食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測定

1、食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測定氣相色譜-質(zhì)譜法食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測定1范圍本標準規(guī)定了食品接觸材料及制品中環(huán)氧大豆油遷移量的氣相色譜-質(zhì)譜測定方法。本標準適用于食品接觸材料及制品中環(huán)氧大豆油遷移量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法。GB 31604.1食品安全國家標準食品接觸材料及制品遷移試驗通則GB 5009.156 食品安全國家標準食品接觸材料及制品遷移試驗預處理方法通則

2、3原理水基、酸性、酒精類食品模擬物中環(huán)氧大豆油用乙酸乙酯提取，油性食品模擬物中環(huán)氧大豆油(epoxidized soybean oil, ESBO)用甲醇提取，經(jīng)甲酯化和用環(huán)戊酮衍生化后，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定其中18:2E的衍生物，采用外標法定量。4試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682規(guī)定的一級水。試劑氯化鈉。無水硫酸鈉。甲醇鈉。檸檬酸氫二鈉。三氟化硼乙醛絡合物。異辛烷：色譜純。環(huán)戊酮：色譜純。乙酸乙酯：色譜純。無水甲醇：色譜純。無水乙醇：色譜純。正己烷：色譜純。乙酸。試劑的配制水基、酸性、酒精類、油基食品模擬物：按 GB 5009.156規(guī)定配制。

3、氯化鈉溶液（2 mol/L）：稱取10.7 g氯化鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定 容至刻度，充分搖勻。檸檬酸氫二鈉溶液（10 %,質(zhì)量分數(shù)）：稱取10.0 g檸檬酸氫二鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，充分搖勻。甲醇鈉溶液（0.02 mol/L）:稱取0.11 g甲醇鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用無水甲醇 定容至刻度，充分搖勻。標準品環(huán)氧大豆油 CAS號：8013-07-8 ,純度A 99.5 %。標準溶液配制環(huán)氧大豆油標準儲備液（10 g/L ）：準確稱取1.0 g環(huán)氧大豆油（精確至 0.1 mg）至100 mL

4、容量 瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，充分搖勻，于 -204 C條件下避光保存，6個月內(nèi)濃度保持穩(wěn)定。環(huán)氧大豆油標準中間液（2500 mg/L ）:準確移取2.5 mL的環(huán)氧大豆油標準儲備液至10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，充分搖勻。食品模擬物標準工作溶液的制備水基、酸性、酒精類食品模擬物標準工作溶液分另1J準確吸取環(huán)氧大豆油標準中間液（4.4.2） 0 mL、0.20 mL、0.40 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL于100 mL容量瓶中，用水基食品模擬物定容，其中環(huán)氧大豆油的濃度分別為0 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 m

5、g/L。采用同樣方式，分別用酸性、酒精類食品模擬物配制同樣濃度系列的 環(huán)氧大豆油標準工作溶液，然后按 6.2.1步驟進行提取操作。油性食品模擬物標準工作溶液分別準確稱取10 g （精確至0.01 g）油性食品模擬物，置于 6個25 mL具塞玻璃試管中，用可調(diào) 移液器分別移取 0 M 20戶40屋100屋400環(huán)氧大豆油標準中間液（4.4.2）至試管中，得到油性食品模擬物標準工作溶液，其中環(huán)氧大豆油的濃度分別為0 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg,然后按6.2.2步驟進行提取操作。5儀器和設備氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配EI離子源。

6、渦旋振蕩器。離心機：4000 r/min。分析天平：感量 0.0001 g和0.01 g。有機濾膜：0.22容量并瓦:10 mL, 50 mL, 100 mL。具塞離心管：10 mL, 25 mL?？烧{(diào)式移液器（1屋20 L, 20 屋100 門100屋5 000。6分析步驟樣品遷移試驗按照GB 5009.156及GB 31604.1的要求，對樣品進行遷移試驗，得到食品模擬物試液。如果得到 的食品模擬物試液不能馬上進行下一步試驗，應將食品模擬物試液于0 C4 C冰箱中避光保存。應將所得食品模擬物試液冷卻或恢復至室溫后進行下一步試驗。試液制備水基、酸性、酒精類食品模擬物試液的制備分別準確移取5

7、mL水基、酸性、酒精類食品模溶液于具塞離心管中，加入 5 mL乙酸乙酯，渦旋 振蕩2 min ,在4000 r/min下離心3 min ,將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，重復萃取三次，合并有 機相，用氮氣吹干溶劑，加入4 mL 0.02 mol/L甲醇鈉溶液，再加入約1 g無水硫酸鈉，混勻，在60 C 下保持2 h進行甲酯化。冷卻至室溫后，加入 5 mL正己烷和5 mL 10%的檸檬酸氫二鈉溶液，混勻， 在4000 r/min下離心3 min ,將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，加入約1 g無水硫酸鈉，在4000 r/min下離心3 min ,將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，用氮氣吹干溶劑。依次

