2022年農業(yè)生物技術資料歸類考試題

1、一、名詞解釋1. 生物技術： 以現(xiàn)代生命科學為基礎，結合先進的科學技術手段和其它自然學科原理，按照預先設計的改造生物體或加工生物原料，為人類產生出所需要產品或達到某種目的的技術 2. 植物組織培養(yǎng)： 在無菌和人為控制的條件下，培養(yǎng)、研究植物組織器官，進而從中分 化發(fā)育出整體植株的技術。3. 細胞全能性： 具有完整細胞核的細胞，在適宜的條件下能夠分化成完整植株的潛在能 力。4. 愈傷組織： 具有分裂能力的一團細胞 5. 脫分化： 回復分裂能力的過程。6. 再分化： 生長由無序重新進入有序。7. 培養(yǎng)基： 供微生物、動植物組織生長、產生代謝產物或維持用的人工配置的營養(yǎng)基質。8. 植物離體快繁： 利

2、用植物組織培養(yǎng)技術，在離體條件下，對植物進行營養(yǎng)繁殖，使其 在短期內獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。9. 增殖系數(shù)： 接種一個芽或一塊增殖的培養(yǎng)物，經過一個生產年的培養(yǎng)后得到的芽和苗 的數(shù)量10. 褐變： 在組織培養(yǎng)的過程中，由于培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質導致培養(yǎng)基逐漸 變?yōu)楹稚?，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。11. 污染： 是指在培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基或培養(yǎng)材料上滋生真菌、細菌等微生物，使培養(yǎng)材 料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。12. 玻璃化： 細胞分裂與體積增大的速度超過了干物質產生和積累的速度，植物只能吸收 水分來充漲自己的體積。13. 莖尖培養(yǎng)脫毒 ：采取莖尖分生組織離體培養(yǎng)獲得

3、無毒幼苗的方法。14. 外植體： 植物組織培養(yǎng)中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織片段。15. 植物體細胞胚： 植物離體培養(yǎng)的細胞、組織、器官產生類似胚的結構，其形成也經歷 了一個類似合子胚胎發(fā)生和發(fā)育過程。16. 繼代培養(yǎng) ：愈傷組織培養(yǎng)一段時間后必須轉移到新鮮的培養(yǎng)基上以保持培養(yǎng)物質的正 常生長，更換一次培養(yǎng)基的過程。17. 原生質體： 除細胞壁以外細胞膜包被的物質。18. 單倍體 ：體細胞數(shù)等于配子染色體數(shù)的個體。19. 花藥培養(yǎng) ：用植物組織培養(yǎng)技術，把發(fā)育到一定階段的花藥，通過無菌操作技術，接 種在人工培養(yǎng)基上，形成愈傷組織或胚狀體，隨后使愈傷組織分化成完整的植株。（花藥 培養(yǎng)形成二倍體，

4、花粉培養(yǎng)形成單倍體和二倍體）20. 單倍體的鑒定： 莖尖或根尖細胞染色體計數(shù)、流式細胞儀分析細胞核 DNA含量、測量 葉片保衛(wèi)細胞長度21. 共培養(yǎng) ：植物細胞、 組織、器官與農桿菌一起培養(yǎng)一段時間，獲得轉基因產物的方法。22. 基因工程： 人們按照預先設計的生物施工藍圖，把需要的目的基因經過體外切割、拼 接與重新組合，然后引入受體細胞，并使其在受體內進行復制、表達，按要求改變受體細 胞的遺傳特性，然后由轉化細胞再分化成具有預期新性狀的工程植株 23. 質粒：是一種廣泛存在于細菌細胞中染色體以外能夠自主復制的裸露的環(huán)狀 DNA分子。DNA分子中某種特定的核苷酸序列，并能精確特 24. 限制性內

