SPE技術(shù)在畜禽產(chǎn)品殘留的分析應(yīng)用課件

1、 報(bào)告人：?jiǎn)渭芐PE技術(shù)在畜禽產(chǎn)品殘留分析中的應(yīng)用7/23/20221食品與農(nóng)產(chǎn)品：殘留分析要求高選擇性降低或消除基質(zhì)干擾高靈敏度痕量物質(zhì)可靠的結(jié)果：定量準(zhǔn)確度和化合物確認(rèn)重現(xiàn)性，穩(wěn)定性和動(dòng)態(tài)范圍樣品基質(zhì)中低濃度目標(biāo)物質(zhì)的準(zhǔn)確定量按照法規(guī)要求進(jìn)行確認(rèn)方法穩(wěn)定性復(fù)雜樣品基質(zhì)，減少樣品凈化操作7/23/20222殘留分析:樣品前處理的重要性 是影響實(shí)驗(yàn)成敗的決定性步驟 占樣品分析時(shí)間的比例最大(70-80%) 樣品預(yù)處理所用時(shí)間遠(yuǎn)多于色譜分離的時(shí)間 占分析消耗總成本的比重最大 消耗大量的溶劑及其它化學(xué)品 對(duì)分析結(jié)果的重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性影響最大的環(huán)節(jié) 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果好壞的最重要因素(回收率,%RSD）7

2、/23/20223樣品前處理的通用方法 高速離心取上清液 過濾、超濾 選擇性沉淀 衍生反應(yīng) 液-液萃取 固相提取(Solid Phase Extract, SPE)7/23/20224為什么要用SPE? 樣品濃縮 提高靈敏度 樣品凈化 提高靈敏度 延長(zhǎng)系統(tǒng)不間斷開機(jī)時(shí)間 延長(zhǎng)色譜柱壽命 比液液萃取更快,節(jié)省溶劑 可自動(dòng)化批量處理 重現(xiàn)性好 7/23/20225不斷革新的SPE技術(shù) 1977 率先推出業(yè)界第一個(gè)硅膠基質(zhì)固相提取技術(shù)的商品化產(chǎn)品：Sep-Pak 1996 推出第一個(gè)水浸潤(rùn)性聚合物基質(zhì)SPE吸附劑(OasisHLB) 快速通用性反相SPE方法學(xué) 1997 用于OasisHLB的先進(jìn)的

3、新型方法學(xué)，可以獲得更干凈的本底(2D 優(yōu)化方法學(xué)) 1999 推出混合機(jī)理吸附劑(OasisMCX 和MAX)，從而可以對(duì)堿性和酸性化合物進(jìn)行高選擇性和高靈敏度的提取 Oasis96 孔提取板設(shè)計(jì)獲得R&D 100 大獎(jiǎng)7/23/20226不斷革新的SPE技術(shù)2002 Waters 最新革新SPE技術(shù) 首次使得洗脫體積低至25 L 無需揮發(fā)與重現(xiàn)配制，洗脫后直接進(jìn)樣即可 是小體積樣品的理想提取工具 靈敏度可以提高25x 2004 推出用于保留強(qiáng)堿(如季銨鹽)和強(qiáng)酸(如磺酸鹽)的WCX和 WAX 吸附劑7/23/20227SPE小柱的種類 根據(jù)吸附劑的劃分 正相 Silica /Alumina

4、(A, B , N) / Florisil/ NH2/ CN反相 C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN離子交換 SCX、MCX、PCX、WCX、MAX7/23/20228傳統(tǒng)(C18)SPE吸附劑的問題對(duì)極性化合物保留不足 藥物（農(nóng)藥）及代謝產(chǎn)物難以同時(shí)提取對(duì)堿性化合物回收不足強(qiáng)硅羥基相互作用 堿性樣品回收率低小柱跑干不吸附 操作過程需仔細(xì)控制回收率低，重現(xiàn)性差是其主問題。7/23/20229理想的樣品處理方法除去干擾物 在很寬的極性范圍內(nèi)，對(duì)酸性、堿性及中性化合物均有可重現(xiàn)的高回收率 很容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，對(duì)大量樣品進(jìn)行高通量處理 容易使用并且耐受性好 快速并且最

