阿司匹林含量測(cè)定綜述

1、阿司匹林原料藥及制劑的含量測(cè)定方法摘要：本文對(duì)阿司匹林原料藥及制劑常見的含量測(cè)定方法的原理、步驟、計(jì)算公式以及 各方法的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了介紹和綜述。關(guān)鍵詞：阿司匹林；原料藥 ；制齊J;含量檢測(cè).前言：性，利用酸堿反應(yīng)反應(yīng)測(cè)定其含量。原理：COOHCOONa- NaOH _aOCSH測(cè)定方法：取本品約0.4g ,精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚丈指示液顯中性）20mL溶解后，加酚吹指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L ）滴定。每1mL的氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L ）相當(dāng)于 18.02mg 的 GHO計(jì)算公式：NaOHW定度T=0.1阿司匹林，化學(xué)名為 2-（乙酰氧基） 苯甲酸，作為解熱鎮(zhèn)痛

2、抗炎藥臨床上 用于治療感冒發(fā)燒，牙痛、肌肉痛及神 經(jīng)痛等慢性疼痛，急、慢性風(fēng)濕病及 類風(fēng)濕病等，還是各種心血管疾病的 預(yù)防、治療藥物。另外，在近年的流 行病學(xué)研究結(jié)果顯示，阿司匹林與許 多疾病的有相關(guān)性，因此阿司匹林在 歷經(jīng)百余年的使用仍煥發(fā)出新的活力。 為了避免阿司匹林的胃腸道副作用，隨著現(xiàn)代藥學(xué)技術(shù)的發(fā)展，目前已有 片劑、腸溶劑、泡騰片、栓劑和散劑 等多種劑型，測(cè)定方法也各不相同。 由于阿司匹林的藥效受劑量影響較大， 因此方便而準(zhǔn)確的含量測(cè)定方法是阿 司匹林的臨床研究及應(yīng)用有著至關(guān)重 要的因素。因此，本文試圖對(duì)其作一 綜述。.阿司匹林原料藥的含量檢測(cè)方法酸堿滴定法直接滴定法阿司匹林結(jié)構(gòu)中具

3、有竣基，顯酸X 180.16 X （1/1）=18.02 （mg/ml）F=M（實(shí)際）/M（規(guī)定）含量（ = （VX TX F） /WX 100%（V為滴定液體積（ml）; T為氫 氧化鈉的滴定度，W為供試品稱樣量（g）; F為滴定液濃度校正因子（F= 滴定液實(shí)際濃度/滴定液規(guī)定濃度）討論：本法專屬性較差，易受 阿司匹林的水解及其產(chǎn)物、有機(jī)酸類 穩(wěn)定劑的干擾，使用時(shí)應(yīng)注意規(guī)范操 作，避免水解引起的偏差。水解后剩余量滴定法阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性溶液中易 于水解的特性，直接滴定易引起偏差， 則加入定量過量的氫氧化鈉滴定液， 加熱使酯鍵水解后，再用硫酸滴定液 回滴定剩余的氫氧化鈉滴定液。原理：網(wǎng)1r

4、/y加欣二 cum岫M .慟T N副I岫測(cè)定方法：取本品1.5g,精密稱定，加氫氧 化鈉滴定液(0.5mol/L ) 50.0ml ,混 合，緩緩煮沸10min,放冷，加酚吹指 示液，用硫酸滴定液(0.25mol/L )滴 定，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。計(jì)算公式：從上述反應(yīng)式可知：阿司匹林與硫酸的摩爾比為1:1硫酸的 T=0.25 X ( 1/1 ) X 180.16=45.04(mg/ml)含量( =(V0-V) XFXT/ W100%(V0為空白試驗(yàn)消耗硫酸滴定液 的體積(ml); V為樣品測(cè)定時(shí)消耗硫 酸滴定液的體積(ml); W為阿司匹林 樣品的稱取量(g);F為硫酸的濃度校 正因數(shù)