5、切酶： 是一類能夠識別雙鏈 異的切割雙鏈 DNA分子的核酸內切酶。（DNA純度、甲基化程度、甘油的含量、反應體系 PH值、反應溫度、酶切時間等影響酶的活性）25. DNA聚合酶 ：以 DNA為復制模板，從將DNA由 5 端點開始復制到3 端的酶。（具有耐高溫的特點）26. 感受態(tài)細胞 ：經過氯化鈣溶液處理過的細胞處于容易接受外源 DNA狀態(tài)。27. 基因組文庫 ：將某一生物的基因組 因組文庫包括 cDNA文庫）DNA酶切后插入特定載體中而形成的克隆集合。 （基28. cDNA文庫 ：將某一生物特定發(fā)育時期或環(huán)境條件下轉錄的全部 段后插入特定載體中而形成的克隆集合。mRNA反轉錄成 cDNA片2

6、9. . 轉座子： 是一類在基因組中能夠發(fā)生跳躍的DNA序列。30. 圖位克?。?也稱定位克隆，依據(jù)目的基因在染色體上的位置，通過分子標記、基因組文庫篩選，克隆得到目的基因然后進行最終鑒定。31. 分子標記： 在分子水平上可標識的遺傳多樣性。32. 葉圓法 ：用打孔器取得葉圓片，在過夜培養(yǎng)的龍桿菌菌液中侵染數(shù)分鐘，接種于一定 培養(yǎng)基上共培養(yǎng) 2-3 天，再轉移到含有抑菌劑或抗生素和選擇劑的培養(yǎng)基上，除菌和使轉 化細胞生長并再生植株。二、填空題1. 植物組織培養(yǎng)的類型：按培養(yǎng)材料不同可劃分為：完整植株培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、器官培 養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細胞培養(yǎng)、原生質體培養(yǎng)。按培養(yǎng)基類型分為：固體培養(yǎng)、液體培

7、養(yǎng)、半夜半固體培養(yǎng)。2. 植物組織培養(yǎng)的原理：細胞全能性 3. 全能性體現(xiàn)的兩個條件： （1）離體狀態(tài)（ 2）一定的外界條件（生長素和細胞分裂素比值高利于生根，比值低利于長芽） 。4. 組織培養(yǎng)流程外植體脫分化愈傷組織再分化組織器官植株5. 標準的植物培養(yǎng)實驗室應包括：洗滌室、培養(yǎng)基室、接種室、培養(yǎng)室、細胞學實驗室。6. 滅菌種類： 物理滅菌 （高溫高壓滅菌、 干熱滅菌、 射線滅菌、 過濾滅菌）、化學滅菌 （熏 蒸滅菌、消毒液滅菌）7. 高溫高壓滅菌： 121高壓和每平方厘米1 個大氣壓下持續(xù) 15-20 分鐘。8. 過濾滅菌：孔徑小于 0.45 微米微孔濾器裝置。9. 射線滅菌：波長為 20

8、0 納米-300 納米的紫外線，其中以 260nm最強。10. 培養(yǎng)基的主要成分（1）無機鹽：大量元素（ C H O N P K Mg S Ca ）：濃度大于 0.5mol/L 微量元素（ Fe Mn Cu Mo Co Zn）（2）有機化合物：碳水化合物（蔗糖、葡萄糖、果糖）植物生長調節(jié)物質、瓊脂。、維生素（ VB1）、肌醇、氨基酸、11. 培養(yǎng)基配置的四個原則：目的明確、營養(yǎng)協(xié)調、理化適宜、經濟節(jié)約95%酒精、12. 培養(yǎng)基的配置過程：配料溶解調節(jié)PH過濾分裝包扎滅菌13. 母液配置的方法：單配法、混配法（激素一般不溶于水，需要添加助溶劑（酸、堿均可）14. 植物快繁的四個程序包括：無菌（初

