《醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)》2010年教學(xué)大綱(精)

1、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)2010年教學(xué)大綱課程名稱：醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程英文名稱：MedicalMoleculauBiology課程性質(zhì)：專業(yè)選修課授課對(duì)象：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)以及預(yù)防醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)和藥學(xué)等各專業(yè)碩士研究生。學(xué)時(shí)數(shù)：140學(xué)時(shí)（理論50，實(shí)驗(yàn)70，自學(xué)20）執(zhí)筆人：?jiǎn)慰扇?、周建?jiǎng)等編寫單位：分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室編寫日期：2010年5月一、教學(xué)目的和要求醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)是基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)以及預(yù)防醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)和藥學(xué)等各專業(yè)碩士研究生的主要選修課程之一。要求學(xué)生掌握醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的基本理論、基本知識(shí)和基本的研究技能，培養(yǎng)碩士研究生在基礎(chǔ)研究；臨床實(shí)踐中應(yīng)用醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)

2、知識(shí)分析問題、解決問題的能力。二、選用教材及主要參考書（一）教材醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)供年制及7年制臨床醫(yī)學(xué)等專業(yè)用，馮作化主編人民衛(wèi)生出版社2005年8月第1版（二）主要參考書1、RobertF.Weaver編著.MolecularBiology（第二版）.北京：科學(xué)出版社.20022、SambrookandRuussell編著.MolecularCloning（第三版）.西安：世界圖書出版公司.20023、胡維新主編.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)長(zhǎng)沙：中南大學(xué)出版社.20014、TimothyM.Cox&JohnSinclair編著.MedicineMolecularBiology.北京：科學(xué)出版社.20005

3、、馮作化主編.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社.20016、陳丙鶯，陳子興，主編.分子生物學(xué)基礎(chǔ)與臨床.南京：東南大學(xué)出版社.207、張迺蘅主編.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué).北京：北京醫(yī)科大學(xué)出版社，1999三、考試的形式與辦法理論課內(nèi)容閉卷考試，題型靈活并注重考察學(xué)生理論聯(lián)系實(shí)際的能力。實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容采取實(shí)際操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告和學(xué)生平時(shí)表現(xiàn)相結(jié)合的考核辦法，注重綜合素質(zhì)與動(dòng)手能力的考核?？傇u(píng)成績(jī)中，理論課考試成績(jī)占60%，實(shí)驗(yàn)成績(jī)占40%。四、學(xué)時(shí)分配理論課教學(xué)-H-章節(jié)教學(xué)內(nèi)容教學(xué)時(shí)數(shù)第一章緒論2第二章基因2第三章基因組2第五章DNA損傷與修復(fù)4第八章基因表達(dá)的調(diào)控6第九章細(xì)胞間通訊與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)3第十章細(xì)胞

4、增生和凋亡的分子機(jī)制3第十一章基因分析的基本策略4第十二章基因功能分析的基本策略2第十三章基因工程與體外表達(dá)6第十四章基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)變化與疾病4第十九章在基因水平診斷疾病6第二十章基因治療研究4其它RNA測(cè)定技術(shù)2總計(jì)50學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容教學(xué)時(shí)數(shù)大實(shí)驗(yàn)一質(zhì)粒BluescriptM13土在EcoliDH.5a40實(shí)驗(yàn)1質(zhì)粒Bluescript8實(shí)驗(yàn)2質(zhì)粒Bluescript6實(shí)驗(yàn)3M13DNA定量瓊脂糖凝膠電泳分離質(zhì)粒Bluescript10實(shí)驗(yàn)4M13DNA大腸桿菌DH感受態(tài)5a16大實(shí)驗(yàn)二全血DNA的提取及PCR擴(kuò)增30實(shí)驗(yàn)1人全血DNA提取及定12實(shí)驗(yàn)2人全血DNA的PCR擴(kuò)增及瓊脂