5、；T為硫酸溶液的滴定度)討論：消除了酸性雜質(zhì)和酯鍵水解的干擾毛細(xì)管電泳法原理：劉海興等建立了毛細(xì)管 電泳測(cè)定阿司匹林中乙酰水楊酸含量 的新方法。確定的優(yōu)化緩沖溶液是 30 mmoJ/L硼砂溶液，pH為9. 02。電泳 電壓為320kV,紫外檢測(cè)波長為214nm 在此條件下水楊酸和乙酰水楊酸分離 度較好，并測(cè)得了阿司匹林中乙酰水 楊酸的含量。【2】測(cè)定方法：依次用0.1 mol/L HCl、重蒸儲(chǔ)水、1 mol/L NaOH、重蒸 儲(chǔ)水各沖洗5分鐘，然后用緩沖溶液沖 洗5分鐘。每兩次運(yùn)行之間，毛細(xì)管僅 用緩沖溶液沖洗5分鐘。三次運(yùn)行之 后，毛細(xì)管需用上面的方法再清洗一 回。運(yùn)行電壓為20 kV,

6、紫外檢測(cè)波長 為214 nm,實(shí)驗(yàn)溫度是20C ,重力進(jìn)樣 時(shí)間為5 s(12 cm高度差)。配制一系 列乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。在 30 mmol/ L硼砂溶液(pH=9.02)條件下運(yùn)行各個(gè) 溶液。每種溶液分別運(yùn)行三次，取平均 值。以譜圖中峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為 橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到的線性回 歸方程。再配制樣品，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線 得到樣品濃度。計(jì)算公式：原阿司匹林樣品溶 液的濃度=CX f(C為阿司匹林樣品稀釋溶液的濃度(g/L ) ； f為稀釋倍數(shù))討論：毛細(xì)管電泳以其高效、 快速、微量的優(yōu)勢(shì)，在藥物分析中得到 了廣泛應(yīng)用，本法具有簡便、快速、 準(zhǔn)確特點(diǎn)。反相高效液相色譜法原理：李琳麗等建

7、立了一種適 用于阿司匹林穩(wěn)定性及其降解動(dòng)力學(xué) 研究含量測(cè)定的反相高效液相色譜法。 選用 ShimadzuODSft(250mnX 4.6mm 5m),以乙月青為溶劑，流動(dòng)相為甲醇一 水一冰醋酸(40 : 60: 6,鹽酸調(diào)節(jié)pH 為2.5),檢測(cè)波長280nm柱溫40 C, 流速為1.0mL/min ,采用導(dǎo)數(shù)色譜法鑒 定了色譜峰純度。結(jié)果顯示在選定色 譜條件下，阿司匹林能與相鄰雜質(zhì)完 全分離。阿司匹林在 601800仙g/mL 范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好 (r=0.9998);平均回收率為 100.6%, RSM 1.3%,重復(fù)性試驗(yàn)RSM 0.9 % (n=5)。高、中、低3個(gè)濃度的

8、精密度 試驗(yàn)RSD勻小于1.4 %(n=5)。測(cè)定方法：精密稱取樣品150mg 置50mL*瓶中，加意境適量溶解并稀 釋至刻度；精密稱取10mL置25mL 瓶中，用乙月青稀釋至刻度，搖勻，作 為供試品溶液，取15仙L注入液相色 譜儀，記錄峰面積。制備對(duì)照品溶液(含阿司匹林1200Ng/mL) 15仙L,同 法測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算阿司匹林含量。計(jì)算公式：原阿司匹林樣品溶 液的濃度=CX f(C為阿司匹林樣品稀釋溶液的 濃度(g/L ) ； f為稀釋倍數(shù))討論：該方法快速簡便，結(jié)果 準(zhǔn)確可靠，可作為阿司匹林穩(wěn)定性及 降解動(dòng)力學(xué)研究的含量測(cè)定方法?？梢姺止夤舛确ㄔ恚褐炝v等研究了用分光 光度法快速、