9、代）培養(yǎng)的建立、繁殖體增殖、芽苗生根、小植 株的移栽馴化。15. 培養(yǎng)材料的增殖方式： 頂芽和腋芽增殖、 不定芽增殖、 體細胞胚增殖、 原球莖發(fā)生型。16. 試管馴化的目的：培養(yǎng)壯苗、提高成活力。17. 移栽的目的：防止菌類滋生、保持小苗水分供給平衡、移栽時選擇合理的種植基質，為小苗提供充足的養(yǎng)分。18. 細菌污染的特點：粘液狀菌斑，一般接種 19. 真菌污染的特點：出現(xiàn)菌絲、菌霉，一般1-2 天發(fā)現(xiàn)。3 天后出現(xiàn)。20. 玻璃化的原因：激素、瓊脂、PH、營養(yǎng)、光照、溫度21. 病毒的侵染途徑：（1）農業(yè)操作時的機械損傷（2）通過微傷口進行侵染（ 3）通過嫁 接、寄主性植物傳播。22. 病毒在

10、植物體內的運輸方式：細胞間短距離通過胞間連絲、長距離則通過韌皮部的輸 導組織。23. 植物脫毒的方法：莖尖培養(yǎng)脫毒、愈傷組織培養(yǎng)法、溫熱療法、冷凍療法脫毒 24. 檢測脫毒是否成功的方法：直接觀察、嫁接指示植物、電鏡觀察、PCR。25. 愈傷組織的形成經歷：誘導、細胞分裂、細胞分化三個時期。26. 器官發(fā)生的兩種模式：不經過愈傷組織、經過愈傷組織形成。27. 影響器官分化的因素： （1）起始材料（ 2）外植體類型（ 3）培養(yǎng)條件 28. 植物體細胞胚發(fā)生的途徑： （1）直接途徑（直接由外植體發(fā)育而來） （2）間接途徑（不 從外植體發(fā)育而來）29. 影響體細胞胚發(fā)生的因素：激素、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件

11、 30. 體細胞胚發(fā)生的過程：胚性細胞時期、球形胚時期、心形胚時期、魚雷形胚時期，子 葉形胚時期、胚胎成熟期。31. 再生植株的途徑有：器官發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是細胞）和體細胞胚發(fā)生途徑（培養(yǎng)的是 體細胞胚）32. 原生質體分離的方法：機械分離法（獲得原生質體的量少，局限性強）（果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶）、酶解分離法33. 原生質體純化的方法為：漂浮法、界面法 34. 原生質體融合的方法： NaNO 3 處理、高 PH/高濃度鈣處理、 PEG處理、電融合 35. 原生質體融合的類型：自發(fā)融合、誘發(fā)融合、化學誘導融合。36. 原生質體活力檢測的方法：觀察細胞質環(huán)流、氧氣攝入法、光合作用活性和活體

12、染色 法。37. 原生質體培養(yǎng)的方法：液體培養(yǎng)法、固體包埋培養(yǎng)、固液雙層培養(yǎng)。38. 體細胞雜交的應用：培育新品種、合成新材料。39. 單倍體產生的途徑：誘發(fā)單倍體途徑（雄核不育、雌核不育）、自發(fā)單倍體途徑（半 受精、多胚、染色體消除、雄核發(fā)育、雌核發(fā)育）40. 白化苗形成的原因：核基因變異、質體 粉預處理可以適當降低白化苗）41. 染色體加倍的方法：秋水仙素處理DNA缺失、小孢子發(fā)育過程中質體變態(tài)（對花42. 外源基因導入的方法：生物介導（農桿菌轉化）乙二醇）、物理方法（基因槍） 、化學方法（聚43. 農桿菌介導的基因轉移方法：葉圓法、共培養(yǎng)法、直接接種法 44. 基因直接轉移方法：化學方法

13、（PEG誘導、脂質體導入法）、物理方法（基因槍、點擊 法、顯微注射法）、農桿菌微彈法（基因槍與龍桿菌轉化結合）45. 常見的選擇標記基因：卡那霉素、鏈霉素、青霉素46. 植物基因的結構分為：轉錄區(qū)（起始密碼子、外顯子、內含子、終止密碼子、3端+非編碼區(qū)、 5端非翻譯區(qū)）和非轉錄區(qū)（啟動子、終止子、增強子）47. 載體分為：質粒載體、噬菌體載體、黏粒載體、人工染色體載體四種。48. 限制性內切酶的命名：EcoR I 屬名（第一個字母大寫）+種名（前兩個字母小寫）菌株類型（大寫） +（羅馬字母表示發(fā)現(xiàn)的順序）49. II 型限制酶的基本特性：識別位點具有特異性、識別序列具有特異性、切割位點具有 規(guī)