5、糖凝膠電泳鑒定PCR擴(kuò)增產(chǎn)物18總計(jì)70學(xué)時(shí)五、教學(xué)內(nèi)容與目的要求一、課程在培養(yǎng)方案中的地位、目的和任務(wù)分子生物學(xué)是一門從分子水平研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)及其規(guī)律的科學(xué)，近年來已在醫(yī)藥衛(wèi)生及其它領(lǐng)域有著突飛猛進(jìn)的發(fā)展，已成為醫(yī)學(xué)生教學(xué)不可缺少的一部分。本課程的教學(xué)目的和任務(wù)，是掌握分子生物學(xué)的基本理論與技術(shù)，同時(shí)了解分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用。由于分子生物學(xué)理論與技術(shù)的發(fā)展十分迅速，新技術(shù)新方法層出不窮，本課程將根據(jù)學(xué)科的發(fā)展，介紹新的知識(shí)與技術(shù)。二、課程的基本要求（一）基本理論和基本知識(shí)1了解分子生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史和醫(yī)學(xué)的關(guān)系。2掌握基因的概念及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，掌握中心法則的基本內(nèi)容；熟悉基因突變?cè)谶M(jìn)

6、化及醫(yī)學(xué)上的意義；了解基因命名的基本原則、人及小鼠基因的命名法。掌握基因組的概念及病毒、原核生物、真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；熟悉基因組變異的生理和病理意義；了解人類基因組學(xué)的概念及人類基因組計(jì)劃的研究?jī)?nèi)容。了解DNA結(jié)構(gòu)受損傷的因素，損傷的類型及其效應(yīng)。DNA損傷和修復(fù)的重要生物學(xué)意義。掌握主要的DNA修復(fù)方式的原理：切除修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù)。熟悉細(xì)胞周期檢查點(diǎn)控制是真核生物誘導(dǎo)修復(fù)的主要機(jī)制。5熟悉原核基因表達(dá)的特點(diǎn)；掌握原核基因的調(diào)控機(jī)制；熟悉真核基因表達(dá)的特點(diǎn)；掌握真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制；了解基因表達(dá)的“統(tǒng)一理論”。6掌握細(xì)胞間通訊與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子；熟悉G蛋白偶聯(lián)

7、受體及胰島素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的基本步驟；了解各種受體介導(dǎo)的信號(hào)通路。7掌握細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的概念，細(xì)胞周期調(diào)控蛋白及胱天蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)；了解死亡受體和線粒體凋亡途徑。8了解兩種DNA序列測(cè)定的原理及其主要應(yīng)用；掌握Southern雜交和PCR等技術(shù)原理在分析基因拷貝數(shù)的應(yīng)用；Northernblot和RT-PCR技術(shù)原理及在基因轉(zhuǎn)錄水平變化分析中的應(yīng)用；Westernblot原理及在特定基因產(chǎn)物-蛋白質(zhì)分析中的應(yīng)用。掌握利用反義RNA抑制基因表達(dá)和RNAi技術(shù)沉默特定基因以鑒定基因功能的原理與方法；熟悉利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和細(xì)胞模型研究基因功能的原理與方法；熟悉利用轉(zhuǎn)基因敲除模型研究基因功能

8、的原理與方法。熟悉限制性核酸內(nèi)切酶和其他常用工具酶的特點(diǎn)；掌握常用克隆載體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；掌握基因克隆的基本過程；掌握外源基因在大腸桿菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)原理和方法；熟悉定點(diǎn)誘變技術(shù)原理；了解昆蟲和酵母表達(dá)系統(tǒng)。掌握基因突變的概念、類型及其特點(diǎn)；熟悉基因突變的發(fā)生過程；熟悉鑒定疾病相關(guān)基因的技術(shù)；了解結(jié)構(gòu)基因突變導(dǎo)致疾病發(fā)生的分子機(jī)制。掌握基因診斷的基本概念、基本原理和主要內(nèi)容；熟悉各種基因診斷技術(shù)的特點(diǎn)；掌握基因診斷的基本策略；了解基因轉(zhuǎn)移的靶細(xì)胞；了解基因診斷技術(shù)的發(fā)展過程。掌握基因治療的概念、原理及基因治療的基本策略，基因治療的常用載體，基因治療的靶細(xì)胞；熟悉治療基因的受控表達(dá)原理與方法