5、終的成本低7/23/202210PEP (Polymer enhanced polymer) ：極性提高了的共聚物具有反相SPE的最佳性質(zhì)pH：0-14，810m2/g親水性單體：親水” 使填料具有水可浸潤(rùn)性質(zhì) 允許溶劑跑干而不會(huì)損失回收率和重現(xiàn)性“親脂” 提供對(duì)分析物的反相保留能力7/23/202211C18與PEP小柱相比： 溶劑跑干對(duì)回收率的影響(普魯卡因胺、 醋氨酚、 雷尼替 丁、 心得安、 多慮平)7/23/202212C18與PEP小柱相比： 溶劑跑干對(duì)回收率的影響7/23/202213PEP可取代C18 的優(yōu)勢(shì)吸附容量更大 是C18的3到10倍，常用規(guī)格1mL/30mg（C18：

6、100mg）操作更簡(jiǎn)便 小柱干涸不影響回收率方法更通用 適合性質(zhì)各異的各種物質(zhì)的提取7/23/202214PEP可取代C18 的優(yōu)勢(shì)開發(fā)方法更容易 聚合物基質(zhì)，無硅醇基影響對(duì)極性物質(zhì)的提取回收率更高 藥物(農(nóng)藥)及代謝產(chǎn)物同時(shí)提高7/23/202215樣品前處理： 適于HPLC分析的通用SPE方法此通用方法適于多種樣品基質(zhì)的絕大多數(shù)被測(cè)物。 當(dāng)分析堿性化合物時(shí)，不要使用高有機(jī)含量的水溶液進(jìn)行清洗，因?yàn)镻EP吸附劑中不含硅醇基。 首先使用通用方法提取。若需進(jìn)一步降低干擾，可使用優(yōu)化方法7/23/202216樣品前處理： 適于HPLC分析的通用SPE方法7/23/202217pH 與化合物反相保留

7、7/23/202218血清中的四環(huán)素7/23/202219血清中四環(huán)素的提取結(jié)果比較 SPE 化合物 %回收率 %RSDPEP 二甲胺四環(huán)素 94.8 1.4 四環(huán)素 104 0.55C18 二甲胺四環(huán)素 52.8 2.82 四環(huán)素 68.4 2.44 6次實(shí)驗(yàn)結(jié)果：加標(biāo)水平：2.5g/mL 7/23/202220四環(huán)素類殘留分析 （日本政府食品安全公告）2003年月宣布有關(guān)來自中國(guó)的蝦中的四環(huán)素類藥物監(jiān)測(cè)（Tetracycline in the shrimp from China）如果為養(yǎng)殖蝦，政府要求必須監(jiān)測(cè)四環(huán)素類藥物殘留(mandatory)如果為非養(yǎng)殖蝦，政府推薦監(jiān)測(cè)殘留(volun

8、tary)需HPLC、熒光檢測(cè)器法規(guī)更新：蔬菜和蜂蜜加工的食品必須監(jiān)測(cè)殘留法規(guī)以前不要求檢測(cè)農(nóng)藥殘留，但因在加工食品和蜂蜜中發(fā)現(xiàn)了許多農(nóng)藥，故現(xiàn)在要求檢測(cè)7/23/202221食用肉中的四環(huán)素 7/23/202222牛奶中的四環(huán)素 7/23/202223四環(huán)素食品分析的結(jié)果 化合物 牛肉 豬肉 牛奶 牛奶 0.5 g/ g 0.5 g/ g 25 g/L 50 g/L4 土霉素 96.2 (5.7) 103 (5.0) 70.7 (3.5) 67.7 (5.8)四環(huán)素 91.4 (5.5) 99.8 (6.1) 73.7 (7.3) 68.5 (5.1)金霉素 80.6 (6.8) 83.4

9、(6.1) 76.7 (2.9) 67.3 (1.8）結(jié)果以% 回收率表示,括號(hào)內(nèi)數(shù)字為% RSD 7/23/202224反相離子交換雙重機(jī)理吸附劑 MCX：陽(yáng)離子交換反相吸附劑 用于堿性物質(zhì)提取MAX：陰離子交換反相吸附劑 用于酸性物質(zhì)提取WCX：弱陽(yáng)離子交換反相吸附劑 用于強(qiáng)堿性物質(zhì) (如季銨鹽類)提取WAX：弱陰離子交換反相吸附劑 用于強(qiáng)酸性物質(zhì)提取 7/23/202225適合于堿性藥物提取的MCX 小柱 7/23/202226雙機(jī)理吸附劑：堿性化合物的保留 7/23/202227混合機(jī)理:陽(yáng)離子交換與反相的保留 7/23/202228MCX SPE 通用方法 7/23/202229常見

