(chǎn)試劑的質(zhì)量尚需提高，某些實驗的陰性對照經(jīng)常 成為定值（因為陰性對照0.05按0.05計算，cutoff =0.05艱個常數(shù)或陰性對照 十某個常數(shù)，如 HBsAg的cutoff = 2

2、.1 0.05）,造成cutoff亦為定值。參考區(qū)間：解釋檢驗結(jié)果是正常還是異常的依據(jù)區(qū)別血清和血漿血清,指血液凝固后，在血漿中 除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖 維蛋白已被除去的血泡。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生 長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷、對 培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用血清的主要成分：血清是由血漿去除 纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的 混合物，具組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量 常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不 含纖維蛋白原的膠狀液體，具有維持血液的正常粘度、酸堿

3、度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成，這些化學(xué)成分包括白蛋白、at a2、0、丫球 蛋白，甘油三酯，總膽固醇，谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿 蛋白、多肽、脂 肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展，但 仍存在一些問題。主要是：第一:血清的成份可能有幾百種之多，目前對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用 機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認(rèn) 識，這給研究工作帶來許多困難；第二:血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存

4、期至多一 年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性 受到限制；第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì)，這被認(rèn)為是瓶中惡化”的原因之一主要作用峨供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物 等，是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可的松、地塞 米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長 因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。喊供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶 維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起 重要作用。喊供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼

5、壁免受機械損傷。霸寸培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì) 胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶 然發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白 酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保 護(hù)細(xì)胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時，粘度起到重要作用。血清還 含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如 SeO3,硒等鑒別方法血清血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中， 不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成 膠凍。凝血塊收縮，具 周圍所析出之淡黃

6、色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無 纖維蛋白原，這一點是與 血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都 發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血 酶，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大 量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許 多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。血漿相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分，呈淡黃色液體（因含 有膽紅素）。血漿的化學(xué)成分中，水分占 9092 %

7、,溶質(zhì)以血漿蛋白為主血漿是血液的液體成分，血細(xì)胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血 漿，約占血液總體積的55% o血漿的絕大部分是水（體積的 90%）,其中溶解 的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽 離子、激素以及二氧化碳。血 漿的主要功能是運載血 細(xì)胞，同時也是運輸分泌產(chǎn)物的主要媒介而架 -1 TOC o 1-5 h z 血細(xì)胞Y/空E胞；?-/#血/3IV：,I血液成分（加入抗凝劑）將新鮮血液離心，使血細(xì)胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清 的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。血漿是由抗凝的血液中分離出來的液體，其中含有纖維蛋白原，若向血漿 中加入Ca2+,血漿會

8、發(fā)生再凝固，因此血漿中不含游離的 Ca2+0血清是由凝固 的血中分離出來的液體，其中已無纖維蛋白原，但含有游離的CJ+，若向其中再加入Ca2+,血清也不會再凝固。止匕外，血漿與血清的另一個區(qū)別是：血清中少 了很多的凝血因子，以及多了很多的凝血產(chǎn)物。收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔常見問題保存方法血清應(yīng)保存在-5C至-2C。然而，若存放于4c時，請勿超過一個月。若您 一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損？將血清從冷凍箱取出后，先置于 2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之 全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均

9、勻。避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法 （-2 C至4 c至室溫），若血清 解凍時改變的溫度太大（如-20C至37C,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā) 生3、請勿將血清置于37 c太久。若在37 c放置太久，血清會變得混濁， 同 時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步 驟。5、若必須做血清的熱滅活，請遵守 56 C, 30分鐘的原則,并且隨時搖晃 均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮

10、狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理 ？欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清 分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起 過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾 膜。何謂熱滅活？一般是以56 C, 30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使 補體去活化，而補體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和 血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。有必要做熱滅活嗎？收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔實驗顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要 的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，

11、或完全沒有任何作用， 甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng) 過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀 察，像是“小黑點，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在 37C環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清。保存注意事項血清的保存應(yīng)該注意以下幾點：(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20 C - 70 C低溫冰箱中.4 C冰箱中保 存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低 溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂

12、.(2)熱滅活是指56 C, 30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖 晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須，一 般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清 的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用，平滑肌細(xì)胞收縮，肥大細(xì)胞和血小板釋放 組胺，增強吞噬作用，促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20 C至-70 C低溫冰箱中的血清放入 4c冰箱中溶解1天.然后移入室溫，待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕 輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生.切勿

13、直接將血 濤從-20 C進(jìn)入37 c解凍,這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀(4)一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可 將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清.(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖 維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去 除,也可不用處理.顯微鏡下“小黑點”:經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著 增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象小黑點，常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下， 此小黑點不會影響細(xì)胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應(yīng)立即停止使用，更換另一 批號的血清

14、.(6)切勿將血清在37c放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成 分會破會而影響血清質(zhì)量.血清獸藥收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔血清主要成份：蒙古黃黃提取液、抗病毒藥、 ALR、混感血清。性狀：本品為黃棕色澄明液體。功能：本品能誘導(dǎo)機體產(chǎn)生干擾素，調(diào)節(jié)機體免疫功能，促進(jìn)抗體形成， 刺激巨噬細(xì)胞吞噬作用，增強機體對病原微生物的吞噬作用，具有抗炎、抗病 毒、抗毒素和提高機體免疫功能等作用。血栓與止血的檢測主要用于血小板量與質(zhì)異常、凝血障礙、血栓前狀態(tài)和 血栓性疾病的臨床診斷、鑒別診斷、病情觀察、療效評價和預(yù)后判斷，也用于 抗栓治療的監(jiān)測。血栓與止血檢查方法繁多，可先選擇簡單