9、，基因轉(zhuǎn)移的基本技術(shù)；基因干預(yù)的基本技術(shù)。掌握人類基因組計(jì)劃及其研究?jī)?nèi)容，基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)概念與研究方法；了解基因組學(xué)在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用、主要的人類基因組數(shù)據(jù)庫(kù)。（二）基本技能掌握大腸桿菌DH5a感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化。掌握人類基因組DNA提取的原理與方法。掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理和方法。掌握堿裂解法小量提取質(zhì)粒DNA的原理和電泳分析方法。掌握重組質(zhì)粒DNA的酶切鑒定及電泳分析方法。掌握PCR反應(yīng)的操作步驟及PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)方法。三、課程內(nèi)容的基本內(nèi)容及重點(diǎn)難點(diǎn)：第一章緒論目的要求】掌握：分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的定義。了解：分子生物學(xué)研究對(duì)象和研究?jī)?nèi)容；分子生

10、物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史；醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史；分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。授課學(xué)時(shí)】1學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)分子生物學(xué)是從分子水平探討生命活動(dòng)的本質(zhì)一、分子生物學(xué)的定義二、分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史三、現(xiàn)代分子生物學(xué)研究主要涉及的三個(gè)領(lǐng)域第二節(jié)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)主要是在分子生物學(xué)水平進(jìn)行疾病相關(guān)研究一、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史二、分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用1基因和基因組結(jié)構(gòu)與功能研究是闡明疾病分子機(jī)制的一個(gè)重要方面2細(xì)胞間通訊和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究是闡明疾病分子機(jī)制的另一重要方面3基因診斷和基因治療將成為疾病診斷和治療的重要手段4基因分析是建立疾病診斷新技術(shù)的基礎(chǔ)5基因功能研究和基因克隆與表達(dá)是研制新型疫苗和新型藥物的基礎(chǔ)第

11、二章基因目的要求】掌握：基因的概念及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；結(jié)構(gòu)基因；順式作用元件；基因突變改變遺傳信息的幾種形式。熟悉：斷裂基因；基因型；表現(xiàn)型；增強(qiáng)子；轉(zhuǎn)錄。了解：基因的命名法。重點(diǎn)：基因的概念；原核生物和真核生物基因調(diào)控序列；多順反子,單順反子難點(diǎn)：原核生物和真核生物基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。授課學(xué)時(shí)】2學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)基因是遺傳的基本單位一、Mendel的遺傳因子學(xué)說為“基因”概念的提出奠定了基礎(chǔ)二、基因是編碼RNA或多肽鏈的核酸片段三、基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的部分稱為結(jié)構(gòu)基因四、基因中含有與轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)的序列第二節(jié)遺傳信息按照中心法則有序傳遞一、遺傳信息儲(chǔ)存在DNA的序列中二、RNA序列也可以提供遺傳

12、信息三、信使RNA將DNA序列中的遺傳信息傳遞給蛋白質(zhì)四、遺傳密碼指導(dǎo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列合成五、原核生物的結(jié)構(gòu)基因多轉(zhuǎn)錄為多順反子mRNA六、真核生物結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄為單順反子mRNA并需要轉(zhuǎn)錄后加工七、同一段DNA序列能夠編碼兩種甚至三種蛋白質(zhì)分子八、基因突變可改變遺傳信息第三節(jié)基因（符號(hào)）的命名法一、基因命名的基本原則二、人類基因的命名法三、其他生物基因的命名法第三章基因組目的要求】掌握：生物基因組和真核生物基因組概念；人基因組和基因的數(shù)量；原核生物及真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。熟悉：操縱子的概念及其結(jié)構(gòu)；轉(zhuǎn)座因子的類型及其遺傳效應(yīng)；真核生物基因組重復(fù)序列；基因組變異的生理和病理學(xué)意義；易感基因