10、獸藥殘留的 SPE 推薦方法名稱 規(guī)格克侖特羅 MCX/SCX/PCX 沙丁胺醇 MCX/SCX/PCX 磺胺 C18/PEP/ Alumina B氯霉素 C18/PEP/Silica氟喹諾酮 PEP/C18硝基咪唑類藥物 PEP/C18己烯雌酚 PEP/C18四環(huán)素 PEP/C18萊克多巴胺 Alumina A/ MCX 7/23/202230SPE在殘留分析方面的成功實(shí)例 硝基咪唑類藥物： J AOAC International, 2003, 86(3), 505-509 四環(huán)素: J chromatography A, 2003,987,227-233 動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的SPE與

11、GC/MS 分析液相色譜通訊，37，13-147/23/202231SPE在殘留分析方面的成功實(shí)例萊克多巴胺： Analytica chim, 2003,483(1-2) P137-145 氯霉素： 動(dòng)物源食品中氯霉素的液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定,分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2002，21增刊，185-186 磺胺： 動(dòng)物組織中磺胺類藥物殘留量檢測(cè)方法-HPLC法7/23/202232磺胺藥物樣品前處理SPE法 HLB 雞組織中磺胺類藥物殘留量檢驗(yàn)方法高效液相色譜紫外檢測(cè)法 廣州出入境檢驗(yàn)檢疫局食品檢驗(yàn)處 B(堿性氧化鋁小柱) 羊肉組織中七種磺胺殘留的測(cè)定 Waters液相色譜通訊35期，2002年 動(dòng)物源食品中磺

12、胺類藥物殘留的檢測(cè)方法高效液相色譜法 農(nóng)業(yè)部號(hào)文 C18 高效液相色譜法測(cè)定肉類奶粉中四種磺胺藥物殘留量的方法研究 Waters液相色譜通訊15期，1990年 動(dòng)物源食品中磺胺二甲嘧啶殘留檢測(cè)方法高效液相色譜法 農(nóng)業(yè)部號(hào)文；7/23/202233典型成功開發(fā)：動(dòng)物組織中磺胺藥物的殘留檢測(cè)方法HPLC法NY 5029-2001 農(nóng)業(yè)部“無公害畜產(chǎn)品例行監(jiān)測(cè)”專用方法艾杰爾科技磺胺專用柱7/23/202234動(dòng)物源食品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)方法高效液相色譜法 簡(jiǎn)介 農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心7/23/202235主要內(nèi)容一、適用范圍 二、原理 三、試劑和材料四、儀器設(shè)備 五、檢驗(yàn)步驟 7/2

13、3/2022361、適用范圍 本方法用于測(cè)定動(dòng)物可食性組織中磺胺間甲氧嘧啶（SMM）、磺胺二甲基嘧啶（SM2）、磺胺甲噁唑（SMZ）、磺胺二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺喹噁啉（SQ）單個(gè)或混合物的殘留量。 7/23/2022372原理 組織經(jīng)乙腈提取后，其上清液加入正己烷進(jìn)行液液分配，取下層溶液加入正丙醇減壓干燥，殘留物用乙腈溶解，過Sep-Pak堿性氧化鋁柱, 洗脫，干燥后定容，用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。 7/23/2022383、試劑和材料 除特別注明外，所用試劑均為分析純；水為超純水。 3.1 磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)品（SMM、SDM、SM2、SMZ和SQ），（Sigma公司，含量不少于98.9%）

14、3.2 甲醇 色譜純3.3 乙腈 色譜純3.4 正已烷 3.5 正丙醇 3.6 無水硫酸鈉 7/23/2022393、試劑和材料3.7 堿性氧化鋁SPE柱（6毫升，500毫克）3.8 磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1mg/mL） 分別精密稱取上述磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)品各50mg，甲醇溶解并轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶，定容，搖勻。置-20以下冰箱中保存,有效期3個(gè)月。3.9 磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)工作液 取磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用流動(dòng)相稀釋成濃度為0.05,0.1,0.2,0.5,1.0，2.0g/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。置2-8冰箱中保存，有效期1周。7/23/2022404、儀器設(shè)備 4.1 高效液相色譜儀（配紫外檢測(cè)器）4.