14、范性（回文結構）50. DNA 連接酶： E coliDNA 連接酶，來源于大腸桿菌，可用于連接粘性末端；T4DNA連接酶，來源于 T4 噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率低。51. DNA 連接反應條件：溫度（通常為 的時間、連接片段的長度。16 攝氏度）、ATP濃度、連接酶的濃度、連接反應52. 目標 DNA片段獲得的方法：（1）化學直接合成（ 2）從基因文庫中獲?。?3）通過 PCR 擴增53. 目的 DNA片段和載體的連接：（1）互補黏性末端連接，該連接方法簡單（黏性末端連接（ 3）平末端連接2）非互補54. 重組載體轉化宿主細胞的方法：氯化鈣處理、電穿孔法、熱激法 55.

15、 重組克隆的篩選：（1）表型篩選法（ 2）酶切鑒定篩選（ 3）PCR篩選法（ 4）分子雜交 篩選法。56. 基因文庫分為：基因組文庫和 cDNA文庫 57. 從基因文庫中篩選目的基因的方法：核酸雜交法、免疫學檢測法、PCR篩選法。58. 分子標記的分類：（1）基于 DNA-DNA雜交：RFLP（2）基于 PCR：ISSR SSR STS SCAR ARAP （3）基于 PCR和 RE酶切：AFLP（4）基于 DNA測序：SNP ES。應用最普遍的是 RFLP、 RAPD、SSR（共顯性）和 AFLR 59. PCR 反應組分： DNA模板、一對引物、 dNTP、Taq 酶、 Mg 2+ 、緩沖

16、液、 ddH2O 60. 常用的顯色劑：瓊脂糖凝膠EB染色；聚丙烯酰胺凝膠硝酸銀染色；帶熒光分子的 引物熒光捕獲61. PCR技術的原理：（1）高溫變性 95；（2）引物與模板退火 Tm=4（G+C）+2（A+T）Tm；（3）冷卻延伸 72三、簡答論述題1. 植物組織培養(yǎng)的主要特征？（1）在培養(yǎng)容器中進行（ 2）無菌環(huán)境，排除了微生物及害蟲等的侵入（3）各種環(huán)境因 子如營養(yǎng)因子、激素因子以及光照溫度等物理因子處于人工控制條件下，達到最適條件。（4）通常打破了正常植株的發(fā)育過程和格局。2. 植物組織培養(yǎng)的應用？（1）脫毒快繁（ 2）用于植物遺傳育種：種質資源離題保存、花粉花藥培養(yǎng)產生單倍體、胚乳

17、培養(yǎng)產生三倍體、體細胞雜交、克服遠緣雜交困難（3）大規(guī)模植物細胞、組織和器官培養(yǎng)生產次生代謝產物（4）用于植物研究：生理學、病理學、胚胎學等。3. 凝固劑必須具有的特點？（1）在微生物生長范圍內保持凝固（2）不被微生物分解利用（ 3）不因消毒高溫處理而破壞（ 4）對微生物無害（ 5）配置方便（ 6）透明度好，粘著力強。4. 外植體的選擇的要求？（1）選擇優(yōu)良的種質及母株（母株性狀穩(wěn)定、健壯、無病蟲害）。（2）選擇適當?shù)臅r期，春季和夏季采樣比較適合（3）取材的大小適宜（ 4）來源要豐富（ 5）易于消毒（ 6）選擇 合適的取材部位（莖尖、花粉、花藥、葉片均可）5. 無菌（初代）培養(yǎng)的消毒？（1）消