13、。了解：多基因家族、假基因等。重點(diǎn)：原核生物及真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征；真核生物基因組重復(fù)序列種類；功能基因組學(xué)包括那些研究?jī)?nèi)容。難點(diǎn)：真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特征。授課學(xué)時(shí)】3學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)基因組是一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和一、基因組儲(chǔ)存了生物體整套的遺傳信息二、不同生物基因組蘊(yùn)含的遺傳信息量有著巨大的差別三、不同生物基因組的結(jié)構(gòu)與組織形式也明顯不同第二節(jié)不同病毒基因組的核酸具有不同特點(diǎn)一、病毒基因組可以由DNA或RNA組成二、RNA病毒基因組有單、雙鏈和正、負(fù)鏈之分三、DNA病毒基因組有環(huán)狀DNA分子和線性DNA分子第三節(jié)原核生物基因組比較簡(jiǎn)單一、原核生物基因組通常由環(huán)狀雙鏈DNA分

14、子組成二、操縱子結(jié)構(gòu)是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)之一三、原核生物基因組還具有一些結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)四、在原核生物基因組的非編碼區(qū)內(nèi)主要是一些調(diào)控序列五、細(xì)菌基因組中的可移動(dòng)成分能產(chǎn)生轉(zhuǎn)座現(xiàn)象六、質(zhì)粒DNA是具有自主復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA第四節(jié)真核生物基因組更加復(fù)雜一、真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組二、真核生物基因組由染色體DNA和染色體外DNA組成三、真核生物基因組中非編碼序列多于編碼序列四、多基因家族和假基因的存在是真核基因組的另一特點(diǎn)第五節(jié)基因組變異具有重要的生理和病理意義一、基因組在進(jìn)化過程中發(fā)生了各種形式的變異二、染色體DNA變異可導(dǎo)致疾病的發(fā)生三、線粒體基因病受到越來越多的重視四、易感

15、基因與環(huán)境的相互作用第六節(jié)基因組學(xué)是20世紀(jì)末發(fā)展起來的一門科學(xué)一、人類基因組的四張圖譜二、人類基因組計(jì)劃的完成向人們提出了更高的挑戰(zhàn)第五章DNA損傷與修復(fù)目的要求】掌握：1、DNA損傷、DNA的重排的概念。2、主要的DNA修復(fù)方式：直接修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù)。熟悉：真核生物誘導(dǎo)修復(fù)的主要機(jī)制。了解：DNA的損傷類型；DNA結(jié)構(gòu)損傷的因素；DNA損傷和修復(fù)的重要生物學(xué)意義。重點(diǎn)：DNA主要修復(fù)方式。難點(diǎn)：真核生物誘導(dǎo)修復(fù)的主要機(jī)制。自學(xué)：DNA損傷和修復(fù)的參考標(biāo)志。授課學(xué)時(shí)】4學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)DNA損傷的因素；DNA損傷的類型一、多種因素可以引起DNA損傷二、DNA損傷可以不

16、同形式在鏈內(nèi)或鏈間形成第二節(jié)DNA損傷的修復(fù)機(jī)制，包括直接修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)和SOS修復(fù)一、某些DNA損傷可以直接修復(fù)二、切除修復(fù)是覺的修復(fù)方式三、重組修復(fù)是DNA損傷較多時(shí)的修復(fù)方式四、SOS修復(fù)是DNA損傷嚴(yán)重時(shí)的應(yīng)急性修復(fù)方式五、細(xì)胞周期檢查點(diǎn)控制是真核生物誘導(dǎo)修復(fù)的主要機(jī)制第三節(jié)DNA損傷和修復(fù)的生物學(xué)意義、DNA損傷的檢測(cè)一、DNA損傷和修復(fù)具有重要的生物學(xué)意義二、DNA損傷的檢測(cè)第八章基因表達(dá)的調(diào)控【目的要求】掌握：1、管家基因、誘導(dǎo)表達(dá)、阻遏表達(dá)、協(xié)調(diào)表達(dá)、基因表達(dá)調(diào)控、反式作用因子、負(fù)調(diào)控、正調(diào)控的概念；2、原核生物乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制；3、真核生物基因表達(dá)在DNA水