15、2 離心機(jī)4.13 固相萃取裝置（配考克閥）4.4 分析天平 精度0.0001g 4.5 天平 精度0.01g4.6 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀4.7 振蕩器4.8 勻漿機(jī)4.9 渦動(dòng)混合器4.10 分液漏斗 50mL4.11 梨形瓶 100mL4.12 離心管 50mL4.13 微孔濾膜 0.45m7/23/2022415 檢驗(yàn)步驟 5.1 試料的制備5.1.1 取絞碎后的供試樣品,作為供試試料。5.1.2 取絞碎后的空白樣品,作為空白試料（陰性對(duì)照）。5.1.3 取絞碎后的空白樣品5g,添加5g/mL的工作液0.1mL，作為空白添加試料（陽(yáng)性對(duì)照）。7/23/2022425 檢驗(yàn)步驟5.2提取和純化5.2

16、.1 組織樣品5.00g5g無水硫酸鈉+ 25mL乙腈均質(zhì)振蕩10min以3000r/min的速度離心5min重復(fù)兩次并兩次的上清液加入正己烷30mL振蕩10min離心5min取下層液體于100 mL梨形瓶中。7/23/2022435 檢驗(yàn)步驟5.2.1（續(xù)） 加正丙醇5mL，50下減壓干燥至干，殘留物用95%乙腈3ml溶解，過氧化鋁B柱。用5mL乙腈-水（95+5）過柱，不收集，再用10mL 乙腈-水（70+30）洗脫。 洗脫液中加入5mL正丙醇，50下減壓干燥至干，殘留物用2.0mL流動(dòng)相溶解，溶液用濾膜過濾，作為試樣溶液，供高效液相色譜分析。7/23/2022445 檢驗(yàn)步驟5.3 色譜

17、條件5.3.1 色譜柱：C18柱，2504.6mm（i.d.），粒徑5m，或相當(dāng)者；5.3.2 流動(dòng)相：乙腈-甲醇-水-乙酸(2+2+9+0.2)；5.3.3 流速：1mLmin；5.3.4 檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm；5.3.5 進(jìn)樣量：20L。7/23/2022455 檢驗(yàn)步驟5.5 測(cè)定法 5.5.1 取試樣溶液和0.05g/mL的對(duì)照溶液，作單點(diǎn)校準(zhǔn)，以峰面積計(jì)算。對(duì)照溶液及試樣溶液中磺胺類藥物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍之內(nèi)，試樣溶液測(cè)定過程中應(yīng)參插注入對(duì)照溶液，以便準(zhǔn)確定量。5.5.2 試劑空白試驗(yàn)除不加試料外，采用完全相同的測(cè)定步驟進(jìn)行平行操作。5.5.3 結(jié)果計(jì)算和表述按下式計(jì)算

18、供試組織中磺胺類藥物的殘留量： Xi=(CSVA)/(ASm)7/23/2022465 檢驗(yàn)步驟5.6 結(jié)果判定5.6.1 線性范圍 在0.02g/mL1.0g/mL范圍考察線性，計(jì)算回歸方程，其相關(guān)系數(shù)0.995。5.6.2準(zhǔn)確度本方法在100g/kg添加濃度水平上的回收率范圍為50%110%。5.6.3 允許相對(duì)偏差允許相對(duì)偏差26%。7/23/202247SPE在鹽酸克侖特羅（瘦肉精）殘留檢測(cè)中的應(yīng)用樣品前處理：SPE法參見：中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：飼料中鹽酸克侖特羅的測(cè)定參見：中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：動(dòng)物組織中鹽酸克侖特羅的測(cè)定7/23/202248SPE在鹽酸克侖特羅（瘦肉精）