15、易行的篩選試驗， 再逐步做確診試驗使用全血和血漿檢查，在采集標(biāo)本時要加入抗凝劑，檢查的項目不同，所 加的抗凝劑也不同，常用的抗凝劑有：1、草酸鹽常用的有草酸鉀、草酸鈉和草酸俊，它們?nèi)芙夂蠼怆x的草酸根與 標(biāo)本中的鈣離（Ca2+）形成不解離的草酸鈣，失去 Ca2+的凝血功能而起抗凝 作用。常用于臨床化學(xué)和血液學(xué)檢查。高濃度鉀離子（K+）或鈉離子（Na+）易使血細(xì)胞脫水皺縮，而草酸俊則可使血細(xì)胞膨脹；故測定血細(xì)胞比容時用草 酸俊和草酸鉀或草酸鈉兩者混合的抗凝劑。若用草酸鉀或草酸鈉作抗凝劑，與 肝素為抗凝劑測定的血細(xì)胞比容比較，可降低 8%13 % ,此時的血漿量也相 應(yīng)增加，用它測定血漿中化學(xué)成分，

16、結(jié)果可低 5%左右。標(biāo)本中加入高濃度的 草酸鹽抗凝劑，可發(fā)生溶血和改變血液 pH,干擾測定血漿中的鉀、鈉和氯，還 能抑制有些酶的活性。具優(yōu)點是溶解度好、價廉， 2mg草酸鹽能抗凝lml血 液。收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔2、肝素是生理性抗凝劑，抗凝機制較為復(fù)雜，主要是抑制凝血酶原轉(zhuǎn)變 為凝血酶，抑制凝血酶對纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白和穩(wěn)定血小板的作用。所 用制劑多為肝素的鈉或鉀鹽，除有些因肝素能干擾的凝血機制檢查項目外，絕 大多數(shù)的檢查都可用肝素作為抗凝劑。 20U肝素可抗凝lml血液。3、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 常用的是它的鈉或鉀鹽，抗凝作用是與 Ca2 + 絡(luò)合而使Ca2

17、+失去凝血作用。適用范圍與草酸鹽基本相同。 1-2mgEDTA鹽 可杭凝1ml血液。4、枸檬酸鹽 主要為枸檬酸鈉；抗凝機制與草酸鹽相似。在血中的溶解度低，抗凝力不如前幾種抗凝劑。多用于臨床血液學(xué)檢查。5mg枸檬酸鹽可抗凝1ml血液。5、氟化鈉與Ca2+結(jié)合而起抗凝作用，因其抑制細(xì)胞分解葡萄糖，故用于 葡萄糖測定。抽血及抗凝原理1.快速血清管：橘紅色頭蓋，采血管內(nèi)有促凝劑，可激活纖 維蛋白酶，使可溶性纖維蛋白變?yōu)椴豢扇艿睦w維蛋白多聚體，進(jìn)而 形成穩(wěn)定的纖維蛋白凝塊。快速血清管可在5分鐘之內(nèi)使采集的血液凝固。適用于急診血清生化試驗。2.惰性分離膠促凝管：金黃頭蓋，采血管內(nèi)添加有惰性分離 膠和促凝劑

18、。標(biāo)本離心后，惰性分離膠能夠?qū)⒀褐械囊后w成分(血清或者血漿)和固體成分徹底分開并完全積聚在試管中央而形收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔成屏障，標(biāo)本在48小時內(nèi)保持穩(wěn)定，促凝劑可快速激活凝血機制， 加速凝血過程。適用于急診血清生化試驗。3.肝素抗凝管：綠色頭蓋，內(nèi)添加有肝素，肝素直接有抗凝 血酶的作用，可延長標(biāo)本凝血時間。適用于 紅細(xì)胞脆性試驗，血氣 分析，紅細(xì)胞壓積試驗，血沉及普通生化試驗 ，不適于血凝試驗。 過量的肝素會引起白細(xì)胞的聚集，不能用于白細(xì)胞計數(shù)，因其可使 血片染色后背景呈淡藍(lán)色，故也不適于白細(xì)胞分類。4.血漿分離管：淺綠色頭蓋，在惰性分離膠管內(nèi)加入肝素鋰抗 凝劑，可達(dá)到快速分離血漿的目的，是電解質(zhì)檢測的最佳選擇，也 可用于常規(guī)血漿生化測定和ICU等急診，血漿生化檢測。血漿標(biāo)本 可直接上機并在冷藏狀態(tài)下保持 48小時穩(wěn)定。5. EDT雨凝管：紫色頭蓋，乙二胺四乙酸及其鹽是一種氨基 多羥基酸，可以有效地螯合血液標(biāo)本中的鈣離子，螯合鈣或?qū)⑩}從 反應(yīng)位點移去將阻滯和中止內(nèi)源性或者外源性凝血過程，從而防止 血液標(biāo)本凝固。適 用于一般血液學(xué)檢驗，不適用于凝血試驗及血小 板功能檢查，也不是用于鈣離子，鉀離子，鈉離子，鐵離子，堿性 磷酸酶，肌酸激酶和亮氨酸氨基