實驗四血凝與血凝抑制試驗

1、關于實驗四血凝和血凝抑制試驗第一張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月一、實驗目的 掌握血凝和血凝抑制試驗的原理，以及使用該試驗測定血清抗體水平的操作步驟和結果判定方法。第二張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月二、實驗原理（一）血凝試驗（HA）有些病毒能夠促使某些動物（如雞、鵝、豚鼠、綿羊）和人的紅細胞發(fā)生凝集，這就是紅細胞凝集現(xiàn)象，稱做血凝試驗。病毒凝集紅細胞是一種較為普遍的現(xiàn)象，可以作為病毒鑒定的一個指標。第三張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月HA試驗的原理圖第四張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月病毒血凝素與完整成熟的病毒顆粒結合較密切，不經特殊化學方法處理不能分開。例如

2、流感、腮腺炎、新城疫等病毒，病毒游離下來后，紅細胞不能再次被凝集。病毒凝集紅細胞可以分為3種類型第五張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月病毒血凝素與完整成熟的病毒顆粒易于分開，血凝素呈游離狀態(tài)，例如天花、牛痘、鼠痘等病毒，它們的凝集現(xiàn)象是可逆的。象各種腦炎病毒、口蹄疫病毒等，凝集紅細胞的條件很嚴格，對紅細胞的種類有很嚴格的選擇，同時還要掌握反應的pH和溫度等。 第六張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）血凝抑制試驗（HI）當病毒懸液中加入特異性抗體時，這種紅細胞凝集的現(xiàn)象就被抑制，稱做紅細胞凝集抑制試驗，也叫血凝抑制試驗。第七張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月HI試驗的原理圖

3、第八張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月三、試驗材料雞新城疫病毒：雞新城疫弱毒株（Lasota）接種雞胚、收獲尿囊液制備。雞紅細胞：采集健康雞血液，以阿氏液抗凝，以生理鹽水洗滌35次，將血漿、白細胞等充分洗去，用生理鹽水配置成1%紅細胞懸液使用。0.85%生理鹽水。被檢血清，采自被檢雞的血清。第九張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月四、操作步驟（一）血凝試驗（HA）在血凝板第一排的112孔加入50l生理鹽水。在第1孔中加入50l病毒抗原，反復吸取混勻后吸50l到第2孔，如此倍比稀釋直到第10孔，混勻后棄50l；最后兩孔（11、12）為細胞對照。第十張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6

4、月將1%的紅細胞輕輕搖動混勻，在112孔中每孔加入50l。手工震蕩，37靜置30min后觀察結果。結果觀察（血凝價是1：？）。第十一張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月1:21 1:22 1:23 1:24 1:25 1:26 1: 27 1: 28 1: 29 1: 210 C C 以50%的紅細胞發(fā)生凝集的病毒懸液的最高稀釋度作為血凝價的終點，即一個血凝單位。第十二張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）血凝抑制試驗（HI）在血凝板的112孔加入50l生理鹽水，最后一孔加100l。第1孔加入待檢血清50l，混勻后吸50l至第2孔，倍比稀釋直至第10孔，混勻后棄50l。從111孔，每孔加稀釋好的50l 4個血凝單位的病毒懸液。如果血凝價為1:28，那么4個血凝單位就是1:26第十三張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月將1%的紅細胞輕輕搖動混勻，在112孔中每孔加入50l。手工震蕩，在37靜置30min后觀察結果。結果判定（血凝抑制價是1：？，被檢血清為陰/陽性）。第十四張，PPT共十七頁，創(chuàng)作于2022年6月HA試驗HI試驗第十五張，PPT共十