17、平、轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制。熟悉：1、反式作用因子的基本特征和調(diào)節(jié)方式。了解1、色氨酸操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制。2、反式作用因子結(jié)構(gòu)域模式和反式作用因子的作用方式。重點(diǎn)：1、原核生物乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制；2、真核基因轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制。難點(diǎn)：1、原核生物乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制。自學(xué)：1、基因表達(dá)的“統(tǒng)一理論”。2、原核生物翻譯水平的調(diào)控機(jī)制。3、真核生物翻譯水平和翻譯后水平調(diào)控的基本環(huán)節(jié)。【授課學(xué)時(shí)】6學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)原核生物基因表達(dá)的主要在轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)水平一、轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是原核生物的主要調(diào)控環(huán)節(jié)第二節(jié)真核生物基因表達(dá)的調(diào)控是多級(jí)調(diào)控一、真核生物基因表達(dá)可在DNA水平進(jìn)行調(diào)

18、控二、真核基因轉(zhuǎn)錄是由激活的反式作用因子調(diào)控三、mRNA的加工和運(yùn)輸可形成轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控四、microRNA第九章細(xì)胞間通訊與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)【目的要求】掌握：1、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、受體的概念；G蛋白循環(huán)；2、細(xì)胞與細(xì)胞間的通訊方式；3、受體的作用、特點(diǎn)及分類；4、負(fù)責(zé)信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)傳遞與轉(zhuǎn)換的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子；熟悉：1、G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的基本步驟；2、胰島素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要步驟。了解1、細(xì)胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。2、G蛋白偶聯(lián)受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。3、胰島素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。4、Y-干擾素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。5、TGF-0受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。重點(diǎn)：1、負(fù)責(zé)信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)傳遞與轉(zhuǎn)換的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。難點(diǎn)

19、：1、負(fù)責(zé)信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)傳遞與轉(zhuǎn)換的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。自學(xué)：1、膜離子通道受體、血管緊張素II受體及TNFa受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo);2、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能與醫(yī)學(xué)?！臼谡n學(xué)時(shí)】3學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)細(xì)胞通訊一、細(xì)胞間隙連接通訊二、膜表面分子接觸通訊三、化學(xué)信號(hào)倡導(dǎo)的通訊第二節(jié)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制概述一、信號(hào)必須經(jīng)由愛體發(fā)揮作用二、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子負(fù)責(zé)信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)的傳遞與轉(zhuǎn)換三、信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)換和傳遞機(jī)制第三節(jié)脂溶性化學(xué)信號(hào)的受體是位于細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子第五節(jié)G蛋白偶聯(lián)受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制一、G蛋白偶聯(lián)受體轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)的基本方式二、P腎上腺能受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)第六節(jié)酶偶聯(lián)受體依靠蛋白質(zhì)相互作用轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)一、酶偶聯(lián)受體的分類

20、二、胰島素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)三、Y-干擾素受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路四、TGF-p受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路第十章細(xì)胞增生和凋亡的分子機(jī)制【目的要求】掌握：1、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡的概念；細(xì)胞周期及細(xì)胞周期中的關(guān)卡；2、細(xì)胞周期中關(guān)卡的作用；3、細(xì)胞周期的調(diào)控蛋白質(zhì)；4、凋亡途徑中的胱天蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)；熟悉：1、細(xì)胞調(diào)亡的形態(tài)學(xué)變化；2、細(xì)胞凋亡與細(xì)胞死亡的區(qū)別。了解：1、死亡受體凋亡途徑；2、線粒體凋亡途徑；3、調(diào)控蛋白協(xié)同作用調(diào)控細(xì)胞周期。重點(diǎn)：1、細(xì)胞周期的調(diào)控蛋白質(zhì)。難點(diǎn)：1、凋亡途徑中的胱天蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)?！臼谡n學(xué)時(shí)】3學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)生長(zhǎng)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)活化細(xì)胞周期進(jìn)程是細(xì)胞增生的分子機(jī)制

