（液體罐菌種的生產(chǎn)）學(xué)習(xí)資料單

1、第四章原種的生產(chǎn)（液體菌種生產(chǎn)）!1!第三節(jié)：液體罐菌種的生產(chǎn)市場(chǎng)上液體菌種罐種類很多，從大型工業(yè)發(fā)酵罐到小型液體發(fā)酵罐都向操作 簡(jiǎn)便和高成功率轉(zhuǎn)型。一、發(fā)酵罐型號(hào)食用菌液體發(fā)酵罐有很多型號(hào)：如50L, 100L, 200L, 400L, 600L。各個(gè)菌罐生產(chǎn)廠所生產(chǎn)的食用菌罐各有其優(yōu)缺點(diǎn)，只要是操作技術(shù)人員熟悉 罐體結(jié)構(gòu)，成功率就很高了。二、常用的液體罐菌種的生產(chǎn)流程現(xiàn)在菌種生產(chǎn)者常用的液體罐菌種的生產(chǎn)流程:（一）發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方以1L的培養(yǎng)基配方為例進(jìn)行計(jì)算。如下:1 .紅糖10g,玉米粉5g,豆餅粉10g,蛋白腺l.5g,磷酸二氫鉀0. 8g,硫酸鎂0.8go也可以用煮土豆麥聯(lián)培養(yǎng)基。

2、各種斜面培養(yǎng)基配方都可以做為液體菌培養(yǎng)液配方使用。一般200L的發(fā)酵 罐一般可裝160L培養(yǎng)料。（二）液體菌種生產(chǎn)工藝流程：罐的清洗與檢查一培養(yǎng)基的配制一上料一滅菌一降溫一搖瓶接種一培養(yǎng)一接種栽培袋罐的清洗與檢查每一罐做完之后，新的一罐做之前。我們都需要對(duì)罐體進(jìn)行清洗，目的是除 去罐內(nèi)所有污垢。方法就是用清水沖刷內(nèi)壁。然后檢查各部件是否完好，有無(wú)滲 漏，設(shè)備能否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。我們還需要進(jìn)行煮罐，那在什么時(shí)候進(jìn)行煮罐呢？比如在新罐第一次使用 時(shí)；在上一罐染菌時(shí)；在更換品種時(shí)；在長(zhǎng)期閑置不用時(shí)。這些時(shí)候我們都需要 進(jìn)行煮罐。具體的操作方法就是：、加水至試鏡中線，扣上接種蓋，微開(kāi)排 氣閥。、打開(kāi)啟動(dòng)開(kāi)關(guān)

3、，進(jìn)入滅菌狀態(tài)，溫度升到124C時(shí)，計(jì)時(shí)，40分鐘 后，控制柜報(bào)警。、關(guān)閉排氣閥，關(guān)閉啟動(dòng)開(kāi)關(guān)，悶罐20分鐘，放水。如是外置濾芯需要對(duì)外置濾芯及無(wú)菌水滅菌將進(jìn)氣管管口用8-10層紗布包好。選擇容積是1000ml的廣口燒瓶，加水750-780ml,蓋棉塞，包牛皮紙。在壓力是0. 11-0. 15MPa,溫度121-126C的條件下，計(jì)時(shí)60分鐘。培養(yǎng)基的制作配方按生產(chǎn)品種配制。很多公司現(xiàn)在也有現(xiàn)成的專用培養(yǎng)基。直接配比水即 可。上料將培養(yǎng)料加入培養(yǎng)器。(注意：培養(yǎng)料提前用水稀釋，不要有結(jié)塊和顆粒， 避免滅菌不徹底)滅菌培養(yǎng)料加入培養(yǎng)器后，扣上接種蓋，微開(kāi)排氣閥。(注意：開(kāi)蒸汽閥門(mén)順 序不要開(kāi)錯(cuò)，

4、防止發(fā)酵罐培養(yǎng)料回料)打開(kāi)滅菌開(kāi)關(guān)。當(dāng)發(fā)酵罐溫度到123度一126度時(shí)，計(jì)80分鐘時(shí)，此時(shí)開(kāi)始三次排料: 在計(jì)時(shí)后0分鐘、17分鐘、35分鐘各排料一次,每次排料3-5分鐘,三次共排 料3-5升。排料部位:罐底下的各閥門(mén)，如進(jìn)氣閥、接種閥等同時(shí)排料。排料方法:微微打開(kāi)各閥門(mén)，只要有少量料液和蒸汽排出即可。降溫(冷卻)計(jì)時(shí)結(jié)束，控制柜報(bào)警，開(kāi)始降溫。停止排料。通入循環(huán)冷卻水。在火焰的保護(hù)下，將進(jìn)氣管接到進(jìn)氣閥上。準(zhǔn)備接搖瓶菌種并瓶：在接種室或接種箱內(nèi)，在火焰的保護(hù)下，將液體專用母種搗碎倒入無(wú) 菌水內(nèi)。或者直接用搖瓶菌種。接種在接種時(shí)我們需要準(zhǔn)備:并好瓶的菌種，火焰圈，95%的酒精，火機(jī), 防燙手套