19、殘留檢測(cè)中的應(yīng)用中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY /T 468 2005 動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法NY/XQ 421-2003“動(dòng)物尿液中鹽酸克倫特羅（瘦肉精）殘留的檢測(cè) 氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）方法” 起草單位：農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心7/23/202249動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法 原理對(duì)樣品在堿化的條件下用乙酸乙酯提取，合并提取液后，利用鹽酸克倫特羅易溶于酸性溶液的特點(diǎn)，用稀鹽酸反萃取，萃取的樣液pH調(diào)至5.2后用SCX固相萃取小柱凈化，分離的藥物殘留經(jīng)過雙三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用帶有質(zhì)量選擇檢測(cè)器的氣相色譜儀測(cè)定。7/

20、23/202250動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法 提取 (50.05)g動(dòng)物肝組織加入15mL乙酸乙酯加入3mL10.0%碳酸鈉溶液均質(zhì)離心2min上層有機(jī)溶劑在殘?jiān)性俅翁崛『蟛⒑霞尤?mL0.10mol/L的鹽酸離心2min重復(fù)萃取合并下層溶液2.5mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至5.2。 7/23/202251動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法凈化 SCX小柱5mL 甲醇5 mL水5 mL 30 mmol/L鹽酸活化萃取液上樣5 mL水5 mL甲醇淋洗柱子抽干SCX小柱5 mL 4 %氨化甲醇溶液洗脫。衍生化 在50水浴氮?dú)獯蹈?00L 甲苯100L BSTFA8

21、0衍生lh冷卻加入0.3mL甲苯氣相色譜-質(zhì)譜分析。7/23/202252動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法GC/MS測(cè)定參數(shù)設(shè)定色譜柱：HP-5MS 5%苯基甲基聚硅氧烷，30m0.25mm（內(nèi)徑），0.25m（膜厚）；進(jìn)樣口：220；進(jìn)樣方式：不分流；進(jìn)樣體積：1L；柱溫：70（保持0.6min）, 以25/min升溫至200（保持6min），以25/min升溫至280（保持5min）；載氣：氦氣，流速：0.9mL/min（恒流）；GC/MS 傳輸線溫度：280；溶劑延遲：8min；EM電壓：高于調(diào)諧電壓200V；離子源(EI)溫度：200；四極桿溫度：160；選擇離子監(jiān)測(cè):(m

22、/z)86，212，262，277 7/23/202253動(dòng)物尿液中鹽酸克倫特羅的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法凈化 依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L鹽酸5mL潤(rùn)洗固相萃取小柱，將上述備用液過柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脫SCX小柱，收集洗脫液于具塞玻璃試管中，50下氮?dú)獯蹈伞Ｔ跇右哼^柱和洗脫過程中流速控制在1mL/min左右。7/23/202254殘留分析SPE前處理應(yīng)用小結(jié) 以常規(guī)方法為起點(diǎn) 如需要，根據(jù)樣品性質(zhì)與基質(zhì)進(jìn)行方法優(yōu)化 對(duì)于堿性或酸性組分采用雙機(jī)理吸附劑 7/23/202255SPE小柱的典型應(yīng)用實(shí)例 磺胺：Sep-Pak Al2O3(

23、B), 12cc/2g, WAT054260 動(dòng)物源食品中磺胺類藥物殘留物檢測(cè)方法HPLC 金霉素：Sep-Pak C18或者tC18 金霉素殘留的HPLC測(cè)定 伊維菌素：Sep-Pak C18或者tC18 伊維菌素殘留的HPLC測(cè)定法 7/23/202256SPE小柱的典型應(yīng)用實(shí)例 恩諾沙星，環(huán)丙沙星：Sep-Pak tC18(含碳量16%) 動(dòng)物性食品中恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留物檢測(cè)方法HPLC 噁喹酸，氟甲喹：Sep-Pak tC18(含碳量16%) 動(dòng)物性食品中噁喹酸和氟甲喹殘留物檢測(cè)方法HPLC7/23/202257國(guó)家科技攻關(guān)計(jì)劃課題畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全關(guān)鍵控制技術(shù)系列標(biāo)準(zhǔn)研究 (課題編