9、準(zhǔn)確測(cè)定阿司匹林(ASP) 中水楊酸(SA)含量的方法。以 FeCl3 為顯色劑，通過測(cè)含雜質(zhì)的阿司匹林 溶液的吸光度來測(cè)定其中 SA含量，考 慮了 pH、溫度、反應(yīng)時(shí)間、顯色劑用 量等因素對(duì)絡(luò)合物生成量及穩(wěn)定性的 影響，確定了最適宜的測(cè)定條件，并繪 制了標(biāo)準(zhǔn)工作曲線.結(jié)果表明，在pH值 =3 的 CH3COOH-CH3COONa溶液中， Fe3+與SA生成較穩(wěn)定的絡(luò)合物，絡(luò)合 比為1:1,常溫下10min即可絡(luò)合完全， 該絡(luò)合物的最大吸收波長為512nm該 定量方法測(cè)量誤差在2.5%以內(nèi)。測(cè)定方法：確量取不同體積的 標(biāo)準(zhǔn)水楊酸(SA)溶液(0.01mol/L)與3. 00mL Fe3+(0.

10、01mol/L)標(biāo)準(zhǔn)溶液于 50 mL容量瓶中，用pH值=3的緩沖液定容 配制成不同濃度的SA-Fe3+ 容液。以F e3+空白溶液作為參比液，分別測(cè)定每組溶液吸光度，繪制吸光度隨水楊酸 濃度變化的標(biāo)準(zhǔn)曲線。當(dāng)SA濃度在0 70仙g/mL即所取SA標(biāo)準(zhǔn)液體積在0 2.5mL之間時(shí)，吸光度與濃度呈良好的 線性相關(guān)。對(duì)該曲線線性擬合，得線性 方程。準(zhǔn)確稱取阿司匹林待測(cè)樣品m(g),用V0(mL)體積乙醇溶解后(V0視m 而定，為保證試樣完全溶解,V0 40m L),若有不溶雜質(zhì)存在，需用濾紙過濾。 量取濾液V(mL)于50mL|f量瓶中，加入 稍過量Fe3切色齊1J,用pH值=3的CH3 COOH

11、-CH3COO締中溶液稀釋至亥ij度 后測(cè)吸光度。計(jì)算公式：w(SA)=CX 50 X V0 VX 1000X mx 100%討論：該方法快速簡便，結(jié) 果準(zhǔn)確可靠，可作為阿司匹林穩(wěn)定性 及降解動(dòng)力學(xué)研究的含量測(cè)定方法。.阿司匹林制劑的含量檢測(cè)方法兩步滴定法因阿司匹林片劑中除存在其水解 產(chǎn)物水楊酸及醋酸外，在制劑工藝中 添加了抑制阿司匹林水解的穩(wěn)定劑酒 石酸或枸檬酸，因而采用此法。兩步滴定法系指測(cè)定過程分兩步 進(jìn)行：第一步中和制劑中的酸性水解 產(chǎn)物和酸性穩(wěn)定劑(同時(shí)中和阿司匹林的游離竣基)，以消除其干擾；第 步水解與滴定，即水解后剩余量滴定 法?！?】原理：中和：水解與滴定:測(cè)定方法：中和：取本

12、品10片，精密稱定， 研細(xì)，精密稱取片粉適量(約相當(dāng)于 阿司匹林0.3g),置錐形瓶中，加中性 乙醇(對(duì)酚猷指示劑顯中性)20ml, 振搖使阿司匹林溶解，加酚吹指示液3 滴,滴加氫氧化鈉滴定液(0.1mol/ml) 至溶液顯粉紅色。此時(shí)中和了供試品 中存在的游離酸，阿司匹林也同時(shí)成 為鈉鹽。水解與滴定：在中和后的供試品 溶液中，精密加氫氧化鈉滴定液(0.1 mol/ml ) 40ml,置水浴上加熱15分鐘 并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫 酸滴定液(0.05mol/ml)滴定，并將滴 定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。計(jì)算公式：從上述反應(yīng)式可知：阿司匹林與 硫酸的摩爾比為2: 1硫酸的 T=0.05X