5、，濕毛巾，打火機(jī)，開(kāi)接種口桿等。接種過(guò)程:打開(kāi)排氣閥，當(dāng)罐壓降到接近于零時(shí)，迅速關(guān)閉排氣閥，點(diǎn) 燃火圈，旋開(kāi)接種蓋，在火焰的保護(hù)下，將菌種倒入罐內(nèi)，把接種蓋在火焰上燒 一下，扣上旋緊，撤掉火圈，當(dāng)罐壓升到0. 02MPa以上時(shí)，微微打開(kāi)排氣閥調(diào)整罐壓，罐壓調(diào)整在0. 02-0. 04MPa之間。標(biāo)記發(fā)酵罐接種日期，接種時(shí)間，記錄在生產(chǎn)記錄本上。培養(yǎng)階段在液體發(fā)酵罐發(fā)酵的過(guò)程中，設(shè)置好培養(yǎng)溫度即可進(jìn)入培養(yǎng)階段。培養(yǎng)品種 不同設(shè)定培養(yǎng)溫度不同(一般在24-26 C),罐壓維持在0. 03-0. 05MPa, 一般品 種培養(yǎng)周期為72-96小時(shí)?？諝饬髁浚?30升型培養(yǎng)器空氣流量不小于1. 0立方

6、米每小時(shí)。接袋生長(zhǎng)周期：一般在液體罐內(nèi)長(zhǎng)好需要2-4天左右，此時(shí)菌液顏色變淡， 菌球、菌液界限分明，菌液氣味變淡了，取而代之的是菌絲的淡淡香味，沒(méi)有酸 臭味。菌球濃度70%以上就可以接袋了。培養(yǎng)3-4天菌球數(shù)量：第一天菌球數(shù)量20%左右第二天菌球數(shù)量50%左右第三天菌球數(shù)量70%以上培養(yǎng)后的菌種：菌球多、清澈。接種槍及接種管提前滅菌準(zhǔn)備好，把接種槍槍口及接種管管口用8-10 層紗布包好，外包牛皮紙。在壓力是0. 11-0. 15MPa,溫度121-126C的條件下計(jì) 時(shí)40分鐘。接袋過(guò)程：取樣，保證閥門(mén)暢通，在火焰的保護(hù)下，將進(jìn)氣管接到進(jìn)氣閥上。調(diào)整罐壓 在0. 05-0. 08MPa之間。關(guān)

7、閉啟動(dòng)開(kāi)關(guān)，打開(kāi)接種閥，在接種室的接種機(jī)前接種。用液體槍進(jìn)行接種。液體發(fā)酵罐接種過(guò)程，及接種后發(fā)菌的整齊程度。下面我們來(lái)總結(jié)一下發(fā)酵罐操作的幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。._L 口 /A - i1! 11二、無(wú)搖瓶制作的成功，占到這個(gè)罐子菌種做的80%,至關(guān)重要。（二）滅菌正常操作，要實(shí)現(xiàn)無(wú)死角滅菌。（三）空氣過(guò)濾要達(dá)到一級(jí)過(guò)濾，0. 01 nmo靠眼睛來(lái)判斷液體菌種的好壞，造成很?chē)?yán)重的損失。任何一個(gè)環(huán)節(jié)都不能疏 忽大意。如：液體菌種不做取樣檢測(cè)、培養(yǎng)料滅菌不徹底、不檢測(cè)PH數(shù)值、培 養(yǎng)料滅菌時(shí)間太久、培養(yǎng)料發(fā)酵不徹底、培養(yǎng)料變質(zhì)、母種活性不好、培養(yǎng)料水 份調(diào)節(jié)不適合、菌球占培養(yǎng)液的比例、菌球大小、數(shù)量不詳?shù)?/p>

8、問(wèn)題都需要注意，其實(shí)就是要 很細(xì)心的進(jìn)行操作和管理。這是食用菌液體發(fā)酵罐基本流程，每個(gè)廠家的操作工藝流程是有區(qū)別的。液 體培養(yǎng)罐的功能結(jié)構(gòu)在不斷變化，有單體罐培養(yǎng)，有連體罐培養(yǎng)，工藝上也有不 斷的創(chuàng)新成果。我們也都希望得到一款傻瓜似的食用菌液體發(fā)酵罐。即操作簡(jiǎn)便 成功率又高的液體發(fā)酵罐。四、液體發(fā)酵罐的外形，內(nèi)部構(gòu)造下面我們對(duì)比一下液體發(fā)酵罐的外形，內(nèi)部構(gòu)造，操作的方便性。（一）外形原來(lái)的發(fā)酵罐細(xì)高，現(xiàn)在發(fā)酵罐多是矮胖，都是單層雙層罐，外形并不是很 重要，只要能做出優(yōu)質(zhì)菌種來(lái)就是好設(shè)備，但是矮的便于操作，顯而易見(jiàn)矮的比 較好操作。原來(lái)的沒(méi)有粘轆，挪動(dòng)不方便，現(xiàn)在液體發(fā)酵設(shè)備多帶車(chē)古轆。（二）內(nèi)部構(gòu)造原來(lái)的發(fā)酵罐都耍把空氣過(guò)濾系統(tǒng)拆掉放到高壓鍋里滅菌，也是很麻煩的， 每次還要無(wú)菌操作鏈接，現(xiàn)在的發(fā)酵罐多是空氣過(guò)濾在滅菌的時(shí)候就隨之滅了， 每次只需打開(kāi)進(jìn)氣閥門(mén)即可。（三）操作發(fā)酵罐底部閥門(mén)越多越容易出現(xiàn)問(wèn)題，以前的下面有三個(gè)閥門(mén)，一個(gè)是進(jìn)氣 口，還有個(gè)輔助進(jìn)氣閥門(mén)，還有一個(gè)是出菌種的閥門(mén)，現(xiàn)在的發(fā)酵罐多是一個(gè)出 菌種的閥門(mén)。另外以前在做發(fā)酵罐培養(yǎng)基時(shí)，每次幾十斤土豆都要煮培養(yǎng)基有點(diǎn)的麻