24、號(hào)： 2002BA906A75 ) 農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心 7/23/202258國(guó)家科技攻關(guān)計(jì)劃子課題三種獸藥使用規(guī)范驗(yàn)證和四種獸藥殘留檢測(cè)方法研究 (子課題編號(hào)： 2002BA906A37-01 ) 農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心 2005年11月10日 7/23/20225920種獸藥殘留檢測(cè)方法的技術(shù)要點(diǎn)22.1 豬組織中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚殘留檢測(cè)方法研究（氣相色譜-質(zhì)譜法） 在堿化的條件下用乙酸乙酯提取豬組織樣品中己烯雌酚、已二烯雌酚和已烷雌酚殘留，然后通過碳酸鈉溶液和硅膠柱對(duì)洗脫物質(zhì)進(jìn)行凈化處理。凈化后的樣品平均分兩份進(jìn)行吹干后衍生，BSTFA衍生后進(jìn)行

25、氣相色譜質(zhì)譜分析。 檢測(cè)限:0.25 g/kg -0.5g/kg；回收率:60.9%85.6% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 7/23/20226022.1 豬組織中已烯雌酚、已烷雌酚、已二烯雌酚殘留檢測(cè)方法研究（氣相色譜-質(zhì)譜法）已二烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)衍生化后選擇離子模式下的總離子流圖豬肝添加樣品總離子流圖(已二烯雌酚添加濃度為4g/kg)7/23/2022612.2 豬組織中雌二醇?xì)埩魴z測(cè)方法研究（液相色譜-質(zhì)譜法） 試樣勻漿后,加入氘代雌二醇內(nèi)標(biāo),經(jīng)正己烷脫脂,經(jīng)HLB柱、硅膠柱、氨基柱凈化后，于液質(zhì)聯(lián)用儀上進(jìn)行測(cè)定。同位素內(nèi)標(biāo)定量。 檢測(cè)限:1 g/kg；回收率:97.1%10

26、6.1% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 7/23/2022622.2 豬組織中雌二醇?xì)埩魴z測(cè)方法研究（液相色譜-質(zhì)譜法）豬肝添加雌二醇色譜圖(從上至下添加濃度依次為 0g/kg, 5g/kg, 2g/kg, 1g/kg) 7/23/2022632.3 豬尿液中丙酸睪酮?dú)埩魴z測(cè)方法（液相色譜-質(zhì)譜法） 豬尿樣品經(jīng)固相萃取小柱凈化后，供液相色譜-質(zhì)譜儀測(cè)定。 丙酸睪酮檢測(cè)限: 1.0 g/kg 丙酸睪酮回收率: 62.2%73.5% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 丙酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)譜圖 空白豬尿中添加50g/L的丙酸睪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液后的SIR色譜圖 7/23/2022642.5豬組

27、織及豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇?xì)埩魴z測(cè)方法（氣相色譜-質(zhì)譜法） 試樣用高氯酸溶液勻漿、超聲加熱提取，用異丙醇+乙酸乙酯(40+60)萃取，有機(jī)相濃縮，經(jīng)弱陽(yáng)離子交換柱進(jìn)行分離，用乙醇+濃氨水(98+2)溶液洗脫，洗脫液濃縮，經(jīng)N,O雙三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后于氣質(zhì)聯(lián)用儀上進(jìn)行測(cè)定。外標(biāo)法定量。 檢測(cè)限:1 g/kg；回收率:60.37%93.86% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 7/23/2022652.5 豬組織及豬尿中克倫特羅、沙丁胺醇?xì)埩魴z測(cè)方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）豬肝加標(biāo)樣色譜圖 (2g/kg)7/23/2022662.6 豬組織及豬尿中萊克多巴胺殘留檢測(cè)方法（

28、氣相色譜-質(zhì)譜法） 樣品經(jīng)過高氯酸水解提取，用乙酸乙酯和異丙醇（4：6）再次提取后過SCX陽(yáng)離子小柱凈化，用合適的溶劑選擇洗脫后, 氮?dú)獯蹈?，供高效液相色譜定量（質(zhì)譜檢測(cè)器）測(cè)定。外標(biāo)法定量。 檢測(cè)限:1 g/kg；回收率:66.47%86.21% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 7/23/2022672.6 豬組織及豬尿中萊克多巴胺殘留檢測(cè)方法（氣相色譜-質(zhì)譜法）300 g/L標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)譜圖 肉添加10g/kg質(zhì)譜圖7/23/2022682.7 豬組織中氯霉素殘留檢測(cè)方法（液相色譜-質(zhì)譜法） 樣品經(jīng)過乙腈-水（1+1）溶液、乙酸乙酯重復(fù)提取，用正己烷除去樣品中的脂肪等雜質(zhì)，C18固相