21、一、細(xì)胞經(jīng)歷細(xì)胞周期而增生二、有許多蛋白質(zhì)參與調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程三、調(diào)控蛋白協(xié)同作用調(diào)控細(xì)胞周期四、生長(zhǎng)因子等細(xì)胞外因素通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控細(xì)胞周期第二節(jié)細(xì)胞凋亡是一種自發(fā)的程序化細(xì)胞死亡一、細(xì)胞凋亡機(jī)制涉及胱天蛋白酶的級(jí)還將有活化二、死亡受體途徑及線粒體途徑是兩種主要的凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑第十一章基因分析的基本策略目的要求】掌握：1、基本概念：DNA序列分析技術(shù)，核酸分子雜交，PCR,實(shí)時(shí)熒光定量PCR，Westernblot。2、雙脫氧鏈終止法的基本原理。3、核酸分子雜交的原理。4、用SouthernBlot進(jìn)行基因拷貝數(shù)分析時(shí)的關(guān)鍵步驟。5、PCR技術(shù)的基本原理、反應(yīng)體系及基本過程。6、RT-PC

22、R及其基本過程。熟悉：1、基本概念：Tm，DNA復(fù)性，PCR引物。2、化學(xué)裂解法測(cè)定DNA序列的優(yōu)缺點(diǎn)。3、DNA自動(dòng)化測(cè)序中終止標(biāo)記系統(tǒng)的基本原理。4、DNA變性及其影響因素。5、探針常見的非同位素標(biāo)記方式有哪些？6、TaqDNAPolymerase的特點(diǎn)。7、實(shí)時(shí)熒光定量PCR常見的標(biāo)記系統(tǒng)有哪些？8、TaqMan探針的要素及原理。了解：1、化學(xué)裂解法測(cè)序的技術(shù)路線2、其他雜交類型的基本知識(shí)Northernblot、斑點(diǎn)雜交、原位雜交3、PCR引物設(shè)計(jì)的一般規(guī)律4、非常規(guī)測(cè)序焦磷酸測(cè)序、DNA芯片測(cè)序5、分子燈塔探針的原理6、定量RTPCR重點(diǎn)：1、基本概念：DNA變性、DNA復(fù)性、退火、

23、Tm、探針2、DNA雙脫氧末端終止法測(cè)序、Southern雜交、PCR及Real-timePCR技術(shù)原理3、PCR引物設(shè)計(jì)的基本要求難點(diǎn)：1、影響雜交的因素及探針的標(biāo)記2、PCR的反應(yīng)條件控制3、利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行絕對(duì)、相對(duì)定量分析授課學(xué)時(shí)】5學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)利用DNA定性定量分析可從不同角度對(duì)基因和基因組進(jìn)行研究、DNA序列測(cè)定可以揭示基因和基因組以及結(jié)構(gòu)：Sanger雙脫氧鏈終止法，Maxam-Gilbert化學(xué)裂解法，DNA測(cè)序自動(dòng)化（引物標(biāo)記系統(tǒng)，終止標(biāo)記系統(tǒng)），非常規(guī)測(cè)序（焦磷酸測(cè)序，DNA芯片測(cè)序）；基因及基因組一級(jí)結(jié)構(gòu)變化在醫(yī)學(xué)研究中的意義。二、Soutern雜交

24、和PCR等技術(shù)可分析基因拷貝數(shù)的變化：、核酸分子雜交：Southern印跡雜交，其他種類雜交簡(jiǎn)介（Northernblot、斑點(diǎn)雜交、原位雜交）、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，實(shí)時(shí)PCR（realtime-PCR）技術(shù)（標(biāo)記系統(tǒng)，絕對(duì)定量,相對(duì)定量）第二節(jié)利用RNA定性定量分析可從不同角度揭示基因表達(dá)活性一、RNA定性定量分析可在轉(zhuǎn)錄水平分析基因表達(dá)：RT-PCR，定量RT-PCR第三節(jié)利用蛋白質(zhì)的定性定量定位分析也可揭示基因的表達(dá)活性一、Westernblot可對(duì)細(xì)胞總蛋白質(zhì)中的特定基因產(chǎn)物進(jìn)行鑒定：Westernblot第十二章基因功能分析的基本策略【目的要求】掌握：1、基本概念：反義RNA技術(shù)、RNA