13、（2/1） X 180.16=18.02 （mg/ml）標(biāo)示量 =（V0-V） XFXTX W（平 均）/ （WX標(biāo)示量）X 100%（VD為空白試驗(yàn)消耗硫酸滴定液 的體積（ml）; V為樣品測(cè)定時(shí)消耗硫 酸滴定液的體積（ml）; F為硫酸滴定 液的濃度校正因數(shù)；T為硫酸的滴定度 （mg/ml）； W為供試品片粉的取樣量 （g）；W（平均）為供試品的平均片重（g）;標(biāo)示量為片劑的規(guī)格（mg/片）討論：兩步滴定法是水解后剩 余滴定法的改進(jìn)，第二步也應(yīng)做空白 試驗(yàn)。柱分配色譜-紫外分光光度法原理：采用柱色譜分離法消除 阿司匹林膠囊和栓劑中輔料及降解產(chǎn) 物的干擾。測(cè)定方法：色譜柱的制備：于 玻璃柱（

14、20cm x 2.5cm）下端塞入少量 玻璃棉，裝入硅藻土 3g和新制碳酸氫 鈉（1-12）2ml的混合填充劑。對(duì)照溶 液的制備：取阿司匹林對(duì)照品約50mg 精密稱定，置50ml量瓶中，加冰醋酸0.5ml，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度， 混勻。精密量取5ml,置100ml量瓶中， 用冰醋酸三氯甲烷（1-100）稀釋至 刻度，混勻。制成每1ml中約50ug的 溶液。供試品的制備：取膠囊20粒，盡 可能完全傾出內(nèi)容物，精密稱定，研 細(xì)，混勻；取細(xì)粉適量（相當(dāng)于阿司匹 林50mg）,精密稱定，置50ml量瓶中， 加鹽酸甲醇溶液（1-50） 1ml,加三 氯甲烷稀釋至刻度，混勻。精密量取5 ml,移至色

15、譜柱填充劑上，用三氯甲 烷5ml、25ml相繼洗滌，棄去洗液， 用冰醋酸三氯甲烷溶液（1-50） 10ml 洗滌后，再用冰醋酸三氯甲烷溶液（1 -100） 85ml洗脫，收集洗脫于100ml 量瓶中，并用冰醋酸三氯甲烷溶液（1 -100）稀釋至刻度，混勻。測(cè)定法：用1cm吸收池，以三氯 甲烷為空白，立即于最大吸收波長 28 0nm處測(cè)定對(duì)照溶液和供試溶液的吸 光度。計(jì)算公式：阿司匹林（mg =CR X （AX/AR）（CR為阿司匹林對(duì)照溶液濃度（u g/ml ）; AX和AR分別為供試溶液和對(duì) 照溶液的吸光度）高效液相色譜法原理：附加成分顯著影響主成分的測(cè)定，如在主成分最大吸收波長 處有顯著吸

16、收。則使用高效液相色譜 分離檢測(cè)?！?】測(cè)定方法：用ODS柱，以乙月青-四氫味喃-冰 醋酸-水（20: 5: 5: 70）為流動(dòng)相； 檢測(cè)波長為276nm理論板數(shù)按阿司匹 林峰計(jì)算不低于3000,阿司匹林峰與 水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。取本 品精密稱定，置小燒杯中，在40-50C 水浴上微溫熔融，在不斷攪拌下冷卻 至室溫，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿 司匹林0.1g）,置50ml量瓶中，力口 1% 冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻， 置冰浴中冷卻1小時(shí)，取出，迅速濾 過，取續(xù)濾液作為供試品貯備液。精 密量取供試品貯備液5ml,置100ml量 瓶中，用1麻醋酸的甲醇溶液稀釋至 刻度，搖勻，精密量取

17、1ul ,注入液相 色譜儀，記錄色譜圖；另取阿司匹林 對(duì)照品，精密稱定，加1%K醋酸的甲 醇溶液振搖使溶解并定量稀釋制成每 1ml中約含0.1mg的溶液，同法測(cè)定， 按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。計(jì)算公式：標(biāo)示量%= CRX （AX /AR）義DX W”均）/（W X標(biāo)示量） X 100%（CR為對(duì)照品溶液濃度（mg/ml）； AX和AR分別為供試品溶液和對(duì)照品溶液的峰面積；D為稀釋體積（ml, D=5 0X 100/5=1000）; W為栓劑熔融物取樣 量（g）； W均）為栓劑平均粒重（g）; 標(biāo)示量為栓劑規(guī)格（mg成）線性掃描伏安法原理：蔡卓等人以玻碳電極為 指示電極，用線性掃描伏安法測(cè)定水