29、萃取柱進(jìn)一步凈化，N2氣吹干后供高效液相色譜定量（質(zhì)譜檢測(cè)器）測(cè)定。外標(biāo)法定量。 檢測(cè)限:0.1 g/kg；回收率:67.4%87.0% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 1 g/L標(biāo)準(zhǔn)溶液圖肉添加1 g/kg圖7/23/2022692.7 豬組織中氯霉素殘留檢測(cè)方法（液相色譜-質(zhì)譜法）7/23/2022702.8 豬組織中粘桿菌素殘留檢測(cè)方法（液相色譜法） 待測(cè)動(dòng)物組織中殘留的粘桿菌素經(jīng)三氯乙酸-甲醇溶液提取，C18固相萃取柱凈化后，與熒光衍生化試劑反應(yīng)，用高效液相色譜（熒光檢測(cè)器）進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法定量。 檢測(cè)限:75 g/kg；定量限:150 g/kg, 回收率:80.1%108.5

30、% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% a：空白樣品圖 b：添加0.05g/g粘桿菌素樣品圖7/23/2022712.9 豬組織中磺胺類藥物殘留檢測(cè)方法（液相色譜法） 組織樣品經(jīng)乙腈提取后，在上清液中加入正己烷進(jìn)行液液分配，取下層溶液加入正丙醇減壓干燥，殘留物用乙酸乙酯溶解，過氨基鍵合小柱, 以乙酸乙醇溶液洗脫，氮?dú)獯蹈珊笥昧鲃?dòng)相溶解，定容后用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。 檢測(cè)限:35 g/kg；回收率:65.1%92.1% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 7/23/2022722.9 豬組織中磺胺類藥物殘留檢測(cè)方法（液相色譜法）磺胺類藥物標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖豬肝添加磺胺類藥物色譜圖7/23/

31、2022732.10 豬組織中乙酰甲喹殘留檢測(cè)方法（液相色譜法） 動(dòng)物組織勻漿用雙蒸水、三氯乙酸提取，經(jīng)C18固相小柱凈化，80%甲醇洗脫，收集洗脫液，作為試樣溶液供高效液相色譜（配紫外檢測(cè)器）分析，外標(biāo)法定量 檢測(cè)限:50 g/kg 回收率:60.1%83.1% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 空白豬肉組織試樣色譜圖 豬肉試樣中添加乙酰甲喹色譜圖 7/23/2022742.11 動(dòng)物組織（豬、雞）中硝基咪唑類藥物多殘留檢測(cè)方法（液相色譜-質(zhì)譜法） 待測(cè)動(dòng)物組織中殘留的硝基咪唑類藥物用乙酸乙酯提取，液/液萃取分離,固相萃取柱凈化后，通過高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用的大氣壓化學(xué)電離正離子檢測(cè)（

32、APCI+）方式,進(jìn)行選擇離子 (SIR)檢測(cè)，外標(biāo)法定量，實(shí)現(xiàn)了三種硝基咪唑類化合物的多殘留確證。 檢測(cè)限:0.5-1.0 g/kg；回收率:55.31%88.66% 批內(nèi)變異系數(shù)15%，批間變異系數(shù)20% 豬肝加標(biāo)樣選擇離子檢測(cè)色譜圖. (a) 洛硝噠唑(M/Z= 201, 2.0g/kg); (b) 甲硝唑（M/Z =172, 1.0g/kg）; (c) 地美硝唑（M/Z= 142, 1.0g/kg） 7/23/2022752.12 動(dòng)物（羊、豬）組織中伊維菌素類藥物多殘留檢測(cè)方法（液相色譜法） 待測(cè)動(dòng)物組織中殘留的伊維菌素類藥物經(jīng)乙腈提取，堿性氧化鋁固相萃取柱凈化后，與熒光衍生化試劑反應(yīng)，用高效液相色