25、干涉、RNA干涉技術(shù)2、RNAi引發(fā)基因沉默的機(jī)制（RNAi的基本原理）熟悉：1、反義RNA2、RNAi的生物學(xué)特性重點(diǎn)：RNAi技術(shù)的原理及一般研究技術(shù)路線難點(diǎn)：核酸分子的反義鏈與正義鏈【授課學(xué)時(shí)】2學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第三節(jié)通過抑制或沉默基因表達(dá)對(duì)基因的功能進(jìn)行分析研究一、利用反義RNA抑制基因表達(dá)水平二、利用RNAi技術(shù)在細(xì)胞中沉默特定基因以研究其功能第十三章基因工程與基因體外表達(dá)目的要求】掌握：1、基本概念：基因工程，DNA重組，克隆載體，質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)導(dǎo),轉(zhuǎn)染，表達(dá)系統(tǒng)。2、限制性核酸內(nèi)切酶及其識(shí)別位點(diǎn)特征。3、質(zhì)粒載體應(yīng)該具備的特性。4、基因工程技術(shù)的基本過程。熟悉：1、基本概念：表達(dá)

26、載體，基因組文庫(kù)，cDNA文庫(kù)2、DNA連接酶及其在基因工程中的主要用途。3、DNA聚合酶I在基因工程中的主要用途。重點(diǎn)：重組DNA技術(shù)的基本過程難點(diǎn)：工具酶和載體及其主要用途授課學(xué)時(shí)】4學(xué)時(shí)教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)基因克隆是利用工具酶進(jìn)行操作一、限制性核酸內(nèi)切酶在基因克隆中用于切割DNA二、基因克隆需要具有不同功能的工具酶第二節(jié)基因克隆需要特定的DNA載體一、常用克隆載體主要來自質(zhì)粒和病毒二、表達(dá)載體將外源基因帶入宿主并進(jìn)行表達(dá)第三節(jié)基因克隆的過程包括五個(gè)基本部分一、采用不同方法獲取目的基因二、依據(jù)基因克隆的目的選擇和準(zhǔn)備載體三、選擇合適的策略將DNA片段進(jìn)行連接四、重組DNA需要導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)

27、增五、重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞后需要進(jìn)行篩選與鑒定第四節(jié)真核細(xì)胞可利用不同方法進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染一、真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法與基本原理二、轉(zhuǎn)染細(xì)胞可利用抗性標(biāo)記進(jìn)行篩選第十四章基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)變化與疾病的關(guān)系【目的要求】掌握：1、基因突變的概念、類型及其遺傳學(xué)效應(yīng)；2、功能克隆及定位克隆的概念熟悉：1、基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)與疾病的研究策略；2、功能克隆及定位克隆的方法了解：1、基因突變與疾病發(fā)生；2、血紅蛋白病等常見單基因病的發(fā)病分子機(jī)制。重點(diǎn)：基因突變的類型及其遺傳學(xué)效應(yīng)；基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)與疾病的研究策略功能克隆及定位克隆的概念及方法難點(diǎn)：基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)與疾病的研究策略；功能克隆及定位克隆的方法【授課學(xué)時(shí)】6學(xué)時(shí)【

28、教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)不同基因通過不同機(jī)制導(dǎo)致疾病發(fā)生一、基因結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)或量變化引起疾病二、細(xì)胞間信號(hào)異常導(dǎo)致基因表達(dá)異常引起疾?。蝗?、細(xì)胞內(nèi)因素導(dǎo)致基因表達(dá)異常引起疾病四、不同的病原微生物通過不同的方式引起疾病第二節(jié)基因引起疾病的特定原因和機(jī)制需要采取不同策略進(jìn)行研究一、通過結(jié)構(gòu)分析確定基因變異在疾病發(fā)生中的作用二、通過基因表達(dá)水平分析確定基因在疾病發(fā)生中的作用三、通過功能學(xué)研究確定基因在疾病發(fā)生中的作用第三節(jié)采用功能克隆和定位克隆等技術(shù)鑒定疾病相關(guān)基因一、疾病相關(guān)基因主要是指一定程度上與疾病的發(fā)生有關(guān)的基因二、功能克隆是利用蛋白質(zhì)的表達(dá)及功能信息分離鑒定未知基因三、定位克隆是利用基