18、毒流程： 材料預處理 75%酒精消毒 20s無菌水沖洗 2-3 次 0.1%升汞處理 15 分 鐘左右無菌水沖洗 6 次瀝干接種（2）常用消毒劑：升汞、次氯酸鈉、酒精（3）消毒過程中的注意事項：植物材料、消毒藥劑及其濃度、消毒時間（三者需實際考慮）。6. 外植體的接種步驟？（1）無菌操作：接種室的滅菌、超凈工作臺滅菌、接種器皿用具滅菌、試驗人員滅菌（2）材料的分離、切取和接種（接種時防治空氣、操作、器皿帶來的污染）7. 影響褐變的因素及克服辦法？（1）植物基因型（ 2）材料的生理狀態(tài)（ 3）取材的時間和部位（ 4）培養(yǎng)基（ 5）光照（ 6）溫度（ 7）培養(yǎng)時間克服褐變的方法： （1）選擇適宜的

19、外植體（2）改善營養(yǎng)條件（ 3）在培養(yǎng)基中加入一些附加物，如活性炭、 PVP（4）加強生長素含量，降低細胞分裂素含量 8. 植物離體快速繁殖造成污染的原因？（1）外植體滅菌不徹底（ 2）實驗器皿及培養(yǎng)基滅菌不徹底（3）超凈工作臺被污染（ 4）環(huán)境不清潔（ 5）人為因素 9. 離體快繁的利用？（1）用于無菌苗快繁（ 2）用于無法用種子繁殖或難以保持后代一致性材料的繁殖（3）瀕危植物的拯救（ 4）用于種質資源的拯救和保存 10. 植物患病后的主要癥狀有哪些？（1）因葉綠素遭到破壞引起花葉、黃葉；壞死。（2）植物發(fā)生矮化然后畸形； （3）形成枯斑或11. 病毒的特征？（1）結構簡單，僅由蛋白質和核酸

20、組成，無細胞結構（2）不能進行獨立的代謝活動，需 要依靠寄主才能存活（ 3）病毒有核酸，依靠寄主細胞進行復制（4）具有侵染力，能夠從一種寄主細胞轉移到其它細胞。12. 植物脫毒的意義？（1）防止品種的退化，保持優(yōu)良的種性（2）提高產量，改善品質（3）降低成本，保護環(huán)境。13. 原生質體的特性？（1）去壁的原生質體容易實現(xiàn)外源遺傳物質的導入和吸收（2）不同來源的原生質體具有 彼此融合的能力（ 3）原生質體具有細胞全能性。14. 花藥培養(yǎng)的流程？（1）確定取樣時期（ 2）預處理（熱處理、秋水仙素處理） （3）花藥表面消毒和接種培養(yǎng)（常用 MS、N6 FHC培養(yǎng)基）（4）白化苗 15. 影響花粉、花

21、藥培養(yǎng)的因素有哪些？供體植株的基因型、花藥壁因子、培養(yǎng)基與培養(yǎng)密度、小孢子或花粉的發(fā)育階段、溫度與光照影響、供體植株的生理狀態(tài)。16. 質粒載體的特征？（1）能在宿主細胞中獨立復制和表達（2）具有 1-2 個選擇標記（ 3）具備多克隆位點（ 4）自身相對分子量小、拷貝數(shù)高（5）易于操作和 DNA的制備。17. DNA 聚合酶的種類及功能？5 到 3 聚合酶活性、 5 到 3 外切（1）大腸桿菌 DNA聚合酶 I ，是一種多功能酶，具有由 酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（ 2）Klenow 片段，填補或者標記 DNA分子的 3 隱縮 末端，具有由 5 到 3 聚合酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（ 3）T4DNA聚合酶，外切酶 活性高于大腸桿菌 DNA聚合酶 I ，具有由 5 到 3 聚合酶活性、 3 到 5 外切酶活性等功能（4）反轉錄酶，用于 cDNA片段合成。18. 修飾性工具酶的種類？（1）末端轉移酶：不依賴于DNA模板的 DNA聚合酶，可以在沒有模板的情況下，將核