8、加入2 mL異辛烷、1.5 mL環(huán)戊酮和0.5 mL三氟化硼乙醛絡合物，振蕩30 s,加入5 mL 2 mol/L氯化鈉溶液，振蕩混勻，停止衍生化反應。在 4000 r/min下離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清液并用異辛烷定容至5mL ,吸取濾液1mL2 mL ,通過0.22科m的有機相微孔濾膜過濾器后所得試液供GC/MS進樣測定用。油性食品模擬物試液的制備分別準確稱取5.0 g （精確至0.01 g）油性食品模擬物，加入 5 mL甲醇，渦旋振蕩2 min,在4000 r/min下離心3 min ,將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，重復萃取三次，合并有機相，用氮氣吹干溶 劑，加入4 mL 0.02 m

9、ol/L甲醇鈉溶液，再加入約 1 g無水硫酸鈉，混勻，在 60 C下保持2 h進行甲 酯化。冷卻至室溫后，加入 5 mL正己烷和5 mL 10%的檸檬酸氫二鈉溶液，混勻，在 4000 r/min下離 心3 min ,將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，加入約1 g無水硫酸鈉，在 4000 r/min下離心3 min , 將有機相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中， 用氮氣吹干溶劑。依次加入2 mL異辛烷、1.5 mL環(huán)戊酮和0.5 mL 三氟化硼乙醛絡合物， 振蕩30 s,加入5 mL 2 mol/L氯化鈉溶液，振蕩混勻，停止衍生化反應。在4000 r/min下離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清液并用異辛烷定容至 5

10、mL ,吸取濾液1mL2 mL,通過0.22科m的有 機相微孔濾膜過濾器后所得試液供 GC/MS進樣測定用?？瞻自囈旱闹苽湮磁c食品接觸材料或制品試樣接觸的水性、酸性、酒精類食品模擬物按照6.2.1操作，油性食品模擬物按照6.2.2操作。6.4測定氣相色譜質(zhì)譜測定參考條件a）色譜柱：HP-5MS ,柱長30.0 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚0.25科卬或性能類似的分析柱。b）程序升溫：初始溫度 80 C,保持2 min, 20 C/min升溫至275 C,保持12 min。c）進樣塊溫度：250 C。d）質(zhì)譜接口溫度：280 C。e）離子源溫度:230 C。f）四級桿溫度：150 C。g）載氣：

11、He （純度99.999 %） , 1.0 mL/min 恒流。h）進樣量：1 Loi）進樣方式：不分流進樣。j）電離方式：EI。k）溶劑延遲：5 min。l）質(zhì)譜掃描方式：選擇性離子模式（ SIM）。m）選擇離子：定量離子m/z 309,定性離子 m/z 277, m/z 337。標準工作曲線的制作按照6.4.1所列儀器參考條件，對水基、酸性、酒精類食品模擬物標準工作溶液和油性食品模擬物標準工作溶液依次進樣測定。以環(huán)氧大豆油彳行生物濃度作為橫坐標，單位以“mg/L”或“ mg/kg”表示，以對應的峰面積作為縱坐標 （環(huán)氧大豆油選擇兩種非對映異構體 18：2E1或18：2E2中的一種來計算），

12、 繪制標準工作曲線，得到線性方程。標準溶液色譜圖見附錄Ao食品模擬物試液的測定按照6.4.1所列儀器參考條件，對食品模擬物試液進行檢測，得到環(huán)氧大豆油衍生物的定量離子的峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測試液中環(huán)氧大豆油的濃度。同時對空白試液進行檢測。定性在相同的試驗條件下進行樣品測定時，若試樣溶液中待測物的色譜峰的保留時間與對應標準品的色譜峰的保留時間偏差在土 2.5%以內(nèi)，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，且樣品譜圖中定性離子的相對豐度與濃度接近的標準溶液譜圖中對應定性離子的相對豐度進行比較，偏差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷為樣品中存在該種待測物。表1定性確證時相對離子豐度的最大允許誤差相對離子小度/%50205010200 10允許的最大偏差/%士0小5上007分析結(jié)果的表述由標準曲線求得的試液中環(huán)氧大豆油衍生物的濃度，按GB5009.156進行遷移量的計算，得到食品模擬物及制品中環(huán)氧大豆油的遷移量，計算結(jié)果保留至小