18、 楊酸，從而間接測(cè)定阿司匹林.在硫酸 -硫酸鉀底液中，水楊酸在玻碳電極上 產(chǎn)生一靈敏的氧化峰，峰電位為1.16 V;在 4.0 義 10-5mol/L8.0 義 10-3mol/ L濃度范圍內(nèi)水楊酸與峰電流呈良好 線性關(guān)系，最低檢測(cè)濃度為2.0 乂 10-5 mol/L o 測(cè)定方法：取10 mL待測(cè)溶液 置于電解杯中，在CH I600電化學(xué)工作 站上用線性掃描伏安法測(cè)定。儀器參 數(shù)設(shè)置為：掃描電位范圍0.5 V1.5 V, 掃描速率0.1 V/s,靜止時(shí)間2 s.讀取 1.16 V處的峰電流（P229圖1）.測(cè)定前, 玻碳電極用氧化鋁糊狀液拋光，再用 去離子水沖洗干凈，用濾紙吸干表面 水分。

19、選擇一系列試劑作為支持電解 質(zhì)，與水楊酸形成測(cè)定體系，在CH I60 0電化學(xué)分析儀上選擇不同參數(shù)進(jìn)行 測(cè)定，觀察支持電解質(zhì)組成變化對(duì)峰 電流的影響，確定最佳的測(cè)定體系和 測(cè)定條件。工作曲線制作：取7個(gè)25 mL容 量瓶，依次加入由實(shí)驗(yàn)選定的測(cè)定體 系和不同體積的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，用 水定容.在選定儀器條件下進(jìn)行伏安 掃描，讀取峰電流.以水楊酸濃度對(duì)峰 電流做一元線性回歸，即得工作曲線。樣品測(cè)定：稱取一定量阿司匹林 樣品，先用少量0.1mol/NaOH溶解同時(shí) 水解成水楊酸，待反應(yīng)完全后（約10m in）,再用 0.1 m o l/L N aOH 定容。計(jì)算公式：根據(jù)工作曲線計(jì)算 含量，將峰電流

20、代入回歸方程，求得 濃度。討論：線性掃描伏安法具有簡 便、快速、儀器簡單的特點(diǎn)，不需要使 用昂貴的儀器，也不需要繁瑣的制備 離子電極，可用于阿司匹林藥片制劑 含量的快速測(cè)定。同步掃描熒光光譜法原理：同步掃描熒光光譜法單 次掃描同時(shí)測(cè)定阿司匹林和水楊酸雙 組分的方法。熒光光度計(jì)同步掃描時(shí)， 得到兩組分互不干擾的熒光峰，借此 分別測(cè)定兩組分的含量。測(cè)定方法：對(duì)照液：精密稱取 阿司匹林對(duì)照品適量，置100ml量瓶， 用乙醇定容。精密量取 2ml置100ml 量瓶，用乙醇定容，即得。供試品：精密稱取阿司匹林注射 液適量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇 定容，即得。用對(duì)照品溶液測(cè)定熒光強(qiáng)度與濃 度的線性關(guān)系后，再在每次測(cè)定前， 用一定濃度的對(duì)照品溶液校正儀器的 靈敏度；然后再相同的條件下，分別 讀取對(duì)照品溶液及其試劑空白的熒光 強(qiáng)度與供試品溶液及其空白的熒光強(qiáng) 度計(jì)算公式：CX = （RARXb / （RrRrb） 乂 Cr（CX和Cr為供試品溶液、對(duì)照 品溶液的濃度，RX供試品溶液熒光強(qiáng) 度，RXb供試品溶液試劑空白的熒光強(qiáng) 度，Rr對(duì)照品溶液的熒光強(qiáng)度，Rrb 為對(duì)照品溶液的試劑的空白熒光強(qiáng)度）討論：該法簡單、快速準(zhǔn)確、 易操作，二組分不互相干擾，測(cè)定速 度快，體系熒光性質(zhì)穩(wěn)定?？蓽p少制 樣和測(cè)定過程中阿司匹林的水解 ，因 而準(zhǔn)確度