29、因在染色體的位置信息分離鑒定未知基因四、人類基因組計(jì)劃的完成為疾病相關(guān)基因的克隆創(chuàng)造了新條件第十九章在基因水平診斷疾病【目的要求】掌握：1、基因診斷的概念2、常用基因診斷策略、基本技術(shù)熟悉：遺傳病、腫瘤及感染性疾病的基因診斷策略及方法。了解：1、基因診斷特點(diǎn)；2、基因診斷的發(fā)展；3、基因診斷臨床應(yīng)用中存在的問題；4、幾種常見遺傳病的基因診斷。重點(diǎn)：常用基因診斷策略、基本技術(shù)難點(diǎn)：基因診斷的基本技術(shù)【授課學(xué)時(shí)】：4學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)目標(biāo)序列的識(shí)別和定性定量分析師基因診斷的基礎(chǔ)一、核酸分子雜交和PCR擴(kuò)增是基因診斷的基礎(chǔ)技術(shù)二、基因診斷有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)第二節(jié)對(duì)不同的疾病需要采用不同的基因診斷策略

30、一、通過致病基因的檢測(cè)診斷疾病二、通過連鎖遺傳標(biāo)志檢測(cè)診斷疾病三、通過表型克隆建立疾病基因診斷指標(biāo)四、通過基因表達(dá)的定量分析診斷疾病第三節(jié)基因診斷為醫(yī)學(xué)的發(fā)展開辟了廣闊的前景一、基因診斷經(jīng)歷了三個(gè)基本發(fā)展階段二、基因診斷技術(shù)的應(yīng)用尚存在理論、技術(shù)和倫理問題三、基因診斷有巨大的發(fā)展前景第四節(jié)用基因診斷技術(shù)檢測(cè)遺傳病一、基因診斷是遺傳病預(yù)防的最有效手段二、直接診斷和間接診斷是遺傳病基因診斷的兩種基本策略三、幾種可進(jìn)行基因診斷的遺傳病第五節(jié)用基因診斷技術(shù)診斷感染性疾病一、對(duì)不同的腫瘤要選擇不同的基因診斷策略二、通過檢測(cè)腫瘤染色體異位及融合基因診斷腫瘤三、通過檢測(cè)癌基因和抑癌基因診斷腫瘤四、通過檢測(cè)腫

31、瘤相關(guān)病毒診斷腫瘤五、通過檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物基因或mRNA診斷腫瘤第六節(jié)用基因診斷技術(shù)診斷感染性疾病一、基因診斷在感染性疾病診斷中具有獨(dú)特的優(yōu)越性二、用基因診斷技術(shù)診斷病毒感染性疾病三、用基因診斷技術(shù)診斷細(xì)菌感染性疾病四、用基因診斷技術(shù)診斷寄生蟲感染性疾病第二十章基因治療研究【目的要求】掌握：1、基因治療的概念、基本策略；2、常用載體、及非病毒介質(zhì)；熟悉：1、基因轉(zhuǎn)移的基本技術(shù)；2、基因干預(yù)的原理及方法；了解：基因轉(zhuǎn)移的靶細(xì)胞；治療基因的受控表達(dá)原理與方法；基因治療的應(yīng)用研究；基因治療的前景與問題；重點(diǎn)：基因治療的概念、基本策略；常用載體、及非病毒介質(zhì)；基因干預(yù)的原理及方法；難點(diǎn)：基因轉(zhuǎn)移的基本技術(shù)；基因干預(yù)方法；【授課學(xué)時(shí)】：4學(xué)時(shí)【教學(xué)內(nèi)容】第一節(jié)針對(duì)不同疾病可以采用不同的基因治療策略一、基因置換可以矯正缺陷基因二、基因添加使細(xì)胞表達(dá)原來不能表達(dá)的蛋白三、基因干預(yù)是抑制特定基因的表達(dá)四、導(dǎo)入自殺基因可產(chǎn)生細(xì)胞自殺效應(yīng)五、基因修飾能夠改變細(xì)胞的功能特性第二節(jié)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)主要有生物學(xué)法和非生物學(xué)法兩大類一、基